Елюювання антитіл за допомогою ультразвукової діагностики з використанням високопродуктивної ультразвукової системи

Афінна хроматографія є потужним методом очищення білка, який вимагає Ультразвукова неспецифічна елюація є надійним методом підготовки зразків для отримання антитіл за допомогою афінної хроматографії. Ефективна і відтворювана елюювання цільових антитіл, зв'язаних з матрицями спорідненості, значно покращується за допомогою ультразвуку. Високопродуктивний пластинчастий ультразвуковий UIP400MTP оптимально підходить для елюювання з високою кількістю зразків у 96-лункових, мікротитрових і багатолункових планшетах і полегшує відновлення антитіл при афінній хроматографії.

Як ультразвук полегшує елюцію?

Використовуючи інтенсифіковану ультразвуком неспецифічну елюцію, працівники лабораторій і вчені можуть ефективно відновлювати очищені антитіла з колонок афінної хроматографії. Ці очищені антитіла використовуються в різних галузях, таких як імунологія, біотехнології та медична діагностика.

Елюювання – це етап підготовки зразка, який зазвичай використовується для афінної хроматографії: Афінна хроматографія використовує високоспецифічні взаємодії між молекулою-мішенню (наприклад, антитілом) і лігандом, іммобілізованим на хроматографічній матриці. Це дозволяє проводити селективне очищення молекули-мішені від складної суміші з використанням специфічної спорідненості зв'язування молекул, наприклад, антитіл.
Специфічне зв'язування антитіл: Антитіла часто очищають за допомогою афінної хроматографії, де вони вибірково зв'язуються з лігандом, іммобілізованим на хроматографічній смолі хроматографії. Це може бути антиген, білок A/G або будь-яка інша молекула, яка взаємодіє конкретно з антитілом, що цікавить.
Елюювання: Після зв'язування цільового антитіла з матриксом наступним етапом є елюювання (або вимивання) зв'язаного антитіла зі смоли. Цей етап елюювання зазвичай включає порушення специфічного зв'язування між антитілом і лігандом. Цей етап можна об'єднати за допомогою ультразвуку.
Ультразвуковий зонд UP50H - це лабораторний гомогенізатор, який часто використовується як руйнівник клітин, диспергатор і емульгатор в лабораторіях.Ультразвукова неспецифічна елюція: На відміну від специфічних методів елюювання, які порушують тільки взаємодію антитіло-ліганд, неспецифічні методи елюювання порушують всі взаємодії на смолу, включаючи неспецифічні. Це може бути корисним при роботі з міцно зв'язаними забруднювачами, які можуть заважати процесу очищення. Ось і в гру вступає звук! Ультразвукові хвилі використовуються для генерації кавітаційних бульбашок в елююючому буфері. Коли ці бульбашки руйнуються біля матриці смоли, вони створюють інтенсивні локалізовані сили зсуву та мікропотоки. Це механічне порушення допомагає розірвати неспецифічні взаємодії між антитілом і лігандом, полегшуючи елюювання зв'язаного антитіла з матриксу.

Пластини на 96 лунок та інші багатолункові пластини найкраще обробляти за допомогою UIP400MTP ультразвуку. Ця ультразвукова система ідеально підходить для лізису, фрагментації ДНК та обробки зразків з високою продуктивністю.

Високопродуктивний звуковий UIP400MTP полегшує елюювання антитіл і білків

Запит інформації




Зверніть увагу на наші Політика конфіденційності.


 

Цей підручник пояснює, який тип ультразвукового апарату найкраще підходить для ваших завдань підготовки зразків, таких як лізис, порушення клітин, ізоляція білків, фрагментація ДНК та РНК у лабораторіях, аналіз та дослідження. Виберіть ідеальний тип ультразвукового апарату для вашої програми, обсягу зразка, номера зразка та пропускної здатності. Hielscher Ultrasonics має ідеальний ультразвуковий гомогенізатор для вас!

Як знайти ідеальний ультразвуковий пристрій для порушення клітин та вилучення білка в науці та аналізі

Мініатюра відео

 

Переваги ультразвукового елюювання за допомогою ультразвуку

Ультразвукове елюювання має ряд переваг, особливо в контексті методів очищення білка, таких як афінна хроматографія.
Наприклад, ультразвукова діагностика перевершує альтернативні методи з точки зору цілісності білка, відновлення, чистоти, універсальності та ефективності. Ці переваги роблять ультразвукове елюювання кращим вибором для процесів очищення білка, особливо в додатках, де важливо підтримувати структуру білка та активність. Крім того, ультразвукова елюація виділяється своєю простотою, ефективністю, універсальністю та сумісністю з широким спектром білків і матрицями спорідненості. Застосовуючи ультразвукові хвилі для порушення взаємодії білка з матрицею, ультразвукова елюація пропонує м'який і швидкий метод очищення білка, забезпечуючи високу швидкість відновлення та зберігаючи цілісність білка для подальших застосувань.

