अल्ट्रासोनिक ऊतक homogenizers
- अल्ट्रासोनिकेशन एक सुरक्षित है & ऊतक समरूपता की कुशल विधि।
- अल्ट्रासोनिक अनुप्रयोगों में तैयारी ऊतक और निलंबन, प्रोटीन, डीएनए / आरएनए और सक्रिय यौगिकों का निष्कर्षण, साथ ही एंजाइम और खमीर के सक्रियण / निष्क्रियता शामिल हैं।
- जांच-प्रकार अल्ट्रासोनिक होमोजेनाइज़र की सटीक नियंत्रणीयता ऊतक के नमूनों की विश्वसनीय तैयारी की अनुमति देती है।
अल्ट्रासोनिक जांच का उपयोग कर ऊतक Homogenization
ऊतक समरूपता एक नमूना तैयारी प्रक्रिया है जहां प्रोटीन, डीएनए या आरएनए जैसे इंट्रासेल्युलर पदार्थ के निष्कर्षण से पहले पशु और पौधों की कोशिकाओं या सूक्ष्मजीवों को तैयार किया जाता है। सेल सामग्री को छोड़ने के लिए सेल मेम्ब्रान को तोड़ना होगा। कोशिका भित्ति को तोड़ने के बाद, इंट्रासेल्युलर मैक्रोमोलेक्यूल्स बफर समाधान में तैरते हैं ताकि ऑर्गेनेल, प्रोटीन और डीएनए / अल्ट्रासोनिक ऊतक homogenizers और सेल व्यवधान सेल व्यवधान, lysis और निष्कर्षण के लिए बहुत कुशल उपकरण हैं।
प्रोब-प्रकार अल्ट्रासोनिकेटर (जैसे, 200 वाट शक्तिशाली UP200St) विश्वसनीय ऊतक homogenizers हैं और व्यापक रूप से नमूना तैयार करने के लिए उपयोग किया जाता है।
अल्ट्रासोनिक ऊतक Homogenizers बनाम वैकल्पिक Lysis तकनीक
आप अपने आप से पूछ सकते हैं कि सेल व्यवधान की कौन सी तकनीक और कौन सा ऊतक समरूपता उपकरण आपकी प्रयोगशाला के लिए सबसे अच्छा विकल्प है। नीचे, आप कुछ तर्क पा सकते हैं जो अल्ट्रासोनिक लसीका और ऊतक समरूपता के लिए बोलते हैं क्योंकि अल्ट्रासोनिकेशन के वैकल्पिक समरूपता विधियों पर कई फायदे हैं:
- दक्षता: अल्ट्रासोनिक homogenization ऊतकों और कोशिकाओं को बाधित करने के लिए एक तेज और कुशल तरीका है। अल्ट्रासोनिक ऊतक homogenizers ध्वनिक cavitation के कार्य सिद्धांत का उपयोग करें। यह विधि अत्यधिक कुशल है और कुछ ही सेकंड में कोशिकाओं को बाधित कर सकती है। चूंकि तीव्रता के स्तर को हल्के से तीव्र तक समायोजित किया जा सकता है, सोनिकेशन विशेष रूप से कठोर या रेशेदार ऊतकों के लिए प्रभावी है जो अन्य तरीकों का उपयोग करके समरूप बनाना मुश्किल है।
- क्रॉस-संदूषण से बचें: Hielscher शक्तिशाली अल्ट्रासोनिक ऊतक homogenizers है कि एक अप्रत्यक्ष sonication उपचार में नमूना तैयार प्रदान करता है। UIP400MTP के साथ (माइक्रोटिटर और मल्टीवेल-प्लेटों के लिए आदर्श), साथ ही वायलट्वीटर और कपहॉर्न (शीशियों, ट्यूबों और बीकर के लिए आदर्श) Hielscher गैर-संपर्क समरूपीकरण के लिए अल्ट्रासोनिक सेल व्यवधान उपकरण प्रदान करता है, जो नमूनों के बीच क्रॉस-संदूषण के जोखिम को कम करता है। यह पीसने वाली सतहों या अन्य समरूपता उपकरणों से दूषित पदार्थों को पेश करने के जोखिम को भी कम करता है।
