Desprendimiento de biopelículas con el sonicador de alto rendimiento UIP400MTP
Los sonicadores de alto rendimiento diseñados para placas multipocillo y placas de 96 pocillos son herramientas esenciales en la investigación de biopelículas, en particular para desalojar y eliminar biopelículas de pocillos, tubos, agujas y placas de Petri. Estos sonicadores facilitan el procesamiento de numerosas muestras simultáneamente, mejorando la eficiencia y la consistencia. El sonicador de alto rendimiento UIP400MTP de Hielscher es ideal para sonicar placas de varios pocillos, placas de 96 pocillos, varios tubos o placas de Petri. La vibración ultrasónica uniforme y la cavitación eliminan de forma fiable las biopelículas del fondo de la placa. Esto convierte al sonicador de placas multipocillo UIP400MTP en la herramienta de preparación de muestras ideal para la eliminación de biopelículas, los ensayos de biopelículas y la investigación de bacterias y microbios.
Sonicator UIP400MTP de múltiples placas de pocillos para el desprendimiento y la eliminación de biopelículas en la preparación de muestras de alto rendimiento:
- Biopelículas bacterianas
- Biopelículas eucariotas
- Biopelículas fúngicas
- Biopelículas arqueas
- Biopelículas polimicrobianas / Biopelículas de especies mixtas
- Biopelículas dentales (placa)
- Biopelículas marinas
- Biopelículas ambientales
- Biopelículas de productos sanitarios
- Suspensiones celulares cultivadas
UIP400MTP sonicador de alto rendimiento para la eliminación de biopelículas de placas multipocillo, placas de 96 pocillos, tubos y placas de Petri.
Este sonicador de Hielscher cuenta con certificación ISO y cumple las normas UL, RoHs y CE. Funciona las 24 horas del día, los 7 días de la semana, para flujos de trabajo de alto rendimiento.
Desprendimiento y eliminación de biopelículas mediante sonicación
El sonicador de alto rendimiento UIP400MTP de Hielscher está diseñado para la sonicación fiable y uniforme de placas multipocillo y de 96 pocillos. Esencial en la investigación de biopelículas, el sonicador de placas multipocillo UIP400MTP ofrece una tecnología fiable para desalojar y eliminar biopelículas de placas multipocillo, tubos y placas Petri. Al permitir una preparación de muestras de alto rendimiento, el UIP400MTP mejora la eficacia y la coherencia de los ensayos de biopelículas y otros estudios relacionados, lo que hace que este sonicador sea indispensable en la investigación microbiológica tanto académica como industrial.
Eliminación de biopelículas mediante sonicación: Para desalojar la biopelícula, se deja que se forme en los pocillos de la placa multipocillos en condiciones controladas. A continuación, se coloca la placa en el sonicador, donde se ajustan parámetros como el tiempo, la amplitud y la frecuencia en función de los requisitos específicos del tipo de biopelícula y los objetivos experimentales. Las ondas ultrasónicas generan cavitación dentro de cada pocillo, lo que altera eficazmente la matriz de la biopelícula y desplaza las células.
Preparación ultrasónica de muestras para biopelículas: En los ensayos de biopelículas, los sonicadores de alto rendimiento tienen varias aplicaciones. Tras la sonicación, las células desprendidas de la biopelícula pueden recogerse y cuantificarse mediante diversos ensayos, como la tinción con violeta cristal, el recuento de células viables o la medición de la biomasa. Además, las biopelículas pueden tratarse con agentes antimicrobianos seguidos de sonicación para evaluar la eficacia de estos agentes en la interrupción de las biopelículas. Las células de biofilm desprendidas también son útiles para estudios genómicos y proteómicos, ya que pueden utilizarse para la extracción de ADN, ARN y proteínas para su posterior análisis molecular.
Los sonicadores de alto rendimiento ofrecen numerosas ventajas. Permiten el procesamiento simultáneo de múltiples muestras, ahorrando tiempo y mano de obra, y garantizan un tratamiento uniforme de todos los pocillos, reduciendo la variabilidad y mejorando la reproducibilidad de los resultados. Estos dispositivos también son adecuados para estudios a gran escala, ya que permiten un cribado de alto rendimiento de la formación, la disrupción y el tratamiento de biopelículas.
(A) Placa que contiene TSB con glucosa al 2% utilizada para la formación de biopelículas, la recuperación de células y la determinación de MIC y MBCB; (B) Tapa con alfileres para la formación de biopelículas estafilocócicas.
Las células de biopelícula formadas en las clavijas se desalojaron utilizando el sonicador Hielscher UIP250MTP durante 5 min en placas de 96 pocillos que contenían medio de cultivo fresco para la recuperación de las células.
(Fotografía y estudio: ©de Oliveira et al., 2016)
Sonicador de placas de 96 pocillos UIP400MTP para la sonicación de placas microtiter y multipocillo
Importancia de la eliminación ultrasónica de biopelículas en la investigación de biopelículas
La eliminación ultrasónica de biopelículas es crucial en la investigación de biopelículas debido a su eficacia, consistencia, eficiencia y versatilidad. Garantiza una disrupción completa y uniforme de las biopelículas, facilitando un análisis preciso y reproducible en diversos ensayos de biopelículas. Estos ensayos, que incluyen la tinción con violeta cristal, el recuento de células viables, la bioluminiscencia ATP, la reducción XTT, el análisis microscópico y la extracción de ácidos nucleicos/proteínas, proporcionan una visión completa de la formación, viabilidad, estructura y respuesta de las biopelículas a los tratamientos.