М'якше впливає на структуру білка: Елюювання з низьким рН передбачає використання кислотних буферів для порушення зв'язування між білком-мішенню (наприклад, антитілами) і матриксом спорідненості. Однак вплив низького рН може денатурувати білки, потенційно порушуючи їх структуру та біологічну активність. Навпаки, ультразвукова елюація в першу чергу покладається на механічне руйнування, а не на хімічну денатурацію, що робить її більш м'якою для структури білка. Це особливо вигідно при очищенні делікатних білків або антитіл, чутливих до змін рН.

  • Зниження ризику агрегації: Елюювання з низьким рівнем рН може збільшити ризик агрегації білка через розгортання білка та оголення гідрофобних ділянок. Агрегація може призвести до втрати активності білка та труднощів у подальшій переробці. Ультразвукова елюція, для порівняння, мінімізує ризик агрегації, використовуючи механічні сили для порушення взаємодії між білком і матриксом спорідненості, не змінюючи суттєво нативну конформацію білка.
  • Покращене відновлення та чистота: Ультразвукове елюювання дозволяє досягти більш високих показників відновлення та рівня чистоти порівняно з альтернативними методами елюювання. Механічне порушення, що забезпечується ультразвуком, ефективно вивільняє зв'язані білки з матриці спорідненості, мінімізуючи при цьому неспецифічні взаємодії. Це призводить до посиленого відновлення цільового білка зі зменшенням забруднення неспецифічно зв'язаними молекулами, що сприяє підвищенню чистоти елюйованої фракції.
  • Високопродуктивна обробка: Hielscher Ultrasonics пропонує різні ультразвукові апарати для очищення, елюювання білка та біопанування за допомогою ультразвуку. Мікротитрна пластина-сонікатор UIP400MTP дозволяє проводити масову обробку зразків в 96-лункових та інших багатолункових пластинах. VialTweeter ідеально підходить для безпроблемного одночасного ультразвукового дослідження до 10 трубок, таких як флакони Eppendorf, за однакових умов. CupHorn - це універсальний звуковий апарат, який ідеально підходить для кількох трубок, невеликих мензурок та інших судин. І, звичайно ж, класичні УЗД зондового типу з мікронаконечниками є добре зарекомендував себе лабораторним інструментом для підготовки зразків. Асортимент продукції Hielscher Ultrasonics має ідеальний звуковий апарат для вашого експерименту та розміру вибірки.
  • Універсальність і сумісність: Ультразвукове елюювання сумісне з широким спектром білків і матрицями спорідненості, пропонуючи універсальність у застосуванні очищення. Навпаки, елюювання з низьким рН може бути непридатним для певних білків, чутливих до кислих умов, або для матриці спорідненості, які схильні до деградації або вилуговування при низькому рН. Ультразвукове елюювання забезпечує м'яку та універсальну альтернативу, яку можна адаптувати до конкретних потреб очищення без шкоди для цілісності білка або стабільності матриці.
  • Час та ефективність: Ультразвукова елюція зазвичай вимагає коротшого часу елюювання порівняно з іншими методами елюювання. Швидке та ефективне вивільнення зв'язаних білків, чому сприяє ультразвук, скорочує час обробки та підвищує загальну ефективність очищення, що робить його привабливим варіантом для високопродуктивних застосувань або коли потрібні результати, чутливі до часу.
96-лунковий пластинчастий сонікатор UIP400MTP для лізису клітин, екстракції ДНК, фрагментації ДНК, розчинення клітин та очищення білка.

96-лунковий пластинчастий сонікатор UIP400MTP для ультразвукового дослідження багатолункових пластин, ПЛР та ІФА пластин

 

VialTweeter на ультразвуковому процесорі UP200ST

Ультразвуковий апарат VialTweeter для одночасного ультразвукового дослідження 10 зразків, наприклад, для руйнування клітин і вилучення білків

Біопанування за допомогою ультразвуку

Біопанування є критично важливим методом очищення антитіл, особливо коли необхідно отримати високоспецифічні антитіла для дослідження або медичної діагностики. Біопанування - це процес, при якому антитіла виділяються з суміші антитіл, так звана бібліотека антитіл.

Як працює ультразвукове біопанорамування?

Вона починається з бібліотеки антитіл, суміші різних антитіл. Кожне антитіло характеризується своєю унікальною формою і специфічністю. Для аналізу та терапії необхідно виділити специфічні антитіла, які розпізнають певну мішень, наприклад, вірус або ракову клітину. За допомогою біопанування можна виділити ці специфічні антитіла. Ультразвук допомагає полегшити процес біопанування, роблячи очищення антитіл більш ефективним.