- लचीलापन: अल्ट्रासोनिक homogenization नमूना आकार और मात्रा की एक किस्म के साथ इस्तेमाल किया जा सकता है, छोटे संस्करणों से बड़े ऊतक के नमूनों के लिए. इसके अलावा, अल्ट्रासोनिक समरूपता भी नमूना प्रकारों की एक विस्तृत श्रृंखला के लिए उपयुक्त है, जिसमें पौधे के ऊतक, पशु ऊतक और माइक्रोबियल संस्कृतियां शामिल हैं। विभिन्न प्रकार के ऊतकों के लिए व्यवधान के स्तर को अनुकूलित करने के लिए अल्ट्रासोनिकेशन की तीव्रता और अवधि को समायोजित किया जा सकता है।
- प्रजनन क्षमता: अल्ट्रासोनिक समरूपीकरण लगातार परिणाम प्रदान करता है और बिजली उत्पादन और सोनीशन समय जैसे समरूपीकरण मापदंडों के सटीक नियंत्रण की अनुमति देता है। यह प्रयोगात्मक डेटा की प्रजनन क्षमता और सटीकता सुनिश्चित करने में मदद करता है।
- बायोमोलेक्यूल्स का संरक्षण: जांच-प्रकार अल्ट्रासोनिकेशन एक गैर-थर्मल उपचार है। इसका मतलब है कि इसका प्रभाव गर्मी पर आधारित नहीं है। हालांकि, प्रत्येक यांत्रिक उपचार ऊष्मप्रवैगिकी के दूसरे नियम के अनुसार गर्मी उत्पन्न करता है। इसका मतलब है कि नमूना लंबे समय तक सोनीशन समय पर गर्म हो जाता है। Hielscher अत्याधुनिक अल्ट्रासोनिकेटर तापमान सेंसर और स्मार्ट तापमान निगरानी सॉफ्टवेयर से लैस हैं। परिष्कृत शीतलन विकल्प गर्मी के क्षरण को रोकने की अनुमति देते हैं और एंजाइम और प्रोटीन जैसे गर्मी के प्रति संवेदनशील बायोमोलेक्यूल्स की गतिविधि को संरक्षित करने में मदद करते हैं।
- समय बचाने वाला: जांच-प्रकार अल्ट्रासोनिकेशन की उच्च दक्षता तेजी से ऊतक समरूपीकरण की अनुमति देती है, जो अन्य तरीकों की तुलना में समय बचाता है जिसके लिए ऊतक के अधिक व्यापक शारीरिक हेरफेर की आवश्यकता होती है।
अल्ट्रासोनिक ऊतक homogenization वैकल्पिक homogenization तरीकों पर कई फायदे प्रदान करता है। यही कारण है कि अल्ट्रासोनिक ऊतक homogenizers विभिन्न अनुसंधान और औद्योगिक अनुप्रयोगों में पसंदीदा सेल व्यवधान तकनीक हैं।
एक अल्ट्रासोनिक जांच का उपयोग कर एक ऊतक Homogenization प्रोटोकॉल के लिए उदाहरण:
अल्ट्रासोनिकेटर सरल ऑपरेशन और एक त्वरित समरूपता प्रक्रिया द्वारा ऊतक समरूपता की सुविधा प्रदान करते हैं। इसी समय, अल्ट्रासोनिक प्रक्रिया मापदंडों को सावधानीपूर्वक नियंत्रित और मॉनिटर किया जा सकता है ताकि परिणाम विश्वसनीय और प्रतिलिपि बनाने योग्य हों।
सामग्री:
- ऊतक का नमूना (जैसे यकृत, मस्तिष्क, मांसपेशियों)
- बफर (जैसे पीबीएस, ट्रिस-एचसीएल)
- प्रोटीज अवरोधक कॉकटेल
- अल्ट्रासोनिक homogenizer (जांच प्रकार)
- बर्फ़
- माइक्रोसेंट्रीफ्यूज ट्यूब
- पिपेट
अल्ट्रासोनिक ऊतक Homogenization के लिए प्रोटोकॉल:
नोट: सोनीशन की अवधि और तीव्रता को ऊतक प्रकार, आयु और स्वास्थ्य की स्थिति के साथ-साथ विशिष्ट डाउनस्ट्रीम अनुप्रयोगों के आधार पर अनुकूलित करने की आवश्यकता हो सकती है। होमोजेनेट की उपज और गुणवत्ता को अनुकूलित करने के लिए बफर, प्रोटीज इनहिबिटर और अन्य एडिटिव्स का सावधानीपूर्वक चयन करना भी महत्वपूर्ण है।
अल्ट्रासोनिक ऊतक homogenizer UP200Ht सेल व्यवधान, lysis, सेल homogeniaztion और घुलनशीलता के साथ-साथ प्रोटीन निष्कर्षण के लिए एक 2 मिमी सींग / जांच के साथ।
Hielscher अल्ट्रासोनिक ऊतक Homogenizers के प्रमुख लाभ
- तेजी से और कुशल पीस, homogenization, lysis & सेल व्यवधान, या शक्तिशाली अल्ट्रासोनिक cavitation द्वारा निष्कर्षण
- आसान और सहज उपयोग और संचालन (एनालॉग या डिजिटल संस्करण का चयन करें)
- सोनीशन के तहत सोनोट्रोड को फ्लश करके उत्पाद-संपर्क सतहों की आसान सफाई (सीआईपी क्लीन-इन-प्लेस/एसआईपी स्टरलाइज-इन-प्लेस)
- ध्वनि संरक्षण बॉक्स (प्रयोगशाला उपकरणों के लिए ध्वनि सुरक्षा बॉक्स पूरी तरह से किसी भी कोण से पूर्ण दृश्यता के लिए ऐक्रेलिक ग्लास से बना है)
- डिवाइस (डिजिटल अल्ट्रासोनिकेटर) या पावरमीटर (एनालॉग उपकरणों के लिए) पर डिजिटल टच-डिस्प्ले के माध्यम से प्रक्रिया मापदंडों पर पूर्ण नियंत्रण
- एकीकृत तापमान नियंत्रण (गर्मी के प्रति संवेदनशील, अस्थिर ऊतक के नमूनों के लिए महत्वपूर्ण)
- होमोजेनाइजेशन रन में ठहराव को व्यक्तिगत रूप से परिभाषित किया जा सकता है और डिजिटल मेनू में पूर्व-सेट किया जा सकता है
- सभी डिजिटल डिवाइस स्वचालित डेटा रिकॉर्डिंग (एक एकीकृत एसडी / यूएसबी-कॉम्बोकार्ड पर), प्लग करने योग्य तापमान सेंसर और ब्राउज़र रिमोट कंट्रोल से लैस हैं।
- के साथ बहु-नमूना उपचार वायलट्वीटर, कपहॉर्न या 4- या 8-उंगली sonotrodes के उपयोग से (उदाहरण के लिए प्रयोगशाला रोबोट प्रक्रियाओं में एकीकरण के लिए)
- छोटे पैमाने पर और बड़े पैमाने पर अनुप्रयोगों के लिए
के साथ नमूना तैयार करना अल्ट्रासोनिक जांच UP100H.
