Ultradźwiękowe przygotowanie próbki do analizy THC
- Ekstrakcja ultradźwiękowa jest sprawdzoną metodą produkcji THC, ale może być również stosowana do celów analitycznych.
- Ultradźwięki to powszechna metoda przygotowywania próbek stosowana do analizy całkowitej zawartości THC w produktach z konopi indyjskich.
- Ekstrakcja ultradźwiękowa jest stosowana do próbek przed analizą TLC, GC i HPLC.
Ultradźwiękowa ekstrakcja THC
THC lub tetrahydrokannabinol (delta-9-tetrahydrokannabinol) to substancja chemiczna, która powoduje większość efektów psychologicznych marihuany. Znanych jest ponad 400 różnych odmian konopi indyjskich. W zależności od konkretnej odmiany, konopie indyjskie mogą zawierać zaledwie 0,3% wagowych THC. W innych odmianach zawartość THC może sięgać nawet 20% wagowych.
Również różne produkty z konopi indyjskich znacznie się różnią: Średnie stężenie THC w marihuanie wynosi od 1 do 5%; w haszyszu zawartość THC wynosi od 5 do 15%, a w oleju haszyszowym średnio 20%. THC w rekreacyjnych dawkach marihuany jest bardzo zmienne, a im niższa zawartość THC w marihuanie, tym więcej użytkownik musi spożyć, aby doświadczyć pożądanych efektów.
Ultradźwiękowe przygotowanie próbki służy do analizy zawartości THC
- do kontroli jakości rekreacyjnych produktów THC,
- do określania jakości farmaceutycznych produktów THC,
- dla rozróżnienia konopi narkotycznych i włóknistych.
Do analizy THC powszechnie stosowane są następujące metody chromatograficzne: Chromatografia cienkowarstwowa (TLC), chromatografia gazowa (GC) i wysokosprawna chromatografia cieczowa (HPLC).
Ultradźwiękowy protokół przygotowania próbki do analizy TLC
Przygotowanie próbek: W celu przygotowania próbek, wysuszony materiał roślinny musi zostać zmacerowany i zmielony na jednorodny proszek. W przypadku ekstrakcji ultradźwiękowej, 500 mg proszku z konopi indyjskich i 5 ml mieszaniny metanolu i chloroformu (stosunek 9 : 1) miesza się w fiolce. Sonikacja może być stosowana przy użyciu ultrasonicator z mikro końcówką VialTweeter lub ultradźwiękowy cuphorn. Czas sonikacji wynosi około 5 minut. Następnie pozostawić próbkę na co najmniej 5 minut. Rozcieńczyć klarowny supernatant mieszaniną ekstrakcyjną (v/v: 1 : 10). Wolne THC: 1 μl na płytce TLC
Dekarboksylacja: 100 μl ekstraktu odparowuje się do sucha. Pozostałość ogrzewa się w temperaturze 180 ℃ przez 4 minuty. Dodać 500 μl metanolu-chloroformu (v/v 9 : 1). Sonikacja przez 5 min. Rozcieńczyć klarowny supernatant mieszaniną ekstrakcyjną (v/v: 1 : 10).
Kalibracja: 20ng, 60ng, 100ng, 140ng
HPTLC:
TLC żel krzemionkowy F-254, Merck 5729
Skaner TLC II, oprogramowanie CATS3, Camag Muttenz Eluens:
Etyloacetat : Toluol : Chloroform = 3 : 17 : 0,25 (v/v/v)
Derywatyzacja postchromatograficzna: Fast Blue Salt 0,1% w 0,1 M NaOH
Densytometria przy 550 nm
Tetrahydrokannabinol (Δ9-THC) do analizy i ekstrakcji
Ultradźwiękowy protokół przygotowania próbki do analizy GC
Przygotowanie próbki: Wysuszony materiał roślinny jest macerowany i mielony na jednorodny proszek. Do ekstrakcji w fiolce miesza się 500 mg proszku z konopi indyjskich i 10 ml mieszaniny metanolu i heksanu (stosunek 9 : 1). Sonikacja może być stosowana przy użyciu urządzenie ultradźwiękowe z sondą z mikro końcówką VialTweeter lub ultradźwiękowy cuphorn. Sonifikować próbkę przez 15-20 min. Wstrząsnąć próbką i pozostawić na co najmniej 5 minut. Rozcieńczyć klarowny supernatant mieszaniną ekstrakcyjną (v/v 1:20).
Dekarboksylacja: we wkładce
Temperatura wtryskiwacza 250 ℃
Kalibracja: 5 ng/μL do 250 ng/μL
GC: HP 6890 z 5973 MSD i 7683 autosamplerem: 1μL, czas bez rozdzielania: 2 min.
Kolumna: HP-5 MS, 30 m, średnica 250 μm, grubość warstwy 0,25 μm
Gaz nośny: He, 35 psi, stały przepływ: 4 mL/min.
