Hielscher Ultrasonics
เรายินดีที่จะพูดคุยเกี่ยวกับกระบวนการของคุณ
โทรหาเรา: +49 3328 437-420
ส่งอีเมลถึงเรา: info@hielscher.com

การเตรียมอัลตราโซนิกของตัวอย่าง C. elegans

C. elegans หนอนไส้เดือนฝอยเป็นสิ่งมีชีวิตแบบจําลองที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในชีววิทยา การเตรียมตัวอย่างก่อนการวิเคราะห์จําเป็นต้องมีการสลายการสกัดโปรตีนและไขมันตลอดจนการกระจายตัวของ RNA ซึ่งสามารถทําได้อย่างน่าเชื่อถือผ่านการ sonication เครื่องรบกวนเซลล์อัลตราโซนิกเป็นอุปกรณ์ที่เชื่อถือได้ซับซ้อนและใช้งานง่ายสําหรับการเตรียมตัวอย่าง C. elegans อย่างรวดเร็ว

การเตรียมอัลตราโซนิกของตัวอย่าง C. elegans

C. elegans เป็นพยาธิตัวกลมซึ่งใช้กันอย่างแพร่หลายในห้องปฏิบัติการวิจัยเพื่อตรวจสอบจีโนมิกส์ ชีววิทยาพัฒนาการ และโรค ยีนหลายยีนในจีโนมของ C. elegans มียีนที่ใช้งานได้ในมนุษย์ ด้วยเหตุนี้หนอนไส้เดือนฝอยจึงเป็นแบบจําลองที่มีประโยชน์อย่างยิ่งสําหรับโรคของมนุษย์ ข้อดีอื่น ๆ สําหรับการใช้งาน C. elegans อย่างกว้างขวางคือการเพาะปลูกที่ง่ายและราคาถูกบนจานที่มีแบคทีเรีย (เช่น. coli) ความโปร่งใสการจัดการที่สะดวกตลอดจนความเป็นไปได้ในการแช่แข็งและเก็บหนอนไว้เป็นเวลานาน
การวิเคราะห์โปรตีนและไขมันเป็นขั้นตอนปกติในห้องปฏิบัติการ และการเตรียมตัวอย่างอัลตราโซนิกเป็นวิธีที่กําหนดขึ้นในการสลายไส้เดือนฝอย C. elegans ในทุกขั้นตอนการพัฒนา (เช่น ตัวอ่อน ตัวอ่อน L1-L4 ตัวเต็มวัย) เนื่องจาก C. elegans ยังใช้เป็นระบบการแสดงออกของโปรตีนเพื่อแสดงโปรตีนเป้าหมายมากเกินไป จึงจําเป็นต้องมีวิธีการสลายและการสกัดโปรตีนที่เชื่อถือได้และทําซ้ําได้ ซึ่งให้ผลผลิตโปรตีนสูง ระบบการหยุดชะงักของเซลล์อัลตราโซนิกและการสกัดมีให้เป็นโฮโมจีไนเซอร์ชนิดโพรบและเป็นเครื่องอัลตราโซนิกหลายตัวอย่าง เพื่อเตรียมตัวอย่างที่สะดวกและตัวเลขขนาดตัวอย่างทุกประเภท Hielscher Ultrasonics มีตัวรบกวนเซลล์อัลตราโซนิกที่เหมาะสําหรับขั้นตอนในห้องปฏิบัติการของคุณ
C. elegans เป็นสิ่งมีชีวิตแบบจําลองที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในการวิจัยทางชีวภาพ การสลายอัลตราโซนิกเป็นเทคนิคที่ซับซ้อนเชื่อถือได้ทําซ้ําได้และรวดเร็วในการเตรียมสารสกัดโปรตีนคุณภาพสูงจาก C. elegans

อัลตราโซนิก C. elegans Lysis สําหรับ

  • การเตรียมโฮโมจีเนตของหนอน
  • การสกัดโปรตีน
  • การสกัดไขมัน
  • การหาปริมาณโปรตีน
  • การตกตะกอนของภูมิคุ้มกัน
  • เวสเทิร์นบลอตติ้ง
  • การสกัด RNA
  • การทดสอบเอนไซม์
VialTweeter ที่โปรเซสเซอร์อัลตราโซนิก UP200ST

ไวอัลทวีตเตอร์ หน่วยเตรียมหลายตัวอย่างสําหรับการ sonication พร้อมกันของหลอดทดลอง 10 หลอด

การขอข้อมูล







โปรโตคอลอัลตราโซนิกสําหรับการหยุดชะงักของ C. elegans และการสลาย

การทําให้เป็นเนื้อเดียวกันแบบอัลตราโซนิกและการสลายของ C. elegans และการสกัดโปรตีนและไขมันที่ตามมาสามารถทําได้โดยใช้ขั้นตอนที่แตกต่างกันโดยใช้บัฟเฟอร์การทําให้เป็นเนื้อเดียวกันและการสลายที่แตกต่างกันเป็นต้น โปรโตคอลการสลายทั้งหมดมีเหมือนกันคือต้องเก็บตัวอย่างไว้บนน้ําแข็งอย่างต่อเนื่องเพื่อป้องกันการย่อยสลายของโปรตีน ด้านล่างนี้ เราขอนําเสนอโปรโตคอลการสลายอัลตราโซนิกและการสกัดที่เชื่อถือได้และรวดเร็วสําหรับการเตรียมตัวอย่าง C. elegans ที่มีโปรตีนหรือไขมันคุณภาพสูง

ข้อดีของอัลตราโซนิก C. elegans Lysis

  • เชื่อถือได้
  • จำลอง
  • ควบคุมอุณหภูมิได้อย่างแม่นยํา
  • การควบคุมกระบวนการที่เชื่อถือได้
  • วิธีการอ่อนโยน
  • ง่ายต่อการสมัคร
  • ปลอดภัย

การสกัดโปรตีนอัลตราโซนิกจากตัวอย่าง C. elegans

การสลายอัลตราโซนิกและการสกัดโปรตีนของหนอน C. elegans สามารถทําได้โดยใช้โปรโตคอลต่างๆ ด้านล่างนี้เราจะนําเสนอโปรโตคอลการสลายที่เชื่อถือได้และรวดเร็วสําหรับผลการสกัดโปรตีนที่ทําซ้ําได้

