E. coli ultraheli lüüs
- E. coli bakterid on mikrobioloogias ja biotehnoloogias kõige sagedamini kasutatavad bakterid.
- Ultraheli rakkude katkestajad annavad usaldusväärseid ja reprodutseeritavaid tulemusi E. coli lüüsi jaoks.
- Intensiivsed, kuid täpselt kontrollitavad kavitatsiooni- ja nihkejõud põhjustavad täielikke häireid ja suuri ekstraheerimissaaseid (nt valgud, DNA).
Miks on E. coli ultraheli rakkude häirimine eelistatud meetod?
Ultraheli homogenisaatorid või sondi tüüpi ultrasonikaatorid pakuvad E. coli lüüsi jaoks mitmeid eeliseid, kuna intensiivne ultraheli häirib tõhusalt rakuseinu ja membraane. Sondi tüüpi ultrasonikaatoreid kasutatakse laialdaselt E. coli lüüsi jaoks järgmistel põhjustel:
Valgu ekstraheerimine E.coli rakkudest toimub tõhusalt ultraheli sond UP200St
Sondi tüüpi ultrasonikaator pakub E. coli lüüsile palju eeliseid. Usaldusväärne ja täpne kontroll ultraheli protsessi parameetrite üle võimaldab soovitud tulemuste saavutamiseks optimeerida tööparameetreid, nagu võimsus, kestus ja proovide käitlemine.
E. coli EDL933 genoomse DNA elektroforeetilised analüüsid, mis viidi läbi 0 – 15 min ultraheliga. L tähistab DNA redelit.
(uuring ja pilt: ©Basselet et al. 2008)
Rakkude katkestamine ultraheli kavitatsiooni abil
Ultraheli sondi tüüpi homogenisaatorid töötavad umbes 20 000 tsükliga sekundis (20 kHz juures) ja põhjustavad kavitatsiooni vedelikes või suspensioonides. Akustiline kavitatsioon mikroskoopilised vaakumilaadsete rõhkude ja kõrgete temperatuuride piirkonnad, mis rebivad rakud laiali. Kuigi temperatuur võib ulatuda mitme tuhande kraadini, on kavitatsioonimahud nii väikesed, et need ei soojenda protsessi oluliselt. Ultraheli genereeris akustilise kavitatsiooni ja nihkejõud perforeerivad või purustavad bakterirakkude, näiteks E.coli rakumembraani. Hielscheri ultrasonikaatorid võimaldavad täpset kontrolli protsessi parameetrite üle, nagu ultraheli intensiivsus, amplituud, energiasisend ja temperatuur. Seega saab ultraheli lüüsiprotsessi optimaalselt kohandada vastavalt rakutüübile, rakukultuurile ja protsessi eesmärgile.
- lüüsi täpne kontroll (intensiivsus, amplituud, temperatuur)
- usaldusväärsed, reprodutseeritavad tulemused
- optimaalne kohandamine konkreetsete proovidega
- temperatuuri reguleerimine
- väga väikeste kuni väga suurte proovide puhul (μL-liitrini)
- Puhtmehaaniline töötlemine
- kasutajasõbralik ja ohutu kasutamine
- lineaarne skaala laborist tootmiseni
VialTweeter ultraheli lüüsi jaoks
Ultraheli homogenisaator vs muud lüüsimeetodid
Kuigi keemiline ja ensümaatiline lüüs võib olla problemaatiline – kuna keemiline lüüs võib muuta valgustruktuure ja tekitada puhastusprobleeme ning ensümaatiline lüüs nõuab pikka inkubatsiooniaega ega ole reprodutseeritav – Ultraheli häired on keerukas, kiire rakkude katkestamise meetod.
