Sonikacja w badaniu leków i analizie siły ich działania
Homogenizacja i ekstrakcja ultradźwiękowa to powszechnie stosowane techniki przygotowania próbek przed analizą leków, np. do badań jakości, oceny surowców i badań siły działania. Sonikatory sondowe są szeroko stosowane do uwalniania substancji czynnych, takich jak substancje czynne farmaceutycznie (API), bioaktywne związki roślinne i inne substancje.
Przedanalityczne przygotowanie próbek w badaniu leków z wykorzystaniem sonikacji
Badania siły działania leków są niezbędne do określenia ilości związku czynnego w próbce leku. Analizę leków i badania siły ich działania stosuje się w farmakologii, toksykologii i kryminalistyce. Ze względu na swoistość i skuteczność wysokosprawna chromatografia cieczowa (HPLC) jest najczęściej stosowaną metodą analizy siły działania leków.
Kluczowa różnica między oznaczeniem a siłą działania polega na tym, że oznaczenie jest badaniem materiału w celu określenia jego składników i jakości, natomiast siła działania to ilość leku wymagana do uzyskania efektu o maksymalnej intensywności. Oba te terminy, oznaczenie i siła działania, są powszechnie używane w biochemii i farmakologii.
Sonikację stosuje się przed analizą siły działania i oznaczeniami w celu uwolnienia składników bioaktywnych lub substancji czynnych farmaceutycznie (API) z matrycy. Sonikacja umożliwia ekstrakcję związków docelowych z materiałów roślinnych (np. liści, korzeni itp.) lub rozpuszczenie postaci farmaceutycznej leku, takiej jak tabletki, aby udostępnić substancję czynną do dalszej analizy.
Homogenizatory ultradźwiękowe UP100H (100 watów) i UP400St (400 watów) do przedanalitycznych etapów przygotowania próbek, takich jak homogenizacja i ekstrakcja.
Protokół analizy leków krok po kroku
Przygotowanie próbek jest ważnym etapem analizy leków i badania siły ich działania oraz obejmuje kilka kroków zapewniających dokładne i odtwarzalne wyniki. Poniżej przedstawiono ogólne etapy przygotowania próbek przed analizą siły działania leków:
- Pobieranie próbek: Pierwszym krokiem jest pobranie odpowiedniej próbki produktu leczniczego, który może mieć postać stałą, ciekłą lub półstałą. Ważne jest, aby próbka była reprezentatywna dla całej partii oraz aby była właściwie przechowywana i poddawana odpowiednim czynnościom w celu zachowania jej jakości i stabilności.
- Homogenizacja próbki: Próbkę należy zhomogenizować, aby zapewnić równomierne rozmieszczenie leku w całej próbce. Ten etap ma kluczowe znaczenie w przypadku próbek stałych i półstałych. Sonikacja jest wysoce wydajną i niezawodną metodą homogenizacji, dlatego jest powszechnie stosowana w przygotowaniu próbek. Przeczytaj więcej o zastosowaniu homogenizatorów ultradźwiękowych do przygotowania próbek!
- Jeśli substancja docelowa jest uwięziona w matrycy komórkowej (np. materiale roślinnym, tkance komórkowej), należy ją uwolnić przed wykonaniem pomiaru analitycznego lub oznaczenia. Ekstrakcja ultradźwiękowa jest najlepszą techniką udostępniania uwięzionych substancji do pobrania i analizy. Przeczytaj więcej o ultradźwiękowej ekstrakcji związków bioaktywnych!
- Zmniejszenie wielkości próbki: Następnym krokiem jest zmniejszenie objętości próbki do ilości odpowiedniej do analizy. Można to osiągnąć przez odważenie części próbki lub zastosowanie dzielnika próbek.
- Rozcieńczanie próbki: Jeśli stężenie próbki jest zbyt wysokie, może być konieczne jej rozcieńczenie, aby mieściło się w zakresie liniowym oznaczenia. Użyty rozcieńczalnik powinien być odpowiedni dla leku i stosowanej metody oznaczania.
- Podział próbki na porcje: Rozcieńczoną próbkę należy podzielić na oddzielne porcje, aby zapewnić użycie takiej samej ilości próbki do każdego oznaczenia. Ten etap pomaga ograniczyć zmienność między oznaczeniami i poprawić odtwarzalność.
- Przechowywanie próbek: Próbki podzielone na porcje należy przechowywać w odpowiednich warunkach, np. w lodówce lub zamrażarce, aby zachować ich stabilność do czasu, gdy będą gotowe do analizy.
Te kroki stanowią ogólne wytyczne dotyczące przygotowania próbek i mogą się różnić w zależności od konkretnego leku i stosowanej metody oznaczania. Ważne jest przestrzeganie instrukcji dostarczonych przez producenta testu, aby zapewnić dokładne i wiarygodne wyniki.
Jak ultradźwięki wspomagają izolację związków bioaktywnych z materiału roślinnego?