การเตรียมสารสกัดจากไซโตโซลิกอย่างรวดเร็วจากหนอน C. elegans โดย Sonication

ด้วยโปรโตคอลต่อไปนี้ คุณสามารถเตรียม C. elegans lysates ได้ภายในเวลาไม่ถึง 30 นาที
คอลเลกชันของ C. elegans
เลือกหนอน C. elegans ที่ต้องการลงในหลอดน้ําเกลือบัฟเฟอร์ฟอสเฟต (PBS) ขนาด 1.5 มล. หรือล้างออกจากจานด้วย PBS 1.5 มล. หมุนเหวี่ยงเป็นเวลา 1 นาทีที่ 2000 รอบต่อนาทีเพื่ออัดเม็ด เก็บตัวอย่างไว้ตลอดเวลาบนน้ําแข็ง
จากนั้นล้างหนอนสองครั้งด้วย PBS
หลังจากนั้นล้างหนอนสองครั้งด้วย ddH2O.
ระงับหนอนอีกครั้งในบัฟเฟอร์การทําให้เป็นเนื้อเดียวกัน (HB) อย่างน้อย 500ul ตัวอย่างหนอนพร้อมสําหรับการสลายอัลตราโซนิกแล้ว
สําหรับคุณภาพสารสกัดโปรตีนที่สูงขึ้น คุณอาจต้องการลดการปนเปื้อนของแบคทีเรียโดยการล้างหนอนเป็นเวลา 5 นาทีใน PBS และน้ําบริสุทธิ์พิเศษที่ปราศจากเชื้อ (ddH2O) หรือทําการลอยตัวของซูโครส เก็บหนอน samp อย่างต่อเนื่องบนน้ําแข็ง

โปรโตคอลอัลตราโซนิก C. elegans Lysis

  • ตรวจสอบให้แน่ใจว่าคุณเตรียมเครื่องอัลตราโซนิกล่วงหน้าเพื่อให้โฮโมจีไนเซอร์อัลตราโซนิกพร้อมใช้งาน (ติดตั้งโพรบตั้งค่าโปรแกรม sonication ไว้ล่วงหน้า)
  • Ultrasonicator UP200Ht (200 วัตต์, 26kHz) พร้อมไมโครทิป S26d2 สําหรับการเตรียมตัวอย่างทางชีวภาพหากเครื่องอัลตราโซนิกของคุณติดตั้งแบบตั้งพื้น ให้วางอ่างน้ําแข็งกับหลอดตัวอย่างใต้โพรบอัลตราโซนิก และใส่โพรบอัลตราโซนิกลงในหลอดขนาด 1.5 มล.

  • สําหรับการสลาย C. elegans ด้วย UP200St หรือ UP200Ht ควรทําอัลตราโซนิกโดยใช้ไมโครทิป (เช่น โพรบ 2 มม. S26d2; ดูภาพซ้าย) ที่แอมพลิจูด 40% เป็นเวลา 1 วินาทีโดยมีการหยุดชั่วคราว 30 วินาทีระหว่างนั้น 5 รอบ sonication สําหรับแต่ละ 1 วินาทีโดยมีการหยุดชั่วคราว 30 วินาทีเหมาะอย่างยิ่งสําหรับการสลาย C. elegans หากคุณทําการสลายเป็นครั้งแรก คุณสามารถตรวจสอบความคืบหน้าของการสลายในส่วนแบ่งเล็กๆ ของตัวอย่างหลังจากพัลส์แต่ละครั้งโดยใช้กล้องจุลทรรศน์
  • การสลายจะเสร็จสมบูรณ์เมื่อหนอนหยุดชะงัก การ sonication มากเกินไปส่งผลให้นิวเคลียสแตกหักและมองเห็นได้เมื่อตัวอย่างมีความหนืดหรือโฟม เพื่อป้องกันการเสื่อมสภาพของตัวอย่าง ให้ใช้พัลส์มากขึ้นหากจําเป็น อย่าเพิ่มเวลาของรอบชีพจรอัลตราโซนิกแต่ละรอบเพื่อให้ได้สารสกัดโปรตีนคุณภาพสูง
  • ล้างไลเซตเซลล์โดยการหมุนเหวี่ยงหนอนที่ละลายด้วยอัลตราโซนิกที่ 14,000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 10 นาทีที่ 4ºC
  • จากนั้นถ่ายโอนสารน้ําชั้นบนไปยังหลอดใหม่และเตรียมพร้อมสําหรับการตกตะกอนของภูมิคุ้มกันหรือการทดสอบอื่นๆ

หมายเหตุสําหรับบัฟเฟอร์การทําให้เป็นเนื้อเดียวกัน: เตรียมบัฟเฟอร์การทําให้เป็นเนื้อเดียวกันสําหรับโปรโตคอลการสลายอัลตราโซนิกด้านบนดังนี้:

  • 15 มิลลิเมตร Hepes pH 7.6 – 15 มล. 0.5 ม.
  • 10 มิลลิเมตร KCl – 2.5 มล. ของ 2 M
  • 1.5 มิลลิเมตร MgCl2 – 0.75 มล. ของ 1 M
  • 0.1 มิลลิเมตร EDTA – 100 ul ของ 0.5 M
  • 0.5 มิลลิเมตร EGTA – 2.5 มล. 0.1 ม
  • 44 มิลลิเมตร ซูโครส – 14.7 มล. 50%
  • เพิ่มก่อนใช้งาน: 1mM DTT – 1,000x ของ 1M
  • บวกกับสารยับยั้งโปรตีเอส

 

บทช่วยสอนนี้อธิบายว่าเครื่อง sonicator ประเภทใดดีที่สุดสําหรับงานเตรียมตัวอย่างของคุณเช่นการสลายการหยุดชะงักของเซลล์การแยกโปรตีนการกระจายตัวของ DNA และ RNA ในห้องปฏิบัติการการวิเคราะห์และการวิจัย เลือกประเภทเครื่องโซนิคเตอร์ที่เหมาะกับการใช้งานปริมาตรตัวอย่างจํานวนตัวอย่างและปริมาณงานของคุณ Hielscher Ultrasonics มีโฮโมจีไนเซอร์อัลตราโซนิกที่เหมาะสําหรับคุณ!