Ultraheli lüüs põhineb ainult mehaanilistel jõududel. Kemikaale ei lisata, ultrahelitöötlus purustab rakuseina nihkejõududega. Keemiline lüüs võib muuta valgu struktuuri ja tekitada puhastusprobleeme. Ensümaatiline katkestus nõuab pikka inkubatsiooniaega ja ei ole reprodutseeritav. E.coli bakterirakkude ultraheli rakkude katkestamine on kiire, lihtne, usaldusväärne ja reprodutseeritav. Sellepärast kasutatakse Hielscheri ultrasonikaatoreid bioloogilistes ja biokeemilistes laborites üle maailma proovide ettevalmistamiseks, eel-ananlüütikumideks, in vitro diagonstikaks ja mitmekülgseteks analüüsideks.
Ultraheli lüüsi üldised soovitused
Sonikatsioon on kõige populaarsem meetod väga väikeste, keskmiste ja suurte koguste rakususpensioonide lüüsimiseks – pico-liitrist kuni 100L / h (kasutades ultraheli voolurakku). Rakke lüüsitakse vedeliku nihke ja kavitatsiooniga. DNA nihkub ka ultrahelitöötluse ajal, mistõttu ei ole vaja rakususpensioonile lisada DNaasi.
Temperatuuri reguleerimine ultraheli E.coli lüüsi ajal
Proovi eeljahutamisega ja proovi hoidmisega ultrahelitöötluse ajal jääl saab proovi termilist lagunemist kergesti vältida.
Ideaaljuhul tuleks proove lüüsi ajal hoida jääkülmana, kuid enamiku proovide puhul piisab, kui temperatuur ei tõuse üle kultuuri või koeallika temperatuuri. Seetõttu on soovitatav hoida suspensiooni jääl ja sonikeerida mitme lühikese ultraheli impulsiga 5-10 sek ja pausidega 10-30 sek. Pauside ajal võib soojus hajuda, et taastada madal temperatuur. Suuremate rakuproovide jaoks on saadaval erinevad jahutussärkidega voolurakureaktorid.
Loe siit üksikasjalikke näpunäiteid ja soovitusi edukaks ultraheli lüüsiks!
E. coli lüsaatide ultraheli valmistamise protokollid
Teadlased kasutavad Hielscheri ultraheli homogenisaatoreid E.coli rakkude katkestamiseks. Allpool leiate erinevaid testitud ja tõestatud protokolle E.coli lüüsi jaoks, kasutades Hielscheri ultraheli homogenisaatoreid erinevate E. coli seotud rakenduste jaoks.
Rakkude kasv, ristsidumine ja E. coli rakuekstraktide valmistamine ultraheli abil
SeqA ja RNA polümeraasi puhul kasvatati ChIP-Chip E. coli MG1655 või MG1655 ΔseqA 37 °C juures OD-ks600 umbes 0,15 50 ml LB-s (+ 0,2% glükoosi), enne kui lisati 27 μl formaldehüüdi (37%) ml söötme kohta (lõplik kontsentratsioon 1%). Ristlinkimine viidi läbi aeglasel loksutamisel (100 pööret minutis) toatemperatuuril 20 minutit, millele järgnes kustutamine 10 ml 2,5 M glütsiiniga (lõppkontsentratsioon 0,5 M). Kuumašoki katsete jaoks kasvatati E. coli MG1655 65 ml LB söötmes 30 °C juures OD-ni600 umbes 0,3. Seejärel viidi 30 ml kultuuri eelsoojendatud kolbi temperatuuril 43 °C ja ülejäänut hoiti temperatuuril 30 °C. Ristsidumine ja kustutamine toimus nii, nagu eespool kirjeldatud, välja arvatud see, et rakke hoiti 5 minutit temperatuuril 30 või 43 °C, enne kui neid toatemperatuuril aeglaselt loksutati. Rakud koguti tsentrifuugimise teel ja pesti kaks korda külma TBS-iga (pH 7,5). Pärast resuspensiooni 1 ml lüüsipuhvris (10 mM Tris (pH 8,0), 20% sahharoosi, 50 mM NaCl, 10 mM EDTA, 10 mg/ml lüsosüümi) ja inkubeerimist 37 °C juures 30 minutit, millele järgnes 4 ml IP puhvri lisamine, töödeldi rakke jääl 12 korda 30 sekundi ja 30 sekundi vaheaegadega, kasutades Hielscheri ultraheli protsessorit UP400St 100% võimsuse seadistusega. Pärast 10minutilist tsentrifuugimist 9000 g juures hoiti -20 °C juures 800 μl supernatandi alikvoote. (Waldminghaus 2010)
