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Como utilizar os homogeneizadores ultrassónicos de tecidos Hielscher

Antes de purificar ou caracterizar macromoléculas intracelulares, como proteínas, organelos, enzimas ou compostos ativos, é essencial utilizar um método eficiente de lise de tecidos e desintegração celular. A ultrassonicação é uma técnica altamente eficaz para a preparação de células, libertando rapidamente os materiais intracelulares para uma solução tampão. As forças mecânicas de cisalhamento geradas durante a homogeneização ultrassónica de tecidos podem ser ajustadas com precisão aos materiais específicos. Isto permite a preparação suave de tecidos moles ou o cisalhamento de DNA/RNA com uma sonicação mais suave, bem como uma cavitação ultrassónica intensa para a rutura celular destrutiva (por exemplo, de nannochloropsis e leveduras).

Abaixo encontra uma seleção de tecidos, células e outros materiais biológicos, com protocolos de sonicação recomendados e orientações para preparar eficientemente as suas amostras utilizando um homogeneizador ultrassónico de tecidos ou um triturador de células.

Sonicador de laboratório UP200Ht (200W, 26kHz) para aplicações de preparação de amostras, homogeneização, lise celular, solubilização de suspensões celulares, extração de proteínas, fragmentação de DNA, emulsificação, dispersão e mistura.

Sonicador de laboratório UP200Ht (200W, 26kHz) para tarefas de preparação de amostras

Como preparar os seus lisados, homogeneizados e extratos a partir de materiais biológicos

Por ordem alfabética:

Acetobacter suboxydans

Aplicação ultrassónica:
Rutura celular em 5–15 sec.
Dispositivo recomendado:
UP200St

Actinomyces

Aplicação ultrassónica:
Rutura e extração de proteínas em 3–5 min.
Dispositivo recomendado:
UP50H

Atividade de ALP e LDH

Aplicação ultrassónica:
Determinação da atividade de ALP e LDH e do teor de proteínas
As amostras de células congeladas foram descongeladas durante 20 min em gelo, seguindo-se a lise celular com PBS contendo 1% de Triton X-100 durante 50 min em gelo. Durante a lise celular, cada amostra foi sonicada durante 1 min a 80 W com um processador ultrassónico UP100H (Hielscher Ultrasonics).
Dispositivo recomendado:
UP100H
Referência/Artigo científico:
Bernhardt, A. et al. (2008): O colagénio mineralizado – uma matriz óssea extracelular artificial – melhora a diferenciação osteogénica de células estromais da medula óssea.

Fosfato tricálcico amorfo (ATCP)

Aplicação ultrassónica:
As nanopartículas de ATCP, que são um precursor excecionalmente reativo para a formação de hidroxiapatite, foram dispersas em clorofórmio contendo 5 % (w/w) de Tween20 relativamente ao PLGA, utilizando o dispositivo ultrassónico Hielscher UP400S a 320W durante 5 min., com intervalos pulsados (50%) para permitir a relaxação das partículas.
Dispositivo recomendado:
UP400S
Referência/Artigo científico:
Mohn, Dirk; Ege, Duygu; Feldman, Kirifl; Schneider, Oliver D.; Imfeld, Thomas; Boccaccini, Aldo R. (2014): As cargas de nanopartículas esféricas de fosfato de cálcio permitem o processamento de polímeros para dispositivos de fixação óssea com elevada bioatividade. The Free Library 01 de maio de 2010. 21 de janeiro de 2014.

Antocianinas

Aplicação ultrassónica:
Antocianinas: diglucósidos, monoglucósido, monoglucósidos acilados e diglucósidos acilados de peonidina, malvidina, cianidina, petunidina e delfinidina: extração da película da uva em 40 sec.; pH 5,0; proporção de material/solvente de extração de 1:6.
Dispositivo recomendado:
UP100H

Antraquinonas

Aplicação ultrassónica:
Extração de antraquinonas das raízes de Morinda citrifolia
Dispositivo recomendado:
UP400S

Sementes de alperce

Aplicação ultrassónica:
Pré-tratamento ultrassónico antes da extração de óleo das sementes de Jatropha curcas L. para melhorar a extração.
Dispositivo recomendado:
UP400S

Artemisia selengensis Turcz

Aplicação ultrassónica:
Extração de rutina (1,0g de amostra moída em 30 mL de metanol) a 25°C em 5–10 min.
Dispositivo recomendado:
UP50H

Aspergillus flavus

Aplicação ultrassónica:
Inativação ultrassónica de Aspergillus flavus em meio de cultura Sabouraud
Dispositivo recomendado:
UP200S

B. sphaericus / Bacillus sphaericus

Aplicação ultrassónica:
Rutura em 1–3 min.
Dispositivo recomendado:
UP200S

Esporos de Bacillus anthracis sterne 34F2

Aplicação ultrassónica:
Remoção ultrassónica de esporos de Bacillus anthracis sterne 34F2, Bacillus cereus ATCC 21281 e Bacillus thuringiensis ATCC 33680. A utilização de 150 ppm de hipoclorito de sódio em conjunto com ultrassons levou efetivamente à inativação dos esporos.
Dispositivo recomendado:
UP200S a 100% de amplitude
Referência/Artigo científico:
Pamarthi, S.R. et al.: Eficácia dos ultrassons na remoção de sujidade contendo esporos de Bacillus spp incorporados em matrizes alimentares complexas aderentes a várias superfícies de contacto.

Bacillus cereus ATCC 21 281 spores

Aplicação ultrassónica:
Remoção ultrassónica de esporos de Bacillus anthracis sterne 34F2, Bacillus cereus ATCC 21281 e Bacillus thuringiensis ATCC 33680. A utilização de 150 ppm de hipoclorito de sódio em conjunto com ultrassons levou efetivamente à inativação dos esporos.
Dispositivo recomendado:
UP200S a 100% de amplitude
Referência/Artigo científico:
Pamarthi, S.R. et al.: Eficácia dos ultrassons na remoção de sujidade contendo esporos de Bacillus spp incorporados em matrizes alimentares complexas aderentes a várias superfícies de contacto.

Bacillus subtilis

Aplicação ultrassónica:
Os ultrassons de elevada potência e baixa frequência em pequenos volumes de suspensão bacteriana resultam numa redução contínua do número de células bacterianas, ou seja, a taxa de mortalidade predomina. Em volumes maiores, a sonicação resulta num aumento inicial do número de células, sugerindo a desagregação dos aglomerados de bactérias, mas este aumento inicial dá depois lugar a uma diminuição, à medida que a desagregação termina e a taxa de mortalidade se torna mais importante.
Dispositivo recomendado:
UP200St
Referência/Artigo científico:
Joyce, E.; Phull, S. S.; Lorimer, J. P.; Mason, T. J. (2003): Desenvolvimento e avaliação de ultrassons para o tratamento de suspensões bacterianas. Um estudo da frequência, potência e tempo de sonicação em espécies de Bacillus cultivadas. Ultrason. Sonochem. 10/2003. pp. 315–318.