नीचे दी गई तालिका आपको सेल विघटन, लसीका और निष्कर्षण के लिए हमारे अल्ट्रासोनिक ऊतक होमोजेनाइज़र की अनुमानित प्रसंस्करण क्षमता का संकेत देती है:
| बैच वॉल्यूम | प्रवाह दर | अनुशंसित उपकरण |
|---|---|---|
| मल्टी-वेल प्लेट्स | n/a | UIP400MTP |
| शीशियों, छोटे बीकर | n/a | अल्ट्रासोनिक CupHorn |
| 10 शीशियों तक | n/a | वायलट्वीटर |
| 1 से 500mL | 10 से 200mL/मिनट | यूपी100एच |
| 10 से 2000mL | 20 से 400mL/मिनट | यूपी200एचटी, UP400St |
| 0.1 से 20L | 0.2 से 4L/मिनट | यूआईपी2000एचडीटी |
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अल्ट्रासोनिक CupHorn नमूनों के बाँझ समरूपीकरण के लिए बंद ट्यूबों और शीशियों के गहन sonication के लिए।
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Hielscher अल्ट्रासोनिक ऊतक homogenizers 50W से 16,000W (16kW) के बीच एक अल्ट्रासाउंड आउटपुट रेंज के साथ उपलब्ध हैं।
प्रयोगशाला कार्यकर्ता Hielscher अल्ट्रासोनिक लैब homogenizers के सरल और सहज संचालन से प्रसन्न हैं। विशिष्ट आवश्यकताओं के आधार पर, Hielscher डिवाइस डिजिटल या एनालॉग नियंत्रण के साथ आते हैं।
- वायलट्वीटर एक शक्तिशाली अल्ट्रासोनिक होमोजेनाइज़र है जो एक ही तीव्रता पर 10 शीशियों या टेस्ट ट्यूबों के एक साथ सोनिकेशन की अनुमति देता है। अप्रत्यक्ष sonication के कारण, पार संदूषण और नमूना हानि पूरी तरह से बचा जाता है। डिस्पोजेबल शीशियों के उपयोग के कारण सफाई और स्वच्छता कम से कम हो जाती है। ब्लॉक सोनोट्रोड ऑटोक्लेवबल है।
- UIP400MTP प्लेट-सोनिकेटर आदर्श है जब आप माइक्रोटिटर और मल्टी-वेल प्लेट्स जैसे 96-वेल प्लेट्स के साथ काम करते हैं। बस UIP400MTP में अपने multiwell थाली या अपने पेट्री पकवान जगह और सभी नमूने समान रूप से sonicated हो. UIP400MTP प्लेट-सोनिकेटर के साथ, उच्च-थ्रूपुट नमूना प्रसंस्करण सरल और कुशल हो जाता है!
- जांच-प्रकार के लैब अल्ट्रासोनिकेटर की सीमा में, होमोजेनाइज़र को 50 वाट, 100 वाट, 200 वाट और 400 वाट के साथ चुना जा सकता है।
UP50H (50W)
UP100H (100W)
UP200Ht / UP200St (200W)
UP400St (400W)
अल्ट्रासोनिक ऊतक Homogenizers के आवेदन और उपयोग
अल्ट्रासोनिक homogenizers आमतौर पर ऊतक पीस, सेल व्यवधान के लिए उपयोग किया जाता है & "आणविक रेंज में इंट्रासेल्युलर पदार्थ के निष्कर्षण से पहले जैविक नमूनों का लसीका और समरूपीकरण"। नमूनों के नियंत्रित sonication द्वारा, lysis से निष्कर्षण और homogenization के सभी चरणों को एक ही अल्ट्रासोनिक सेल विघटनकर्ता का उपयोग करके किया जा सकता है।
अल्ट्रासोनिक homogenizers का महान लाभ आसानी से समायोज्य बिजली इनपुट और sonication तीव्रता में निहित है। Hielscher अल्ट्रासोनिक सेल व्यवधान (lysers) आयाम को 20% से 100% तक समायोजित करके सोनीशन तीव्रता को नियंत्रित करने की अनुमति देते हैं।
वैकल्पिक रूप से निरंतर संचालन के लिए, अल्ट्रासोनिक होमोजेनाइज़र को चक्र मोड पर सेट किया जा सकता है, उदाहरण के लिए गर्मी-संवेदनशील ऊतक के सोनिकेशन के लिए। पल्स मोड में सोनिकेशन का मतलब है कि अल्ट्रासोनिकेटर आवधिक चक्रों में उच्च तीव्र अल्ट्रासोनिक तरंगें उत्पन्न करता है। सोनीशन अवधि की अवधि और बाकी समय उपयोगकर्ता द्वारा व्यक्तिगत रूप से निर्धारित किया जा सकता है।