Ensüümide ületootmine ja puhastamine ultraheli sondiga
Dekahistidiini (His10)-märgistatud valkude ületootmiseks muundati E. coli BL21(DE3) pET19b konstruktsioonidega. Üleöö eelkultuur koguti tsentrifuugimise teel ja 1% kasutati ekspressioonikultuuri inokuleerimiseks. PET19mgtB-d kandvaid rakke kasvatati 22 °C juures, kuni optiline tihedus 600 nm juures (OD600) oli 0,7. Kultuur viidi üle temperatuurini 17 °C ja indutseeriti 100 μM IPTG-ga. 16 tunni pärast koguti kultuur tsentrifuugimise teel 7 500 × g juures 4 °C juures. Rakud resuspendeeriti 50 mM fosfaatpuhvri lisandiga soolalahuses (PBS) 0,3 M NaCl-ga pH 7,4 juures ja katkestati ultraheliga S2 mikro-otsa sonotrode juures Hielscheri ultrasonikaatoris UP200St tsüklis 0,5 ja amplituudiga 75%.
Dekahistidiiniga märgistatud GtfC ületootmine indutseeriti 37 °C juures OD juures600 0,6 koos 100 μM IPTG-ga. Seejärel inkubeeriti rakke 4 tundi, koguti ja lüüsiti, nagu eespool MgtB puhul märgitud.
Toorrakuekstraktid tsentrifuugiti 15 000 × g ja 4 °C juures, et settida rakujäätmeid. Selitatud ekstraktid laaditi 1-ml HisTrap FF Crude kolonnidesse, kasutades ÄKTAprime Plus süsteemi. Ensüümid puhastati vastavalt tootja protokollile Tema märgistatud valkude gradiendi elueerimiseks. Elueeritud valgulahuseid dialüüsiti kaks korda 1,000 mahuosa 50 mM fosfaatpuhvri lisandiga keedusoolalahusega, pH 7,4, 0,3 M NaCl-ga 4 °C juures. Puhastamist analüüsis 12% SDS-PAGE. Valgu kontsentratsioon määrati Bradfordi meetodil, kasutades Roti-Quanti. (Rabausch et al. 2013)
E. coli bakterite valgu ultraheli ekstraheerimine
Huvipakkuv söödavalk (antud juhul Arabidopsis thaliana MTV1) sulatatakse GST sildile ja väljendatakse BL21 Escherichia coli (E. coli) rakkudes.
- Võetakse üks GST-MTV1 ja GST pellet (mis vastab 50 ml bakterikultuurile) ja suspendeeritakse uuesti 2,5 ml jääkülma ekstraheerimise puhvris.
- Kasutage ultrasonikaatorit UP100H (varustatud MS3 mikrotip-sonotrode'iga väikeste koguste jaoks umbes 2-5 ml), et häirida bakterirakke, kuni need on lüüsitud, mida näitab vähenenud läbipaistmatus ja suurenenud viskoossus. See tuleb läbi viia jääl ja soovitatav on sonikeerida intervallidega (nt 10 sek ultraheliga töötlemine, millele järgneb 10-sekundiline paus jääl ja nii edasi). Tuleb olla ettevaatlik, et mitte liiga kõrge intensiivsusega ultraheliga sonikeerida. Kui tuvastatakse vahutamine või valge sademe moodustumine, tuleb intensiivsust vähendada.
- Lüüsitud bakterite lahus viiakse 1,5 ml mikrotsentrifuugiküvettidesse ja tsentrifuugitakse 4 °C juures, 16 000 x g 20 minutit.