Alfa-amilase da cevada

Aplicação ultrassónica:
Estimulação ou inibição da atividade da alfa-amilase da cevada: a amostra (10 g de sementes de cevada) foi dispersa em 80 ml de água da torneira por sonicação direta, com uma intensidade ultrassónica de 20, 60 e 100% de amplitude, um ciclo de 50% e agitação adicional. O sonotrodo foi imerso cerca de 9 mm na solução. A solução foi processada a uma temperatura constante de 30C° durante 5, 10 e 15 min.
Dispositivo recomendado:
UP200S, amplitudes: 20, 60 e 100%; ciclo de 50%; sonotrodo S3, 30C°.
Referência/Artigo científico:
Yaldagard et al. (2008): Efeito da potência ultrassónica na atividade da alfa-amilase da cevada após o tratamento das sementes posterior à sementeira

Náuplios de cirrípedes

Aplicação ultrassónica:
Rutura celular/morte do mesozooplâncton: por sonicação nas seguintes condições, com quatro caudais (200, 400, 520 e 800 lh-1) e quatro amplitudes (25, 50, 75 e 100 %), foi alcançada uma taxa de mortalidade entre 61 e 97 %.
Dispositivo recomendado:
UIP2000hd
Referência/Artigo científico:
Viitaslo et al. (2005): Ozono, luz ultravioleta, ultrassons e peróxido de hidrogénio como tratamentos de água de lastro – Experiências com mesozooplâncton em água salobra de baixa salinidade.

Bifidobacteria strains: B. breve ATCC 15 700, B. animalis subsp. Lactis (BB-12), B. longum (BB-46)

Aplicação ultrassónica:
Destruição de células bacterianas e libertação de ß-galactosidase de estirpes de bifidobactérias: B. breve ATCC 15700, B. animalis subsp. Lactis (BB-12), B. longum (BB-46): 100 mL de leite pasteurizado misturado com uma cultura bacteriana foram tratados com ultrassons. A cavitação provoca a destruição das células bacterianas e, simultaneamente, a libertação de ß-galactosidase.
Dispositivo recomendado:
UIP1000hd: amplitude: 10%, potência: 80W, amplitude: 100%, potência: 200W; sonotrodo BS2d34; 15–30 min.
Referência/Artigo científico:
Hung et al. (2009): Fermentação de iogurte com probióticos assistida por ultrassons.

Células BL21(DE3) pAtHNL (células de Arabidopsis thaliana)

Aplicação ultrassónica:
Rutura celular: 15 g de células BL21-(DE3)_pAtHNL foram lentamente suspensas em tampão de fosfato de potássio 50 mM (pH 7,5) a 0 degC.
Dispositivo recomendado:
UP200S + sonotrodo S14D: a 70W/cm2 (4 x 5 min), com arrefecimento num banho de gelo
Referência/Artigo científico:
Okrob, D. et al (2009): Hidroxinitrilo liase de Arabidopsis thaliana: identificação de parâmetros de reação para a síntese de cianoidrinas enantiomericamente puras por catalisador puro e imobilizado. Adv. Synth. Catal. 2011, 353, 2399 – 2408.

Células sanguíneas (vermelhas e brancas)

Aplicação ultrassónica:
Rutura em 3–10 sec.
Dispositivo recomendado:
UP100H

Boldina das folhas de boldo (Peumus boldus Molina)

Aplicação ultrassónica:
Um composto ativo importante do boldo é a boldina ((S)-2,9-dihydroxy-1,10-dimethoxiaporphine), que, juntamente com a catequina ((2S,3R)-2-(3,4-dihydroxy-phenyl)-3,4-dihydro-1(2H)-benzopyran-3,5,7-triol), constitui um dos principais componentes da fração de alcaloides e flavonoides das folhas de boldo. A boldina é um potente agente antioxidante que sofre danos peroxidativos mediados por radicais livres e atua como um captador eficiente de radicais hidroxilo.
Procedimento de extração: Num procedimento de extração típico, amostras de folhas de boldo foram extraídas com 1L de água destilada à pressão atmosférica utilizando o sonicador UIP1000hd em modo descontínuo e de fluxo contínuo. O tempo de extração varia entre 10 e 40 min., com uma intensidade ultrassónica de 10 a 23 W/cm2, e um intervalo de temperaturas de 10 a 70°C. Os melhores resultados foram obtidos nas seguintes condições: intensidade ultrassónica de 23 W/cm2 durante 40 min. à temperatura de 36°C
Resultados: Os resultados da análise mostram que a sonicação de elevada potência melhora a libertação do analito do material da matriz vegetal do boldo a taxas significativamente superiores às do método convencional: um rendimento igual foi obtido por sonicação em 30 min., enquanto o tempo de extração convencional foi de 2h.
Chemat (2013) e colaboradores demonstraram que a extração assistida por ultrassons melhora a eficiência da extração vegetal, reduzindo simultaneamente o tempo de extração e aumentando a concentração dos extratos (mesma quantidade de solvente e de material vegetal). A análise revelou que as condições otimizadas eram: potência de sonicação de 23 W/cm2 com UIP1000hd durante 40 min. e a uma temperatura de 36°C. Os parâmetros otimizados da extração por ultrassons proporcionam uma extração melhor do que a maceração convencional em termos de tempo de processo (30 min. em vez de 120 min.), maior rendimento, maior eficiência energética, melhor limpeza, maior segurança e melhor qualidade do produto.
Dispositivo recomendado:
UIP1000hd com sonotrodo BS2d34 e célula de fluxo
Referência/Artigo científico:
Petigny, L.; Périno-Issartier, S.; Wajsman, J.; Chemat, F. (2013): Extração de folhas de boldo (Peumus boldus Mol.) assistida por ultrassons em modo descontínuo e contínuo. International Journal of Molecular Science 14, 2013. 5750–5764.

Albumina sérica bovina (BSA)

Aplicação ultrassónica:
Microencapsulação em poli(ácido láctico-co-glicólico) em 40 sec.
Dispositivo recomendado:
GDmini
Referência/Artigo científico:
Freitas et al. (2005): Emulsificação ultrassónica em fluxo contínuo combinada com micromistura estática para a produção assética de microesferas por extração com solvente.

Tronco cerebral + glândula suprarrenal

Aplicação ultrassónica:
Dispersão e análise de nucleótidos; tamanho da amostra: amostras de 10 mg em 10 ml de fluido.
Dispositivo recomendado:
UP50H

Candida albicans

Aplicação ultrassónica:
Rutura de 15mL em 9min.
Dispositivo recomendado:
UP100H

Hidratos de carbono, polissacáridos e outros compostos funcionais

Aplicação ultrassónica:
Extração de hidratos de carbono, polissacáridos e outros compostos funcionais
Dispositivo recomendado:
UP200St

Ácido carnósico do alecrim

Aplicação ultrassónica:
Extração de ácido carnósico, um composto ativo, do alecrim.
Dispositivo recomendado:
UP400S

Capsaicinoides

Aplicação ultrassónica:
Extração de capsaicinoides (capsaicina, nordihidrocapsaicina) de malaguetas: os capsaicinoides de malaguetas Capsicum frutescens foram obtidos por extração ultrassónica nas seguintes condições: solvente: etanol a 95% (v/v), proporção solvente/massa de 10 ml/g, tempo de extração por sonicação de 40 min., temperatura de extração de 45°C. Rendimento de extração: 85% dos capsaicinoides
Dispositivo recomendado:
UP400S

Carotenoides, betacarotenoides

Aplicação ultrassónica:
Extração de cenouras.
Dispositivo recomendado:
UP50H

cDNA

Aplicação ultrassónica:
O RNA poli-A foi purificado com o kit de purificação de mRNA Dynabeads (Invitrogen), seguindo as instruções do fabricante, e tratado durante 30 min a 37°C com TURBO DNase (Ambion; 0,2 unidades/1 μg de RNA). A síntese da primeira e da segunda cadeia seguiu o protocolo do fabricante. Cerca de 500ng de cDNA de cadeia dupla foram fragmentados por sonicação com o sonicador da Hielscher UTR200. O DNA foi separado num gel de agarose de alta resolução a 2% e foram recortados fragmentos de 230–270 bp.
Dispositivo recomendado:
UTR200 ou TD_CupHorn
Referência/Artigo científico:
Delft, J. van; Gaj, St.; Lienhard,M.; Albrecht, M. W.; Kirpiy, A.; Brauers, K.; Claessen, S.; Lizarraga, D.; Lehrach, H.; Herwig, R.; Kleinjans, J. (2012): O RNA-Seq proporciona novos conhecimentos sobre as respostas do transcriptoma induzidas pelo carcinogénio benzo[a]pireno. Toxicological Sciences 130/2, 2012. 427–439.

