Tecnología de ultrasonido de Hielscher

Preparación de la muestra con el VialTweeter ultrasónico

La preparación de la muestra antes del análisis puede requerir diversos procesos preanalíticos como la homogeneización de los tejidos, la lisis, la extracción de proteínas, el ADN, el ARN, los orgánulos y otras sustancias intracelulares, la disolución y la desgasificación. El VialTweeter es un dispositivo ultrasónico único que prepara varios tubos de muestras simultáneamente en condiciones exactamente iguales. Gracias a la sonicación indirecta de los tubos de ensayo cerrados, se evita la contaminación cruzada y la pérdida de muestras.

Preparación de muestras por ultrasonidos

La ecografía es una técnica común de tratamiento de muestras para preparar la muestra para análisis como la reacción en cadena de los polímeros (PCR), Western Blots, ensayos, secuenciación molecular, cromatografía, etc. La ecografía es una técnica ampliamente utilizada en los laboratorios para tratar las muestras de forma preanalítica. Una de las principales ventajas de la sonicación es que el principio de funcionamiento de los ultrasonidos se basa en fuerzas puramente mecánicas. La lisis ultrasónica y la disrupción celular se logran mediante fuerzas de cizallamiento sonomecánicas, lo que da a la ultrasonicación la ventaja de que los disolventes utilizados para la extracción de proteínas pueden utilizarse también durante la lisis. Los disruptores celulares ultrasónicos como el VialTweeter rompen las paredes / membranas celulares y promueven la transferencia de masa entre el interior de la célula y el disolvente. De este modo, el analito (por ejemplo, ADN, ARN, proteínas, orgánulos, etc.) se transfiere eficientemente de la matriz celular al disolvente. Esto significa que los pasos de enfriamiento y extracción se superponen con el proceso de disrupción celular ultrasónica, lo que hace que la lisis ultrasónica sea muy eficaz. Además, la preparación de muestras por ultrasonidos no requiere detergentes y otros reactivos de lisis, que podrían alterar y destruir la estructura del lisado y es conocida por los problemas posteriores de la purificación. Otro método de lisis, la alteración enzimática, requiere largos tiempos de incubación y da resultados a menudo no reproducibles. La preparación de muestras por ultrasonido permite superar problemas comunes en la preparación de muestras, como la homogeneización de los tejidos, la disrupción celular, la lisis, la extracción de proteínas y la solubilización del lisado. Dado que la intensidad del tratamiento ultrasónico puede controlarse con exactitud y ajustarse a la muestra biológica, se evita la degradación y la pérdida de muestras. La temperatura de la muestra, el modo de pulso y la duración de la sonicación, que se supervisan y controlan automáticamente, garantizan resultados óptimos.

El VialTweeter es un sistema ultrasónico único para la sonicación simultánea de hasta 10 viales bajo las mismas condiciones exactas sin contaminación cruzada.

UP200St con VialTweeter para la sonicación de viales cerrados

El VialTweeter es especialmente conveniente para el trabajo de laboratorio que requiere la preparación simultánea de múltiples muestras en las mismas condiciones. El VialTweeter es un sonotrodo de bloque ultrasónico que puede contener hasta 10 viales (por ejemplo, Eppendorf, centrífuga, tubos NUNC, crioviales) y los sonica intensamente bajo condiciones controladas con precisión. Como la energía ultrasónica se acopla a través de las paredes de los viales en el medio de la muestra, los viales se mantienen cerrados durante el tratamiento. De este modo, se evita completamente la pérdida de muestras y la contaminación cruzada.

Equipo completo del VialTweeter: Sonotrodo VialTweeter con el procesador ultrasónico UP200St

Unidad de preparación de muestras ultrasónicas VialTweeter: VialTweeter sonotrodo en el procesador ultrasónico UP200St

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Viales y tubos que se ajustan al VialTweeter

El VialTweeter es adecuado para alojar 10 tubos comunes de fondo cónico o redondo como los de Eppendorf, centrífuga, crioviales y varios tipos de viales NUNC, pero los orificios pueden ser personalizados para otros tamaños de viales y tubos a petición. Por favor, háganos saber qué tipo de tubos de ensayo quiere usar para que podamos modificar su VialTweeter en consecuencia. Para tubos de ensayo más grandes como tubos Falcon y otros contenedores de ensayo, vasos de precipitados y recipientes, el VialPress es una solución conveniente.