La sonicación desprende y elimina suavemente la biopelícula de sustratos sólidos como fondos de placas, alfileres, clavijas o cubreobjetos.
- Interrupción eficaz de las biopelículas:
Cavitación: Las ondas ultrasónicas crean burbujas de cavitación que generan fuertes fuerzas de cizallamiento al colapsar, alterando eficazmente la compleja estructura de las biopelículas.
Desprendimiento completo: Garantiza que las células de la biopelícula se desprendan completamente de las superficies, lo que es crucial para una cuantificación y un análisis precisos. - Coherencia y reproducibilidad:
Tratamiento uniforme: Los sonicadores de alto rendimiento proporcionan una distribución uniforme de la energía ultrasónica en todas las muestras, lo que reduce la variabilidad y mejora la reproducibilidad.
Estandarización: Permite la estandarización de los protocolos de disrupción del biofilm, lo que conduce a resultados más fiables y comparables. - Eficiencia:
Capacidad de alto rendimiento: Permite el procesamiento simultáneo de múltiples muestras, ahorrando tiempo y aumentando el rendimiento en los estudios de biopelículas.
Automatización: Puede integrarse fácilmente en flujos de trabajo automatizados, mejorando aún más la eficiencia y reduciendo el trabajo manual. - Preservación de la viabilidad y la integridad:
Condiciones controladas: Parámetros como el tiempo y la intensidad pueden ajustarse con precisión para alterar las biopelículas sin comprometer la viabilidad o la integridad celular, lo que es importante para ensayos posteriores. - Versatilidad:
Amplia aplicabilidad: Adecuada para varios tipos de biopelículas (bacterianas, fúngicas, de especies mixtas) y compatible con diferentes superficies y materiales utilizados en la investigación de biopelículas.
El sonicador de placas de pocillos múltiples UIP400MTP ofrece numerosas ventajas, que lo convierten en una herramienta indispensable en la preparación de muestras de alto rendimiento.
Hielscher Ultrasonics ofrece varios modelos de sonicadores incluyendo sonicadores tipo sonda, sonicadores sin contacto y sonicadores de alto rendimiento. Póngase en contacto con nosotros. Nuestros expertos técnicos estarán encantados de analizar con usted sus requisitos de procesamiento y recomendarle el sonicador más adecuado para su aplicación de biopelículas.
Sonicador de placas de microtitulación UIP400MTP se utiliza para desalojar biopelículas para la investigación
Literatura / Referencias
- FactSheet UIP400MTP Multi-well Plate Sonicator – Non-Contact Sonicator – Hielscher Ultrasonics
- UIP400MTP-Multi-well-Plate-Sonicator-Infographic
- De Oliveira A, Cataneli Pereira V, Pinheiro L, Moraes Riboli DF, Benini Martins K, Ribeiro de Souza da Cunha MDL (2016): Antimicrobial Resistance Profile of Planktonic and Biofilm Cells of Staphylococcus aureus and Coagulase-Negative Staphylococci. International Journal of Molecular Sciences 17(9):1423; 2016.
- Martins KB, Ferreira AM, Pereira VC, Pinheiro L, Oliveira A, Cunha MLRS (2019): In vitro Effects of Antimicrobial Agents on Planktonic and Biofilm Forms of Staphylococcus saprophyticus Isolated From Patients With Urinary Tract Infections. Frontiers in Microbiology 2019.
Preguntas frecuentes sobre la investigación de biopelículas
¿Cuál es el andamio más común para las biopelículas?
El andamio más común para las biopelículas en la investigación de laboratorio es la placa de microtitulación. Las placas de microtitulación, en particular el formato de 96 pocillos, se utilizan ampliamente debido a su versatilidad, facilidad de uso y compatibilidad con diversas técnicas analíticas.
¿Cuál es la mejor placa de 96 pocillos para biopelículas?
La mejor placa de 96 pocillos para estudios de biopelículas depende de varios factores, como el tipo de biopelícula que se estudia, la configuración experimental y los requisitos específicos de la investigación. Sin embargo, algunas de las placas de 96 pocillos más recomendadas para estudios de biopelículas son:
- Corning® Costar® 3596 Placa de fondo plano transparente de 96 pocillos: Esta placa se utiliza a menudo debido a su alta claridad óptica, que es beneficiosa para la formación de imágenes y ensayos espectrofotométricos.
- Placas de 96 pocillos Nunc™ MicroWell™: Estas placas son conocidas por sus dimensiones uniformes de los pocillos y su gran claridad óptica. Están disponibles en varios tratamientos de superficie para soportar diferentes tipos de cultivo celular.