วิธีค้นหาเครื่องสะท้อนเสียงที่สมบูรณ์แบบสําหรับการหยุดชะงักของเซลล์และการสกัดโปรตีนในวิทยาศาสตร์และการวิเคราะห์

ภาพขนาดย่อของวิดีโอ

 

การสลายปริมาณงานสูงของ C. elegans ในเพลต 96 หลุมโดยใช้ UIP400MTP Plate Sonicator

C. elegans Lysis (ไส้เดือนฝอยตัวเต็มวัย)
UIP400MTP แอมพลิจูด 80% 20 รอบ (แต่ละรอบการ sonication: เปิด 30 วินาทีปิด 30 วินาที)
บัฟเฟอร์ Lysis:

  • ตัวเลือกที่ 1) 4% SDS, 0.1 M Tris/HCl pH 8.0, 1 mM EDTA
  • ตัวเลือกที่ 2) สําหรับการตกตะกอนด้วยภูมิคุ้มกัน (co-IP): 10 mM Tris HCl (pH 7.5), 150 mM NaCl, 0.5 mM EDTA, 0.5 % NP-40 (ค็อกเทลยับยั้งโปรตีนเนสที่สมบูรณ์)

การกระจายตัวของ DNA ปริมาณงานสูง
C. elegans (ไส้เดือนฝอยตัวเต็มวัย) DNA 200-300bp: เครื่องสะท้อนเสียงแผ่น UIP400MTP – ตั้งค่าแอมพลิจูด 80%, 30 พัลส์ – เปิดทุก 30 วินาที ปิด 30 วินาที

UIP400MTP Plate Sonicator สําหรับการเตรียมตัวอย่างที่มีปริมาณงานสูง: UIP400MTP จะสะท้อนตัวอย่างอย่างสม่ําเสมอในแผ่นไมโครไทเตอร์แบบหลายหลุมและแผ่น 96 หลุมที่ขัดขวางเซลล์สกัดโปรตีนแยกส่วน DNA, RNA และเส้นใยอัลฟา-ซินนิวคลีน

UIP400MTP Plate Sonicator สําหรับการเตรียมตัวอย่างที่มีปริมาณงานสูงจะสะท้อนตัวอย่างอย่างสม่ําเสมอในแผ่นไมโครไทเตอร์แบบหลายหลุมและแผ่น 96 หลุม

อัลตราโซนิก Lysis ของ C. elegans สําหรับการทดสอบการทําให้บริสุทธิ์ความสัมพันธ์เชิงปริมาณ

ตัวอ่อน C. elegans (∼2 ล้านต่อการทําซ้ํา) ถูกเก็บเกี่ยวใหม่ในสามเท่าทางชีวภาพโดยการฟอกสีกระเทยวัยหนุ่มและโซนิกบนน้ําแข็ง (รอบ: 0.5 วินาที, แอมพลิจูด: 40–45%, 5 จังหวะ/เซสชัน, 5 เซสชัน, ช่วงเวลาระหว่างเซสชัน: 30 วินาที; โปรเซสเซอร์อัลตราโซนิก UP200S ด้วยไมโครทิป S26d2 (Hielscher Ultrasonics GmbH)) ในบัฟเฟอร์การสลายตัว (ปริมาตรทั้งหมด: ∼600 μl; 50 mm Tris-HCl, pH 7.4, 100 mm KCl, 1 mm MgCl2, 1 mm EGTA, 1 mm DTT, 10% glycerol, protease inhibitor mixture, 0.1% Nonidet P-40 Substitute) หลังจากการ sonication Nonidet P-40 Substitute ถูกเพิ่มถึง 1% และไลเสทถูกบ่มด้วยการหมุนหัวเหนือหางที่ 4 °C เป็นเวลา 30 นาที ตามด้วยการหมุนเหวี่ยงที่ 20,000 × g เป็นเวลา 20 นาทีที่ 4 °C จากนั้นไลเสทที่ผ่านการล้างแล้วจะถูกดูดโดยไม่รบกวนชั้นไขมันด้านบน และแบ่งครึ่งหนึ่งเป็นลูกปัดอะกาโรสต่อต้าน GFP หรือลูกปัดควบคุมที่ถูกปิดกั้น (40–50 μl) หลังจากหมุนหัวเหนือหางที่อุณหภูมิ 4°C เป็นเวลา 60-90 นาที ลูกปัดจะถูกล้างหนึ่งครั้งด้วยบัฟเฟอร์การสลายที่มีสารทดแทน Nonidet P-40 0.1% ตามด้วยการล้างสองครั้งในบัฟเฟอร์ I (25 มม. Tris-HCl, pH 7.4, 300 มม. NaCl, 1 มม. MgCl2) หรือบัฟเฟอร์ II (1 มม. Tris-HCl, pH 7.4, 150 มม. NaCl, 1 มม. MgCl2) หรือทั้งสองอย่าง สําหรับการดึงลง GFP:MBK-2 มีการทดลองแยกกันสองครั้งโดยใช้เงื่อนไขการซักที่แตกต่างกัน โปรตีนถูกชะโดยการเขย่าวงโคจรใน 50 μl ของยูเรีย 6 ม./ไทโอยูเรีย 2 ม. ที่อุณหภูมิห้อง สําหรับการทดลองแบบดึงลง MBK-1::GFP โปรตีนถูกชะสองครั้งโดยการเขย่าใน 50μl ของกัวนิดินเนียมคลอไรด์ 8 ม. ที่ 90°C ตามด้วยการตกตะกอนเอทานอล ตัวอย่างโปรตีนที่ชะแล้วจะถูกย่อยในสารละลาย
(อ้างอิง Chen et al., 2016)

sonotrode MTP-24-8-96 มีโพรบอัลตราโซนิกแปดตัวสําหรับการ sonication ของหลุมของแผ่นไมโครไทเตอร์

sonotrode MTP-24-8-96 มีโพรบอัลตราโซนิกแปดตัวสําหรับการ sonication ของหลุมของแผ่นไมโครไทเตอร์

Ultrasonic Worm Homogenization และ Lysis

สําหรับขั้นตอนการสลายตัวและการสกัดโปรตีนของ C.elegans มีการรวบรวม 30,000 nemotodes ของขั้นตอนที่เกี่ยวข้องต่อตัวอย่างและล้างใน S-basal เย็นจัดโดยแรงเหวี่ยงที่ 1500 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 2 นาที ล้างหกครั้งด้วย S-basal เย็นเพื่อขจัดแบคทีเรียที่ตกค้าง จากนั้นเก็บไว้บนน้ําแข็งจนกว่าจะพร้อมใช้งาน สําหรับการสกัดโปรตีนหนอนที่โตเต็มวัยได้รับอนุญาตให้สร้างเม็ดขนาดกะทัดรัดหลังจากการล้าง S-basal ครั้งสุดท้าย เม็ดหนอนจะถูกแขวนลอยอีกครั้งในบัฟเฟอร์การสกัดเย็น 1 มล. [โพแทสเซียมฟอสเฟต 20 mM, pH 7.4, EDTA 2mM, Triton-X-100% 100, สารยับยั้งโปรตีเอส (Sigma P2714)] และประมวลผลทันที
∼หนอนตัวเต็มวัย 30,000 ตัว (สอดคล้องกับน้ําหนักเปียก ∼100 มก.) ถูกคลื่นเสียงบนน้ําแข็งโดยใช้เครื่องอัลตราโซนิกแบบโพรบ (เช่น UP50H พร้อมไมโครทิป MS2) ที่แอมพลิจูด 40% เป็นเวลา 10 รอบ 3 วินาที ปิด 30 วินาที ในบัฟเฟอร์การสกัดเย็น 1 มล. (อ้างอิง Baskharan et al. 2012)

