Preparación de la muestra de masa de la placa microtiter por ultrasonido

Las placas microtiter, las placas multipozos, las placas de 96 pocillos o las placas ELISA se utilizan para el cultivo de muestras en masa y el procesamiento de muestras biológicas. Con el ultrasonido de placas microtiter UIP400MTP, Hielscher ofrece una solución ultrasónica única de preparación de muestras uniforme y fiable de placas de 96 pocillos. Las aplicaciones comunes del ultrasonido de microtitulación UIP4000MTP incluyen la lisis celular, la extracción de proteínas, la homogeneización y solubilización celular, así como la fragmentación de ADN.

Preparación de muestras de masa con el ultrasonido UIP400MTP

Las placas microtiter y las placas de 96 pozos son herramientas para la manipulación y el procesamiento simultáneo de un gran número de muestras. Como su nombre "placa de 96 pocillos" ya indica, las placas microtiter tienen 96 pocillos y pueden contener por lo tanto 96 muestras individuales. La preparación de las muestras antes del análisis, por ejemplo, antes de los ensayos basados en células (como ELISA o PCR) requiere lisis celular, disrupción celular así como la extracción de proteínas y la liberación de otras moléculas intracelulares específicas. La lisis y extracción celular ultrasónica es un método bien establecido y de larga data para la preparación de muestras de alta calidad. La lisis celular y la extracción de proteínas por ultrasonido se realizan de conformidad con protocolos y, por lo tanto, ofrecen resultados repetibles y fiables. El ultrasonido de muestra de masa UIP400MTP es un sistema ultrasónico de 400 vatios de potencia que acopla las ondas ultrasónicas de forma indirecta a través de las paredes de las placas de múltiples pozos en el medio de la muestra. Cada uno de los 96 pozos de muestra se sondea con la misma intensidad ultrasónica, lo que da lugar a una lisis celular y un rendimiento de extracción superiores.

Control preciso de la temperatura durante la sonicación de la placa del microtitulador

El UIP400MTP es un potente ultrasonido de 400 vatios, que transmite ondas de ultrasonido y vibraciones indirectamente a través de las paredes de la placa microtiter hacia las muestras y crea cavitación y fuerzas de cizallamiento en el medio. Como todos los métodos de disrupción celular mecánica, la sonicación crea calor. Sin embargo, a diferencia de los métodos alternativos de disrupción celular, el UIP400MTP permite un sofisticado control de la temperatura y el preajuste de los límites de temperatura para evitar cualquier degradación térmica de las muestras biológicas.
El UIP400MTP está equipado con un software inteligente. A través de la pantalla táctil digital, se puede acceder fácilmente al menú para establecer los límites de temperatura y programar la entrada de energía total para la ejecución de la muestra.

Monitorización de la temperatura de la muestra: El Ultrasonido Multimuestra UIP400MTP está equipado con un software inteligente y un sensor de temperatura enchufable. Enchufe el sensor de temperatura en el UIP400MTP e inserte la punta del sensor de temperatura en uno de los pozos microtiter. A través de la pantalla táctil digital de color, puede establecer en el menú del UIP400MTP un rango de temperatura específico para la sonicación de su muestra. El ultrasonido se detendrá automáticamente cuando se alcance la temperatura máxima y hará una pausa hasta que la temperatura de la muestra descienda al valor más bajo de la temperatura establecida ∆. Entonces la sonicación comienza automáticamente de nuevo. Esta característica inteligente evita la degradación inducida por el calor.
Si es posible, podría preenfriar la placa microtiter y sus muestras para posponer el alcanzar el límite de temperatura crítica.