Caryophanon latum

Aplicação ultrassónica:
Extração de glucosamina, ácido murâmico, alanina, ácido glutâmico e lisina de caryophanon datum.
Dispositivo recomendado:
UP100H

Celulose

Aplicação ultrassónica:
Homogeneização/preparação de celulose isotopicamente homogénea.
Dispositivo recomendado:
UP200S; num banho de gelo
Referência/Artigo científico:
Laumer et al. (2009): Uma nova abordagem para a homogeneização de celulose destinada à utilização de microquantidades em análises de isótopos estáveis.

Nanocristais de celulose (CNC) preparados a partir de CNC de celulose de eucalipto

Aplicação ultrassónica:
Os nanocristais de celulose (CNC) preparados a partir de CNCs de celulose de eucalipto foram modificados por reação com cloreto de metiladipoílo, CNCm, ou com uma mistura de ácido acético e ácido sulfúrico, CNCa. Para tal, os CNCs, CNCm e CNCa liofilizados foram redispersos em solventes puros (EA, THF ou DMF) a 0,1 wt%, por agitação magnética durante a noite a (24 ± 1) C, seguindo-se 20 min num banho de sonicação utilizando o UP100H da Hielscher Ultrasonics (Alemanha), equipado com um sonotrodo de 130 W/cm2, a 24 ± 1 degC. Em seguida, foi adicionado CAB à dispersão de CNC, de modo que a concentração final de polímero fosse de 0,9 wt%.
Dispositivo recomendado:
UP100H; a 24 degC durante 20 min.
Referência/Artigo científico:
Blachechen, L. S. et al (2013): Interação entre a estabilidade coloidal dos nanocristais de celulose e a sua dispersibilidade numa matriz de acetato butirato de celulose. Cellulose 2013.

Celulose do bagaço de cana-de-açúcar

Aplicação ultrassónica:
Extração de celulose do bagaço de cana-de-açúcar
Dispositivo recomendado:
UP200St

Ensaio ChIP

Aplicação ultrassónica:
A ultrassonicação é utilizada para a lise celular, a fim de libertar a cromatina. Uma sonicação suave (pulsada) é utilizada para fragmentar a cromatina. Além disso, os ultrassons aceleram a ligação dos anticorpos às proteínas-alvo, reduzindo assim o tempo de imunoprecipitação.
Dispositivo recomendado:
UP100H
Referência/Artigo científico:
Basselet, P. et al. (2008): Processamento de amostras para análise de Escherichia coli entero-hemorrágica (EHEC) baseada em matrizes de chips de DNA.
Lauri, A. (2005): Análise molecular do desenvolvimento de pétalas por X-ChIP e tecnologia de duplo híbrido. Dissertação, Universidade de Colónia, 2005.

Cromatina

Aplicação ultrassónica:
Cisalhamento da cromatina
Dispositivo recomendado:
UP400S; a 30% de amplitude e ciclo de 0,5; em gelo.
Referência/Artigo científico:
Oh et al. (2003): O gene da acetil-CoA carboxilase é regulado pela proteína de ligação ao elemento regulador de esteróis-1 no fígado.

Extração de cromatina

Aplicação ultrassónica:
O lisado de células MEL DS19 foi sonicado em 10 séries de 20 s cada, a 70% da potência máxima de saída, utilizando o processador ultrassónico Hielscher UP200H de 200W
Dispositivo recomendado:
UP200H; 70% da potência máxima de saída; modo pulsado: 10 ciclos de 20 sec. cada.
Referência/Artigo científico:
Kang, H. Ch. et al (2010): PIAS1 regula a localização de CP2c e a formação do complexo promotor ativo na expressão de a-globina específica de células eritroides. Nucleic Acids Res. 38/ 16, 2010. pp. 5456–5471.

Cromatografia

Aplicação ultrassónica:
A sonicação do adsorvente no solvente elimina os aglomerados em poucos segundos e permite preparar uma coluna uniforme e de fácil enchimento. Relevante para a preparação do adsorvente (por exemplo, gel de sílica) antes da cromatografia em coluna.
Dispositivo recomendado:
UP400S

Cladóceros

Aplicação ultrassónica:
Rutura celular do mesozooplâncton
Dispositivo recomendado:
UP2000hd com célula de fluxo
Referência/Artigo científico:
Viitaslo et al. (2005): Ozono, luz ultravioleta, ultrassons e peróxido de hidrogénio como tratamentos de água de lastro – Experiências com mesozooplâncton em água salobra de baixa salinidade.

Copépodes adultos e copepoditos

Aplicação ultrassónica:
Rutura celular do mesozooplâncton: por sonicação nas seguintes condições, com quatro caudais (200, 400, 520 e 800 lh-1) e quatro amplitudes (25, 50, 75 e 100%), foi alcançada uma taxa de mortalidade entre 87 e 99%.
Dispositivo recomendado:
UIP2000hd com célula de fluxo
Referência/Artigo científico:
Viitaslo et al. (2005): Ozono, luz ultravioleta, ultrassons e peróxido de hidrogénio como tratamentos de água de lastro – Experiências com mesozooplâncton em água salobra de baixa salinidade.

Náuplios de copépodes

Aplicação ultrassónica:
Rutura celular do mesozooplâncton: por sonicação nas seguintes condições, com quatro caudais (200, 400, 520 e 800 lh-1) e quatro amplitudes (25, 50, 75 e 100%), foi alcançada uma taxa de mortalidade entre 87 e 99%.
Dispositivo recomendado:
UIP2000hd com célula de fluxo
Referência/Artigo científico:
Viitaslo et al. (2005): Ozono, luz ultravioleta, ultrassons e peróxido de hidrogénio como tratamentos de água de lastro – Experiências com mesozooplâncton em água salobra de baixa salinidade.

Células COS7

Aplicação ultrassónica:
Lise em 400 μl de tampão
Dispositivo recomendado:
UP200S; 7 ciclos
Referência/Artigo científico:
Zaim (2005): Análise de ratinhos deficientes em Nesprin-2.

Cryptosporidium parvum

Aplicação ultrassónica:
Inativação ultrassónica de Cryptosporidium parvaum (protozoário) em água.
Dispositivo recomendado:
UP400S
Referência/Artigo científico:
Tsukamoto, I.; Yim, B.; Stavarache, C. E.; Furuta, M.; Hashiba, K.; Maeda, Y. (2004): Inativação de Saccharomyces cerevisiae por irradiação ultrassónica. Ultrasonics Sonochemistry 11/2004. pp. 61–65.