Починаючи з бібліотеки антитіл, антитіла зазвичай відображаються на поверхні бактеріофага, дріжджової клітини або іншої системи відображення. Ця бібліотека представляє різноманітний спектр антитіл.
На першому етапі ця бібліотека піддається впливу вашої цільової молекули. Антитіла, які зв'язуються з мішенню, прилипнуть, а інші змиються. Для видалення незв'язаних антитіл зразки кілька разів промивають буферним розчином.

Тепер у нас є зразки, що містять тільки зв'язані антитіла. Однак це означає, що антитіла все ще прикріплені до системи відображення. Щоб їх звільнити, необхідно порушити антитіло-лігандну взаємодію. Цей етап відомий як елюювання. Зразки можна елюювати за допомогою розчину, який порушує зв'язування, наприклад, за допомогою специфічного елююючого буфера, хаотропного, зниження значення рН, застосування тепла тощо. Ці методи елюювання руйнують зв'язування антитіл з лігандом, але також можуть погіршити самі антитіла. Саме тому ультразвукова діагностика використовується як альтернативна методика для м'якого видалення антитіл з мішені.

Після завершення етапу елюювання ми отримуємо очищені антитіла, готові до використання в дослідженнях, діагностиці або терапії.

Біопанування є потужним методом очищення антитіл, а ультразвукове елюювання полегшує та посилює ефективність – в результаті утворюються високоочищені, непошкоджені антитіла. Ультразвукове біопанорамування дозволяє вченим виділяти високоспецифічні антитіла зі складних зразків, відкриваючи двері для широкого спектру застосувань.

Ультразвукові апарати для очищення антитіл

Ультразвуки Hielscher - це добре зарекомендували себе інструменти, які використовуються в кращих дослідницьких установах по всьому світу. Ультразвукові апарати Hielscher, які цінуються за свій найсучасніший дизайн і чудову продуктивність, вважаються незамінними лабораторними інструментами в галузі біотехнології та молекулярної біології. Hielscher Ultrasonics пропонує ультразвукові апарати для одиничного зразка, а також високопродуктивну підготовку зразків, які сприяють ефективному очищенню антитіл і елююванню молекул, зв'язаних з мішенню, а також дозволяють проводити ефективне біопанорамування для точності та швидкості виділення специфічних антитіл.
У контексті очищення антитіл ультразвукові апарати Хілшера чудово полегшують етапи промивання та елюювання, ефективно видаляючи незв'язані антитіла, зберігаючи цілісність комплексів, пов'язаних з мішенями. Їх точний контроль і масштабованість дозволяють створювати індивідуальні умови обробки, забезпечуючи оптимальні результати очищення в широкому діапазоні обсягів і складності зразків.
Ультразвукові апарати Hielscher є технологічною інновацією в ультразвуковій обробці, пропонуючи безпрецедентні можливості для очищення, елюювання та біопанування антитіл. Завдяки своїй точності, надійності та простоті експлуатації різноманітні ультразвукові системи забезпечують оптимальну ефективність та універсальність для біофармацевтичних досліджень, діагностики та терапії.
Зв'яжіться з нами зараз, щоб дізнатися більше про ультразвукові апарати Hielscher для очищення, елюювання та біопанування антитіл! Наш досвідчений технічний персонал радий обговорити ваше застосування, пов'язане з антитілами!

Чому Hielscher Ultrasonics?

  • висока ефективність
  • Нові технології
  • надійність & надійність
  • Регульоване, точне управління процесом
  • партія & в лінію
  • для будь-якого обсягу
  • Інтелектуальне програмне забезпечення
  • інтелектуальні функції (наприклад, програмовані, протокольовані дані, дистанційне керування)
  • Легко і безпечно працювати
  • Низькі витрати
  • CIP (чистий на місці)

Дизайн, виробництво та консалтинг – Якість виробництва Німеччини

Hielscher ультраакукатори добре відомі своїми найвищими стандартами якості та дизайну. Надійність і проста експлуатація дозволяють плавно інтегрувати наші ультразвукові апарати в промислові об'єкти. Грубі умови та вимогливе середовище легко обробляються ультразвуковими апаратами Hielscher.

Hielscher Ultrasonics є сертифікованою ISO компанією і робить особливий акцент на високопродуктивних ультразвукових апаратах, що відрізняються найсучаснішими технологіями та зручністю для користувачів. Звичайно, ультразвукові апарати Hielscher сумісні з CE і відповідають вимогам UL, CSA та RoHs.

Зв'яжіться з нами! / Запитати нас!

Запитайте більше інформації

Будь ласка, використовуйте форму нижче, щоб отримати додаткову інформацію про ультразвукові процесори, програми та ціну. Ми будемо раді обговорити з вами ваш процес і запропонувати вам ультразвукову систему, що відповідає вашим вимогам!









