Hielscher tecnologia de ultra-som

Preparação Ultrassônica de Amostras de C. Elegans

C. elegans, um verme nematode, é um organismo modelo amplamente utilizado na biologia. A preparação da amostra antes da análise requer lise, extração de proteínas e lipídios, bem como fragmentação de RNA, que pode ser realizada de forma confiável através da sônica. Os disruptores de células ultrassônicas são dispositivos confiáveis, sofisticados e fáceis de usar para a preparação rápida de amostras de C. elegans.

Preparação Ultrassônica de Amostras de C. Elegans

C. elegans são lombrigas, que são amplamente utilizadas em laboratórios de pesquisa para investigar genômica, biologia do desenvolvimento e doenças. Muitos genes no genoma de C. elegans têm contrapartes funcionais em humanos. Assim, o verme nematoides é um modelo extremamente útil para doenças humanas. Outras vantagens para o amplo uso de C. elegans são seu cultivo fácil e barato em placas contendo bactérias (por exemplo, E. coli), sua transparência, manuseio conveniente, bem como a possibilidade de congelar e armazenar os vermes por um período mais longo.
A análise de proteínas e lipídios são procedimentos regulares em laboratórios e a preparação de amostras ultrassônicas é o método estabelecido para lise C. elegans nematodes em todos os estágios de desenvolvimento (ou seja, embriões, larvas L1-L4, adultos). Uma vez que C. elegans também é usado como sistema de expressão proteica para superexpressar proteínas-alvo, é necessário um método confiável, reprodutível de lise e extração de proteínas, que dá altos rendimentos de proteínas. Sistemas de interrupção e extração de células ultrassônicas estão disponíveis como homogeneizadores do tipo sonda e como ultrassonicadores multi-amostras. Atendendo à preparação de amostras conveniente e a todos os tipos de números de tamanhos amostrais, a Hielscher Ultrasonics tem o disruptor de células ultrassônicas ideal para o seu procedimento de laboratório.
C. elegans is a widely used model organism in biological research. Ultrasonic lysis is a sophisticated, reliable, reproducible and rapid technique to prepare high-quality protein extracts from C. elegans.

Ultrassônico C. elegans Lysis para

  • Preparação de homogeneizadores de vermes
  • extracção de proteínas
  • Extração lipídica
  • Quantificação de proteínas
  • Imunoprecipitação
  • western blot
  • Extração de RNA
  • Ensaios enzimáticos
O sonotrode MTP-24-8-96 tem oito sondas ultrassônicas para a sônica dos poços de placas de microtiter.

O sonotrode MTP-24-8-96 tem oito sondas ultrassônicas para a sônica dos poços de placas de microtiter.

Pedido de informação





Protocolos ultrassônicos para interrupção e lise de C. Elegans

A homogeneização ultrassônica e a lise de C. elegans e a subsequente extração de proteínas e lipídios podem ser realizadas utilizando procedimentos variados usando diferentes buffers de homogeneização e lise etc. Todos os protocolos de lise têm em comum que as amostras devem ser continuamente mantidas no gelo para evitar a degradação da proteína. Abaixo, apresentamos alguns protocolos de lise ultrassônica e extração confiáveis e rápidos para a preparação de amostras de C. elegans contendo proteínas ou lipídios de alta qualidade.

Vantagens da Ultrassônica C. elegans Lysis

  • confiável
  • reprodutível
  • precisamente controlado pela temperatura
  • controle de processo confiável
  • método suave
  • fácil de aplicar
  • seguro

Extração de proteína ultrassônica de C. elegans Amostras

A lise ultrassônica e a extração de proteínas de vermes C. elegans podem ser realizadas usando vários protocolos. Abaixo apresentamos alguns protocolos de lise confiáveis e rápidas para resultados de extração de proteínas reprodutíveis.