Cubossomas

Aplicação ultrassónica:
Os cubossomas – vazios ou dopados com moléculas de fluoróforo – foram preparados dispersando a quantidade adequada de monooleína numa solução de Pluronic F108, utilizando o sonicador UP100H. Para obter cubossomas fluorescentes, o fluoróforo foi disperso na monooleína fundida por sonicação suave, antes da dispersão em Pluronic F108. Foi seguido o mesmo procedimento quando os cubossomas fluorescentes foram também carregados com quercetina.
Amostra: tamanho da amostra: 4 mL – aprox. 96,4 wt% de água, 3,3 wt % de monooleína, 0,3 wt% de Pluronic F108. A percentagem do fluoróforo foi de 2,5 × 10−3 e 2,8 × 10−3 wt%. Quantidade de quercetina adicionada: 6,4 × 10−6 wt%.
Sonicação: UP100H, amplitude de 90%, ciclo de pulsos de 0,9, durante 10 min.
Dispositivo recomendado:
UP100H
Referência/Artigo científico:
Murgia, S.; Bonacchi,S.; Falchi, A. M.; Lampis, S.; Lippolis, V.; Meli, V.; Monduzzi, M.; Prodi, L.; Schmidt, J.; Talmon, Y.; Caltagirone, C. (2013): Cubossomas fluorescentes carregados com fármacos: nanopartículas versáteis para potenciais aplicações teranósticas. Langmuir 29, 2013. 6673–6679.

Dekkera bruxellensis

Aplicação ultrassónica:
Inativação ultrassónica de Dekkera bruxellensis em água
Dispositivo recomendado:
UIP1500hd
Referência/Artigo científico:
Borthwick, K. A. J.; Coakley, W. T.; McDonnell, M. B.; Nowotny, H.; Benes, E.; Grfschl, .M (2005): Desenvolvimento de um novo sonicador compacto para rutura celular. J. Microbio. Meths. 60/2005. pp. 207–216. / Lörincz, A. (2004): Rutura celular ultrassónica de leveduras em suspensões aquosas. Biosys. Eng. 89/ 2004. pp. 297–308. / Tsukamoto, I.; Yim, B.; Stavarache, C. E.; Furuta, M.; Hashiba, K.; Maeda, Y. (2004): Inativação de Saccharomyces cerevisiae por irradiação ultrassónica. Ultrason. Sonochem. 11/2004. pp. 61–65.

Dekkera/Brettanomyces bruxellensis

Aplicação ultrassónica:
Inativação em 90–120 sec.
Dispositivo recomendado:
UIP1500hd
Referência/Artigo científico:
ver acima

ADN

Aplicação ultrassónica:
Fragmentação de DNA: sonicação de 100μL durante 2 min. com UP100H ou sonicação de 100μL durante 4 min. com UTR200.
Dispositivo recomendado:
UP100H, UTR200 ou VialTweeter
Referência/Artigo científico:
Larguinho M. et al. (2010): Desenvolvimento de uma estratégia rápida e eficiente baseada em ultrassons para a fragmentação de DNA.

Células S2 de Drosophila melanogaster

Aplicação ultrassónica:
Extração de proteínas celulares de células S2 de Drosophila melanogaster: células S2 congeladas (1,56108) foram lisadas em 1 mL de tampão de homogeneização arrefecido em gelo (100 mM de Tris-HCl, pH 7,5, 1% de SDS) e mantidas em gelo durante 10 min. A lise celular foi concluída por ultrassonicação em gelo (6615 rajadas, pulso de 0,5 s; intensidade de 75%) com um processador ultrassónico Hielscher UP200S.
Dispositivo recomendado:
UP200S (200W), intensidade de 75%; modo pulsado: 6615 rajadas, pulso de 0,5 s.
Referência/Artigo científico:
Schwientek, T. et al. (2007): Uma abordagem com lectinas em série ao O-glicoproteoma do tipo mucina de células S2 de Drosophila melanogaster. Proteomics 7, 2007. pp. 3264–3277.

Derivados de E. coli

Aplicação ultrassónica:
Rutura celular de derivados de E. coli: os sedimentos congelados correspondentes ao volume de amostra de Vculture = 4/OD mL foram ressuspensos em 580 μL de tampão de fosfato de potássio 10 mM, pH 7, com EDTA 1 mM. Foram adicionados 20 μL de lisozima (concentração de 1 g L-1) e a suspensão celular foi incubada em gelo durante cerca de 30 min. Em seguida, as células foram rompidas por ultrassonicação contínua com um sonicador (processador ultrassónico UP 200S, Dr. Hielscher GmbH, Teltow) em gelo, a uma amplitude de 50 % durante 20 sec. As frações celulares solúveis e insolúveis foram separadas por centrifugação a 13 000 rpm durante 20 min. As proteínas insolúveis foram lavadas duas vezes com o tampão de fosfato de potássio 10 mM, pH 7, com EDTA 1 mM e armazenadas a –20°C.
Dispositivo recomendado:
UP200S com 50% de amplitude
Referência/Artigo científico:
HA (2005): Otimização da produção de proteínas recombinantes ativas, explorando o impacto das pequenas proteínas de choque térmico de Escherichia coli, IbpA e IbpB, na reativação in vivo de corpos de inclusão.

Antigénio de Echinococcus granulosus

Aplicação ultrassónica:
Lise e desintegração celular: a amostra homogeneizada de proteína solúvel de E. granulosus maduro, preparada por congelação e descongelação em azoto líquido e a 42◦C, foi sonicada a 110V, 170W durante 3×15 sec em gelo. Em seguida, a amostra foi centrifugada durante 15min a 10 000g. A concentração de proteínas foi medida pelo método de Bradford e a amostra foi armazenada a -20◦C.
Dispositivo recomendado:
UP200S; 170W, arrefecimento em gelo; 3 x 15 sec.
Referência/Artigo científico:
Tabar et al. (2010): Serodiagnóstico da hidatidose ovina com líquido hidático, protoescólex e antigénio do corpo inteiro de Echinococcus granulosus.

Escherichia coli Gr-

Aplicação ultrassónica:
Inativação ultrassónica de Escherchia coli Gr- em leite e sumos.
Dispositivo recomendado:
UP100H
Referência/Artigo científico:
Zenker, M.; Heinz, V.; Knorr, D. (2003): Aplicação do processamento térmico assistido por ultrassons para a conservação e manutenção da qualidade de alimentos líquidos. J Food Prot 66/2003. pp. 1642–1649.

Escherichia coli Gr- em solução salina

Aplicação ultrassónica:
Inativação ultrassónica de Escherchia coli Gr- em solução salina.
Dispositivo recomendado:
UP100H
Referência/Artigo científico:
Duckhouse, H.; Mason, T. J.; Phull, S. S.; Lorimer, J. P. (2004): Efeito da sonicação na desinfeção microbiana utilizando hipoclorito. Ultrason. Sonochem. 11/ 2004. pp. 173–176.

Escherichia coli Gr- em água

Aplicação ultrassónica:
Inativação ultrassónica de Escherchia coli Gr- em água.
Dispositivo recomendado:
UP100H
Referência/Artigo científico:
Furuta, M.; Yamaguchi, M.; Tsukamoto, T.; Yim, B.; Stavarache, C. E.; Hasiba, K.; Maeda, Y. (2004): Inativação de Escherichia coli por irradiação ultrassónica. Ultrason. Sonochem. 11/2004. pp. 57–60.