Sondi tüüpi ultrasonikaatorid nagu UP400St E.coli tõhusaks lüüsimiseks kasutatakse akustilise kavitatsiooni tööpõhimõtet.
Rekombinantse valgu ekspressioonianalüüs ja puhastamine ultrahelitöötluse abil
E. coli pellet töödeldi ultraheliga Hielscheri ultrasonikaatoriga UP100H. Selleks resuspendeeriti rakupellet jahutatud lüüsipuhvris (50 mM Tris-HCl pH = 7,5, 100 mM NaCl, 5 mM DTT, 1 mM PMSF) ja jahutati jääl 10 minutit. Seejärel töödeldi rakususpensiooni ultraheliga 10 lühikese 10-sekundilise purunemisega, millele järgnes jahutamiseks intervall 30 s. Lõpuks eemaldati rakujäätmed ultratsentrifuugimisega 4 ° C juures 15 minutit kiirusel 14000 pööret minutis. rPR-ekspressiooni kinnitamiseks manustati supernatanti 12% polüakrüülamiidgeeliga ning analüüsiti SDS-PAGE ja Western blot-meetodil. rPR-i puhastamine toimus Ni2+-NTA vaigu (Invitrogen, USA) abil vastavalt tootja juhendile. Selles etapis kasutati natiivset puhastusmeetodit. Puhastatud valgu puhtust hinnati elektroforeesi abil 12% polüakrüülamiidgeelil ja sellele järgnenud Coomassie sinisel värvimisel. Puhastatud valgu kontsentratsiooni mõõdeti Micro BCA valguanalüüsi komplektiga (PIERCE, USA). (Azarnezhad et al. 2016)
Ultraheli homogenisaatorid E. coli lüüsi jaoks
Hielscher Ultrasonics projekteerib, toodab ja tarnib suure jõudlusega ultraheli homogenisaatoreid E. coli bakterite ja teiste rakutüüpide, kudede ja rakukultuuride usaldusväärseks ja tõhusaks lüüsiks.
Ultraheli sondide lai portfell ja kaudsed ultrahelitöötlussüsteemid võimaldavad meil pakkuda teile ideaalset ultraheli koe homogenisaatorit teie rakkude katkestamise ja ekstraheerimise rakenduse jaoks.
Disain, tootmine ja nõustamine – Kvaliteet Valmistatud Saksamaal
Hielscheri ultrasonikaatorid on tuntud oma kõrgeimate kvaliteedi- ja disainistandardite poolest. Nutikas tarkvara, intuitiivne menüü, programmeeritavad seaded ja automaatne andmete protokollimine on vaid mõned Hielscheri ultrasonikaatorite omadused. Vastupidavus ja lihtne kasutamine võimaldavad meie ultrasonikaatorite sujuvat integreerimist uurimis- ja biotehnoloogiarajatistesse. Isegi karmid tingimused ja nõudlikud keskkonnad on Hielscheri ultrasonikaatorite poolt kergesti käsitsetavad.
Hielscher Ultrasonics on ISO sertifitseeritud ettevõte ja paneb erilist rõhku suure jõudlusega ultrasonikaatoritele, millel on tipptasemel tehnoloogia ja kasutajasõbralikkus. Loomulikult on Hielscheri ultrasonikaatorid CE-nõuetele vastavad ja vastavad UL, CSA ja RoHs nõuetele.
