Liposomer via omvendt fase fordampningsmetode ved hjælp af sonikering

Liposomer er alsidige nanobærere, der bruges til lægemiddellevering på grund af deres biokompatibilitet og evne til at indkapsle både hydrofile og hydrofobe lægemidler. Fordampningsmetoden i omvendt fase (også kendt som emulgeringsmetode eller en opløsningsmiddelfordampningsmetode) er en fremtrædende teknik til liposompræparation, der giver høj indkapslingseffektivitet. Denne artikel fokuserer på fremstillingen af liposomer via den omvendte fase fordampningsmetode forbedret ved sonde-type sonikering, der fremhæver de proceduremæssige trin, fordele og potentielle anvendelser i lægemiddelleveringssystemer.

Liposomer er vesikulære strukturer, der består af et eller flere lipid-dobbeltlag, der er i stand til at indkapsle hydrofile og hydrofobe forbindelser. Deres unikke struktur gør dem ideelle til målrettet lægemiddellevering. Fordampningsmetoden i omvendt fase (også kendt som emulgering eller en opløsningsmiddelfordampningsmetode) er en veletableret teknik til fremstilling af liposomer. I de følgende afsnit introducerer vi dig til fordelene ved fordampningsmetoden i omvendt fase ved hjælp af sonde-type sonde-type sonikering, som er kendt for at forbedre emulgering, indkapslingseffektivitet og liposomal størrelsesreduktion.

Metode til liposomforberedelse via omvendt fase fordampningsmetode

Liposomdannelse via omvendt fordampningsmetode ved hjælp af sonikering involverer opløsning af lipider i en organisk opløsningsmiddelblanding af chloroform og methanol (2:1 v / v), hvilket favoriserer dannelsen af omvendte miceller. En vandig buffer tilsættes derefter til denne blanding. Den kombinerede opløsning sonikeres, for eksempel ved hjælp af en sonde-type soniker som UP400ST, for at skabe en vand-i-olie mikroemulsion. Det organiske opløsningsmiddel fordampes derefter ved hjælp af en roterende fordamper, hvilket resulterer i en tyktflydende gel, der til sidst kollapser og danner liposomer. Den store vandige kerne af mikroemulsionsboblerne fremmer indfangning af hydrofile molekyler, hvilket fører til liposomale geler, der udviser kontrolleret frigivelse og en god permeationsprofil. Endelig reduceres liposomerne til en ensartet størrelse ved hjælp af sonikeren.

Liposomdannelse via omvendt fordampningsmetode ved hjælp af sonikering

Protokol / trin-for-trin instruktioner:

1. Vej og opløs lipider:
   Afvej nøjagtigt i alt 40 mg L-α-phosphatidylcholin og kolesterol i et masseforhold på enten 4:1 eller 7:3.
   De vejede lipider opløses i 10 ml af en chloroform/methanolblanding (4:1 v/v) i en rundbundet kolbe.
2. Form lipidfilm:
   Fastgør den rundbundede kolbe til en roterende fordamper.
   Drej kolben ved 8 x g ved 40 °C under vakuumforhold, indtil der dannes en tynd lipidfilm på kolbens vægge.
3. Fjern opløsningsmiddeldampe:
   De resterende dampe fra opløsningsmiddelblandingen tømmes ved at skylle kolben med nitrogengas.
4. Opløs lipidfilm igen:
   Opløs lipidfilmen i 10 ml diethylether for at danne reversfase-vesikler.
5. Forbered vandig fase:
   Bland 5 ml PBS-buffer (0,1 M, pH 7,4) indeholdende det aktive stof til indkapsling og 20 mg Tween 80 med den organiske fase (diethylether med opløste lipider).
6. Sonikere emulsionen:
   Placer w/o-emulsionen i et isbad.
   Soniker emulsionen ved hjælp af en sonde-type sonde-type soniker UP200Ht ved 26 kHz og 50% pulstilstand (0,5 cyklusser = 30 sek ON / 30 sek OFF) og 50% amplitude i 1 minut.
7. Fordamp for at danne gel:
   Returner den sonikerede emulsion til den roterende fordamper.
   Fordamp under atmosfærisk tryk ved 40 °C, indtil der opnås en gel.
8. Form liposomer:
   Fordamp gelen yderligere og bryd den i en halvgennemsigtig væske, hvilket indikerer dannelsen af liposomer.
9. Endelig liposomsuspension:
   Tilsæt yderligere 5 ml PBS-buffer (0,1 M, pH 7,4) til liposomsuspensionen.
   Hvirvl forsigtigt blandingen.
   De resterende dampe af diethylether evakueres ved hjælp af nitrogengas.
10. Oplagring:
    Opbevar den endelige liposomsuspension ved 4 °C i køleskab, indtil den skal bruges.