Piekarnik: 100 ℃ przez 1 min.; wzrost temperatury o 15 ℃ / min. do 280 ℃; 280 ℃ przez 5 min. MSD: SCAN: m/e 35 – 550
Ultradźwiękowy protokół przygotowania próbki do analizy HPLC
Przygotowanie próbki (analogiczne do przygotowania GC): Wysuszony materiał roślinny jest macerowany i mielony na jednorodny proszek. Do ekstrakcji w fiolce miesza się 500 mg proszku z konopi indyjskich i 10 ml mieszaniny metanolu i heksanu (stosunek 9 : 1). Sonikacja może być stosowana przy użyciu ultrasonograf z sondą z mikro końcówką VialTweeter lub ultradźwiękowy cuphorn. Sonifikować próbkę przez 15-20 min. Wstrząsnąć próbką i pozostawić na co najmniej 5 minut. Rozcieńczyć klarowny supernatant mieszaniną ekstrakcyjną (v/v 1:20).
VialTweeter do ultradźwiękowego przygotowania próbek
Kolumna wstępna: LiChrospher 60, RP-Select B, 5μm (Merck 50963)
Kolumna: LiChroCart 125-4, Lichrospher 60, RP-Select B, 5 μm (Merck 50829)
Eluent: izokratyczny 36% TEAP 25 mmol/L, 64% acetonitryl kwantyfikacja przy 210nm
Kalibracja: 0,001 – 010 μg/μL
Kalibracja: 0,01 - 0,50 μg/μL
Czas retencji: dla CBD: 6,2 min; dla CBN: 8,0 min; dla THC: 9,4 min; dla THC-A: 11,0 min.
LOD: CBD 0,5%, CBN 0,5%, THC 0,15%, THC-A 1%
UP200St z mikro-końcówką do sonikacji próbki
Literatura/Referencje
- Werner Bernhard, Franziska Penitschka, Alain Broillet, Prisma Regenscheit (2006): Chemiczne analizy kryminalistyczne THC haltigem Hanfkraut. Od DC przez GC do metody HPLC. Applica 2006.
Fakty, które warto znać
marihuana Składa się z suszonych kwiatów oraz liści i łodyg żeńskiej rośliny konopi indyjskich. Jest to najczęściej spożywana forma marihuany, która zawiera od 3% do 20% THC. Specyficzne, wysoce wyhodowane formy marihuany osiągają zawartość THC przekraczającą 30%. Marihuana jest materiałem źródłowym wszystkich innych odmian produktów z konopi zawierających THC. Aby przekształcić najobficiej występujący kannabinoid, kwas tetrahydrokannabinolowy (THCA), w psychoaktywny THC, należy zainicjować proces dekarboksylacji. Dlatego też konopie indyjskie i ich ekstrakty muszą zostać podgrzane lub odwodnione, aby spowodować dekarboksylację.
kief odnosi się do proszku, bogatego w trichomy, który jest przesiewany z liści i kwiatów konopi. Jest spożywany w postaci proszku lub sprasowany i używany w ciastkach haszyszowych.
haszysz lub haszysz to skoncentrowane ciasto żywiczne lub kulka, która jest wytwarzana z prasowanego kiefu lub z żywicy, która jest zeskrobywana z powierzchni rośliny i zwijana w kulki. Występuje w różnych kolorach, od czarnego do złotobrązowego, w zależności od czystości i źródła. Może być spożywana doustnie lub palona, np. w fajce, fajce wodnej, bongu, bubblerze, waporyzatorze, przy użyciu gorącego noża, palona w jointach, mieszana z pąkami konopi lub tytoniem, palona jako tokes z butelki lub używana jako składnik żywności.
nalewka z konopi indyjskich odnosi się do ekstraktu kannabinoidów w alkoholu. Kannabinoidy są ekstrahowane z rośliny konopi indyjskich przy użyciu wysokoprocentowych alkoholi (głównie alkoholu zbożowego) w celu stworzenia nalewki.
olej haszyszowy to żywiczna matryca kannabinoidów wytwarzana przez ekstrakcję rozpuszczalnikiem, uformowana w stwardniałą lub lepką masę. Olej haszyszowy jest jednym z najsilniejszych produktów z konopi indyjskich ze względu na wysoki poziom związków psychoaktywnych. Stosowanie oleju haszyszowego ekstrahowanego butanem i dwutlenkiem węgla w stanie nadkrytycznym zyskuje ostatnio coraz większą popularność.
Napary odnoszą się do różnych rodzajów naparów z konopi indyjskich, które różnią się od siebie szeroką gamą nielotnych rozpuszczalników, które można wykorzystać do produkcji naparu z konopi indyjskich. Aby przygotować taki napar, substancja roślinna konopi jest mieszana z rozpuszczalnikiem, a następnie prasowana i filtrowana w celu przeniesienia olejów z rośliny do rozpuszczalnika. Powszechnie stosowanymi rozpuszczalnikami są masło kakaowe, masło mleczne, olej spożywczy, gliceryna i środki nawilżające skórę.
medyczna marihuana odnosi się do stosowania konopi indyjskich jako zalecanej przez lekarza terapii ziołowej, a także syntetycznego THC i kannabinoidów. Takie użycie wymaga zazwyczaj recepty, a dystrybucja odbywa się zwykle w ramach określonych przez lokalne przepisy. Kilka badań wykazało, że stosowanie marihuany lub jej pochodnych przeciwdziała np. nudnościom i wymiotom wywołanym chemioterapią, bólowi neuropatycznemu i stwardnieniu rozsianemu.