การสกัดไขมันอัลตราโซนิกจาก C. elegans

ในลิพิโดมิกส์ซึ่งเป็นสาขาหนึ่งของการเผาผลาญไขมันส่วนเสริมของระบบชีวภาพจะได้รับการกําหนดลักษณะและวิเคราะห์ C. elegans ใช้กันอย่างแพร่หลายในลิพิโดมิกส์เพื่อตรวจสอบปฏิสัมพันธ์ของไขมันเมตาบอลิซึมและผลกระทบต่อสุขภาพและอายุขัย
การสลายและการสกัดด้วยอัลตราโซนิกใช้เพื่อปล่อยไขมันเช่นสฟิงโกลิพิดจากตัวอ่อน C. elegans ตัวอ่อนและหนอนที่โตเต็มวัย อัลตราโซนิกใช้ในการเตรียมโมโมจีเนตของหนอนและต่อมาเพื่อสกัดไขมันจากตัวอย่าง
โปรโตคอลสําหรับการสกัดไขมันอัลตราโซนิกจาก C. elegans
ละลายเม็ด C. elegans บนน้ําแข็งและแขวนลอยด้วยน้ําอัลตร้า 0.5 มล. 
โซนิกตัวอย่าง C. elegans ในหลอดทดลอง 1,5 มล. ในขณะที่เก็บตัวอย่างไว้บนน้ําแข็งอย่างต่อเนื่อง
Sonication สามารถทําได้โดยใช้โพรบอัลตราโซนิกเช่น UP200 ฮิตหน่วยเตรียมตัวอย่างอัลตราโซนิก ไวอัลทวีตเตอร์ (sonication พร้อมกัน 10 ตัวอย่าง) หรือ UIP400MTP (สําหรับการ sonication ของแผ่นหลายหลุมเช่นแผ่น 96 หลุม) สําหรับการสลายอัลตราโซนิกด้วย UP200Ht ให้ใช้ไมโครทิป S26d2 ตั้งค่าโหมดวงจรอัลตราโซนิกล่วงหน้าในเมนูดิจิตอล ตั้งค่าแอมพลิจูดเป็น 10% และโหมดรอบการโซนิเคชั่น 2 วินาทีพัลส์ 20 รอบโดยมีการหยุดชั่วคราว 30 วินาที ระหว่างการระเบิดของอัลตราโซนิกแต่ละครั้ง
ถ่ายโอนส่วนบนไปยังหลอดแก้วที่มีฝาเกลียว 
ทําการสกัด Folch โดยเติมน้ําอัลตร้า 1 มล. ลงในหลอดแก้วแต่ละหลอด ตามด้วยการเพิ่มส่วนผสมของคลอโรฟอร์ม/เมทานอล 6 มล. (อัตราส่วน = 2:1) ลงในหลอดแก้วแต่ละหลอด
หมุนหลอดแก้วแต่ละหลอดเป็นเวลา 30 วินาทีเป็นเวลา 4 ครั้ง 
หมุนเหวี่ยงหลอดที่ 1,258 x g เป็นเวลา 15 นาที (Eppendorf, 5810 R) เพื่อเพิ่มการแยกเฟส 
ถ่ายโอนเศษส่วนที่ไม่ชอบน้ําด้านล่างไปยังหลอดแก้วที่สะอาดด้วยปิเปตแก้วปาสเตอร์ 
เช็ดเศษส่วนที่ไม่ชอบน้ําด้านล่างให้แห้งภายใต้การไหลของไนโตรเจนในเครื่องระเหยไนโตรเจน 
เก็บเม็ดแห้งไว้ในช่องแช่แข็ง -80 °C จนกว่าจะใช้งาน

การเตรียมอัลตราโซนิกของหนอนไลเสท

หนอนไลเสท: หนอนระยะ L4 ถูกเก็บเกี่ยวและล้างสามครั้งด้วยบัฟเฟอร์ M9 (42.26 mM Na2เอชพีโอ4, 22.04 มิลลิเมตร KH2ป.ป.4, 85.56 mM NaCl และ 0.87 mM MgSO4) เพื่อกําจัดแบคทีเรียทั้งหมด หลังจากกําจัดบัฟเฟอร์ M9 ให้ได้มากที่สุดแล้ว หนอนจะถูกแขวนลอยในบัฟเฟอร์การสลายตัว: 50 mM HEPES, 50 mM KCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 5 mM ฟอสเฟต β-กลีเซอรอล, 0.1% (v/v) Triton X-100, 50 mM โซเดียมฟลูออไรด์, 1 mM โซเดียมออร์โธวานาเดต, 5 mM โซเดียมไพโรฟอสเฟต, 0.2 mM ฟีนิลมีเทนซัลโฟนิลฟลูออไรด์และสารยับยั้งโปรตีเอส หนอนถูกแช่แข็งในไนโตรเจนเหลวและละลายที่อุณหภูมิ 37 °C เป็นเวลาสามครั้งจากนั้นหนอนจะถูกโซนิกบนน้ําแข็งแห้งด้วยหน่วยไวอัลตราโซนิก VialTweeter สําหรับการเตรียมหลอดตัวอย่าง 10 หลอดพร้อมกัน Sonication ดําเนินการที่แอมพลิจูด 50% ใน 10 รอบ 2 วินาที โดยมีการหยุดชั่วคราว 30 วินาทีระหว่างการระเบิดของ sonication หลังจากนั้น ตัวอย่างจะถูกหมุนเหวี่ยงที่ความเร็ว 12000 รอบต่อนาทีที่ 4°C เป็นเวลา 15 นาที ส่วนเหนือน้ําถูกรวบรวมและเก็บไว้ที่อุณหภูมิ -70°C ส่วนแบ่งถูกใช้สําหรับการตรวจหาปริมาณโปรตีนโดยการทดสอบแบรดฟอร์ด
การหากลูตาไธโอน GSH และ GSSG ทั้งหมด: สําหรับการหาปริมาณกลูตาไธโอน ไลเสทและการตรวจวัดจะทําในวันเดียวกัน ตัวอ่อน L4 ที่เลี้ยงกลูโคสและตัวควบคุมถูกเก็บเกี่ยวและล้างด้วยบัฟเฟอร์ M9 สามครั้ง หลังจากเอาบัฟเฟอร์ M9 ออกให้มากที่สุดแล้วหนอนจะถูกระงับในกรดเมตาฟอสฟอริกที่เย็นจัด (5% w / v) จากนั้นหนอนจะถูก sonicated ในน้ําแข็งด้วย VialTweeter อัลตราโซนิกที่แอมพลิจูด 50% ในสิบรอบ sonication ของ 2 วินาที โดยมี 30 วินาที หยุดชั่วคราวระหว่างแต่ละรอบ หลังจากนั้นหมุนเหวี่ยงที่ 12000 รอบต่อนาทีที่ 4 ̊C เป็นเวลา 15 นาที
(อ้างอิง Alcántar-Fernández et al., 2018)