Preparação Rápida do Extrato Citosolico de C. elegans Worms por Sonication

Com o seguinte protocolo você pode preparar c. elegans lysates em menos de 30 minutos.
Coleção de C. elegans
Escolha os vermes C. elegans desejados em um soro fisco tamponado de fosfato de tubo de 1,5ml (PBS) ou lave-os de uma placa com PBS de 1,5ml. Centrifugar a 1min a 2000rpm para pelota. Mantenha as amostras o tempo todo no gelo.
Em seguida, lave os vermes duas vezes com PBS.
Depois, lave os vermes duas vezes com ddH2O.
Resuspense os vermes em pelo menos 500ul de tampão de homogeneização (HB). As amostras de vermes estão prontas para a lise ultrassônica.
Para maior qualidade do extrato de proteína, você pode querer reduzir a contaminação bacteriana lavando os vermes por 5min cada em PBS e água ultra-pura estéril (ddH2O) ou realizar flutuação de sacarose. Mantenha as amostras de vermes continuamente no gelo.

Protocolo ultrassônico C. elegans Lysis

  • Certifique-se de preparar o ultrassônico antecipadamente para que o homogeneizador ultrassônico esteja pronto para uso (sonda montada, programa de sônica pré-definido).
  • Ultrasonicator UP200Ht (200 watts, 26kHz) with microtip S26d2 for the preparation of biological samplesSe o seu ultrassônico estiver em stand-mounted, coloque o banho de gelo com seus tubos de amostra sob a sonda ultrassônica e insira a sonda ultrassônica no tubo de 1,5ml.

  • Para c. elegans lysis com o UP200St ou UP200Ht, a ultrassonização deve ser realizada usando uma microtipa (por exemplo, sonda de 2mm S26d2; ver imagem à esquerda) a 40% de amplitude para 1seg com pausas de 30seg no meio. 5 ciclos de sônica para cada 1 segundo com pausas de 30seg são ideais para c. elegans lysis. Se você realizar a lise pela primeira vez, você pode verificar a progressão da lise em pequenas alíquotas da amostra após cada pulso usando um microscópio.
  • Lysis é concluída com sucesso quando os vermes são interrompidos. A supersenicação resulta na quebra de núcleos e torna-se visível quando a amostra fica viscosa ou espumas. Para evitar a degradação da amostra, use mais pulsos, se necessário. Não aumente o tempo de cada ciclo de pulso ultrassônico para obter extratos proteicos de alta qualidade.
  • Lise celular clara por centrifugação dos vermes ultrasonicamente lysed a 14.000rpm por 10min a 4ºC.
  • Em seguida, transfira o supernatante para um tubo fresco e prepare-se para imunoprecipitação ou outros ensaios.

Nota para buffer de homogeneização: Prepare o tampão de homogeneização para o protocolo de lise ultrassônica acima da seguinte forma:

  • 15 mM Hepes pH 7.6 – 15 ml de 0,5 M
  • 10 mM KCl – 2,5 ml de 2 M
  • 1,5 mM MgCl2 – 0.75 ml de 1 M
  • 0.1 mM EDTA – 100 ul de 0,5 M
  • 0.5 mM EGTA – 2,5 ml de 0,1 M
  • 44 mM sacarose – 14,7 ml de 50 %
  • Adicione antes de usar: 1mM DTT – 1000x de 1M
  • mais um inibidor de protease

Lise ultrassônica de C. elegans para ensaios de purificação de afinidade quantitativa

Os embriões C. elegans (∼2 milhões por réplica) foram recém-colhidos em triplicado biológico por branqueamento de hermafroditas jovens gravid e sonicados no gelo (ciclo: 0,5 s, amplitude: 40-45%, 5 traçados/sessão, 5 sessões, intervalo entre as sessões: 30 s; Processador ultrassônico UP200S com micro-ponta S26d2 (Hielscher Ultrasonics GmbH)) em tampão de lise (volume total: ∼600 μl; 50 mm Tris-HCl, pH 7.4, 100 mm KCl, 1 mm MgCl2, 1 mm EGTA, 1 mm DTT, 10% glicerol, mistura inibidora de protease, 0,1% Nonidet P-40 Substituto). Após a sônicação, o Substituto nãoidet P-40 foi adicionado a 1% e os lises foram incubados com rotação frontal sobre cauda a 4°C por 30 min, seguido por centrifugação a 20.000 × g para 20 min a 4°C. O lysato limpo foi então aspirado sem perturbar a camada lipídica superior e dividido pela metade nas contas anti-GFP agarose ou nas contas de controle bloqueadas (40-50 μl). Após rotação de cauda de cabeça a 4°C por 60-90 min, as contas foram lavadas uma vez com tampão de lise contendo 0,1% Substituto Nãoidet P-40, seguido por duas vezes de lavagem em tampão I (25 mm Tris-HCl, pH 7.4, 300 mm NaCl, 1 mm MgCl2) ou tampão II (1 mm Tris-HCl, pH 7.4, 150 mm NaCl, 1 mm MgCl2) ou ambos. Para pull-downs GFP:MBK-2, dois experimentos separados foram realizados utilizando condições de lavagem diferentes. As proteínas foram elucidadas por agitação orbital em 50 μl de 6 m de ureia/2 M de tiarea à temperatura ambiente. Para os experimentos de recuo mbk-1::GFP, as proteínas foram eludidas duas vezes por agitação em 50μl de cloreto de guanidinium de 8 m a 90°C, seguida pela precipitação do etanol. Amostras de proteínas elucidas foram então digeridas em solução.
(cf. Chen et al., 2016)

VialTweeter at the ultrasonic processor UP200ST

VialTweeter unidade de preparação multi-amostra para a sônica simultânea de 10 tubos de ensaio.

Homogeneização e Lise de Vermes Ultrassônicos

Para o procedimento de lise e extração de proteínas, 30.000 nemotodos da etapa relevante foram coletados por amostra e lavados em S-basal gelado, concentrados por centrifugação a 1.500 rpm por 2 min., lavados seis vezes com s-basal gelado para remover bactérias residuais e, em seguida, armazenados no gelo até estarem prontos para uso. Para extração de proteínas, vermes gravid-adultos foram autorizados a formar uma pelota compacta após a última lavagem S-basal. As pelotas de verme foram então resuspended em 1 ml de tampão de extração gelado [fosfato de potássio de 20 mM, pH 7.4, 2mM EDTA, 1% Triton-X-100, inibidores de protease (Sigma P2714)] e processado imediatamente.
∼ 30.000 vermes gravid-adultos (correspondentes a ∼100 mg de peso molhado), foram sonicados no gelo usando um ultrassonicador tipo sonda (por exemplo, UP50H com microtip MS2) com 40% de amplitude para 10 ciclos de 3 segundos em diante, 30 seg de desconto, em 1 ml de tampão de extração gelada. (cf. Baskharan et al. 2012)

Extração lipídica ultrassônica de C. elegans

Na lipidômica, ramo da metabolômica, o complemento lipídico dos sistemas biológicos é caracterizado e analisado. C. elegans são amplamente utilizados em lipidômicas para investigar a interação de lipídios metabólicos e seus efeitos na saúde e na vida útil.
A lise ultrassônica e a extração são usadas para liberar lipídios, como esfingolipidos de embriões de C. elegans, larvas e vermes adultos. A ultrassônica é usada para preparar homogêneos de vermes e, posteriormente, extrair os lipídios da amostra.
Protocolo para Extração Lipídica Ultrassônica de C. elegans
Descongele a pelota C. elegans no gelo e resuspend com ultraágua de 0,5 ml. 
Sonicate as amostras de C. elegans em tubos de ensaio de 1,5mL, mantendo as amostras continuamente no gelo.
A sônica pode ser realizada usando um sonda-ultrassonicstor, como o UP200Ht, a unidade de preparação de amostras ultrassônicas VialTweeter (sônica simultânea de 10 amostras) ou a UIP400MTP (para a sônica de placas multi-poço, como placas de 96 poços). Para a lise ultrassônica com o UP200Ht use a micro-ponta S26d2. Pré-ajuste o modo de ciclo ultrassônico no menu digital. Ajuste a amplitude para 10% e o modo de ciclo de sônica de 2 segundos de pulsos de 20 ciclos com uma pausa de 30 segundos entre cada explosão de pulsação ultrassônica.
Transfira os supernantes para tubos de vidro com tampa de parafuso. 
Realize a extração de folch adicionando 1 ml de ultraagua a cada tubo de vidro, seguido pela adição de 6 ml de mistura de clorofórmio/metanol (razão = 2:1) a cada tubo de vidro.
Vórtice cada tubo de vidro por 30 segundos por 4 vezes. 
Centrifugar os tubos a 1.258 x g por 15 min (Eppendorf, 5810 R) para melhorar ainda mais a separação de fase. 
Transfira a fração hidrofóbica inferior para um tubo de vidro limpo por uma pipeta pasteur de vidro. 
Seque a fração hidrofóbica inferior sob o fluxo de nitrogênio em um evaporador de nitrogênio. 
Guarde a pelota seca em um congelador de -80 °C até usar.

Preparação ultrassônica de Lysates de Vermes

Lysate de vermes: Vermes de estágio L4 foram colhidos e lavados três vezes com tampão M9 (42,26 mM Na2HPO4, 22,04 mM KH2Po4, 85,56 mM NaCl, e 0,87 mM MgSO4), a fim de remover todas as bactérias. Depois de remover o máximo possível de buffer M9, os worms foram resuspengados em tampão de lise: 50 mM HEPES, 50 mM KCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 5 mM fosfato β-glicerol, 0,1% (v/v) Triton X-100, 50 mM de flúor de sódio, 1 mM de ortovanadato de sódio, pirofosfato de sódio de 0,2 mM. Os vermes foram congelados em nitrogênio líquido e descongelados a 37°C por três vezes, então os vermes foram sonicados em gelo seco com uma unidade de VialTweeter ultrassônico para a preparação simultânea de 10 tubos de amostra. A sônica foi realizada com 50% de amplitude em 10 ciclos de 2 segundos. com pausa de 30 segundos entre as rajadas de sônica. Em seguida, as amostras foram centrifugadas a 12.000 rpm a 4°C por 15 min. O supernante foi coletado e armazenado a -70°C. Uma alíquota foi usada para quantificação de proteínas pelo ensaio de Bradford.
Determinação da glutatione total, GSH e GSSG: Para quantificação de glutationa, os lysatos e a determinação foram feitos no mesmo dia. As larvas L4 alimentadas com glicose foram colhidas e lavadas com tampão M9 três vezes. Depois de remover o máximo possível do tampão M9, os vermes foram resuspendados em ácido metafosfórico gelado (5% c/v), então os vermes foram sonicados no gelo com um VialTweeter ultrassônico a 50% de amplitude em dez ciclos de sônica de 2 segundos com 30 segundos de pausa entre cada ciclo. Depois, centrifused a 12000 rpm às 4:00 por 15 min.
(cf. Alcántar-Fernández et al., 2018)

C. elegans Sample Prep antes de Imunoprecipitação e Inchaço Ocidental

Em suma, para extratos embrionários, as larvas C. elegans L1 foram cultivadas em culturas líquidas de grande escala S-média até a idade adulta. Os embriões foram coletados utilizando o método de alvejante padrão e suspensos em tampão de lise (50 mM Tris, pH 7,5, 100 mM KCl, 1 mM EDTA, 1 mM MgCl2, 8,7% glicerol, 0,05% NP-40, 1􏰅 Coquetel Inibidor de Protease, e 1􏰅 Coquetel Inibidor de Fosfatase I e II), rapidamente congelado em nitrogênio líquido, e lised por disrupção celular ultrassônica usando um ultrassônico com microator como o UP200Ht com S26d2 para 10 pulsos acima de 10 s a 30% de amplitude. Se um número maior de amostras deve ser preparado o ultrassônico VialTweeter ou recomenda-se o MultiSample-Ultrasonicator UIP400MTP para placas de bem. Após a sônicação, os extratos foram pré-limpos por centrifugação a 30.000g por 20 min a 4°C. O extrato pré-limpo (300μg de proteína total) foi incubado com 40μ􏰂g de anticorpo anti-CDC-25.1 de afinidade-purificado (este estudo) inter-ligado à proteína A-agarose, ou como controle, uma quantidade semelhante de imunoglobulina de coelho (Ig)G cruzadamente ligada à proteína A-agarose foi usada em um volume total de 200μl de tampão de lise contendo 1% NP-40, a inclusão da qual reduziu a vinculação inespecífica de proteínas à matriz. As amostras foram giradas por 1h a 4°C, as contas foram lavadas três vezes com tampão de lise, e elucidadas com 30μl de glicina/HCl e 200 mM NaCl, pH 2.2. Após a imunoprecipitação, os eluatos foram diluídos em 30μ􏰂l de tampão amostra de SDS, aquecido a 95°C por 4 min, e tipicamente 3% do total para entrada e 30% para os eluatos foram aplicados ao SDS-PAGE seguido por manchas ocidentais com anti-CDC-25.1 (1:400), anti-LIN-23 (1:750), anti-ubiquitina (1:1000), anti-GSK3􏰁 (1:500) ou anticorpos anti-􏰁β-actin (1:2000). Quando os extratos não foram submetidos à imunoprecipitação, a mesma quantidade de proteína total derivada desses extratos foi resuspended em tampão amostral de SDS, aquecido a 95°C, e diretamente aplicado ao SDS-PAGE e analisado por mancha ocidental. (cf. Segref et al. 2020)

Sonda de tipo insonifier UP200St para lise

Disruptor de células ultrassônicas UP200St com micro-ponta S26d2 para lise e extração de proteínas

Lysis ultrassônica sob controle de temperatura de prescisão

The VialTweeter is a MultiSample Ultraonicator that allows for reliable sample preparation under precisely controlled temperature conditions.O controle preciso e confiável da temperatura é crucial ao manusear amostras biológicas. Altas temperaturas iniciam a degradação de proteínas induzidas termicamente em amostras.
Como todas as técnicas mecânicas de preparação de amostras, a sônica cria calor. No entanto, a temperatura das amostras pode ser bem controlada ao usar o VialTweeter. Apresentamos várias opções para monitorar e controlar a temperatura de suas amostras enquanto as preparamos com o VialTweeter e o VialPress para análise.

  1. Monitorando a temperatura da amostra: O processador ultrassônico UP200St, que dirige o VialTweeter, é equipado com um software inteligente e um sensor de temperatura plugável. Conecte o sensor de temperatura no UP200St e insira a ponta do sensor de temperatura em um dos tubos de amostra. Através do touch-display colorido digital, você pode definir no menu do UP200St uma faixa de temperatura específica para sua sônica amostra. O ultrassonicador pára automaticamente quando a temperatura máxima for atingida e pausará até que a temperatura da amostra seja reduzida ao menor valor da temperatura definida ∆. Em seguida, a sônica começa automaticamente novamente. Este recurso inteligente evita a degradação induzida pelo calor.
  2. O bloco VialTweeter pode ser pré-refrigerado. Coloque o bloco Deserção (apenas o sonotrodo sem transdutor!) na geladeira ou no congelador para pré-resfriar o bloco de titânio ajuda a adiar o aumento da temperatura na amostra. Se possível, a amostra em si pode ser pré-resfriada também.
  3. Use gelo seco para esfriar durante a sônicação. Use uma bandeja rasa cheia de gelo seco e coloque o Frascotweeter no gelo seco para que o calor possa se dissipar rapidamente.

Encontre o disruptor de células ultrassônicas ideal para o seu aplicativo de lise

A Hielscher Ultrasonics é uma fabricante experiente de longo prazo de disruptores de células ultrassônicas de alto desempenho e homogeneizadores para laboratórios, sistemas de bancada e escala industrial. O tamanho da cultura celular bacteriana, sua pesquisa ou objetivo de produção e o volume de células para processar por hora ou dia são fatores essenciais para encontrar o disruptor de células ultrassônicas certo para sua aplicação.
A Hielscher Ultrasonics oferece várias soluções para a sônica simultânea de várias amostras (até 10 frascos) bem como amostras de massa (ou seja, placas microtiter / placas de 96 poços), o clássico ultrassônico de laboratório tipo sonda com diferentes níveis de potência de 50 a 400 watts para processadores ultrassônicos totalmente industriais com até 16.000watts por unidade para interrupção de células comerciais e extração de proteínas em grande produção. Todos os ultrassonicadores Hielscher são construídos para a operação 24/7/365 sob carga total. Robustez e confiabilidade são características principais de nossos dispositivos ultrassônicos.
Todos os homogeneizadores ultrassônicos digitais são equipados com software inteligente, display de toque colorido e protocolo automático de dados, que fazem do dispositivo ultrassônico uma ferramenta de trabalho conveniente em instalações de laboratório e produção.
Deixe-nos saber, que tipo de células, que volume, com que frequência e com que alvo você tem para processar suas amostras biológicas. Recomendaremos o disruptor de células ultrassônicas mais adequado para as necessidades do seu processo.

A tabela abaixo dá-lhe uma indicação da capacidade aproximada de processamento de nossos sistemas ultrassônicos de homogeneizadores compactos portáteis e Ultrasonicadores MultiSample para processadores ultrassônicos industriais para aplicações comerciais:

Volume batch Quociente de vazão Dispositivos Recomendados
Placas de 96 poços / microtiter n / D. UIP400MTP
10 frascos a 0,5 a 1,5mL n / D. VialTweeter em UP200St
0.01 a 250mL 5 a 100mL/min UP50H
0.01 a 500mL 10 a 200 mL / min UP100H
10 a 2000 mL 20 a 400 mL / min UP200Ht, UP400St
0.1 a 20L 00,2 a 4 L / min UIP2000hdT
10 a 100L 2 de 10L / min UIP4000hdT
n / D. 10 a 100L / min UIP16000
n / D. maior aglomerado de UIP16000

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Por favor, use o formulário abaixo para solicitar informações adicionais sobre processadores ultrassônicos, aplicativos e preço. Ficaremos felizes em discutir seu processo com você e oferecer-lhe um sistema ultrassônico atendendo aos seus requisitos!









Por favor, note que o nosso Política de Privacidade.


Ultrasonic high-shear homogenizers are used in lab, bench-top, pilot and industrial processing.

A Hielscher Ultrasonics fabrica homogeneizadores ultrassônicos de alto desempenho para aplicações de mistura, dispersão, emulsificação e extração em escala laboratoria, piloto e industrial.

Literatura / Referências



Fatos, vale a pena conhecer

Caenorhabditis elegans

C. elegans é um nematode transparente de vida livre (lombriga) com cerca de 1 mm de comprimento, que se alimenta de bactérias (por exemplo, E. coli) e tem um ciclo de vida relativamente curto. A 20 °C, a cepa laboratorial de C. elegans (N2) tem uma vida útil média em torno de 2-3 semanas e um tempo de geração de 3 a 4 dias. Quando c. elegans são cultivados em grande número, o que pode ser facilmente feito sob condições de laboratório precisamente controladas, eles podem ser facilmente rastreados para o princípio de trabalho de novas drogas, bem como seus efeitos e interação dentro de processos moleculares complexos em doenças humanas. O genoma curto, o ciclo de vida curto e o manuseio simples em ambientes laboratoriais fazem de C. elegans um organismo modelo ideal para pesquisas como genômica, proteômica, biologia do desenvolvimento, pesquisa de doenças, desenvolvimento de medicamentos etc.
Caenorhabditis elegans vermes podem ser machos ou hermafroditas. Hermafroditas têm órgãos reprodutivos masculinos e femininos. No entanto, vermes fêmeas não existem. Hermafroditas podem se auto-fertilizar ou também podem procriar com vermes machos. C. elegans pode produzir mais de 1.000 ovos todos os dias.
Como C. elegans é um dos organismos mais simples com um sistema nervoso, o verme nematoides é usado desde 1963 como um organismo modelo para pesquisa. Os neurônios não disparam potenciais de ação e não expressam nenhum canal de sódio fechado por tensão. Na hermafrodita, este sistema compreende 302 neurônios do padrão que foi amplamente mapeado, no que é conhecido como um connectome.
Muitos dos genes do genoma de C. elegans têm contrapartes funcionais em humanos, o que o torna um modelo extremamente útil para doenças humanas e é, por exemplo, usado para estudar biologia do desenvolvimento, envelhecimento e fatores que influenciam a longevidade. Além disso, os mutantes C. elegans fornecem modelos para muitas doenças humanas, incluindo distúrbios neurológicos (por exemplo, Alzheimer), doença cardíaca congênita e doença renal.
Esses fatores fizeram de C. elegans um modelo altamente valioso para muitos campos de pesquisa. Consequentemente, C. elegans foi o primeiro organismo multicelular a ter todo o seu genoma sequenciado. O genoma contém cerca de 20.470 genes codificadores de proteínas. Cerca de 35% dos genes C. elegans têm homólogos humanos. Notavelmente, genes humanos têm sido mostrados repetidamente para substituir seus homólogos C. elegans quando introduzidos em C. elegans. Por outro lado, muitos genes C. elegans podem funcionar de forma semelhante aos genes dos mamíferos.

A vida útil de C. elegans é de aproximadamente 3 semanas e consiste em seis estágios de vida: embriogênese (estágio do ovo), quatro estágios larvais (L1 a L4) e o estágio adulto. Os nematoides eclodem de ovos como larvas L1 compostas por 560 células. O crescimento durante cada estágio larval ocorre por divisão celular e por hipertrofia celular. A fusão cuticular pontua cada estágio larval. Se condições ambientais severas sinalizarem para o verme em desenvolvimento que as condições são improváveis de suportar a fertilidade adulta, C. elegans pode alterar seu desenvolvimento e formar um estágio larval L3 alternativo, onde as larvas entram em um estágio dauer. Neste estado, os animais são extraordinariamente tolerantes ao estresse e longevos e podem sobreviver de três a nove meses. Larvas dauer isolam-se das adversidades selando suas cavidades bucais e anais, encolhendo seu intestino, e ligando um programa genético dependente de daf-16/FOXO que, entre outras coisas, leva à expressão de uma cutícula específica dauer. (cf. Henderson et al., 2006)

C. elegans Dauer Larvae

Larvas dauer é o termo para larvas de nematoides, que entrou em um estágio alternativo de desenvolvimento. o termo "Larvas dauer" é particularmente usado para vermes da família de rabditids, incluindo caenorhabditis elegans. A palavra "Dauer" é de origem alemã e significa a "duração"” no significado de “um período de tempo". Larvas dauer entram em um tipo de estase e podem sobreviver a condições adversas. Se e quando uma larva entra na fase dauer depende das condições ambientais. As larvas dauer são extensivamente estudadas em biologia porque as laravae mostram uma extraordinária capacidade de sobreviver a ambientes severos e viver por longos períodos de tempo. Por exemplo, as larvas de C. elegans dauer podem sobreviver até quatro meses, muito mais do que sua vida útil média de cerca de três semanas durante o desenvolvimento reprodutivo normal.