Związki bioaktywne, takie jak terpeny, kannabinoidy lub flawonoidy, można izolować z roślin za pomocą procesu opartego na ultradźwiękach, zwanego ekstrakcją ultradźwiękową, który polega na poddawaniu zawiesiny zmielonego materiału roślinnego w rozpuszczalniku (np. alkoholu, wodzie, wodnym roztworze etanolu, heksanie itp.) działaniu ultradźwięków o dużej mocy. Zastosowanie intensywnej sonikacji do cieczy lub zawiesiny powoduje powstawanie kawitacji akustycznej. Zjawisko kawitacji akustycznej charakteryzuje się lokalnym występowaniem warunków o bardzo dużej gęstości energii, obejmujących bardzo duże różnice ciśnienia i temperatury, a także strugi cieczy i siły ścinające. W tym polu o dużej gęstości energii ściany komórkowe są perforowane i rozbijane, co powoduje uwalnianie materiału wewnątrzkomórkowego do otaczającego rozpuszczalnika. Po procesie sonikacji cząsteczki docelowe są całkowicie uwolnione z matrycy komórkowej i unoszą się w rozpuszczalniku. Za pomocą technik izolacji, takich jak odparowanie lub destylacja, substancję docelową można oczyścić i w razie potrzeby poddać dalszemu przetwarzaniu.
Ekstrakcję ultradźwiękową stosuje się w produkcji związków bioaktywnych (np. adaptogenów, olejków eterycznych, produktów bogatych w konopie i terpeny) przeznaczonych do spożycia jako suplementy diety, dodatki do żywności i środki lecznicze, a także w analizie leków.
Zestaw do ekstrakcji służący do izolacji substancji z materiału roślinnego: Sonikator sondowy UP400ST, filtr próżniowy Büchi i wyparka obrotowa do ekstrakcji związków fitochemicznych.
Laboratoryjne homogenizatory ultradźwiękowe do przygotowania próbek przed analizą leków
Hielscher Ultrasonics opracowuje, produkuje i dostarcza wysokowydajne sonikatory do homogenizacji i ekstrakcji. Homogenizatory ultradźwiękowe i ekstraktory Hielscher są stosowane w przemyśle farmaceutycznym i wytwarzaniu suplementów diety do produkcji i oceny jakości. Homogenizatory ultradźwiękowe są również stosowane do przygotowania próbek w badaniach leków, w tym w badaniach przesiewowych na obecność nielegalnych substancji w lekach, podrobionych lekach i próbkach pochodzących od ludzi.
Dzięki takim funkcjom jak precyzyjna regulacja amplitudy, automatyczne rejestrowanie danych i zdalne sterowanie przez przeglądarkę sonikatory Hielscher umożliwiają przygotowanie próbek o wysokim stopniu standaryzacji.
Poniższa tabela przedstawia orientacyjną wydajność przetwarzania naszych systemów ultradźwiękowych, od kompaktowych homogenizatorów ręcznych i sonikatorów MultiSample po przemysłowe procesory ultradźwiękowe do zastosowań komercyjnych:
| Objętość partii | Natężenie przepływu | Zalecane urządzenia |
|---|---|---|
| różne fiolki i naczynia | n.a. | CupHorn |
| płytki wielodołkowe/ mikrotitracyjne | n.a. | UIP400MTP | 10 fiolek po 0,5 do 1,5mL | n.a. | VialTweeter z UP200St |
| 0,01 do 250mL | 5 do 100mL/min | UP50H |
| 0,01 do 500mL | 10 do 200mL/min | UP100H |
| 10 do 1000mL | 20 do 200mL/min | UP200Ht |
| 10 do 2000mL | 20 do 400mL/min | UP400St |
Skontaktuj się z nami! / Zapytaj nas!
Literatura / Źródła
- Dent M., Dragović-Uzelac V., Elez Garofulić I., Bosiljkov T., Ježek D., Brnčić M. (2015): Comparison of Conventional and Ultrasound Assisted Extraction Techniques on Mass Fraction of Phenolic Compounds from sage (Salvia officinalis L.). Chem. Biochem. Eng. Q. 29(3), 2015. 475–484.
- Fernandes, Luz; Santos, Hugo; Nunes-Miranda, J.; Lodeiro, Carlos; Capelo, Jose (2011): Ultrasonic Enhanced Applications in Proteomics Workflows: single probe versus multiprobe. Journal of Integrated OMICS 1, 2011.
- Priego-Capote, Feliciano; Castro, María (2004): Analytical uses of ultrasound – I. Sample preparation. TrAC Trends in Analytical Chemistry 23, 2004. 644-653.
- Welna, Maja; Szymczycha-Madeja, Anna; Pohl, Pawel (2011): Quality of the Trace Element Analysis: Sample Preparation Steps. In: Wide Spectra of Quality Control; InTechOpen 2011.
Hielscher Ultrasonics produkuje wysokowydajne homogenizatory ultradźwiękowe o wielkości od laboratoryjnej do przemysłowej.