การเตรียมตัวอย่าง C. elegans ก่อนการตกตะกอนทางภูมิคุ้มกันและการบลอตแบบตะวันตก

กล่าวโดยย่อ สําหรับสารสกัดของตัวอ่อน ตัวอ่อน C. elegans L1 เติบโตในการเพาะเลี้ยง S-medium เหลวขนาดใหญ่จนถึงวัยผู้ใหญ่ ตัวอ่อนถูกรวบรวมโดยใช้วิธีการฟอกขาวมาตรฐานและแขวนลอยในบัฟเฟอร์การสลาย (50 mM Tris, pH 7.5, 100 mM KCl, 1 mM EDTA, 1 mM MgCl2, 8.7% glycerol, 0.05% NP-40, 1 Protease Inhibitor Cocktail และ 1 Phosphatase Inhibitor Cocktail I และ II) แช่แข็งอย่างรวดเร็วในไนโตรเจนเหลว และไลซิสโดยการหยุดชะงักของเซลล์อัลตราโซนิกโดยใช้เครื่องอัลตราโซนิกที่มีไมโครทิปเช่น UP200 ฮิต ด้วย S26d2 สําหรับ 10 พัลส์มากกว่า 10 วินาทีที่แอมพลิจูด 30% หากต้องเตรียมตัวอย่างจํานวนมากอัลตราโซนิก ไวอัลทวีตเตอร์ หรือแนะนําให้ใช้ MultiSample-Ultrasonicator UIP400MTP สําหรับแผ่นที่ดี หลังจากการ sonication สารสกัดจะถูกล้างล่วงหน้าโดยการหมุนเหวี่ยงที่ 30,000 กรัมเป็นเวลา 20 นาทีที่ 4 °C สารสกัดที่ผ่านการล้างล่วงหน้า (โปรตีนทั้งหมด 300μg) ถูกบ่มเพาะด้วยแอนติบอดีที่บริสุทธิ์ด้วยความสัมพันธ์ของ anti-CDC-25.1 40μg (การศึกษานี้) ที่เชื่อมโยงข้ามกับโปรตีน A-agarose หรือเป็นตัวควบคุม อิมมูโนโกลบูลินของกระต่าย (Ig)G ที่เชื่อมขวางกับโปรตีน A-agarose ในปริมาณที่ใกล้เคียงกันถูกนํามาใช้ในปริมาณรวม 200μl ของบัฟเฟอร์การสลายที่มี NP-40 1% ซึ่งการรวมเข้าด้วยกันช่วยลดการจับโปรตีนที่ไม่จําเพาะกับเมทริกซ์ ตัวอย่างถูกหมุนเป็นเวลา 1 ชั่วโมงที่ 4°C ล้างลูกปัดสามครั้งด้วยบัฟเฟอร์การสลายตัว และชะด้วยไกลซีน/HCl 30μl และ NaCl 200 mM pH 2.2 หลังจากการตกตะกอนด้วยภูมิคุ้มกัน สารชะจะถูกเจือจางในบัฟเฟอร์ตัวอย่าง SDS 30μ ลิตร อุ่นที่ 95°C เป็นเวลา 4 นาที และโดยทั่วไป 3% ของปริมาณทั้งหมดสําหรับอินพุตและ 30% สําหรับสารชะถูกนําไปใช้กับ SDS-PAGE ตามด้วย Western blotting ด้วย anti-CDC-25.1 (1:400), anti-LIN-23 (1:750), anti-ubiquitin (1:1000), anti-GSK3 (1:500) หรือ anti-��β-actin (1:2000) แอนติบอดี ในกรณีที่สารสกัดไม่ได้รับการตกตะกอนของภูมิคุ้มกัน โปรตีนทั้งหมดในปริมาณที่เท่ากันที่ได้จากสารสกัดเหล่านั้นจะถูกแขวนลอยในบัฟเฟอร์ตัวอย่าง SDS ให้ความร้อนถึง 95°C จากนั้นนําไปใช้กับ SDS-PAGE โดยตรงและวิเคราะห์โดย Western blotting (อ้างอิง Segref et al. 2020)

ตัวเชื่อมแบบโพรบ UP200St สําหรับการสลาย

เครื่องรบกวนเซลล์อัลตราโซนิก UP200St พร้อมไมโครทิป S26d2 สําหรับการสลายและการสกัดโปรตีน

อัลตราโซนิก Lysis ภายใต้การควบคุมอุณหภูมิ Prescise

VialTweeter เป็น MultiSample Ultraonicator ที่ช่วยให้สามารถเตรียมตัวอย่างได้อย่างน่าเชื่อถือภายใต้สภาวะอุณหภูมิที่ควบคุมได้อย่างแม่นยําการควบคุมอุณหภูมิที่แม่นยําและเชื่อถือได้เป็นสิ่งสําคัญเมื่อจัดการกับตัวอย่างทางชีวภาพ อุณหภูมิสูงทําให้เกิดการย่อยสลายโปรตีนที่เกิดจากความร้อนในตัวอย่าง
เนื่องจากเทคนิคการเตรียมตัวอย่างเชิงกลทั้งหมดการ sonication จะสร้างความร้อน อย่างไรก็ตาม อุณหภูมิของตัวอย่างสามารถควบคุมได้ดีเมื่อใช้ VialTweeter เรานําเสนอตัวเลือกต่างๆ ในการตรวจสอบและควบคุมอุณหภูมิของตัวอย่างของคุณในขณะที่เตรียมด้วย VialTweeter และ VialPress สําหรับการวิเคราะห์