Allolev tabel annab teile ülevaate meie ultrasonikaatorite ligikaudsest töötlemisvõimsusest:
| Partii maht | Voolukiirus | Soovitatavad seadmed |
|---|---|---|
| mitme kaevu / mikrotiitri plaadid | mujal liigitamata | UIP400MTP |
| CupHorn viaalide või keeduklaasi jaoks | mujal liigitamata | Ultraheli CupHorn |
| Ultraheli mikrovoolu reaktor | mujal liigitamata | GDmini2 |
| kuni 10 viaali 0,5 kuni 1,5 ml lahusega | mujal liigitamata | VialTweeter |
| 0.5 kuni 1,5 ml | mujal liigitamata | VialTweeter |
| 1 kuni 500 ml | 10 kuni 200 ml / min | UP100H |
| 10 kuni 2000 ml | 20 kuni 400 ml / min | UP200Ht, UP400St |
| 0.1 kuni 20L | 0.2 kuni 4L / min | UIP2000hdT |
| 10 kuni 100L | 2 kuni 10L/min | UIP4000 |
| mujal liigitamata | 10 kuni 100 L / min | UIP16000 |
| mujal liigitamata | Suurem | klaster UIP16000 |
Võta meiega ühendust! / Küsi meilt!
Ultraheli E. coli lüüsi lisaprotokollid
Allitsiiniga modifitseeritud valgud E. colis, kasutades ultraheli VialTweeterit
Sulfhüdrüülisisalduse määramine 5,5′-ditiobis(2-nitrobensoehappe) analüüsiga
Mopsi minimaalse söötme (1:100) inokuleerimiseks kasutati E. coli MG1655 öökultuuri. Kultuuri kasvatati aeroobselt, kuni saavutati A600 0, 4. Kultuur jagati stressiraviks kolmeks 15 ml kultuuriks. Töötlemata kultuur toimis negatiivse kontrollina. Ühele ülejäänud kahest kultuurist lisati 0,79 mM allitsiini (128 μg ml-1) või 1 mM diamiidi. Kultuure inkubeeriti 15 minutit, 5 ml igast kultuurist koguti tsentrifuugimise teel (8,525 × g, 4 °C, 10 minutit). Rakke pesti kaks korda 1 ml fosfaatpuhvri lisandiga keedusoolalahusega (137 mM NaCl, 2,7 mM KCl, 10 mM Na2HPO4, 2 mM KH2PO4, pH 7,4, säilitati enne kasutamist anaeroobselt) ja tsentrifuugiti (13 000 × g, 4 °C, 10 min). Rakud resuspendeeriti lüüsipuhvris (fosfaatpuhvri lisandiga keedusoolalahus 6 mM guanidiiniumHCl-ga, pH 7,4) enne 4 ° C juures ultraheliga katkestamist (VialTweeter ultrasonikaator, Hielscher GmbH, Saksamaa) (3 × 1 min). Rakujäätmed granuleeriti tsentrifuugimise teel (13 000 × g, 4 °C, 15 min). Supernatant kanti magnetsegamisvardaga 3,5 ml QS-makroküvetile (10 mm) ja segati 1 ml lüüsipuhvriga. Proovide ekstinktsiooni jälgiti 412 nm juures Jasco V-650 spektrofotomeetriga, mis oli varustatud PSC-718 reguleeritava temperatuuriga kambrihoidjaga toatemperatuuril. Lisati 100 μl 3 mM ditiobis(2-nitrobensoehape) lahust. Väljasuremist jälgiti, kuni see saavutas küllastumise. Tiooli kontsentratsiooni arvutamiseks kasutati ekstinktsioonitegurit ε412 = 13 700 meetrit-1 Cm-1 tio-2-nitrobensoehappe (TNB) puhul. Rakutiooli kontsentratsioonid arvutati E. coli rakkude mahu põhjal 6,7 × 10-15 liiter ja raku tihedus A600 = 0, 5 (vastab 1 × 10-le8 rakud ml-1 kultuuri). (Müller jt 2016)
In vivo glutatiooni määramine ultraheli rakupurusti abil