Glaucoma, cabeça do nervo ótico

Aplicação ultrassónica:
Fragmentação de RNA de cabeças do nervo ótico (de olhos de rato): a cabeça do nervo ótico (ONH) foi congelada em gelo seco e armazenada a 80°C antes da extração. O RNA foi isolado por sonicação das cabeças de nervo congeladas no tampão de extração do kit, utilizando uma sonda MS 0.5 (UP50H), seguindo depois as instruções fornecidas pelo kit Arcturus, incluindo o tratamento com DNase para remover qualquer DNA. O RNA purificado foi quantificado.
Dispositivo recomendado:
UP50H com sonda MS0.5
Referência/Artigo científico:
Johnson et al. (2007): Alterações globais da expressão génica na cabeça do nervo ótico após exposição a pressão intraocular elevada num modelo de glaucoma em rato.

Glicosaminoglicano sulfato de condroitina (CS)

Aplicação ultrassónica:
Determinação de CS pelo ensaio com azul de dimetilmetileno
Ressuspensão de células: os sedimentos de CS em tubos de microcentrífuga foram ressuspensos em 0,5 ml de uma solução de papaína a 0,1mg/ml em solução salina equilibrada de Hank (HBSS), utilizando pulsos de um sonotrodo ultrassónico (UP 100H, Hielscher Ultrasonics GmbH, Alemanha) com ciclo 1 e amplitude de 100 % durante 3 sec. Em seguida, a digestão decorreu a 60 °C durante 24 h.
Para o ensaio imunoenzimático (ELISA), as células foram depois suspensas em água destilada e desionizada a uma concentração de 106 células/ml e mantidas num congelador a –70°C durante a noite, para facilitar a lise celular. As células foram depois homogeneizadas por ultrassonicação durante 40 sec., utilizando o homogeneizador ultrassónico de tecidos Hielscher UP100H.
Dispositivo recomendado:
UP100H
Referência/Artigo científico:
Vandrovcova et al. (2011): Influência de revestimentos de colagénio e sulfato de condroitina (CS) em poli(lactídeo-co-glicolídeo) (PLGA) sobre células MG 63 semelhantes a osteoblastos. Physiol. Res. 60; 2011. 797–813.

Células HaCaT

Aplicação ultrassónica:
Lise de células HaCaT para imunoprecipitação da cromatina (ChIP): as células HaCaT foram fixadas com 1% de formaldeído durante 10 minutos a 37uC. As células fixadas foram lisadas no tampão RIPA e sonicadas em gelo com um dispositivo ultrassónico de 100W, com amplitude = 1 e ciclo de trabalho = 100%, em 12 pulsos de um minuto (12 x 1 min.).
Dispositivo recomendado:
UP100H; durante 12 min. em gelo,
Referência/Artigo científico:
Zhang et al. (2007): A basonuclina regula um subconjunto de genes de RNA ribossómico em células HaCaT.

Heparina: despolimerização da heparina

Aplicação ultrassónica:
O método ultrassónico permite produzir heparina de baixo peso molecular (LMWH). Para tal, a heparina sofre uma despolimerização radicalar catalisada por peróxido de hidrogénio. A reação é muito rápida e demora menos de 1 hora, enquanto o processo de despolimerização físico-química se baseia em condições de reação suaves, não requer reagentes agressivos ou tóxicos e proporciona um produto isento de artefactos químicos. Assim, o processo ultrassónico é adequado para a produção de LMWH em grande escala, bem como de análogos produzidos a partir de polissacáridos sulfatados naturais.
Procedimento ultrassónico:
Para a despolimerização físico-química de heparina não fracionada por despolimerização radicalar assistida por ultrassons, a heparina foi dissolvida em água até uma concentração final de 25 mg/mL (5 mL). A mistura reacional foi sonicada utilizando um sonicador de sonda UP50H. O sonicador estava equipado com uma sonda (microponta MS3) de 3mm de diâmetro, que proporcionava uma amplitude de 180μm. O processador gerava vibrações mecânicas longitudinais com uma frequência de 30 kHz, produzidas por excitação elétrica. A mistura reacional foi mantida a 60°C num reator Radleys® e foram aplicadas ondas ultrassónicas sob a forma de um pulso de 0,5sec para evitar o aquecimento da mistura. Foi retirada da solução uma alíquota de tempo zero (250μl) antes do início da reação, iniciado pela adição simultânea de peróxido de hidrogénio e aplicação de ondas ultrassónicas. Foi adicionado peróxido de hidrogénio para obter uma proporção final de peróxido de hidrogénio/heparina (w/w) de 0,15 (3,75 mg/mL).
Dispositivo recomendado:
UP50H com sonotrodo MS3
Referência/Artigo científico:
Achour, Oussama; Bridiau, Nicolas; Godhbani, Azza; Le Joubioux, Florian; Bordenave Juchereau, Stephanie; Sannier, Fredéric; Piot, Jean-Marie; Fruitier Arnaudin, Ingrid; Maugard, Thierry (2013): Preparação assistida por ultrassons de heparina de baixo peso molecular (LMWH) com atividade anticoagulante. Carbohydrate Polymers 97; 2013. 684–689.

Lúpulo

Aplicação ultrassónica:
Extração de compostos ativos/extratos vegetais em água e etanol.
Dispositivo recomendado:
UP400S

Lactobacillus (lise/isolamento de ADN de várias estirpes de Lactobacillus)

Aplicação ultrassónica:
Estirpes de Lactobacillus: L. pontis, L. sanfranciscensis, L. farciminis, L. panis, L. oris, L. vaginalis e L. reuteri, L. sp.
Procedimento: para o isolamento de DNA de colónias individuais, foi desenvolvido um protocolo de lise ultrassónica. Uma colónia (2–3 mm de diâmetro) foi suspensa em 100μl de tampão de lise (20 mM de EDTA, 10 mM de Tris [pH 7,9], 1% de Triton X-100, 500 mM de guanidina-HCl, 250 mM de NaCl). As células foram lisadas por 1 min de ultrassonicação com um sonicador de sonda UP50H. Após a adição de 150μl de etanol frio (-20°C), a mistura foi centrifugada numa coluna de centrifugação do kit de tecidos QIAamp e, por fim, eluída com 60μl de tampão (10 mM de Tris [pH 7,5]).
Para dispor de uma ferramenta de identificação rápida e fiável de culturas puras individuais, o ensaio de PCR foi combinado com um procedimento rápido de isolamento de DNA. Os procedimentos demorados de lise enzimática e a suscetibilidade variável das bactérias à lisozima foram ultrapassados pelo tratamento ultrassónico das células, seguido de purificação e concentração por ligação do DNA a uma matriz de sílica. Verificou-se que o material celular de uma única colónia era suficiente para a PCR.
Dispositivo recomendado:
UP50H
Referência/Artigo científico:
Müller, M. R. A. (2000): Caracterização do ecossistema microbiano de fermentações de cereais utilizando métodos de biologia molecular. Dissertação, Universidade de Colónia, 2000.

Lactobacillus acidophilus Gr+

Aplicação ultrassónica:
Inativação ultrassónica de Lactobacillus acidophilus Gr+ em leite e sumos.
Dispositivo recomendado:
UIP500hd
Referência/Artigo científico:
Zenker, M.; Heinz, V.; Knorr, D. (2003): Aplicação do processamento térmico assistido por ultrassons para a conservação e manutenção da qualidade de alimentos líquidos. J Food Prot 66/2003. pp. 1642–1649.