  1. การตรวจสอบอุณหภูมิตัวอย่าง: โปรเซสเซอร์อัลตราโซนิก UP200St ซึ่งขับเคลื่อน VialTweeter มีซอฟต์แวร์อัจฉริยะและเซ็นเซอร์อุณหภูมิแบบเสียบได้ เสียบเซ็นเซอร์อุณหภูมิเข้ากับ UP200St และสอดปลายเซ็นเซอร์อุณหภูมิเข้าไปในหลอดตัวอย่างใดตัวหนึ่ง ผ่านหน้าจอสัมผัสสีดิจิตอลคุณสามารถตั้งค่าในเมนูของ UP200St ช่วงอุณหภูมิเฉพาะสําหรับ sampsonication ของคุณ เครื่องอัลตราโซนิกจะหยุดโดยอัตโนมัติเมื่อถึงอุณหภูมิสูงสุดและหยุดชั่วคราวจนกว่า samp อุณหภูมิจะลดลงเหลือค่าที่ต่ํากว่าของ∆อุณหภูมิที่ตั้งไว้ จากนั้นการ sonication จะเริ่มโดยอัตโนมัติอีกครั้ง คุณสมบัติอันชาญฉลาดนี้ป้องกันการเสื่อมสภาพที่เกิดจากความร้อน
  2. บล็อก VialTweeter สามารถระบายความร้อนล่วงหน้าได้ ใส่บล็อก VialTweeter (เฉพาะ sonotrode ที่ไม่มีทรานสดิวเซอร์!) ลงในตู้เย็นหรือช่องแช่แข็งเพื่อทําให้บล็อกไททาเนียมเย็นลงก่อนจะช่วยเลื่อนอุณหภูมิที่เพิ่มขึ้นในตัวอย่าง ถ้าเป็นไปได้ ตัวอย่างเองก็สามารถระบายความร้อนล่วงหน้าได้เช่นกัน
  3. ใช้น้ําแข็งแห้งเพื่อทําให้เย็นในระหว่างการ sonication ใช้ถาดตื้นที่เต็มไปด้วยน้ําแข็งแห้งแล้ววาง VialTweeter บนน้ําแข็งแห้งเพื่อให้ความร้อนกระจายไปอย่างรวดเร็ว

ค้นหา Ultrasonic Cell Disruptor ที่เหมาะสมที่สุดสําหรับการใช้งาน Lysis ของคุณ

Hielscher Ultrasonics เป็นผู้ผลิตเครื่องรบกวนเซลล์อัลตราโซนิกประสิทธิภาพสูงที่มีประสิทธิภาพสูงและโฮโมจีไนเซอร์ที่มีประสบการณ์มาอย่างยาวนานสําหรับห้องปฏิบัติการระบบเครื่องชั่งแบบตั้งโต๊ะและอุตสาหกรรม ขนาดการเพาะเลี้ยงเซลล์แบคทีเรียเป้าหมายการวิจัยหรือการผลิตและปริมาตรของเซลล์ที่จะประมวลผลต่อชั่วโมงหรือวันเป็นปัจจัยสําคัญในการค้นหาตัวรบกวนเซลล์อัลตราโซนิกที่เหมาะสมสําหรับการใช้งานของคุณ
Hielscher Ultrasonics นําเสนอโซลูชั่นต่างๆสําหรับการ sonication พร้อมกันของหลายตัวอย่าง (มากถึง 10 ขวด) เช่นเดียวกับตัวอย่างมวล (เช่นแผ่นไมโครไทเตอร์ / แผ่น 96 หลุม) เครื่องอัลตราโซนิกในห้องปฏิบัติการแบบโพรบแบบคลาสสิกที่มีระดับพลังงานที่แตกต่างกันตั้งแต่ 50 ถึง 400 วัตต์ไปจนถึงโปรเซสเซอร์อัลตราโซนิกอุตสาหกรรมเต็มรูปแบบที่มีมากถึง 16,000 วัตต์ต่อหน่วยสําหรับการหยุดชะงักของเซลล์เชิงพาณิชย์และการสกัดโปรตีนในการผลิตขนาดใหญ่ เครื่องอัลตราโซนิก Hielscher ทั้งหมดสร้างขึ้นสําหรับการทํางานตลอด 24/7/365 ภายใต้ภาระเต็มที่ ความทนทานและความน่าเชื่อถือเป็นคุณสมบัติหลักของอุปกรณ์อัลตราโซนิกของเรา
homogenizers อัลตราโซนิกดิจิตอลทั้งหมดมีซอฟต์แวร์อัจฉริยะหน้าจอสัมผัสสีและโปรโตคอลข้อมูลอัตโนมัติซึ่งทําให้อุปกรณ์อัลตราโซนิกเป็นเครื่องมือการทํางานที่สะดวกในห้องปฏิบัติการและโรงงานผลิต
แจ้งให้เราทราบว่าเซลล์ชนิดใดปริมาตรเท่าใดความถี่เท่าใดและเป้าหมายใดที่คุณต้องประมวลผลตัวอย่างทางชีวภาพของคุณ เราจะแนะนําตัวก่อกวนเซลล์อัลตราโซนิกที่เหมาะสมที่สุดสําหรับความต้องการในกระบวนการของคุณ

ตารางด้านล่างให้ข้อบ่งชี้เกี่ยวกับความสามารถในการประมวลผลโดยประมาณของระบบอัลตราโซนิกของเราตั้งแต่โฮโมจีไนเซอร์มือถือขนาดกะทัดรัดและเครื่องอัลตราโซนิก MultiSample ไปจนถึงโปรเซสเซอร์อัลตราโซนิกอุตสาหกรรมสําหรับการใช้งานเชิงพาณิชย์:

ปริมาณแบทช์ อัตราการไหล อุปกรณ์ที่แนะนํา
แผ่นไมโครไทเตอร์ 96 หลุม ไม่ UIP400MTP
10 ขวด à 0.5 ถึง 1.5 มล. ไม่ VialTweeter ที่ UP200St
0.01 ถึง 250 มล. 5 ถึง 100 มล. / นาที UP50H
0.01 ถึง 500 มล. 10 ถึง 200 มล. / นาที UP100H
10 ถึง 2000 มล. 20 ถึง 400 มล. / นาที UP200 ฮิต, UP400ST
0.1 ถึง 20L 0.2 ถึง 4L / นาที UIP2000hdt
10 ถึง 100L 2 ถึง 10L / นาที UIP4000hdT
ไม่ 10 ถึง 100L / นาที UIP16000
ไม่ ขนาด ใหญ่ คลัสเตอร์ของ UIP16000

ติดต่อเรา! / ถามเรา!

สอบถามข้อมูลเพิ่มเติม

โปรดใช้แบบฟอร์มด้านล่างเพื่อขอข้อมูลเพิ่มเติมเกี่ยวกับโปรเซสเซอร์อัลตราโซนิกแอพพลิเคชั่นและราคา เรายินดีที่จะหารือเกี่ยวกับกระบวนการของคุณกับคุณและเสนอระบบอัลตราโซนิกที่ตรงกับความต้องการของคุณ!