Disse instruktioner skitserer trin-for-trin-processen til fremstilling af liposomer ved hjælp af omvendt fasefordampningsmetode med ultralydshomogenisering, hvilket sikrer høj intern vandig belastning og effektiv indkapsling af den aktive ingrediens.
Fordampningsmetoden i omvendt fase, især ved hjælp af sonde-type sondebehandling, er en udbredt teknik til fremstilling af liposomer, især når der sigtes mod høj intern vandig belastning. Denne metode er fordelagtig i forhold til den traditionelle tyndfilmshydreringsmetode på grund af dens evne til at inkorporere en større mængde vandig fase i liposomerne.

Fordele ved sonde-type sonikering til liposomdannelse

• Forbedret homogenitet: Sonde-type sonikering giver ensartet energiinput, hvilket resulterer i en mere ensartet størrelsesfordeling af liposomer.
• Forbedret indkapsling: De mekaniske kræfter under sonikering forbedrer lægemiddelindkapsling, især for hydrofile forbindelser.
• Skalerbarhed: Metoderne er let skalerbare, hvilket gør dem velegnede til storskala liposomproduktion.

Anvendelser af liposomer i lægemiddellevering

Liposomer fremstillet via emulgerings- og opløsningsmiddelfordampningsmetoder med sonde-type sonikering er velegnede til forskellige lægemiddelleveringsapplikationer, herunder:

1. Målrettet lægemiddellevering: Funktionalisering af liposomer med specifikke ligander giver mulighed for målrettet levering til bestemte væv eller celler.
2. Kontrolleret frigivelse: Lipid-dobbeltlagsstrukturen tillader kontrolleret lægemiddelfrigivelse, hvilket forbedrer den terapeutiske effekt.
3. Alsidighed: Disse metoder rummer en bred vifte af terapeutiske midler, fra små molekyler til større biomolekyler som proteiner og nukleinsyrer.

Fordampningsmetoden i omvendt fase er især kendt for sin højere indre vandige belastning sammenlignet med tyndfilmshydreringsmetoden. Denne egenskab er gavnlig for applikationer, der kræver betydelig indkapsling af hydrofile lægemidler eller andre terapeutiske midler.
Fordampningsmetoden i omvendt fase ved hjælp af sonde-type sonikering er en robust og effektiv teknik til liposompræparat. Dens evne til at opnå højere intern vandig belastning gør den til en foretrukken metode i farmaceutiske applikationer, hvor maksimering af indkapslingen af hydrofile stoffer er afgørende. Den omhyggelige kontrol af opløsningsmiddelfordampning og brugen af sonikering er nøglen til succesen med denne metode, hvilket fører til produktion af liposomer af høj kvalitet, der er egnede til forskellige terapeutiske formål.

Find den rigtige soniker til din liposomproduktion

Hielscher Ultrasonics tilbyder et bredt produktsortiment af sonde-type sonde-sonikere til effektiv liposomproduktion, hvilket resulterer i en høj indfangningseffektiv og høj belastningskapacitet af bioaktive molekyler.
Du kan bruge Hielscher sonicatorer til forskellige liposompræparationsveje, såsom den her beskrevne fordampningsteknik i omvendt fase, emulgeringsmetoden og tyndfilmsmetoden.
Læs mere om ultralydsliposompræparation via tyndfilmsmetoden!
Læs mere om ultralydspræparerede liposomer, der indkapsler

• C-vitamin
• DHA og EPA (fiskeolie)
• allicin

Design, produktion og rådgivning – Kvalitet fremstillet i Tyskland

Hielscher ultralydapparater er kendt for deres højeste kvalitet og designstandarder. Robusthed og nem betjening muliggør en jævn integration af vores ultralydapparater i industrielle faciliteter. Hårde forhold og krævende miljøer håndteres let af Hielscher ultralydsapparater.

Hielscher Ultrasonics er et ISO-certificeret firma og lægger særlig vægt på højtydende ultralydapparater med avanceret teknologi og brugervenlighed. Selvfølgelig er Hielscher ultralydapparater CE-kompatible og opfylder kravene i UL, CSA og RoHs.

Nedenstående tabel giver dig en indikation af den omtrentlige behandlingskapacitet for vores ultralydapparater: