Ultraheli koe homogenisaatorid
- Ultraheli on ohutu & kudede homogeniseerimise tõhus meetod.
- Ultraheli rakendused hõlmavad koe ja suspensioonide valmistamist, valkude, DNA? RNA ja aktiivsete ühendite ekstraheerimist, samuti ensüümide ja pärmide aktiveerimist? inaktiveerimist.
- Sondi tüüpi ultraheli homogenisaatorite täpne kontrollitavus võimaldab koeproovide usaldusväärset ettevalmistamist.
Kudede homogeniseerimine ultraheli sondide abil
Kudede homogeniseerimine on proovide ettevalmistamise protsess, kus loomsed ja taimsed rakud või mikroorganismid valmistatakse enne rakusisese aine, näiteks valkude, DNA või RNA ekstraheerimist. Raku sisu vabastamiseks tuleb raku membran rebeneda. Pärast rakuseina purustamist hõljuvad rakusisesed makromolekulid puhverlahuses nii, et organellid, valgud ja DNA/ RNA muutuvad kättesaadavaks. Ultraheli koe homogenisaatorid ja rakkude katkestajad on väga tõhusad vahendid rakkude katkestamiseks, lüüsimiseks ja ekstraheerimiseks.
Sondi tüüpi ultrasonikaatorid (nt 200 vatti võimas UP200St) on usaldusväärsed koehomogenisaatorid ja neid kasutatakse laialdaselt proovide ettevalmistamiseks.
Ultraheli koe homogenisaatorid vs alternatiivsed lüüsimeetodid
Võite endalt küsida, milline rakkude katkestamise tehnika ja milline kudede homogeniseerimisseade on teie labori jaoks parim valik. Allpool leiate mõned argumendid, mis räägivad ultraheli lüüsi ja koe homogeniseerimise eest, kuna ultraheliuuringul on mitmeid eeliseid alternatiivsete homogeniseerimismeetoditega võrreldes:
- Tõhusust: Ultraheli homogeniseerimine on kiire ja tõhus meetod kudede ja rakkude häirimiseks. Ultraheli koe homogenisaatorid kasutavad akustilise kavitatsiooni tööpõhimõtet. See meetod on väga tõhus ja võib rakke mõne sekundi jooksul häirida. Kuna intensiivsuse taset saab reguleerida kergest intensiivseks, on ultrahelitöötlus eriti efektiivne kõvade või kiuliste kudede puhul, mida on raske homogeniseerida teiste meetoditega.
- Vältige ristsaastumist: Hielscher pakub võimsaid ultraheli koe homogenisaatoreid, mis valmistavad proovi ette kaudses ultrahelitöötluses. UIP400MTP (ideaalne mikrotiiter- ja mitmekihiliste plaatide jaoks), samuti VialTweeter ja CupHorn (ideaalne viaalidele, torudele ja keeduklaasidele) Hielscher pakub ultraheli rakkude katkestamise seadmeid kontaktivabaks homogeniseerimiseks, mis vähendab proovide ristsaastumise ohtu. Samuti vähendab see saasteainete sisseviimise ohtu lihvimispindadelt või muudelt homogeniseerimisseadmetelt.
- Paindlikkust: Ultraheli homogeniseerimist saab kasutada mitmesuguste proovide suuruste ja mahtudega, alates väikestest kogustest kuni suurte koeproovideni. Lisaks sobib ultraheli homogeniseerimine ka paljudele proovitüüpidele, sealhulgas taimsetele kudedele, loomsetele kudedele ja mikroobikultuuridele. Ultraheli intensiivsust ja kestust saab reguleerida, et optimeerida erinevat tüüpi kudede häirete taset.
- Reprodutseeritavuse: Ultraheli homogeniseerimine annab järjepidevaid tulemusi ja võimaldab täpselt kontrollida homogeniseerimisparameetreid, nagu väljundvõimsus ja ultrahelitöötluse aeg. See aitab tagada katseandmete reprodutseeritavuse ja täpsuse.