โฮโมจีไนเซอร์แรงเฉือนสูงอัลตราโซนิกใช้ในห้องปฏิบัติการแบบตั้งโต๊ะนําร่องและการแปรรูปทางอุตสาหกรรม

Hielscher Ultrasonics ผลิตโฮโมจีไนเซอร์อัลตราโซนิกประสิทธิภาพสูงสําหรับการใช้งานผสมการกระจายอิมัลชันและการสกัดในระดับห้องปฏิบัติการนําร่องและอุตสาหกรรม

วรรณกรรม / อ้างอิง



ข้อเท็จจริงที่ควรค่าแก่การรู้

Caenorhabditis elegans

C. elegans เป็นไส้เดือนฝอยใส (พยาธิตัวกลม) ที่มีความยาวประมาณ 1 มม. ซึ่งกินแบคทีเรีย (เช่น. coli) และมีวงจรชีวิตที่ค่อนข้างสั้น ที่ 20 °C สายพันธุ์ในห้องปฏิบัติการของ C. elegans (N2) มีอายุขัยเฉลี่ยประมาณ 2-3 สัปดาห์และเวลาสร้าง 3 ถึง 4 วัน เมื่อ C. elegans เติบโตเป็นจํานวนมาก ซึ่งสามารถทําได้ง่ายภายใต้สภาวะห้องปฏิบัติการที่มีการควบคุมอย่างแม่นยํา ก็สามารถคัดกรองหลักการทํางานของยาใหม่ได้อย่างง่ายดาย ตลอดจนผลกระทบและปฏิสัมพันธ์ภายในกระบวนการโมเลกุลที่ซับซ้อนในโรคของมนุษย์ จีโนมสั้นวงจรชีวิตสั้นและการจัดการที่ง่ายในห้องปฏิบัติการทําให้ C. elegans เป็นสิ่งมีชีวิตแบบจําลองที่เหมาะสําหรับการวิจัยเช่นจีโนมโปรตีโอมิกส์ชีววิทยาพัฒนาการการวิจัยโรคการพัฒนายาเป็นต้น
หนอน Caenorhabditis elegans สามารถเป็นได้ทั้งตัวผู้หรือกระเทย กระเทยมีอวัยวะสืบพันธุ์ทั้งเพศชายและเพศหญิง อย่างไรก็ตามไม่มีหนอนตัวเมีย กระเทยสามารถปฏิสนธิได้เองหรือสามารถผสมพันธุ์กับหนอนตัวผู้ได้ C. elegans สามารถผลิตไข่ได้มากกว่า 1,000 ฟองต่อวัน
เนื่องจาก C. elegans เป็นหนึ่งในสิ่งมีชีวิตที่ง่ายที่สุดที่มีระบบประสาท หนอนไส้เดือนฝอยจึงถูกนํามาใช้ตั้งแต่ปี 1963 เป็นสิ่งมีชีวิตต้นแบบสําหรับการวิจัย เซลล์ประสาทไม่ยิงศักยภาพในการกระทํา และไม่แสดงช่องโซเดียมที่มีแรงดันไฟฟ้า ในระบบนี้ประกอบด้วยเซลล์ประสาท 302 เซลล์ซึ่งรูปแบบได้รับการทําแผนที่อย่างครอบคลุมในสิ่งที่เรียกว่าคอนเนตโตม
ยีนหลายยีนในจีโนม C. elegans มีคู่ที่ใช้งานได้ในมนุษย์ซึ่งทําให้เป็นแบบจําลองที่มีประโยชน์อย่างยิ่งสําหรับโรคของมนุษย์และตัวอย่างเช่นใช้ในการศึกษาชีววิทยาพัฒนาการความชราและปัจจัยที่มีอิทธิพลต่ออายุยืน นอกจากนี้ การกลายพันธุ์ของ C. elegans ยังเป็นแบบจําลองสําหรับโรคของมนุษย์หลายชนิด รวมถึงความผิดปกติทางระบบประสาท (เช่น อัลไซเมอร์) โรคหัวใจแต่กําเนิด และโรคไต
ปัจจัยเหล่านี้ทําให้ C. elegans เป็นแบบจําลองที่มีคุณค่าสูงสําหรับหลายสาขาการวิจัย ด้วยเหตุนี้ C. elegans จึงเป็นสิ่งมีชีวิตหลายเซลล์ตัวแรกที่มีการจัดลําดับจีโนมทั้งหมด จีโนมมียีนเข้ารหัสโปรตีนประมาณ 20,470 ยีน ประมาณ 35% ของยีน C. elegans มีโฮโมล็อกของมนุษย์ ยีนของมนุษย์ได้รับการแสดงซ้ําแล้วซ้ําเล่าว่าสามารถแทนที่ C. elegans homologs เมื่อนําเข้าสู่ C. elegans ในทางกลับกันยีน C. elegans จํานวนมากสามารถทํางานได้คล้ายกับยีนสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม

อายุขัยของ C. elegans ประมาณ 3 สัปดาห์ และประกอบด้วยหกช่วงชีวิต ได้แก่ การสร้างตัวอ่อน (ระยะไข่) ระยะตัวอ่อนสี่ระยะ (L1 ถึง L4) และระยะตัวเต็มวัย ไส้เดือนฝอยฟักออกมาจากไข่เป็นตัวอ่อน L1 ประกอบด้วยเซลล์ 560 เซลล์ การเจริญเติบโตในแต่ละระยะตัวอ่อนเกิดขึ้นโดยการแบ่งเซลล์และโดยการเจริญเติบโตของเซลล์ การลอกคราบหนังกําพร้าจะคั่นแต่ละระยะของตัวอ่อน หากสภาพแวดล้อมที่รุนแรงส่งสัญญาณไปยังหนอนที่กําลังพัฒนาว่าเงื่อนไขไม่น่าจะสนับสนุนภาวะเจริญพันธุ์ของผู้ใหญ่ C. elegans สามารถเปลี่ยนแปลงพัฒนาการและสร้างระยะตัวอ่อน L3 ทางเลือก ซึ่งตัวอ่อนจะเข้าสู่ระยะ dauer ในสภาวะนี้ สัตว์จะทนต่อความเครียดได้เป็นพิเศษและมีอายุยืนยาว และสามารถอยู่รอดได้สามถึงเก้าเดือน ตัวอ่อน Dauer แยกตัวเองออกจากความทุกข์ยากโดยการปิดผนึกทั้งโพรงแก้มและทวารหนัก หดตัวของลําไส้ และเปิดโปรแกรมทางพันธุกรรมที่ขึ้นกับ daf-16/FOXO ซึ่งเหนือสิ่งอื่นใด นําไปสู่การแสดงออกของหนังกําพร้าเฉพาะ dauer (อ้างอิง Henderson et al., 2006)