Legionella pneumophila Gr+ em meio diluído

Aplicação ultrassónica:
Inativação ultrassónica de Legionella pneumophila Gr+ em meio diluído.
Dispositivo recomendado:
UIP500hd
Referência/Artigo científico:
Dadjour, M. F.; Ogino, C.; Matsumura, S.; Nakamura, S.; Shimizu N. (2006): Desinfeção de Legionella pneumophila por tratamento ultrassónico com TiO2. Water Res 40/2006. pp.1137–1142.

Leuconostoc mesenteroides

Aplicação ultrassónica:
Atividade da lisozima dos leucócitos na leucemia mielocítica: a suspensão celular foi sonicada durante 15 min. e as amostras foram analisadas quanto à atividade da lisozima. Foi determinada a concentração de lisozima dos leucócitos em ug./10 células.
Dispositivo recomendado:
UP50H

Atividade isoenzimática leucocitária na leucemia mielocítica

Aplicação ultrassónica:
Preparação de amostras: a suspensão celular foi tratada por ultrassons e as amostras foram analisadas quanto à atividade da lisozima. Foi determinada a concentração de lisozima dos leucócitos em ug/106.
Dispositivo recomendado:
UP200St

Verde de malaquite

Aplicação ultrassónica:
Degradação sonofotocatalítica do verde de malaquite (um potente bactericida): a degradação fotocatalítica isolada é consideravelmente mais rápida do que a degradação sonolítica; a eficiência pode ser melhorada pelo acoplamento dos dois processos. O verde de malaquite, um potente bactericida, é muito ecotóxico para as bactérias marinhas, mas é convertido em compostos orgânicos menos tóxicos ou não tóxicos.
Dispositivo recomendado:
UP400S

Acilação da mangiferina

Aplicação ultrassónica:
A mangiferina (1,3,6,7-Tetrahydroxy-2-[3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]xanthen-9-one; fórmula: C19H18O11) é um polifenol com estrutura de C-glicosilxantona que pode ser encontrado em muitas espécies vegetais. A mangiferina apresenta várias atividades farmacológicas. A acilação regiosseletiva da mangiferina pode ser catalisada de forma muito eficiente por lipase sob ultrassonicação. Em comparação com os métodos convencionais, a catálise assistida por ultrassons destaca-se pelas vantagens de um tempo de reação mais curto e rendimentos mais elevados. Verificou-se que as condições ótimas para a acilação ultrassónica da mangiferina eram as seguintes:
lipase: PCL, dador de acilo: acetato de vinilo; solvente de reação: DMSO, temperatura de reação: 45 degC, potência ultrassónica: 200W; proporção de substratos: dador de acilo/mangiferina 6/1, carga enzimática: 6 mg/ml
O rendimento da acilação regiosseletiva foi de até 84%.
Dispositivo recomendado:
UP200St ou UP200Ht
Referência/Artigo científico:
cf.: Wang, Z.; Wang, R.; Tian, J.; Zhao, B; Wei, X.F.; Su, Y.L.; Li, C.Y.; Cao, S.G.; Wang, L. (2010): Efeito dos ultrassons na acilação regiosseletiva da mangiferina catalisada por lipase em solventes não aquosos. J. Asian Nat Prod. Res. 12/1, 2010. 56–63.

Extração de moléculas

Aplicação ultrassónica:
Protocolo de extração para extração de gesso, rheolite, basalto, cinzas de edfell e vidro de obsidiana:
Uma amostra de 1g de regolito ou rocha triturada é submetida a extração líquida sob irradiação ultrassónica para extrair e solubilizar as moléculas-alvo. Para tal, foram adicionados 3ml de MeOH P80 a 1g de amostra análoga num tubo de ensaio de vidro, sendo a amostra sonicada durante 20 minutos com um dispositivo ultrassónico de sonda UP50H ajustado para 40% de amplitude. A mistura foi deixada em repouso durante 10 minutos e o sobrenadante turvo que se formou acima da amostra análoga sedimentada foi decantado para tubos de centrifugação de 1,5 ml. Para minimizar a perda de componentes extraídos por adsorção às superfícies dos tubos de centrifugação de polímero hidrofóbico, os tubos foram primeiro bloqueados com 0,5% (w/v) de BSA em HEPES 100 mM, pH 7,4. Os sobrenadantes foram clarificados por centrifugação a 17 000 G durante 10 minutos e armazenados a 2 – 8°C em frascos de vidro até serem testados no imunoensaio.
Dispositivo recomendado:
UP50H
Referência/Artigo científico:
Rix, C.(2012): Deteção de vida em Marte e o Life Marker Chip: ensaios com anticorpos para detetar moléculas orgânicas em extratos líquidos de amostras marcianas. Dissertação, Universidade de Cranfield, 2012.

Sedimentos de fígado de ratinho

Aplicação ultrassónica:
Os sedimentos foram lavados e sonicados durante 5 min com mais 0,5 mL de LB2 e centrifugados a 12 000 g durante mais 20 min, tendo sido recolhidas as duas frações de sobrenadante resultantes. Por fim, os sedimentos foram dissolvidos em 0,5 mL de tampão contendo 40 mM de Tris base, 5 M de ureia, 2 M de tioureia, 4% de CHAPS, 100 mM de DTT, 0,5% (v/v) de biolyte 3–10 (LB3), sendo depois sonicados e centrifugados a 12 000 g durante 20 min.
Dispositivo recomendado:
UP200S; durante 5min.
Referência/Artigo científico:
Gazzana et al. (2009): Uma atualização sobre o proteoma do fígado de ratinho.

Suspensão de fígado de ratinho

Aplicação ultrassónica:
Homogeneização de amostras para produzir lisado celular.
Dispositivo recomendado:
UP200S; durante 3 x 20 sec.
Referência/Artigo científico:
Gazzana et al. (2009): Uma atualização sobre o proteoma do fígado de ratinho.

Penicillium digitatum

Aplicação ultrassónica:
Inativação ultrassónica de Penicillium digitatum (um agente patogénico de plantas) em meio de cultura Sabouraud.
Dispositivo recomendado:
UP200St
Referência/Artigo científico:
López-Malo, A.; Palou, E.; Jiménez-Fernández, M.; Alzamora, S. M.; Guerrero, S. (2005): Inativação multifatorial de fungos combinando termosonicação e agentes antimicrobianos. J. Food Eng. 67/ 2005. pp. 87–93.

Ficocianina de Spirulina platensis (Arthrospira platensis)

Aplicação ultrassónica:
Extração de ficocianina de células de Spirulina platensis (Arthrospira platensis).
Dispositivo recomendado:
UP400S

Células e tecidos vegetais

Aplicação ultrassónica:
Uma preparação de células vegetais compactadas a 30% (W/V) e água destilada é submetida a rutura por sonicação durante 1–15 min.; desintegração de tecido vegetal: 1 g de tecido seco suspenso em álcool é desintegrado durante cerca de 5 min. de sonicação.
Dispositivo recomendado:
UP100H

Plaquetas

Aplicação ultrassónica:
Preparação de lisado de plaquetas: rutura em 1–5 min.
Dispositivo recomendado:
UP200Ht

Pleurotus tuber-regium

Aplicação ultrassónica:
Extração de polissacáridos do fungo comestível Pleurotus tuberregium
Dispositivo recomendado:
UP400S

Ácido poli(láctico-co-glicólico) (PLGA)

Aplicação ultrassónica:
Preparação de poli(ácido láctico-co-glicólico) (PLGA) carregado com albumina sérica bovina (BSA) por sonicação em 40 sec.
Dispositivo recomendado:
Dmini; durante 40sec.
Referência/Artigo científico:
Freitas et al. (2005): Emulsificação ultrassónica em fluxo contínuo combinada com micromistura estática para a produção assética de microesferas por extração com solvente.