- Biomolekulide säilitamine: Sondi tüüpi ultraheliuuring on mittetermiline töötlus. See tähendab, et selle mõju ei põhine soojusel. Kuid iga mehaaniline töötlemine tekitab soojust vastavalt termodünaamika teisele seadusele. See tähendab, et proov soojeneb pikema ultrahelitöötluse aja jooksul. Hielscheri tipptasemel ultrasonikaatorid on varustatud temperatuuriandurite ja nutika temperatuuri jälgimise tarkvaraga. Keerukad jahutusvõimalused võimaldavad vältida soojuse lagunemist ja aitavad säilitada soojustundlike biomolekulide, näiteks ensüümide ja valkude aktiivsust.
- Aja kokkuhoid: Sondi tüüpi ultraheli kõrge efektiivsus võimaldab kiiret koe homogeniseerimist, mis säästab aega võrreldes teiste meetoditega, mis nõuavad koe ulatuslikumat füüsilist manipuleerimist.
Ultraheli koe homogeniseerimine pakub mitmeid eeliseid alternatiivsete homogeniseerimismeetodite ees. Seetõttu on ultraheli koe homogenisaatorid eelistatud rakkude katkestamise tehnika mitmesugustes teadusuuringutes ja tööstuslikes rakendustes.
Näide koe homogeniseerimisprotokollist, kasutades ultraheli sondi:
Ultrasonikaatorid hõlbustavad koe homogeniseerimist lihtsa töö ja kiire homogeniseerimisprotseduuri abil. Samal ajal saab ultraheli protsessi parameetreid täpselt kontrollida ja jälgida, et tulemused oleksid usaldusväärsed ja reprodutseeritavad.
Materjalid:
- Koeproov (nt maks, aju, lihased)
- Puhver (nt fosfaatpuhvri lisandiga keedusoolalahus, Tris-HCl)
- Proteaasi inhibiitori kokteil
- Ultraheli homogenisaator (sondi tüüpi)
- Jää
- mikrotsentrifuugiküvetid
- Pipetid
Ultraheli koe homogeniseerimise protokoll:
Märkus: Ultrahelitöötluse kestust ja intensiivsust võib olla vaja optimeerida sõltuvalt koe tüübist, vanusest ja tervislikust seisundist, samuti spetsiifilistest järgnevatest rakendustest. Samuti on oluline hoolikalt valida puhver, proteaasi inhibiitorid ja muud lisandid, et optimeerida homogenaadi saagist ja kvaliteeti.
Ultraheli koe homogenisaator UP200Ht 2 mm sarvega? sondiga rakkude katkestamiseks, lüüsimiseks, rakkude homogeniaztsiooniks ja lahustumiseks ning valgu ekstraheerimiseks.
Hielscheri ultraheli koe homogenisaatorite peamised eelised
- kiire ja tõhus jahvatamine, homogeniseerimine, lüüs & rakkude katkestamine või ekstraheerimine võimsa ultraheli kavitatsiooniga
- lihtne ja intuitiivne kasutamine ja kasutamine (valige analoog- või digitaalne versioon)
- tootega kokkupuutuvate pindade lihtne puhastamine, loputades sonotrode ultrahelitöötluse all (CIP puhastab kohapeal? SIP steriliseerib kohapeal)
- helikaitsekast (laboriseadmete helikaitsekarp on täielikult valmistatud akrüülklaasist, et tagada täielik nähtavus iga nurga alt)
- täielik kontroll protsessi parameetrite üle digitaalse puutetundliku ekraani kaudu seadmes (digitaalsed ultrasonikaatorid) või võimsusmõõtur (analoogseadmete jaoks)
- integreeritud temperatuuri reguleerimine (oluline kuumatundlike, labiilsete koeproovide puhul)
- Homogeniseerimisjooksu pause saab individuaalselt määratleda ja eelseadistada digitaalses menüüs
- kõik digitaalsed seadmed on varustatud automaatse andmesalvestusega (integreeritud SD/USB-ComboCardil), ühendatava temperatuurianduriga ja brauseri kaugjuhtimispuldiga.