E.coli MG1655 kasvatati MOPS-i minimaalses söötmes kogumahus 200ml, kuni saavutati A600 0,5. Kultuur jagati stressiraviks 50 ml kultuurideks. Pärast 15-minutilist inkubeerimist 0,79 mM allitsiini, 1 mM diamiidi või dimetüülsulfoksiidiga (kontroll) koguti rakud 4,000 g juures 4 °C juures 10 minutit. Rakke pesti kaks korda KPE puhvriga enne graanulite resuspensiooni 700 μl KPE puhvris. Deproteiinimiseks lisati 300 l 10% (w / v) sulfosalitsüülhapet enne rakkude katkestamist ultraheliga (3 x 1 min; VialTweeter ultrasonikaator). Supernatandid koguti pärast tsentrifuugimist (30 min, 13 000g, 4 °C). Sulfosalitsüülhappe kontsentratsiooni vähendati 1% -ni, lisades 3 mahuosa KPE puhvrit. Glutatiooni ja GSSG üldsisalduse mõõtmised viidi läbi eespool kirjeldatud viisil. Rakulise glutatiooni kontsentratsioonid arvutati E. coli rakkude mahu põhjal 6,7×10-15 liiter ja raku tihedus A600 0,5 (vastab 1-le×108 rakud ml-1 kultuuri). GSH kontsentratsioonid arvutati, lahutades 2[GSSG] kogu glutatioonist. (Müller jt 2016)
Inimese mAspAT-i ekspressioon E. coli's, kasutades ultraheli homogenisaatorit
E. coli BL21 (DE3) üksikkoloonia, mis sisaldab ekspressioonivektorit 30 ml Luria-Bertani (LB) söötmes, mis sisaldab 100 μg/ml ampitsilliini, ja seejärel kasvatatakse seda 37 °C juures kuni optilise tiheduseni (OD600) jõudis 0,6-ni. Rakud koguti tsentrifuugimise teel 4 000 × g juures 10 minutit ja resuspendeeriti 3L värskes LB söötmes, mis sisaldas 100 μg/ml ampitsilliini.
Seejärel indutseeriti valgu ekspressioon 1 mM isopropüül-β-ᴅ-1-tiogalaktopüranosiidiga (IPTG) 20 tundi 16 ° C juures. Rakud koguti tsentrifuugimise teel 8 000 × g juures 15 minutit ja pesti puhvriga A (20 mM NaH2PO4, 0,5 M NaCl, pH 7,4). 3 L kultuurist saadi ligikaudu 45 g (märgkaaluga) rakke. Pärast tsentrifuugimist resuspendeeriti rakugraanulid 40 ml (1 L kultuuri jaoks) jääkülma ekstraheerimise puhvris A ja lüüsiti ultraheliga jääkülmal temperatuuril, kasutades Hielscheri ultraheli rakupurustit UP400St. Rakkude lüüsi tsentrifuugiti kiirusel 12 000 pööret minutis 15 minutit, et eraldada lahustuvad (supernatant) ja sadestunud (pelleti) fraktsioonid. (Jiang et al. 2015)
Faktid, mida tasub teada
E.coli
Escherichia coli (E. coli) on gramnegatiivne, fakultatiivselt anaeroobne, vardakujuline koliformne bakter perekonnast Escherichia, mida tavaliselt leidub soojavereliste organismide (endotermide) alumises sooles. On suur hulk E. coli tüvesid (või alatüüpe), millel on erinevad omadused. Enamik E. coli tüvesid on inimestele ohutud, nt B- ja K-12-tüved, mida kasutatakse tavaliselt laborites teadusuuringutes. Kuid mõned tüved on kahjulikud ja võivad põhjustada tõsiseid haigusi.
E. coli mängib kaasaegses biotehnikas ja tööstuslikus mikrobioloogias olulist rolli, kuna baktereid on lihtne manipuleerida. Tavalised laborirakendused, mis hõlmavad sageli E. coli kasutamist, nt rekombinantse desoksüribonukleiinhappe (DNA) loomiseks või mudelorganismina toimimiseks.
E. coli on väga mitmekülgne peremeesorganism heteroloogsete valkude tootmiseks ja E. coli rekombinantsete valkude tootmiseks on saadaval mitmesuguseid valgu ekspressioonisüsteeme. Kasutades plasmiide, mis võimaldavad valgu kõrgetasemelist ekspressiooni, saab bakteritesse viia geene, mis võimaldab toota selliseid valke suurtes kogustes tööstuslikes käärimisprotsessides.