El VialTweeter con VialPress

Hielscher VialTweeter con VialPress para la sonicación indirecta de viales más grandesMientras que el propio VialTweeter, con sus 10 agujeros para tubos, ya es un dispositivo ultrasónico único y altamente funcional, el complemento VialPress hace que el VialTweeter sea aún más versátil y flexible para su funcionamiento. La VialPress es un accesorio para el VialTweeter que consiste en una barra de sujeción que permite fijar al frente del VialTweeter tubos de muestra más grandes, como los tubos Falcon u otros vasos de ensayo pequeños o medianos. La imagen de la izquierda muestra al VialTweeter sosteniendo 10 viales de Eppendorf en el bloque, mientras que la VialPress fija un tubo de ensayo más grande al frente para la sonicación. La VialPress es capaz de sostener hasta 5 tubos de ensayo más grandes para una intensa sonicación.

Protocolos de preparación de muestras de VialTweeter

El VialTweeter se utiliza ampliamente para sonicar muestras biológicas. Antes de su análisis, las muestras deben prepararse para análisis y ensayos bioquímicos o biofísicos, por ejemplo, mediante lisis, homogeneización de tejidos, extracción de proteínas, cizallamiento de ADN/ARN, desgasificación, etc. El VialTweeter cumple con estos procesos ultrasónicos de manera fiable y ofrece resultados reproducibles. Una aplicación común del VialTweeter es la lisis/interrupción celular de tejidos de mamíferos (humanos y animales), así como de células bacterianas y partículas virales. Las muestras biológicas tratadas con éxito con el VialTweeter incluyen células epiteliales de pulmón humano, células madre hematopoyéticas y células de leucemia mieloide, Escherichia coli, Bacillus subtilis, Bacillus anthracis, Francisella tularensis, Yersinia pestis, Streptococcus pyogenes, Caulobacter crescentus, Mycoplasma pneumoniae, complejo de micobacterias / Mycobacterium tuberculosis (MTBC) y muchas otras células bacterianas, botánicas y microbianas.
A continuación, puede encontrar algunos protocolos seleccionados con el VialTweeter.

The VialTweeter can hold up to 10 common test vials for simultaneous ultrasonic sample preparation

El VialTweeter sonica tubos Eppendorf de 1.0, 1.5 y 2.0mL a alta intensidad sin contaminación cruzada o pérdida de muestras.

Aplicaciones del VialTweeter

  • Homogeneizar tejidos
  • ruptura celular & lisis
  • La extracción de proteínas
  • Esquilado de ADN/ARN
  • solubilización de los pellets de células
  • detección de patógenos
  • desgasificación
  • diagnósticos in vitro
  • tratamiento preanalítico
  • proteómica

E.Coli Lysis con VialTweeter para la determinación del glutatión en vivo

La bacteria Escherichia coli de la cepa MG1655 fue cultivada en un medio mínimo de MOPS en un volumen total de 200ml hasta alcanzar un A600 de 0,5. El cultivo se dividió en cultivos de 50 ml para el tratamiento del estrés. Después de 15 min de incubación con 0,79 mM de alicina, 1 mM de diámetro o dimetil sulfóxido (control), las células se cosecharon a 4.000g a 4°C durante 10 min. Las células se lavaron dos veces con tampón KPE antes de la resuspensión de los gránulos en 700µl de tampón KPE. Para la desprotección, se añadieron 300µl de ácido sulfosalicílico al 10% (w/v) antes de la disrupción de las células por ultrasonido (3 x 1 min; ultrasonido VialTweeter). Los sobrenadantes se recogieron después de la centrifugación (30 min, 13.000g, 4°C). Las concentraciones de ácido sulfosalicílico se redujeron al 1% mediante la adición de 3 volúmenes de tampón KPE. Las mediciones del glutatión total y del GSSG se realizaron como se ha descrito anteriormente. Las concentraciones celulares de glutatión se calcularon sobre la base de un volumen de células de E. coli de 6,7×10-15 litros y una densidad celular de A600 0,5 (equivalente a 1×108 células de cultivo ml-1). Las concentraciones de GSH se calcularon restando 2[GSSG] del glutatión total. (Müller et al. 2016)

Lisis celular con VialTweeter antes de la Espectrometría de Absorción Atómica en Horno de Grafito

El Bacillus subtilis 168 (trpC2) se expuso a 15 min de estrés antibiótico, luego las células se cosecharon a 3.320 x g, se lavaron cinco veces con 100 mM Tris/1 mM EDTA, pH 7,5, se resuspendieron en 10 mM Tris, pH 7,5 y se interrumpieron por ultrasonido en un instrumento Hielscher VialTweeter. (Wenzel et al. 2014)

Preparación de la muestra de VialTweeter antes de la Espectrometría de Masas

Los pellets de células liofilizadas de células madre/progenitoras hematopoyéticas CD34 humanas se resuspendieron en 10µl (200µl para la preparación a granel del HEK293 para la serie de dilución peptídica) de 8 M de urea en 100 mM de carbonato de hidrógeno de amonio y se lisaron con la ayuda de la sonicación con el Hielscher VialTweeter a una amplitud del 60%, un ciclo del 60% y una duración de 200s durante tres veces con enfriamiento intermedio en hielo. (Amon et al. 2019)

