Lipossomas via método de evaporação de fase reversa usando sonicação

Os lipossomas são nanocarreadores versáteis usados na administração de medicamentos devido à sua biocompatibilidade e capacidade de encapsular medicamentos hidrofílicos e hidrofóbicos. O método de evaporação de fase reversa (também conhecido como método de emulsificação ou método de evaporação de solvente) é uma técnica proeminente para a preparação de lipossomas, oferecendo alta eficiência de encapsulamento. Este artigo enfoca a preparação de lipossomas por meio do método de evaporação de fase reversa aprimorado por sonicação do tipo sonda, destacando as etapas processuais, benefícios e possíveis aplicações em sistemas de administração de medicamentos.

Os lipossomas são estruturas vesiculares constituídas por uma ou mais bicamadas lipídicas, capazes de encapsular compostos hidrofílicos e hidrofóbicos. Sua estrutura única os torna ideais para a administração direcionada de medicamentos. O método de evaporação de fase reversa (também conhecido como emulsificação ou método de evaporação por solvente) é uma técnica bem estabelecida para a preparação de lipossomas. Nos parágrafos a seguir, apresentamos os benefícios do método de evaporação de fase reversa usando sonicação do tipo sonda, que é conhecido por melhorar a emulsificação, a eficiência do encapsulamento e a redução do tamanho lipossomal.

Metodologia de Preparação de Lipossomas via Método de Evaporação de Fase Reversa

A formação de lipossomas pelo método de evaporação reversa usando sonicação envolve a dissolução de lipídios em uma mistura de solvente orgânico de clorofórmio e metanol (2:1 v/v), o que favorece a formação de micelas invertidas. Um tampão aquoso é então adicionado a esta mistura. A solução combinada é sonicada, por exemplo, usando um sonicador do tipo sonda como o UP400ST, para criar uma microemulsão de água em óleo. O solvente orgânico é então evaporado usando um evaporador rotativo, resultando em um gel viscoso que eventualmente colapsa para formar lipossomas. O grande núcleo aquoso das bolhas de microemulsão promove o aprisionamento de moléculas hidrofílicas, levando a géis lipossomais que exibem liberação controlada e um bom perfil de permeação. Finalmente, os lipossomas são reduzidos a um tamanho uniforme usando o sonicador.

Formação de lipossomas via método de evaporação reversa usando sonicação

Protocolo / Instruções passo a passo:

1. Pesar e dissolver lipídios:
   Pesar com precisão um total de 40 mg de L-α-fosfatidilcolina e colesterol em uma proporção de massa de 4:1 ou 7:3.
   Dissolver os lípidos pesados em 10 ml de uma mistura de clorofórmio/metanol (4:1 v/v) num balão de fundo redondo.
2. Forma de filme lipídico:
   Encaixar o balão de fundo redondo a um evaporador rotativo.
   Girar o balão a 8 x g a 40 °C em condições de vácuo até formar uma fina película lipídica nas paredes do frasco.
3. Remova os vapores do solvente:
   Evacuar os fumos remanescentes da mistura de solventes lavando o balão com gás azoto.
4. Redissolver o filme lipídico:
   Dissolva novamente o filme lipídico em 10 mL de éter dietílico para formar vesículas de fase reversa.
5. Prepare a fase aquosa:
   Misture 5 mL de tampão PBS (0,1 M, pH 7,4) contendo o ingrediente ativo para encapsulamento e 20 mg de Tween 80 com a fase orgânica (éter dietílico com lipídios dissolvidos).
6. Sonicar a emulsão:
   Coloque a emulsão sem emulsão em um banho de gelo.
   Sonicar a emulsão usando um sonicador tipo sonda UP200Ht a 26 kHz e 50% do modo de pulso (0,5 ciclos = 30 seg ON / 30 seg OFF) e 50% de amplitude por 1 minuto.
7. Evaporar para formar gel:
   Retorne a emulsão sonicada ao evaporador rotativo.
   Evaporar sob pressão atmosférica a 40°C até obter um gel.
8. Forma de lipossomas:
   Evaporar ainda mais o gel, quebrando-o em um líquido semitransparente, indicando a formação de lipossomas.
9. Suspensão final do lipossomo:
   Adicione mais 5 mL de tampão PBS (0,1 M, pH 7,4) à suspensão de lipossomas.
   Agite suavemente a mistura.
   Evacuar os fumos remanescentes de éter dietílico com gás azoto.
10. Armazenamento:
    Conservar a suspensão final de lipossomas a 4°C no frigorífico até ser necessário.

Estas instruções descrevem o processo passo a passo para a preparação de lipossomas usando o método de evaporação de fase reversa com homogeneização ultrassônica, garantindo alta carga aquosa interna e encapsulamento eficiente do ingrediente ativo.
O método de evaporação de fase reversa, particularmente usando sonicação do tipo sonda, é uma técnica amplamente adotada para a preparação de lipossomas, especialmente quando se visa alta carga aquosa interna. Este método é vantajoso em relação ao método tradicional de hidratação por filme fino devido à sua capacidade de incorporar uma maior quantidade de fase aquosa dentro dos lipossomas.

Vantagens da sonicação tipo sonda para formação de lipossomas

• Homogeneidade aprimorada: A sonicação do tipo sonda fornece entrada de energia consistente, resultando em uma distribuição de tamanho mais uniforme dos lipossomas.
• Encapsulamento aprimorado: As forças mecânicas durante a sonicação aumentam o encapsulamento de medicamentos, particularmente para compostos hidrofílicos.
• Escalabilidade: Os métodos são facilmente escaláveis, tornando-os adequados para a produção de lipossomas em larga escala.

Aplicações de lipossomas na administração de medicamentos

Os lipossomas preparados por meio dos métodos de emulsificação e evaporação de solvente com sonicação do tipo sonda são adequados para várias aplicações de administração de medicamentos, incluindo:

1. Entrega de medicamentos direcionados: A funcionalização de lipossomas com ligantes específicos permite a entrega direcionada a tecidos ou células específicos.
2. Liberação controlada: A estrutura da bicamada lipídica permite a liberação controlada do fármaco, aumentando a eficácia terapêutica.
3. Versatilidade: Esses métodos acomodam uma ampla gama de agentes terapêuticos, desde pequenas moléculas até biomoléculas maiores, como proteínas e ácidos nucléicos.

O método de evaporação de fase reversa é particularmente conhecido por sua maior carga aquosa interna em comparação com o método de hidratação de filme fino. Essa característica é benéfica para aplicações que requerem encapsulamento substancial de drogas hidrofílicas ou outros agentes terapêuticos.
O método de evaporação de fase reversa usando sonicação do tipo sonda é uma técnica robusta e eficiente para a preparação de lipossomas. Sua capacidade de atingir maior carga aquosa interna o torna um método preferido em aplicações farmacêuticas onde a maximização do encapsulamento de substâncias hidrofílicas é crucial. O controle cuidadoso da evaporação do solvente e o uso de sonicação são fundamentais para o sucesso desse método, levando à produção de lipossomas de alta qualidade adequados para vários fins terapêuticos.

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