Ультразвукові застосування вірусу віспи мавп

Ультразвук є важливим методом обробки для виділення вірусу віспи мавп (MPXV) з аналітичних зразків, для фрагментації ДНК вірусу, а також у виробництві вакцин проти віспи мавп. Для підготовки зразків перед діагностикою та аналізом (ПЛР, ІФА тощо) ультразвук використовується для лізису клітин з метою вивільнення вірусу мавпячої віспи зсередини клітини та / або фрагмента ДНК. У виробництві вакцин застосування варіюється від підготовки вірусних частинок / ДНК, інкапсуляції в носіях ліків та формулювання інокули.
Нижче ви можете знайти детальну інформацію про ультразвукову підготовку зразків вірусу віспи мавп, а також виробництво ультразвукової вакцини MPXV.

 

Що ви знайдете на цій сторінці:

Запит інформації




Зверніть увагу на наші Політика конфіденційності.


Високопродуктивні ультразвукові прилади є критично важливим інструментом обробки у виробництві багатьох вакцин.

Ця система ультразвукових апаратів потужністю 2x 1 кВт для безперервної роботи встановлена на об'єкті з виробництва вакцин.

Ультразвуковий лізис і фрагментація ДНК перед полімеразною ланцюговою реакцією (ПЛР)

Інфекція вірусу віспи мавп виявляється за допомогою ампліфікаційного тестування нуклеїнових кислот (NAAT), за допомогою плр-терапії в режимі реального часу або звичайної полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР) для виявлення унікальних послідовностей вірусної ДНК. Зразок (наприклад, з обміну носоглоткою або біопсії шкіри) містить вірус у клітинах.
Для аналізу вірус повинен бути вивільнений з клітин, а вірусна ДНК повинна бути фрагментована для ПЛР.

Ультразвуковий лізис:

Ультраакулятор UP200Ht з мікротипом S26d2 для ультразвукового лізису біологічних зразківУльтразвукове порушення / лізис клітин є надійним та ефективним методом виділення вірусів із зразків клітин і тим самим кращою технікою перед хімічними агентами, такими як лізоцим, протеїназа К та різні миючі засоби, які альтернативно використовуються для досягнення лізису клітин та вивільнення ДНК.
Однак використання таких хімічних реагентів вимагає трудомісткої пробопідготовки в кілька етапів перед аналізом ПЛР, щоб запобігти гальмуванню реакції ПЛР. Оскільки інгібітори ПЛР впливають на ефективність ампліфікації, невеликі варіації кількості інгібіторів, які не видаляються, можуть призвести до великих варіацій ампліфікації продуктів ПЛР (Diaco, 1995).
Перевага ультразвуку для лізису полягає в тому, що бажане повне порушення клітинних структур і вивільнення ДНК без необхідності лізингових реагентів і трудомістка підготовка зразків. (пор. Фиксе та ін., 2003)

Ультразвукова фрагментація ДНК:

Ультразвукова фрагментація ДНК проста і надійна, оскільки виробляє фрагменти ДНК, що не мають довжини (базовіпари, bp). За допомогою ультразвуку ДНК можна ефективно фрагментувати до цільової довжини ДНК. Точний контроль ультразвукових параметрів і складні варіанти охолодження запобігають деградації ДНК.
Дізнайтеся більше про ультразвукову фрагментацію ДНК!

 

На відео показана ультразвукова система підготовки зразків UIP400MTP, яка дозволяє забезпечити надійну підготовку зразків будь-яких стандартних багатопрофільної пластини з використанням ультразвуку високої інтенсивності. Типові застосування UIP400MTP включають клітинний лізик, ДНК, РНК та зсув хроматину, а також екстракцію білка.

Ультраакукатор UIP400MTP для багато свердловинної ультразвукової обробки плит

Запит інформації




Зверніть увагу на наші Політика конфіденційності.


Ультразвукові застосування вакцини проти вірусу віспи мавп

Ультразвук використовується для виробництва вакцин, таких як вакцини проти віспи мавп. Вакцини, які використовуються проти вірусу віспи мавп, в даний час є живими вірусними вакцинами. Нещодавно розроблені вакцини можуть використовувати інші платформи, такі як на основі ДНК В даний час містить модифіковану Vaccinia Ankara viurs, ослаблений ортопоксвірус, що не копіює. Також в ньому містяться Тріс (трис-амінометан) і хлорид натрію. Вакцина також може містити невелику кількість ДНК і білка з клітин фібробластів курячого ембріона, які використовуються для вирощування вакцинного вірусу, бензонази і антибіотичних сполук, таких як гентаміцин і ципрофлоксацин.