Protocolos de preparación de muestras con la VialPress

The VialTweeter equipped with VialPress, a clamp that fixates larger test vessel to the VialTWeeter front for intense indirect sonicationLa lechuga fresca (Lactuca sativa) se homogeneizó en 0,5 M de solución tampón HEPES (pH 8, KOH ajustado) en una proporción de 1 g de planta (peso fresco) a 200, 100, 50 o 20 mL de solución tampón. La relación entre la masa de la planta y el volumen de la solución tampón se varió para mantener el volumen total homogeneizado entre 3,5 y 12 mL. La relación entre la masa de la planta y el volumen de la solución tampón se varió para mantener el volumen total homogeneizado entre 3,5 y 12 mL, permitiendo la homogeneización con la sonda. Los homogeneizados se sometieron entonces a una ultrasonificación indirecta utilizando un UP200St con VialTweeter equipado con VialPress 200xt (Hielscher Ultrasonics GmbH, Alemania) durante 3 min (80% de pulso y 100% de potencia). El uso de este dispositivo evitó la contaminación. (Laughton et al. 2019)

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VialTweeter at the ultrasonic processor UP200ST

El VialTweeter con 10 viales de Eppendorf en el procesador ultrasónico UP200St

Control fiable de la temperatura durante la sonicación con el VialTweeter

La temperatura es un factor crucial que influye en el proceso y que es especialmente importante para el tratamiento de las muestras biológicas. Como todas las técnicas de preparación de muestras mecánicas, la sonicación crea calor. Sin embargo, la temperatura de las muestras puede ser bien controlada cuando se utiliza el VialTweeter. Le presentamos varias opciones para monitorizar y controlar la temperatura de sus muestras mientras las prepara con el VialTweeter y la VialPress para su análisis.

  1. Monitorización de la temperatura de la muestra: El procesador ultrasónico UP200St, que acciona el VialTweeter, está equipado con un software inteligente y un sensor de temperatura enchufable. Enchufe el sensor de temperatura en el UP200St e inserte la punta del sensor de temperatura en uno de los tubos de muestra. A través de la pantalla táctil digital de color, puede establecer en el menú del UP200St un rango de temperatura específico para su sonicación de la muestra. El ultrasonido se detendrá automáticamente cuando se alcance la temperatura máxima y hará una pausa hasta que la temperatura de la muestra descienda al valor más bajo de la temperatura establecida ∆. A continuación, la sonicación vuelve a comenzar automáticamente. Esta característica inteligente evita la degradación inducida por el calor.
  2. El bloque del VialTweeter puede ser preenfriado. Poner el bloque del VialTweeter (¡sólo el sonotrodo sin transductor!) en la nevera o el congelador para preenfriar el bloque de titanio ayuda a posponer el aumento de temperatura de la muestra. Si es posible, la muestra misma puede ser preenfriada también.
  3. Use hielo seco para enfriar durante la sonicación. Utilice una bandeja poco profunda llena de hielo seco y coloque el VialTweeter sobre el hielo seco para que el calor se pueda disipar rápidamente.

Clientes de todo el mundo utilizan el VialTweeter y el VialPress para su trabajo diario de preparación de muestras en laboratorios biológicos, bioquímicos, médicos y clínicos. Gracias al software inteligente y al control de temperatura del procesador UP200St, la temperatura se controla de forma fiable y se evita la degradación de las muestras inducida por el calor. La preparación de muestras por ultrasonidos con el VialTweeter y la VialPress proporciona resultados altamente fiables y reproducibles!

Detalles técnicos del VialTweeter

El VialTweeter es un sonotrodo de bloque hecho de titanio que puede contener hasta 10 viales en los agujeros dentro del bloque. Además, hasta 5 tubos de ensayo más grandes pueden ser sujetados al frente del VialTweeter usando la VialPress. El VialTweeter está diseñado de tal manera que la energía de ultrasonido se distribuye uniformemente en cada frasco insertado para asegurar resultados de sonicación fiables y uniformes. Un pequeño pivote ajusta el sonotrodo del VialTweeter a un terreno irregular y alinea los tubos de ensayo verticalmente.

Ventajas del VialTweeter de un vistazo

  • Sonicación intensa de hasta 10 viales de forma simultánea
  • Sonicación indirecta a alta intensidad ultrasónica a través de la pared del vaso en la muestra
  • La sonicación indirecta evita la contaminación cruzada y la pérdida de muestra
  • Resultados reproducibles gracias a la amplitud de sonicación ajustable y controlable
  • La VialPress le permite sondear tubos más grandes
  • Amplitud ajustable del 20 al 100%
  • Modo de pulso regulable de 0 a 100 %
  • Autoclavable

El VialTweeter está alimentado por el UP200Stun poderoso procesador ultrasónico de 200 vatios. El UP200St está equipado con un software inteligente que permite el control preciso de todos los parámetros importantes del proceso ultrasónico como la amplitud, el tiempo de sonicación, la pulsación y la temperatura. Esto hace del VialTweeter una herramienta fiable para obtener resultados de proceso reproducibles con éxito en los laboratorios biológicos y bioquímicos.
Pantalla táctil a color del dispositivo ultrasónico UP400StLa amplitud puede ser ajustada entre el 20 y el 100% y permite así adaptar la intensidad ultrasónica a su muestra. Por ejemplo, el cizallamiento y la fragmentación del ADN y el ARN requieren una amplitud más suave para evitar la producción de fragmentos de ADN demasiado pequeños, la homogeneización de los tejidos del cerebro del ratón necesita una sonicación de alta intensidad. Elija la amplitud, la intensidad de sonicación y la duración ideales a través del menú inteligente e intuitivo del procesador UP200St. Se puede acceder fácilmente al menú y a los ajustes mediante una pantalla táctil de color. En los ajustes se pueden preestablecer los parámetros de sonicación como la amplitud, el modo de pulsación/ciclo, la duración de la sonicación, la entrada de energía total y los límites de temperatura. En la investigación y la producción, la repetibilidad de los ensayos y los resultados de las pruebas es crucial. Esto significa que el registro preciso de las condiciones del proceso y los protocolos de sonicación son absolutamente importantes. El protocolo de datos automático escribe todos los datos de sonicación en un archivo CSV en una tarjeta SD integrada para que pueda comprobar y comparar fácilmente varias ejecuciones de sonicación. Todos los datos del proceso ultrasónico pueden ser fácilmente accesibles y compartidos como un archivo CSV.
Hielscher Ultrasonics se esfuerza por proporcionarle tecnología avanzada para facilitar y mejorar su trabajo de investigación!

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Para recibir una propuesta, por favor, introduzca su información de contacto en el siguiente formulario. Se ha preseleccionado una configuración estándar para el dispositivo, pero, por favor, no dude en revisarla y modificarla si lo necesita antes de enviar su solicitud.








Por favor, indique a continuación la información que desea recibir:



  • Generador ultrasónico UP200St-G de 200 vatios

    generador ultrasónico, 200W, 26kHz (sistema automático de sintonización), pantalla táctil, amplitud ajustable 20-100%, pulso 10-100%, protección contra marcha en seco, IP51, incl. medición de potencia, toma para ethernet, fuente de alimentación, cable de red, maletín portátil, manual



  • El transductor ultrasónico UP200St-T de 200 vatios

    transductor ultrasónico, Ø45mm, longitud aprox. 230mm, bocina de titanio Ø10mm (amplitud 70µm), grado IP65, botón de inicio/parada, enchufe para PT100, LEDs para la iluminación de la muestra, con pinza ST1, con herramientas de montaje



  • Hielscher VialTweeter para el dispositivo ultrasónico UP200St

    Vial-Tweeter-Sonotrode, de titanio, para procesador ultrasónico UP200St o UP200Ht, con 10 agujeros ø11mm, para la excitación de hasta 10 tubos Eppendorf de 1,5ml u otros, (véase también el dispositivo de sujeción VialPress para recipientes con otras dimensiones)



  • sonotrodo para sonicación directa, de titanio, Ø2mm (3mm2), longitud aprox. 120mm, rosca macho M6x0,75, para muestras de aprox. 2ml hasta 50ml, relación de amplitud aprox. 1:3, esterilizable en autoclave



  • Hielscher VialPress para VialTweeter en el dispositivo ultrasónico UP200St

    Dispositivo de sujeción como accesorio para VialTweeter-Sonotrode S26d11x10, acero inoxidable, para la excitación de hasta 5 recipientes con un Ø de hasta 20mm



  • interruptor de pie a distancia

    Interruptor de pedal a distancia, botón de pedal, con enchufe RJ45 (macho), acero revestido de goma negro, cable de 1,5 m, para todos los homogeneizadores ultrasónicos de Hielscher con control táctil (p. ej. UP200Ht, UP200St, activar el control remoto RJ45 en los ajustes), ver interruptor de pie a distancia


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VialTweeter dispositivo ultrasónico para la extracción de proteínas a partir de muestras de tejido (Haga clic para agrandar!)

VialTweeter con VialPress para la sonicación indirecta.

Literatura / Referencias



3 pasos hasta el éxito mediante el procesamiento por ultrasonidos: viabilidad - optimización - escalado (clic para ampliar)

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