Polifenóis da maçã

Aplicação ultrassónica:
Extração ultrassónica de polifenóis da maçã. Solvente: aquoso. Aumento do rendimento em 6%; intensidade de sonicação: 20–75Ws/ml; temperatura do processo: aquecimento até 80 degC.
Dispositivo recomendado:
UIP2000hd
Referência/Artigo científico:
Vilkhu, K.; Manasseh, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Recuperação e modificação ultrassónica de ingredientes alimentares. In: Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011): Tecnologias de ultrassons para alimentos e bioprocessamento. New York: Springer, 2011. pp. 345–368.

Polifenóis do chá preto

Aplicação ultrassónica:
Extração ultrassónica de polifenóis do chá preto. Solvente: aquoso. Aumento do rendimento em 6–18%; intensidade de sonicação: 8–10Ws/ml; pressão ambiente, temperatura do processo: aquecimento até 90 degC.
Dispositivo recomendado:
UIP2000hd
Referência/Artigo científico:
Vilkhu, K.; Manasseh, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Recuperação e modificação ultrassónica de ingredientes alimentares. In: Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011): Tecnologias de ultrassons para alimentos e bioprocessamento. New York: Springer, 2011. pp. 345–368.

Polifenóis do bagaço de uva tinta

Aplicação ultrassónica:
Extração ultrassónica de polifenóis do bagaço de uvas tintas. Solvente: aquoso. Aumento do rendimento em 11–35%; intensidade de sonicação: 20–75Ws/ml; pressão ambiente.
Dispositivo recomendado:
UIP2000hd
Referência/Artigo científico:
Vilkhu, K.; Manasseh, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Recuperação e modificação ultrassónica de ingredientes alimentares. In: Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011): Tecnologias de ultrassons para alimentos e bioprocessamento. New York: Springer, 2011. pp. 345–368.

Polifenóis, aminoácido e cafeína do chá verde

Aplicação ultrassónica:
Extração de compostos ativos do chá verde em água
Dispositivo recomendado:
UP400S

Carne de porco: tratamento de lombos em salmoura

Aplicação ultrassónica:
Para a salga em salmoura assistida por ultrassons, os lombos de porco (Longissimus dorsi) foram imersos em salmoura de cloreto de sódio (40 g L−1) e tratados a 5°C com ultrassons de baixa frequência (20 kHz) e baixa intensidade (2–4 W/cm−2). Foi investigado o efeito da cura assistida por ultrassons na microestrutura do tecido porcino, na desnaturação das proteínas, na capacidade de ligação à água (WBC), na capacidade de retenção de água (WHC), no coeficiente de difusão do cloreto de sódio (D) e no perfil de textura da carne (TPA). Os resultados mostraram que o tratamento ultrassónico provocou alterações microestruturais favoráveis no tecido da carne. A capacidade de retenção de água e as propriedades de textura foram melhoradas pelo tratamento ultrassónico em comparação tanto com as amostras salgadas em salmoura e sujeitas a massagem em tambor como com as amostras salgadas em salmoura em condições estáticas. Contudo, estes efeitos positivos dependiam fortemente da intensidade ultrassónica. Intensidades mais elevadas e/ou tempos de tratamento mais longos provocaram a desnaturação das proteínas. O modelo de coeficiente de difusão constante conseguiu descrever com precisão a cinética de difusão do NaCl durante a salga em salmoura. O tratamento ultrassónico aumentou significativamente a difusão do sal em comparação com as amostras salgadas em salmoura em condições estáticas, e o coeficiente de difusão aumentou exponencialmente com o aumento da intensidade ultrassónica.
Dispositivo recomendado:
UP200Ht com sonotrodo S26d40
Referência/Artigo científico:
Siro, I.; Ven, Cs.; Balla, Cs.; Jonas, G.; Zeke, I.; Friedrich, L. (2009): Aplicação de uma técnica de cura assistida por ultrassons para melhorar a difusão do cloreto de sódio na carne de porco. Jornal de Engenharia Alimentar 91/2, 2009. 353-362.

Porphyra yezoensis

Aplicação ultrassónica:
Degradação ultrassónica de polissacáridos de Porphyra yezoensis: 50mL de uma solução de polissacáridos de porphyra yezoensis a 1,0 g/100mL (peso seco) foram sonicados durante 4 hr com um UP400S.
Dispositivo recomendado:
UP400S; ultrassons pulsados (ciclos: 2 sec ligados/2 sec desligados) a 20°C.

Pós

Aplicação ultrassónica:
Moagem, desaglomeração e dispersão para obter um tamanho de partícula pequeno e relativamente uniforme.
Dispositivo recomendado:
UP200St

Ossos de rato

Aplicação ultrassónica:
Rutura de 1 gm em 5–7 min.
Dispositivo recomendado:
UP200St

Pele de rato

Aplicação ultrassónica:
Rutura de 1 gm em 1 min.
Dispositivo recomendado:
UP400S

Rauvolfia serpentina

Aplicação ultrassónica:
Extração do alcaloide reserpina.
Dispositivo recomendado:
UP100H

Rebaudiosídeo A

Aplicação ultrassónica:
Amostras de 10g de folhas secas e moídas de estévia foram extraídas em 100mL de água sob agitação contínua (com um agitador magnético). O valor de pH foi controlado com fosfato de sódio 0,01 M a pH 7. A amostra foi colocada num copo de vidro de 150 mL e sonicada com um sonicador de sonda (UIP500hd, 20kHz, 500W). A ponta do sonotrodo foi imersa cerca de 1,5 cm na suspensão de folhas de estévia. O dispositivo ultrassónico foi ajustado para uma potência de saída de 350W. Um tratamento de sonicação suave de 350 W durante 5–10 min., a uma temperatura de processo constante de 30°C, proporcionou um rendimento de rebaudiosídeo A de 30–34g por 100g de amostra. Após a sonicação, a solução do extrato foi centrifugada e filtrada através de uma membrana microporosa de 0,45 μm; o filtrado foi recolhido para análise do teor total de rebaudiosídeo A. O rendimento de extração do teor total de rebaudiosídeo A foi analisado por HPLC.
A extração assistida por ultrassons sem solventes permitiu obter um elevado rendimento de rebaudiosídeo A em comparação com métodos de extração tradicionais, como a extração térmica ou a maceração.
Dispositivo recomendado:
UIP500hd

Amido de arroz

Aplicação ultrassónica:
Rutura, isolamento de amido e quebra de ligações não covalentes entre proteínas e amido numa suspensão de farinha de arroz (33%) em 20 – 40 min.
Dispositivo recomendado:
UP500hd; 20 – 40 min.

Rotíferos

Aplicação ultrassónica:
Rutura celular do mesozooplâncton: por sonicação nas seguintes condições, com quatro caudais (200, 400, 520 e 800lh-1) e quatro amplitudes (25, 50, 75 e 100%), foi alcançada uma taxa de mortalidade entre 58 e 85%.
Dispositivo recomendado:
UP2000 com célula de fluxo
Referência/Artigo científico:
Viitaslo et al. (2005): Ozono, luz ultravioleta, ultrassons e peróxido de hidrogénio como tratamentos de água de lastro – Experiências com mesozooplâncton em água salobra de baixa salinidade. Journal of Marine Environmental Engineering, 8(1), 35–55.