- mitme prooviga töötlemine VialTweeter, kupael või kasutades 4- või 8-sõrmelisi sonotroode (nt integreerimiseks laboratoorsetesse robotiprotsessidesse)
- väikesemahuliste ja suuremahuliste rakenduste jaoks
Proovi ettevalmistamine ultraheli sond UP100H.
Allolev tabel annab teile ülevaate meie ultraheli koe homogenisaatorite ligikaudsest töötlemisvõimsusest rakkude lagunemiseks, lüüsimiseks ja ekstraheerimiseks:
| Partii maht | Voolukiirus | Soovitatavad seadmed |
|---|---|---|
| mitme kaevuga plaadid | N/a | UIP400MTP |
| viaalid, väike keeduklaas | N/a | Ultraheli CupHorn |
| kuni 10 viaali | N/a | VialTweeter |
| 1 kuni 500 ml | 10 kuni 200 ml? min | UP100H |
| 10 kuni 2000 ml | 20 kuni 400 ml? min | UP200Ht, UP400St |
| 0.1 kuni 20L | 0.2 kuni 4L? min | UIP2000hdT |
Võta meiega ühendust!? Küsi meilt!
Ultraheli CupHorn suletud torude ja viaalide intensiivseks ultrahelitöötluseks proovide steriilseks homogeniseerimiseks.
Leidke oma rakenduse jaoks optimaalne ultraheli koe homogenisaator
Hielscheri ultraheli koe homogenisaatorid on saadaval ultraheli väljundvahemikuga 50W kuni 16 000W (16kW).
Laboritöötajad on rahul Hielscheri ultraheli labori homogenisaatorite lihtsa ja intuitiivse toimimisega. Sõltuvalt konkreetsetest nõuetest on Hielscheri seadmetel digitaalne või analoogjuhtimine.
- The VialTweeter on võimas ultraheli homogenisaator, mis võimaldab samaaegset ultrahelitöötlust kuni 10 viaali või katseklaasi sama intensiivsusega. Kaudse ultrahelitöötluse tõttu välditakse täielikult ristsaastumist ja proovi kadu. Puhastamine ja desinfitseerimine väheneb ühekordselt kasutatavate viaalide kasutamise tõttu miinimumini. Plokk sonotrode on autoklaavitav.
- Plaadi-sonikaatori UIP400MTP on ideaalne, kui töötate mikrotiitri ja mitme auguga plaatidega, näiteks 96-auguliste plaatidega. Lihtsalt asetage oma mitmekihiline plaat või petri roog UIP400MTP ja kõik proovid töödeldakse ühtlaselt. UIP400MTP Plate-Sonicatoriga muutub suure läbilaskevõimega proovide töötlemine lihtsaks ja tõhusaks!
- Sondi tüüpi labori ultrasonikaatorite vahemikus saab homogenisaatoreid valida 50 vatti, 100 vatti, 200 vatti ja 400 vatti.
UP50H (50W)
UP100H (100W)
UP200Ht? UP200St (200W)
UP400St (400W)
Ultraheli koe homogenisaatorite kasutamine ja kasutamine
Ultraheli homogenisaatoreid kasutatakse tavaliselt kudede lihvimiseks, rakkude katkestamiseks & bioloogiliste proovide lüüsimine ja homogeniseerimine enne rakusisese aine ekstraheerimist molekulaarses vahemikus. Proovide kontrollitud ultrahelitöötlusega saab kõiki etappe lüüsist ekstraheerimiseni ja homogeniseerimiseni läbi viia sama ultraheli raku katkestaja abil.
Ultraheli homogenisaatorite suur eelis seisneb kergesti reguleeritavas võimsuse sisendis ja ultrahelitöötluse intensiivsuses. Hielscheri ultraheli rakkude katkestajad (lüserid) võimaldavad kontrollida ultrahelitöötluse intensiivsust, reguleerides amplituudi 20% -lt 100% -ni.