Sonicación uniforme de todos los pozos con el UIP400MTP

Pruebas como la del papel de aluminio y la de la emulsión demuestran la intensidad uniforme de los ultrasonidos en toda la superficie del UIP4000MTP. La intensidad uniforme da como resultado una sonicación homogénea de la muestra en todos los pocillos de las placas multipocillo.
Prueba de papel de aluminio con el UIP400MTP
La prueba de la lámina de aluminio realizada con el ultrasonido de placa multipozo UIP400MTP
demuestra la generación uniforme de cavitación acústica en toda la superficie.
La superficie completa de la lámina de aluminio muestra agujeros uniformemente distribuidos causados por la cavitación.

Prueba de emulsión con el UIP400MTP
Los resultados de la prueba de emulsión demuestran visualmente la intensidad ultrasónica uniforme del UIP400MTP. La imagen superior muestra la mezcla clara de agua y aceite en una placa de 96 pocillos
antes de la sonicación. La segunda imagen muestra las emulsiones ultrasónicas después de 1 minuto de tratamiento. Todos los pozos muestran la misma pérdida de transparencia, lo que indica una emulsión uniforme en todas las cavidades.

UIP400MTP Ultrasonidos para muestras masivas

Clientes de todo el mundo utilizan el Hielscher UIP400MTP para la preparación fiable, reproducible y cómoda de muestras de masa en placas de pozos múltiples. El UIP400MTP facilita su trabajo diario en laboratorios biológicos, bioquímicos, de ciencias de la vida, médicos y clínicos. Con el software inteligente y el control de temperatura del UIP400MTP de Hielscher, la temperatura se controla de forma fiable y se evita la degradación de las muestras inducida por el calor. La preparación de muestras por ultrasonidos con el UIP400MTP de Hielscher Ultrasonics proporciona resultados altamente fiables y reproducibles!
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En la tabla siguiente se indica la capacidad de procesamiento aproximada de nuestros sistemas de ultrasonidos, desde los homogeneizadores manuales compactos y los ultrasonidos multimuestra hasta los procesadores ultrasónicos industriales para aplicaciones comerciales:

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Literatura / Referencias

• Chen J.-X; Cipriani P.G.; Mecenas D.; Polanowska J.; Piano F.; Gunsalus K.C.; Selbach M. (2016): In Vivo Interaction Proteomics in Caenorhabditis elegans Embryos Provides New Insights into P Granule Dynamics. Molecular & Cellular Proteomics 15.5; 2016. 1642-1657.
• LeThanh, H.; Neubauer, P.; Hoffmann, F. (2005): The small heat-shock proteins IbpA and IbpB reduce the stress load of recombinant Escherichia coli and delay degradation of inclusion bodies. Microb Cell Fact 4, 6; 2005.
• Martínez-Gómez A.I.; Martínez-Rodríguez S.; Clemente-Jiménez J.M.; Pozo-Dengra J.; Rodríguez-Vico F.; Las Heras-Vázquez F.J. (2007): Recombinant polycistronic structure of hydantoinase process genes in Escherichia coli for the production of optically pure D-amino acids. Appl Environ Microbiol. 73(5); 2007. 1525-1531.
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Información interesante

¿Qué son las placas microtiter?

Las placas microtiter, también conocidas como placas de 96 pocillos, microplacas de 96 pocillos, placas multipocillos o placas ELISA, son placas multipocillos rectangulares, que se utilizan ampliamente en los laboratorios para procesar células cultivadas, muestras celulares. Las placas microtiter se utilizan comúnmente en ensayos múltiples como ELISA y PCR. La mayoría de las placas de 96 pocillos están diseñadas para flujos de trabajo de grupos altos y son compatibles con instrumentos analíticos y con la manipulación y el procesamiento robótico. Por lo tanto, existen múltiples variantes, como las placas con faldón completo, adecuadas para plataformas robóticas, las placas sin faldón, las semiforradas y las placas con código de barras adaptadas al procesamiento de muestras en masa.
El uso común de las placas microtiter incluye aplicaciones como la recolección de muestras, la preparación de compuestos, la química combinatoria, el cribado de alto rendimiento, la purificación de ácidos nucleicos, el crecimiento de cultivos bacterianos y la replicación de placas.