Ультразвукова гомогенізація використовується у виробництві живих атенуйованих вірусних вакцин, ДНК-вакцин, багатовалентних ДНК-коктейлів, мРНК-вакцин, рекомбінантних білкових вакцин, вірусоподібних частинок вакцин тощо.

Застосування ультразвуку у виробництві вакцин варіюється від

  • дисперсія вірусних частинок і агентів,
  • емульгування
  • інактивація вірусів,
  • рецептура лікарського носія (NLC, SLN)
  • інкапсуляція
  • розчинення агентів,
  • приготування ад'ювантів
  • Дегасінг / Деадерація

 

Ви можете знайти більш детальну інформацію про ультразвукові програми для покращення виробництва вакцин!

Протокол ультразвукової ізоляції вірусу віспи мавп

Дослідницька група Stittelaar (2005) використовувала ультразвуковий лізис для вивільнення вірусу віспи мавпи з культури клітин-хазяїна росту, а також з клітин, отриманих через обмін горлом від інфікованих приматів.

Препарат вакцини проти віспи мавп:

Віруси віспи мавп вирощувалися на клітинах фібробластів курячих ембріонів без специфічних патогенів. Після інкубації протягом 1-2 днів вірусно-клітинна суспензія була зібрана одним раундом заморожування-розморожування, а потім зосереджена шляхом центрифугування. Гранула була реуспендована і піддана декільком раундам ультразвукової гомогенізації.

Ізоляція вірусу віспи мавп від вакцинованих макак:

Зразки тричі заморожували-розморожували і ультразвукову обробку в ультразвуковому CupHorn. Два розведення (1:10 і 1:100) в транспортному середовищі, доповнені 1% фетальної бичачої сироваткою, використовувалися для інокуляції моношарів клітин Vero в шестиствольних пластинах. Після 1 год інкубації при температурі 37°С інокулу видалили і замінили на культуральне середовище, доповнене 1% фетальною бичачою сироваткою. Моношари культивували протягом 5 днів при температурі 37°С і фарбували кристалічно-фіолетовим розчином.
(пор. Стітелаар та ін., 2005)

У цьому відео ми покажемо вам ультразвукову систему потужністю 2 кіловат для внутрішньої роботи в продувній шафі. Hielscher постачає ультразвукове обладнання майже у всі галузі промисловості, такі як хімічна промисловість, фармацевтика, косметика, нафтохімічні процеси, а також для процесів екстракції на основі розчинників. Ця продувна шафа з нержавіючої сталі призначена для експлуатації в небезпечних зонах. Для цього герметична шафа може бути продута замовником азотом або свіжим повітрям, щоб запобігти проникненню в шафу легкозаймистих газів або парів.

2x 1000 Вт Ультразвукові пристрої в продувній шафі для установки в небезпечних зонах

Ультразвукові прилади для аналізу вірусів та виробництва вакцин

Hielscher Ultrasonics широкий портфель продуктів пропонує ідеальний ультразвуковий пристрій для дослідницьких та аналітичних лабораторій, а також для промислового виробництва вакцин.
Hielscher Ultrasonics спеціалізується на розробці, виробництві та розповсюдженні високопродуктивних ультразвукових апаратів та соно-біореакторів для використання в дослідницьких та аналітичних лабораторіях, а також для впровадження в промислове виробництво вакцин (наприклад, вакцини, Api)
Точний контроль над ультразвуковими параметрами процесу за Hielscher ультразвук' Інтелектуальне програмне забезпеченняУльтразвукова обробка може бути застосована до відкритих посудин, закритих реакторів безперервного перемішування та безперервних проточних реакторів. Всі частини ультразвукових систем, які контактують з рідким середовищем, виготовляються з нержавіючої сталі, титану або скла. Автоклавні деталі та сантехнічна арматура забезпечують виробництво під умови фармацевтичного класу.
Автоматичний запис даних: Інтелектуальне програмне забезпечення записує параметри процесу сокації автоматично на інтегровану карту пам'яті SD. Точний контроль за всіма параметрами процесу забезпечує Відтворюваність, Стандартизація виробництва, а також сприяє виконанню стандартів безпеки фармацевтичних продуктів.
Hielscher Ультразвук’ ультразвукові процесори високонадійні і можуть точно керуватися. Всі промислові ультразвукові пристрої можуть регулюватися, щоб забезпечити повний діапазон від нижчих до дуже високих амплітуд. Надійність ультразвукових систем Hielscher дозволяє працювати 24/7 у важких умовах та у вимогливих середовищах.