S. fragilis

Aplicação ultrassónica:
Libertação de galactocinase em 4 min.
Dispositivo recomendado:
UP200St

Saccharomyces cerevisiae

Aplicação ultrassónica:
Inativação ultrassónica de Saccharomyces cerevisiae em meio de cultura Sabouraud e em solução salina.
Dispositivo recomendado:
UP400S
Referência/Artigo científico:
Yap, A.; Jiranek, V.; Grbin, P.; Barnes, M.; Bates, D. (2007): Estudos sobre a aplicação de ultrassons de elevada potência na limpeza e desinfeção de barricas e tábuas. Austr. NZ Wine Indust. J. 22(3)/ 2007. pp. 96–104.

Salvia miltiorrhiza Bunge

Aplicação ultrassónica:
Extração de compostos biologicamente ativos: Danshensu sódico e quatro tanshinonas (dihydrotanshione I, tanshinona I, criptotanshinona e tanshinona IIA).
Dispositivo recomendado:
UP100H

Salvia officinalis

Aplicação ultrassónica:
Extração de compostos ativos de Salvia Officinalis (salva) em menos de 2hr.
Dispositivo recomendado:
UP50H

Soro

Aplicação ultrassónica:
Homogeneização
Dispositivo recomendado:
UP200Ht

Fígados e pulmões com quistos e sangue positivo de ovinos (antigénios de Echinococcus granulosus)

Aplicação ultrassónica:
Fígados e pulmões de ovinos com quistos e sangue positivo (antigénios de Echinococcus granulosus em cordeiros): a amostra foi depois sonicada durante 2 × 15 sec em gelo até deixarem de ser visíveis protoescólices intactos.
Dispositivo recomendado:
UP200S; 2 x 15 sec.
Referência/Artigo científico:
Tabar et al. (2009): Resposta de anticorpos contra antigénios do líquido hidático, do protoescólex e do corpo inteiro de Echinococcus granulosus em cordeiros. Journal of Veterinary Research, Volume 10, Número 3; 2009. 283–288.

Trioleato de sorbitano, etanol (como solvente) e pó de Bi-2212

Aplicação ultrassónica:
Desaglomerar uma suspensão contendo o dispersante Sorbitant Trioleate, etanol (como solvente) e pó de Bi-2212.
Dispositivo recomendado:
UP200S; durante 3 min.
Referência/Artigo científico:
Mora et al. (2009): Fabrico de revestimentos supercondutores em ladrilhos cerâmicos estruturais.

Isoflavonas de soja

Aplicação ultrassónica:
Extração ultrassónica de isoflavonas de soja em água e solvente. Aumento do rendimento de até 15% na eficiência de extração.
Dispositivo recomendado:
UP200St
Referência/Artigo científico:
Rostagno et al. (2003), citado por Vilkhu, K.; Manasseh, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Recuperação e modificação ultrassónica de ingredientes alimentares. In: Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011): Tecnologias de ultrassons para alimentos e bioprocessamento. New York: Springer, 2011. pp. 345–368.

Proteína de soja

Aplicação ultrassónica:
Extração ultrassónica de proteína de soja em água e álcali (hidróxido de sódio). Aumento do rendimento em 53%. Verificou-se que a sonicação em linha era mais eficiente do que a extração descontínua (a sonicação em linha proporcionou um rendimento 23% superior ao da sonicação descontínua).
Dispositivo recomendado:
UIP1000hd para processamento descontínuo/em copo e com reator de célula de fluxo para sonicação em linha.
Referência/Artigo científico:
Moulton e Wang (1982), citados por Vilkhu, K.; Manasseh, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Recuperação e modificação ultrassónica de ingredientes alimentares. In: Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011): Tecnologias de ultrassons para alimentos e bioprocessamento. New York: Springer, 2011. pp. 345–368.

Cabeças de espermatozoides humanos

Aplicação ultrassónica:
Rutura em 10 min.
Dispositivo recomendado:
UP100H

Caudas de espermatozoides humanos

Aplicação ultrassónica:
Rutura imediata
Dispositivo recomendado:
UP100H

Stevia rebaudiana Bert.

Aplicação ultrassónica:
Extração ultrassónica do glicósido esteviosídeo a partir de amostras de 10 g de folhas secas de Stevia rebaudiana com quatro tamanhos de partículas (0,315 mm, 2 mm, 6,3 mm e folhas secas trituradas), que foram misturadas com diferentes solventes: água destilada e misturas de água/etanol (55% e 70%), com diferentes proporções de peso da amostra/volume de solvente: 1/10, 1/8, 1/5 (w/v), e depois expostas a ultrassons à temperatura ambiente. Tempo de sonicação: < 5 min.
Dispositivo recomendado:
UP200St

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Este tutorial explica qual o tipo de sonicador mais adequado às suas tarefas de preparação de amostras, como lise, rutura celular, isolamento de proteínas e fragmentação de ADN e ARN em laboratórios, análise e investigação. Escolha o tipo de sonicador ideal para a sua aplicação, volume e número de amostras e capacidade de processamento. A Hielscher Ultrasonics tem o homogeneizador ultrassónico ideal para si!

 

Sonicadores de elevado desempenho para qualquer dimensão

Os dispositivos de rutura celular e homogeneizadores de tecidos da Hielscher Ultrasonics estão disponíveis em qualquer dimensão, para qualquer volume. Quer necessite de sonicar pequenas amostras, grandes conjuntos de amostras, como placas de 96 poços, volumes médios ou cargas de camião por hora, o nosso portefólio oferece o sonicador ideal para a sua aplicação. Os homogeneizadores ultrassónicos compactos e de mão são ideais para o laboratório e a investigação, enquanto a nossa série industrial abrange toda a gama entre 0,5kW e 16kW por processador ultrassónico. Graças à possibilidade de instalação em conjuntos, os sonicadores Hielscher permitem processar praticamente qualquer volume. A robustez do equipamento ultrassónico da Hielscher permite o funcionamento 24/7 em serviço intensivo e em ambientes exigentes.
O software sofisticado e inteligente permite o mais elevado controlo do processo e a máxima comodidade do operador. Todos os dados de sonicação são registados automaticamente num cartão SD integrado. Outras funcionalidades inteligentes incluem a pré-configuração e gravação dos parâmetros de sonicação, ligação LAN e controlo remoto através do navegador.

A tabela abaixo dá-lhe uma indicação da capacidade de processamento aproximada dos nossos sonicadores de laboratório para a homogeneização de tecidos e outras tarefas de preparação de amostras:

Dispositivos recomendados Volume por lote Caudal
Sonicador para placas de 96 poços UIP400MTP placas multipoços/de microtitulação n.a.
CupHorn ultrassónico CupHorn para frascos ou copo n.a.
GDmini2 microrreator ultrassónico de fluxo n.a.
VialTweeter 0,5 a 1,5mL n.a.
UP100H 1 a 500mL 10 a 200mL/min
UP200Ht, UP200St 10 a 1000mL 20 a 200mL/min
UP400St 10 a 2000mL 20 a 400mL/min
Agitador ultrassónico de peneiros n.a. n.a.

Sonicador UP200Ht com microponta S26d2 para lise ultrassónica de amostras biológicas

Sonicador UP200Ht com microponta S26d2 de 2mm para a sonicação de pequenas amostras

Teremos todo o gosto em discutir o seu processo.

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