Alternatiivina pidevale tööle võib ultraheli homogenisaatorit seadistada tsüklirežiimile, nt soojustundliku koe ultrahelitöötluseks. Sonikatsioon pulsirežiimis tähendab, et ultrasonikaator genereerib perioodilistes tsüklites kõrge intensiivsusega ultraheli laineid. Ultrahelitöötluse perioodi kestust ja puhkeaega saab kasutaja individuaalselt määrata.
juures impulss-ultrahelitöötlus, puhkeperioodil võib ultraheliga töödeldud materjal naasta puhkeolekusse ja proov võib jahtuda (kasutades puhkeaega soojuse hajutamiseks). Seega saab töötlemise intensiivsust täpselt seadistada vastavalt koele ja soovimatu proovi kuumutamine väheneb.
Ultraheli koe homogenisaatorid on tugevad ja kasutajasõbralikud, andes samas usaldusväärseid tulemusi, tagades reprodutseeritavuse tänu täielikule kontrollile kõigi oluliste protsessiparameetrite üle.
Ultraheli kudede lihvimise, rakkude katkestamise, lüüsimise, ekstraheerimise ja homogeniseerimise levinumad rakendused on leitud bioloogilistes ja farmaatsialaborites, mikrobioloogias, proteoomilistes ja genoomilistes uuringutes (nt valkude vabanemine enne Western blottingut ja ensüümiga seotud immunosorbentanalüüs ELISA), aga ka botaaniliste ekstraktide ja bioaktiivsete ühendite tootmisel toidu-, farmaatsia- ja kosmeetikatööstusele.
- Klõpsake siin, et saada konkreetseid protsessisoovitusi seoses proovi ettevalmistamise, kudede homogeniseerimise, lüüsi ja ekstraheerimisega (nt rakud, bakterid, eosed, aktiivsed ühendid)!
- Loe siit, miks sonikaatorid on proteoomiliste uuringute jaoks hädavajalik vahend!
- Siit saate teada, kuidas ultrahelitöötlus hõlbustab genoomiuuringuid!
Kirjandus? Viited
- Nico Böhmer, Andreas Dautel, Thomas Eisele, Lutz Fischer (2012): Recombinant expression, purification and characterisation of the native glutamate racemase from Lactobacillus plantarum NC8. Protein Expr Purif. 2013 Mar;88(1):54-60.
- Brandy Verhalen, Stefan Ernst, Michael Börsch, Stephan Wilkens (2012): Dynamic Ligand-induced Conformational Rearrangements in P-glycoprotein as Probed by Fluorescence Resonance Energy Transfer Spectroscopy. J Biol Chem. 2012 Jan 6;287(2): 1112-27.
- Claudia Lindemann, Nataliya Lupilova, Alexandra Müller, Bettina Warscheid, Helmut E. Meyer, Katja Kuhlmann, Martin Eisenacher, Lars I. Leichert (2013): Redox Proteomics Uncovers Peroxynitrite-Sensitive Proteins that Help Escherichia coli to Overcome Nitrosative Stress. J Biol Chem. 2013 Jul 5; 288(27): 19698–19714.
- Elahe Motevaseli, Mahdieh Shirzad, Seyed Mohammad Akrami, Azam-Sadat Mousavi, Akbar Mirsalehian, Mohammad Hossein Modarressi (2013): Normal and tumour cervical cells respond differently to vaginal lactobacilli, independent of pH and lactate. ed Microbiol. 2013 Jul; 62(Pt 7):1065-1072.
Faktid, mida tasub teada
Ultraheli koe homogenisaatoreid nimetatakse sageli sondi sonikaatoriks, sonic lyseriks, ultraheli katkestajaks, ultraheli veskiks, sono-ruptoriks, sonifieriks, sonic dismembratoriks, raku katkestajaks, ultraheli dispergeerijaks või lahustajaks. Erinevad terminid tulenevad erinevatest rakendustest, mida saab ultrahelitöötlusega täita.
Hielscher Ultrasonics toodab suure jõudlusega ultraheli homogenisaatoreid rakenduste segamiseks, hajutamiseks, emulgeerimiseks ja ekstraheerimiseks laboris, piloot- ja tööstuslikus mastaabis.