Будь ласка, зверніть увагу на наші Політика конфіденційності.


На відео показана ультразвукова система підготовки зразків UIP400MTP, яка дозволяє забезпечити надійну підготовку зразків будь-яких стандартних багатопрофільної пластини з використанням ультразвуку високої інтенсивності. Типові застосування UIP400MTP включають клітинний лізик, ДНК, РНК та зсув хроматину, а також екстракцію білка.

Ультраакукатор UIP400MTP для багато свердловинної ультразвукової обробки плит

Мініатюра відео

Порівняння ультразвукової елюції та традиційних методів елюювання

  1. Градієнтне елюювання: При градієнтній елюції міцність зв'язку між білком-мішенню та матриксом спорідненості поступово зменшується за рахунок зміни складу елюйного буфера. Це може включати зміну таких факторів, як рН, концентрація солі або концентрація конкуруючих лігандів. Градієнтна елюювання дозволяє точно налаштувати умови елюювання для селективного вивільнення цільового білка, мінімізуючи при цьому неспецифічне зв'язування.
    Переваги ультразвукового елюювання: Ультразвукова елюція забезпечує більш швидке та рівномірне вивільнення зв'язаних білків порівняно з градієнтною елюцією. У той час як градієнтне елюювання вимагає ретельної оптимізації та моніторингу умов елюювання, ультразвукове елюювання забезпечує простіший та ефективніший метод відновлення білка.
  2. Змагальне елюювання: При конкурентному елююванні висока концентрація конкуруючого ліганду вводиться в буфер елюювання, щоб порушити зв'язування між білком-мішенню і матриксом спорідненості. Конкуруючий ліганд конкурує з білком-мішенню за ділянки зв'язування на матриксі, тим самим витісняючи білок і вивільняючи його в елюат.
    Переваги ультразвукового елюювання: Ультразвукове елюювання пропонує більш м'яку та універсальну альтернативу конкурентній елюції. Конкурентне елюювання може вимагати використання високих концентрацій хаотропних агентів (тобто розчиненої речовини, яка порушує мережу водневих зв'язків між молекулами води та знижує стабільність нативного стану білків шляхом ослаблення гідрофобного ефекту) або агресивних хімічних речовин, які можуть вплинути на стабільність та активність білка. Навпаки, ультразвукове елюювання забезпечує механічне руйнування без необхідності використання додаткових хімічних агентів, зберігаючи цілісність білка та забезпечуючи високу швидкість відновлення.
  3. Температурно-індуковане елюювання: Температурно-індуковане елюювання передбачає зміну температури елююючого буфера, щоб порушити зв'язок між білком-мішенню та матриксом спорідненості. Цього можна досягти шляхом підвищення або зменшення температури, залежно від конкретної взаємодії білка з матрицею.
    Переваги ультразвукового елюювання: Ультразвукове елюювання пропонує більш швидкий і контрольований метод елюювання білка в порівнянні з методами, викликаними температурою. У той час як температурно-індуковане елюювання може вимагати точного контролю градієнтів температури та довшого часу рівноваги, ультразвукове елюювання забезпечує негайне механічне порушення, що призводить до скорочення часу елюювання та підвищення ефективності.
  4. Ферментативна елюція: Ферментативна елюція використовує специфічні ферменти, які розщеплюють зв'язки між білком-мішенню та матриксом спорідненості, вивільняючи білок в елюат. Цей метод особливо корисний для білків, які міцно пов'язані з матрицею, або для застосувань, що вимагають точного контролю умов елюювання.
    Переваги ультразвукового елюювання: Ультразвукове елюювання пропонує неферментативну та безхімічну альтернативу ферментативному елююванню. У той час як ферментативна елюювання може вимагати оптимізації концентрації ферментів, часу інкубації та умов рН, ультразвукова елюювання забезпечує простий і універсально застосовний метод відновлення білка без необхідності використання додаткових реагентів або спеціалізованого обладнання.
Звуковий апарат для високопродуктивної пробопідготовки! Сонікатор UIP400MTP пластин полегшує лізис, екстракцію білка, фрагментацію ДНК та клітинну солюбілізацію біологічних зразків у 96-лункових пластинах.

Пластинчастий сонікатор UIP400MTP для будь-яких 96-лункових пластин, мікротитрових пластин і багатолункових пластин.



Література/довідники


Високопродуктивний ультразвук! Асортимент продукції Hielscher охоплює весь спектр від компактного лабораторного ультраакулятора над лавками до повнопромислових ультразвукових систем.

Hielscher Ультразвук виробляє високоемоціивні ультразвукові гомогенізатори з Лабораторія до промислових розмірів.


Ми будемо раді обговорити ваш процес.

Давайте зв'яжемося.