ตัวอ่อน C. elegans Dauer

ตัวอ่อน Dauer เป็นคําสําหรับตัวอ่อนไส้เดือนฝอยซึ่งเข้าสู่ขั้นตอนการพัฒนาทางเลือก คําว่า "ตัวอ่อน Dauer" ใช้โดยเฉพาะสําหรับหนอนในตระกูล rhabditids รวมถึง Caenorhabditis elegans คําว่า "Dauer" มีต้นกําเนิดมาจากภาษาเยอรมันและหมายถึง "ระยะเวลา” ในความหมายของ “ช่วงเวลาหนึ่ง" ตัวอ่อน Dauer เข้าสู่ภาวะหยุดนิ่งและสามารถอยู่รอดได้ในสภาวะที่เลวร้าย หากและเมื่อตัวอ่อนเข้าสู่ระยะ dauer ขึ้นอยู่กับสภาพแวดล้อม ตัวอ่อน Dauer ได้รับการศึกษาอย่างกว้างขวางในชีววิทยา เนื่องจากตัวอ่อนแสดงความสามารถพิเศษในการอยู่รอดในสภาพแวดล้อมที่รุนแรงและมีชีวิตอยู่เป็นระยะเวลานาน ตัวอย่างเช่น ตัวอ่อน C. elegans dauer สามารถอยู่รอดได้นานถึงสี่เดือน ซึ่งนานกว่าอายุขัยเฉลี่ยประมาณสามสัปดาห์มากในช่วงพัฒนาการสืบพันธุ์ตามปกติ

ภาพรวมของ C. elegans Life Cycle

การพัฒนา C. elegans ในสภาพแวดล้อมที่เอื้ออํานวย:
Caenorhabditis elegans (C. elegans) แสดงความก้าวหน้าของพัฒนาการที่แตกต่างกันภายใต้สภาพแวดล้อมที่เอื้ออํานวยและไม่เอื้ออํานวย
 
C. elegans ตอบสนองต่อสภาวะที่เอื้ออํานวย:
ในสภาวะที่เอื้ออํานวยพยาธิตัวกลมด้วยกล้องจุลทรรศน์ Caenorhabditis elegans (C. elegans) จะเป็นไปตามเส้นทางการพัฒนาที่กําหนดไว้อย่างดี ไส้เดือนฝอยมักจะผ่านวงจรชีวิตค่อนข้างเร็วเมื่อสภาพแวดล้อมเหมาะสมที่สุดโดยทั่วไปที่อุณหภูมิระหว่าง 15°C ถึง 20°C

  1. พัฒนาการสืบพันธุ์: C. elegans เริ่มต้นวงจรชีวิตเป็นตัวอ่อน จากนั้นจะดําเนินไปตามระยะตัวอ่อนที่แตกต่างกันสี่ระยะ โดยย่อว่า L1 ถึง L4
  2. เวทีผู้ใหญ่: หลังจากเสร็จสิ้นระยะตัวอ่อนทั้งสี่ระยะ C. elegans จะถึงระยะโตเต็มวัยในเวลาเพียง 3 ถึง 5 วัน ในขั้นตอนนี้พวกมันสามารถสืบพันธุ์และมีชีวิตอยู่ต่อไปอีก 2 ถึง 3 สัปดาห์ขึ้นอยู่กับปัจจัยแวดล้อม

 
C. elegans ตอบสนองต่อสภาวะที่ไม่เอื้ออํานวย:

อย่างไรก็ตาม C. elegans เป็นสิ่งมีชีวิตที่ยืดหยุ่นและสามารถปรับตัวให้เข้ากับสภาวะที่ไม่เอื้ออํานวยผ่านกระบวนการที่เรียกว่าการก่อตัวของดาวเออร์

  1. การก่อตัวของ Dauer: เมื่อสภาพแวดล้อมไม่เอื้ออํานวย เช่น ความแออัด การจัดหาอาหารที่ จํากัด หรืออุณหภูมิสูง C. elegans สามารถเข้าสู่ระยะตัวอ่อนที่สามที่ไม่ธรรมดาที่เรียกว่า “ดาวเออร์,” ย่อเป็น L3d
  2. การเอาชีวิตรอดของ Dauer: ตัวอ่อน Dauer ได้รับการดัดแปลงเป็นพิเศษเพื่อความอยู่รอดในสภาวะที่เลวร้าย พวกเขาสามารถมีชีวิตอยู่ได้หลายเดือนในระยะนี้ ประหยัดพลังงานและทนต่อสภาพแวดล้อมที่ท้าทาย

 

การฟื้นตัวในสภาพแวดล้อมที่เอื้ออํานวย:
แง่มุมที่โดดเด่นของ C. elegans คือความสามารถในการกลับสู่วงจรชีวิตปกติเมื่อสภาวะดีขึ้น

  1. กลับสู่สภาวะเอื้ออํานวย: เมื่อตัวอ่อน C. elegans dauer พบกับสภาวะที่เอื้ออํานวยอีกครั้ง เช่น อาหารที่เพียงพอ ความหนาแน่นของประชากรที่ลดลง และอุณหภูมิที่เหมาะสม พวกมันจะสัมผัสได้ถึงการเปลี่ยนแปลงของสิ่งแวดล้อม
  2. การฟื้นตัวและการสืบพันธุ์: เพื่อตอบสนองต่อเงื่อนไขที่ดีขึ้นเหล่านี้ตัวอ่อน dauer ผ่านกระบวนการที่เรียกว่า “การฟื้นตัว” ในระหว่างการฟื้นตัว พวกมันจะเปลี่ยนกลับไปสู่ระยะตัวอ่อนและในที่สุดก็กลายเป็นตัวเต็มวัยที่สืบพันธุ์และมีอายุขัยปกติ

 
ความสามารถในการสลับไปมาระหว่างขั้นตอนพัฒนาการเพื่อตอบสนองต่อสภาพแวดล้อมเป็นแง่มุมพิเศษของชีววิทยา C. elegans ช่วยให้พวกมันอยู่รอดและสืบพันธุ์ได้อย่างมีประสิทธิภาพในสภาวะที่หลากหลายทําให้พวกมันเป็นสิ่งมีชีวิตต้นแบบที่มีคุณค่าสําหรับการวิจัยทางวิทยาศาสตร์โดยเฉพาะอย่างยิ่งในการศึกษาพัฒนาการพันธุศาสตร์และความชรา

เรายินดีที่จะพูดคุยเกี่ยวกับกระบวนการของคุณ

Let's get in contact.