- Microplaca Greiner Bio-One CELLSTAR® de 96 pocillos: Esta placa se utiliza con frecuencia para estudios de biopelículas debido a su calidad constante pocillo a pocillo y a su disponibilidad en diferentes revestimientos de superficie, como superficies tratadas con cultivo de tejidos o de baja adhesión.
- Placas de 96 pocillos con fondo negro/claro: Para los estudios que requieren mediciones de fluorescencia o luminiscencia, las placas negras con fondo transparente (por ejemplo, Corning® 3603) son ideales, ya que minimizan la interferencia entre los pocillos y mejoran la detección de la señal.
- Placas con revestimiento hidrófobo o hidrófilo: Dependiendo de la naturaleza de la biopelícula y del microorganismo, las placas con recubrimientos específicos que promueven o inhiben la adhesión pueden ser beneficiosas. Por ejemplo, las placas hidrófobas pueden ser adecuadas para biopelículas formadas por determinadas bacterias.
- Placas específicas para biopelículas: Algunos fabricantes ofrecen placas diseñadas específicamente para la investigación de biopelículas. Estas placas suelen tener propiedades superficiales mejoradas que favorecen la formación de biopelículas y están optimizadas para ensayos de biopelículas.
Al seleccionar una placa de 96 pocillos para estudios de biopelículas, tenga en cuenta los siguientes criterios:
- Material y tratamiento de la superficie: Elija un material de placa y un tratamiento de superficie que favorezcan la adhesión y el crecimiento de los microorganismos formadores de biopelículas que está estudiando.
Claridad óptica: Para los ensayos que impliquen mediciones ópticas, asegúrese de que la placa tenga una gran claridad óptica. - Diseño de pozos: Tenga en cuenta la forma y profundidad de los pozos, que pueden afectar al crecimiento del biofilm y a la eficacia de los tratamientos o mediciones posteriores.
- Compatibilidad con los equipos: Asegúrese de que la placa es compatible con su sonicador, incubadora y cualquier otro equipo utilizado en su estudio. El sonicador de placas multipocillo de Hielscher es compatible con todas las placas microtiter y multipocillo estándar.
En última instancia, la mejor elección dependerá de los requisitos específicos de su investigación de biopelículas y de las características de los microorganismos implicados.
¿Cuáles son los ensayos típicos de biopelículas utilizados en investigación?
En investigación y diagnóstico, se utilizan varios tipos de ensayos para investigar y clasificar las biopelículas. La sonicación es un paso habitual en la preparación de muestras para separar la biopelícula de su sustrato sólido y hacer que esté disponible para ensayos y análisis.
- Tinción con violeta de cristal:
Objetivo: Cuantificar la biomasa total del biofilm.
Método: Las biopelículas se tiñen con colorante violeta cristal y, a continuación, se solubiliza el colorante y se mide espectrofotométricamente.
Aplicación: Se utiliza para evaluar la formación de biopelículas y los efectos de los agentes antimicrobianos. - Recuento de células viables (ensayo de UFC):
Indicaciones: Determina el número de células viables de la biopelícula.
Método: Las células desprendidas de la biopelícula se diluyen en serie y se colocan en placas de agar para contar las unidades formadoras de colonias (UFC).
Aplicación: Evalúa la viabilidad celular del biofilm y la eficacia antimicrobiana. - Bioluminiscencia ATP:
Finalidad: Medir la actividad metabólica de las células de la biopelícula.
Método: Los niveles de ATP se cuantifican mediante un ensayo bioluminiscente.
Aplicación: Indica la viabilidad y el estado metabólico del biofilm. - Ensayo de reducción XTT:
Finalidad: Evaluar la actividad metabólica celular.
Método: El reactivo XTT es reducido por las células metabólicamente activas para formar un producto de formazán coloreado, que se cuantifica espectrofotométricamente.
Aplicación: Se utiliza para evaluar la viabilidad celular del biofilm y el efecto de los tratamientos. - Análisis microscópico:
Finalidad: Visualizar la estructura y composición de la biopelícula.
Método: Las técnicas incluyen microscopía óptica, microscopía de barrido láser confocal (CLSM) y microscopía electrónica de barrido (SEM).
Aplicación: Proporciona información detallada sobre la arquitectura de la biopelícula, su distribución y los efectos de los tratamientos. - Extracción de ADN, ARN y proteínas:
Finalidad: Analizar los perfiles genéticos y proteómicos de las células de biopelículas.
Método: Las células del biofilm se lisan para extraer ácidos nucleicos y proteínas para su análisis posterior (por ejemplo, PCR, qPCR, secuenciación, proteómica).
Aplicación: Estudia la expresión de genes, la diversidad genética y la expresión de proteínas en biopelículas. - Ensayos de inhibición y erradicación de biopelículas:
Finalidad: Examinar la capacidad de los compuestos para prevenir la formación de biopelículas o erradicar las ya establecidas.
Método: Las biopelículas se tratan con posibles agentes antibiopelícula y la alteración se evalúa mediante los ensayos antes mencionados.
Aplicación: Descubrimiento de fármacos y desarrollo de terapias antibiofilm.
Hielscher Ultrasonics fabrica homogeneizadores ultrasónicos de alto rendimiento de laboratorio a tamaño industrial.