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超音波による雲点抽出

Cloud point extraction (CPE) は、分析対象物を分離し、あらかじめ共沈させるための前分析手順である。超音波処理と組み合わせることで、雲点抽出をより効率的に、より速く、より環境に優しいプロセスとすることができます。超音波アシスト雲点抽出は、溶媒の消費量と抽出時間を削減し、分析対象物の濃縮倍率を大幅に向上させます。

雲点抽出の仕組み

Cloud point extraction (CPE) は、サンプルマトリックスからの分析対象物の抽出および前濃縮に使用される分離技術です。この方法では、曇点と呼ばれる特定の温度で、サンプルマトリックス中にミセルまたは液晶凝集体のクラウドが形成される。分析対象物はミセル相に可溶化され、遠心分離やろ過によってサンプルマトリックスから分離することができる。
CPE法は、水、生物学的流体、環境サンプルなど、さまざまなサンプルマトリックスに適用できる。複雑なマトリックスからのフェノール、多環芳香族炭化水素(PAHs)、農薬などの有機化合物の抽出によく使用される。
雲点抽出とは?
Cloud point extraction ある温度で液体が白濁する、液体の物理的変化を指す。液体の曇点とは、透明な溶液が液-液相分離を起こしてエマルションを形成するか、液-固相転移を起こして安定なゾルを形成するか、沈殿物を沈殿させる懸濁液を形成する温度である。
雲点抽出の動作原理: Cloud point extraction (CPE) 水溶液中の非イオン性界面活性剤の特異的な相挙動を利用し、特定の温度に達した後に相分離を示す。 – いわゆる雲点 – やキレート剤の添加が必要である。曇点抽出における分離の主な要因は、分析物と界面活性剤との間の疎水性相互作用によるもので、これにより、非イオン性界面活性剤が豊富な相に様々な金属錯体の形で分析物を捕捉することができる。
CPEには、固相抽出や液液抽出といった従来の抽出法にはない利点がいくつかある。それは、少量の有機溶媒しか必要としない、シンプルで費用対効果の高い技術である。また、特定の分析対象物の選択的抽出に使用でき、分析対象物の定量分析のために、クロマトグラフィーや分光法などの他の分析技術と容易に組み合わせることができる。
しかし、CPEには注意深い温度制御の必要性や、他のマトリックス成分からの干渉の可能性など、いくつかの限界もある。これらの限界にもかかわらず、CPEは有望な技術であり、超音波処理と組み合わせることでさらに効率的になる。

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超音波カップホーンは、分析物の曇り点抽出のために、同一条件下で複数のサンプルを同時に前処理するためのものです。

超音波カップホーン 同一条件下で複数のバイアルを同時にサンプル調製できるため、雲点抽出が容易になります。

ソニケーションはどのように雲点抽出を効率化するのか?

超音波ホモジナイザーUP100Hは、細胞培養プレートのサンプル調製によく使用されます。超音波治療は、治療補助と改善に使用できる。 cloud point extraction (CPE) いくつかの方法がある。超音波処理では、高周波音波を使用して液体媒体中にキャビテーション気泡を発生させる。この気泡が崩壊すると、局所的な高温と高圧が発生し、サンプルのマトリックスを破壊し、CPE中のミセル相における分析対象物の可溶化を促進することができる。
 
ここでは、超音波治療がCPEを支援し、改善する方法をいくつか紹介する:

  1. ミセル形成を促進する: 超音波処理により、界面活性剤分子とサンプルマトリックスとの接触が増加し、ミセルの形成が促進される。これにより、ミセル相への分析対象物の可溶化がより迅速かつ効率的になり、抽出収率が向上する。
  2. 抽出時間を短縮する: 超音波処理により、サンプルマトリックスからミセル相への分析対象物の物質移動が促進されるため、CPEに必要な抽出時間を短縮することができます。これは、サンプルマトリックスに対する超音波処理の機械的効果によるもので、マトリックスに分析物を保持する分子間力を破壊することができる。
  3. 抽出効率の向上: 超音波処理により、界面活性剤分子と分析対象物の接触が促進され、CPEの抽出効率が向上する。これにより、ミセル相中の分析対象物がより完全に可溶化され、抽出効率が向上する。
  4. 感度を上げる: 超音波処理は、ミセル相中の分析対象物の予備濃縮を改善することで、CPEの感度を向上させることができる。これにより、予備濃縮を行わない場合よりも低濃度の分析物を検出することができる。

全体として、超音波処理は、ミセル形成の促進、抽出時間の短縮、抽出効率の向上、感度の向上により、CPEの性能を向上させる有用なツールとなり得る。

このビデオクリップは、研究室でのサンプル前処理に広く使用されている超音波発生装置、Hielscher社製超音波ホモジナイザーUP100Hを紹介しています。

超音波ホモジナイザー UP100H

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このチュートリアルでは、ラボでの溶解、細胞破砕、タンパク質の単離、DNAやRNAの断片化などのサンプル前処理作業、分析、研究に最適なソニケーターのタイプについて説明します。アプリケーション、サンプル量、サンプル数、スループットに最適なソニケーターのタイプをお選びください。Hielscher Ultrasonicsは、お客様に最適な超音波ホモジナイザーを提供します!

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バッチ量 流量 推奨デバイス
10本までのバイアルまたはチューブ n.a. バイアルツイーター
マルチウェル/マイクロタイタープレート n.a. UIP400MTP
複数のチューブ/容器 n.a. カップホーン
1〜500mL 10~200mL/分 UP100H
10〜1000mL 20~200mL/分 UP200Ht, UP200St
10〜2000mL 20~400mL/分 UP400ST

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このビデオでは、高強度超音波を使用して、あらゆる標準的なマルチウェルプレートで信頼性の高いサンプル調製を可能にする超音波サンプル調製システムUIP400MTPを紹介しています。UIP400MTPの代表的なアプリケーションには、細胞溶解、DNA、RNA、クロマチンシェアリング、タンパク質抽出などがあります。

マルチウェルプレート超音波処理用超音波発生装置 UIP400MTP

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超音波処理装置UP200STのVialTweeter

ヴァイアル・ツイーター は、10本の試験管を同時に超音波処理できる超音波マルチサンプル前処理ユニットです。


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