У таблиці нижче наведено приблизну потужність обробки наших ультразвукових пристроїв:

пакетний Обсяг швидкість потоку Рекомендовані пристрої
мульти-колодязні / мікротитерні пластини п/а (УІП400МТП)
Від 1 до 500мл Від 10 до 200мл / хв UP100H
Від 10 до 2000мл Від 20 до 400мл / хв UP200Ht, UP400St
0.1 до 20 л 0.2 до 4л / хв UIP2000hdT
Від 10 до 100 л Від 2 до 10 л / хв UIP4000hdT
п/а Від 10 до 100 л / хв UIP16000
п/а більший кластер UIP16000

Зв'яжіться з нами! / Запитати нас!

Запитайте більше інформації

Будь ласка, використовуйте форму нижче, щоб запросити додаткову інформацію про ультразвукові процесори, програми та ціни. Ми будемо раді обговорити ваш процес з вами і запропонувати вам ультразвукову систему, що відповідає вашим вимогам!









Будь ласка, зверніть увагу на наші Політика конфіденційності.


Ультразвукові гомогенізатори надійні для стрижки ДНК

Ультразвукова ДНК Shearing
Адаптовано з Jkwchui під CC-BY-SA.03



Література/довідники

  • Stittelaar, Koert; Amerongen, Geert; Kondova, Ivanela; Kuiken, Thijs; Lavieren, Rob; Pistoor, Frank; Niesters, Hubert; Doornum, Gerard; Van der Zeijst, Bernard; Mateo, Luis; Chaplin, Paul; Osterhaus, Albert (2005): Modified Vaccinia Virus Ankara Protects Macaques against Respiratory Challenge with Monkeypox Virus. Journal of Virology 79, 2005. 7845-51.
  • Shah Purvin, Parameswara Rao Vuddanda, Sanjay Kumar Singh, Achint Jain, and Sanjay Singh (2014): Pharmacokinetic and Tissue Distribution Study of Solid Lipid Nanoparticles of Zidovudine in Rats. Journal of Nanotechnology, Volume 2014.
  • J. Robin Harris, Andrei Soliakova, Richard J. Lewis, Frank Depoix, Allan Watkinson, Jeremy H. Lakeya (2012): Alhydrogel® adjuvant, ultrasonic dispersion and protein binding: a TEM and analytical study. Micron Volume 43, Issues 2–3, February 2012, 192-200.
  • Doron Melamed, Gabriel Leitner, E. Dan Heller (1991): A Vaccine against Avian Colibacillosis Based on Ultrasonic Inactivation of Escherichia coli. Avian Diseases Vol. 35, No. 1 (Jan. – Mar., 1991), 17-22.
  • Huang C-F, Wu T-C, Wu C-C, Lee C-C, Lo W-T, Hwang K-S, Hsu M-L, Peng H-J. (2011): Sublingual vaccination with sonicated Salmonella proteins and mucosal adjuvant induces mucosal and systemic immunity and protects mice from lethal enteritis. APMIS 119, 2011. 468–78.

Факти варті знати

Вірус віспи мавп

Мавпяча віспа (MPV, MPXV або hMPXV) - це вид дволанцюгового ДНК-вірусу, який викликає вірусне зоонозне захворювання. Це захворювання відоме як інфекція віспи мавп і може виникнути у людей і тварин. Відноситься до роду Ортопоксвірус в сімействі Poxviridae. Вірус віспи мавп є одним з ортопоксвірусів людини поряд з вірусами вітряної віспи (VARV), коров'ячої віспи (CPX) та вакцинії (VACV). Ортопоксвіруси характеризуються великими частинками вірусу цегляної форми, що містять дволанцюговий геном ДНК приблизно 200 000 bp.

Аналіз ІФА

ІФА розшифровується як імуноферментний аналіз і є міченим імуноферментним аналізом, який вважається золотим стандартом імуноферментних аналізів. ІФА - імунологічний тест, який цінується за високу діагностичну чутливість, використовується для виявлення і кількісної оцінки молекул, включаючи антитіла, антигени, білки, глікопротеїни і гормони. Принцип ІФА заснований на взаємодії антиген-антитіло. Завдяки такій взаємодії антиген-антитіло специфічні антитіла зв'язуються з його цільовим антигеном. Тільки коли відбувається взаємодія, субстрат може зв'язуватися з ферментом і може спостерігатися подальше перетворення субстрату, а значить, виходить позитивний результат.


Високопродуктивний ультразвук! Асортимент продукції Hielscher охоплює весь спектр від компактного лабораторного ультраакукатора над блоками лави до повних промислових ультразвукових систем.

Hielscher Ультразвук виробляє високоемоціивні ультразвукові гомогенізатори з Лабораторія до промислових розмірів.