E.coli kasutatakse insuliini tootmiseks rakutehastena. Edasised rakendused hõlmavad modifitseeritud E. coli rakkude kasutamist vaktsiinide ja immobiliseeritud ensüümide väljatöötamiseks ja tootmiseks, biokütuste tootmiseks ning bioremediatsiooniks.
Tüvi K-12 on E. coli mutantne vorm, mis ekspresseerib üle ensüümi Leeliseline fosfataas (ALP). See mutatsioon tekib ensüümi pidevalt kodeeriva geeni defekti tõttu. Kui geen toodab toodet ilma inhibeerimiseta, nimetatakse seda konstitutiivseks aktiivsuseks. Seda spetsiifilist mutantset vormi kasutatakse ALP ensüümi eraldamiseks ja puhastamiseks.
E. coli baktereid kasutatakse laialdaselt ka rakutehastena. Tehismikroobe (nt baktereid) ja taimerakke saab kasutada nn rakutehastena. Need geneetiliselt muundatud rakud toodavad molekule, kemikaale, polümeere, valke ja muid aineid, mida kasutatakse näiteks farmaatsia-, toidu- ja keemiatööstuses. Selliste biotehnoloogiliste rakkude sisemuses toodetud molekulide vabastamiseks on ultraheli lüüs tavaline meetod rakuseinte katkestamiseks ja sihtainete ülekandmiseks ümbritsevasse vedelikku. Loe lähemalt biotehnoloogiliste rakkude lüüsist!
Ultraheli DNA lõikamine
Ultraheli nihkejõud on tavaliselt kasutatav meetod molekulide, organellide ja valkude vabastamiseks raku sisemusest ning DNA ahelate purustamiseks tükkideks. Akustiline kavitatsioon purustab rakuseinad ja membraanid, et eraldada rakkudest DNA ja tekitada umbes 600-kohaseid fragmente – 800 bp pikk, mis sobib ideaalselt analüüsiks.
Klõpsake siin, et saada lisateavet DNA killustumise ultraheli homogenisaatorite kohta!
Kirjandus / Viited
- Azarnezhad A., Sharifi Z., Seyedabadi R., Hosseini A., Johari B., Sobhani Fard M. (2016): Cloning and Expression of Soluble Recombinant HIV-1 CRF35 Protease-HP Thioredoxin Fusion Protein. Avicenna J Med Biotechnol. 8(4), 2016. 175–181.
- Jiang X., Wang J., Chang H.; Zhou Y. (2016): Recombinant expression, purification and crystallographic studies of the mature form of human mitochondrial aspartate aminotransferase. BioScience Trends 2016.
- Müller A., Eller J., Albrecht F., Prochnow P., Kuhlmann K., Bandow J.E., Slusarenko A.J., Leichert L.I.O. (2016): Allicin Induces Thiol Stress in Bacteria through S-Allylmercapto Modification of Protein Cysteines. Journal of Biological Chemistry Vol. 291, No. 22, 2016. 11477–11490.
- Rabausch U., Juergensen J., Ilmberger N., Böhnke S., Fischer S., Schubach B., Schulte M., Streit W. R. (2013): Functional Screening of Metagenome and Genome Libraries for Detection of Novel Flavonoid-Modifying Enzymes. Applied and Environmental Microbiology 79(15), 2013. 4551–4563.
- Sauer M. (2014): MTV1 Pull-down Assay in Arabidopsis. bio-protocol Vol 4, Iss 12, Jun 20, 2014.
- Waldminghaus T., Skarstad K. (2010): ChIP on Chip: surprising results are often artifacts. BMC Genomics 11, 2010. 414.
Hielscher Ultrasonics toodab suure jõudlusega ultraheli homogenisaatoreid alates Lab kuni tööstuslik suurus.