पर स्पंदित sonication, बाकी अवधि के दौरान, सोनिकेटेड सामग्री अपनी आराम की स्थिति में लौट सकती है और नमूना ठंडा हो सकता है (गर्मी लंपटता के लिए बाकी समय का उपयोग करके)। इस प्रकार, प्रसंस्करण तीव्रता ऊतक के अनुसार सटीक रूप से सेट की जा सकती है और अवांछित नमूना हीटिंग कम हो जाता है।
अल्ट्रासोनिक ऊतक homogenizers मजबूत और उपयोगकर्ता के अनुकूल हैं, जबकि विश्वसनीय परिणाम का उत्पादन सभी महत्वपूर्ण प्रक्रिया मापदंडों पर पूर्ण नियंत्रण के कारण प्रजनन क्षमता का आश्वासन देते हैं।
अल्ट्रासोनिक ऊतक पीसने, सेल व्यवधान, lysis, निष्कर्षण और homogenization के सामान्य अनुप्रयोग क्षेत्रों जैविक और दवा प्रयोगशालाओं, सूक्ष्म जीव विज्ञान, प्रोटिओमिक और जीनोमिक अनुसंधान (जैसे पश्चिमी सोख्ता और एंजाइम से जुड़े immunosorbent परख एलिसा से पहले प्रोटीन रिलीज) में पाए जाते हैं, लेकिन यह भी खाद्य, फार्मा और कॉस्मेटिक उद्योगों के लिए वनस्पति अर्क और bioactive यौगिकों के उत्पादन में.
- नमूना तैयार करने, ऊतक homogenization, lysis और निष्कर्षण (जैसे कोशिकाओं, बैक्टीरिया, बीजाणुओं, सक्रिय यौगिकों) से संबंधित विशिष्ट प्रक्रिया सिफारिशों के लिए यहां क्लिक करें!
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साहित्य/सन्दर्भ
- Nico Böhmer, Andreas Dautel, Thomas Eisele, Lutz Fischer (2012): Recombinant expression, purification and characterisation of the native glutamate racemase from Lactobacillus plantarum NC8. Protein Expr Purif. 2013 Mar;88(1):54-60.
- Brandy Verhalen, Stefan Ernst, Michael Börsch, Stephan Wilkens (2012): Dynamic Ligand-induced Conformational Rearrangements in P-glycoprotein as Probed by Fluorescence Resonance Energy Transfer Spectroscopy. J Biol Chem. 2012 Jan 6;287(2): 1112-27.
- Claudia Lindemann, Nataliya Lupilova, Alexandra Müller, Bettina Warscheid, Helmut E. Meyer, Katja Kuhlmann, Martin Eisenacher, Lars I. Leichert (2013): Redox Proteomics Uncovers Peroxynitrite-Sensitive Proteins that Help Escherichia coli to Overcome Nitrosative Stress. J Biol Chem. 2013 Jul 5; 288(27): 19698–19714.
- Elahe Motevaseli, Mahdieh Shirzad, Seyed Mohammad Akrami, Azam-Sadat Mousavi, Akbar Mirsalehian, Mohammad Hossein Modarressi (2013): Normal and tumour cervical cells respond differently to vaginal lactobacilli, independent of pH and lactate. ed Microbiol. 2013 Jul; 62(Pt 7):1065-1072.
जानने के योग्य तथ्य
अल्ट्रासोनिक ऊतक homogenizers अक्सर जांच sonicator, ध्वनि lyser, अल्ट्रासाउंड विघटनकारी, अल्ट्रासोनिक चक्की, sono-ruptor, sonifier, ध्वनि dismembrator, सेल विघटनकारी, अल्ट्रासोनिक disperser या भंग के रूप में जाना जाता है। विभिन्न शर्तें विभिन्न अनुप्रयोगों के परिणामस्वरूप होती हैं जिन्हें सोनिकेशन द्वारा पूरा किया जा सकता है।
Hielscher Ultrasonics प्रयोगशाला, पायलट और औद्योगिक पैमाने पर अनुप्रयोगों, फैलाव, पायसीकरण और निष्कर्षण के मिश्रण के लिए उच्च प्रदर्शन अल्ट्रासोनिक homogenizers बनाती है।