Ultradźwiękowe odłączanie komórek

Ultradźwiękowe odrywanie komórek jest wysoce skuteczną i niezawodną techniką przygotowywania próbek stosowaną w różnych dziedzinach biologii komórkowej i biotechnologii. Wykorzystując fale ultradźwiękowe, sonikator wielodołkowy UIP400MTP odrywa przylegające komórki od powierzchni hodowli i przygotowuje zawiesiny komórkowe do dalszych zastosowań. Sonikacja oferuje kilka zalet w porównaniu z tradycyjnymi enzymatycznymi, chemicznymi i mechanicznymi technikami odrywania, co czyni ją cennym narzędziem dla naukowców.

Zasada ultradźwiękowego odrywania komórek

Ultradźwiękowe odłączanie komórek opiera się na wykorzystaniu ultradźwięków mocy do zakłócania interakcji między komórkami a podłożem, do którego są przymocowane. Fale ultradźwiękowe generują mikropęcherzyki, kawitację akustyczną i wibracje w pożywce hodowlanej, wytwarzając siły mechaniczne, które delikatnie, ale skutecznie usuwają komórki. Proces ten jest zwykle przeprowadzany przy użyciu bezkontaktowego sonikatora UIP400MTP do płytek wielodołkowych.

Poniżej znajduje się przykładowa instrukcja odrywania komórek przy użyciu sonikatora wielodołkowego UIP400MTP.
 

Sprzęt i materiały do ultradźwiękowego odrywania komórek

• Bezkontaktowy sonikator do płytek wielodołkowych UIP400MTP: Ten wysokowydajny sonikator jest kluczowym narzędziem. Sonikator płytkowy UIP400MTP nadaje się do wszystkich standardowych płytek wielodołkowych i mikrotitracyjnych, a także do płytek Petriego. Fale ultradźwiękowe zapewniają niezbędną energię mechaniczną do oderwania komórek.
• Płytki do hodowli komórkowych lub szalki Petriego: Standardowe naczynia używane do hodowli przylegających kultur komórkowych.
• Podłoże hodowlane: Płynne podłoże, w którym hodowane i utrzymywane są komórki.
• Sterylny PBS (sól fizjologiczna buforowana fosforanami): Służy do mycia komórek przed odłączeniem.
• Rurki zbiorcze: Do zbierania zawiesiny odłączonych komórek.

Protokół oderwania ultradźwiękowego przy użyciu sonikatora płytkowego UIP400MTP

1. Przygotowanie
   – Upewnij się, że cały sprzęt jest czysty i sterylny, aby zapobiec zanieczyszczeniu.
   – Podgrzać podłoże hodowlane i PBS do odpowiedniej temperatury (zwykle 37°C).
2. Mycie komórek
   – Odessać pożywkę z kolby lub płytki do hodowli komórkowej.
   – Delikatnie przepłukać komórki sterylnym PBS w celu usunięcia pozostałości pożywki i oderwanych komórek.
3. sonikacja
   – Dodaj niewielką objętość PBS lub świeżego podłoża hodowlanego do kolby lub płytki, aby przykryć monowarstwę komórek.
   – Umieścić szalkę Petriego lub płytkę w sonikatorze UIP400MTP.
   – Sonikacja przez określony czas, zwykle od kilku sekund do kilku minut, w zależności od rodzaju komórek i siły przyczepienia.
4. Pobieranie zawiesiny komórek
   – Po sonikacji obserwować komórki pod mikroskopem, aby upewnić się, że zostały oderwane.
   – Delikatnie pipetować zawiesinę komórek, aby zebrać oderwane komórki.
   – Przenieść zawiesinę do probówki zbiorczej.
5. Przetwarzanie po odłączeniu
   – W razie potrzeby odwirować zawiesinę komórek w celu ich zagęszczenia.
   – Ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce lub buforze do dalszych zastosowań.

Uwagi: Parametry (takie jak czas i intensywność sonikacji) muszą być zoptymalizowane dla różnych typów komórek, aby uniknąć ich uszkodzenia. Niektóre delikatne typy komórek mogą być bardziej wrażliwe na działanie ultradźwięków, co wymaga starannej optymalizacji.

Praktyczne zastosowania ultradźwiękowego odrywania komórek

Ultradźwiękowe odrywanie komórek jest stosowane w różnych badaniach i warunkach klinicznych:

1. Cytometria przepływowa: Przygotowanie zawiesin pojedynczych komórek do analizy.
2. Liczenie komórek i testy żywotności: Odłączanie komórek w celu dokładnego zliczania i oceny żywotności.
3. Subkultury: Przenoszenie komórek z jednego naczynia hodowlanego do drugiego.
4. Eksperymenty z zakresu biologii molekularnej: Izolacja komórek do ekstrakcji DNA, RNA i białek.

Przeczytaj tutaj, jak sonikator UIP400MTP do 96-dołkowych płytek jest używany do usuwania biofilmu w testach biofilmu, takich jak protokół ASTM E2799!

Dlaczego należy zastąpić skrobanie komórek odrywaniem komórek za pomocą sondy do mikropłytek UIP400MTP?

Zastąpienie skrobania komórek odrywaniem komórek za pomocą sonikatora mikropłytek UIP400MTP oferuje badaczom kilka korzyści. W przeciwieństwie do ręcznego skrobania, precyzyjnie kontrolowana sonikacja za pomocą UIP400MTP zapewnia spójne i delikatne odrywanie komórek, minimalizując uszkodzenia mechaniczne i zachowując żywotność komórek. UIP400MTP zapewnia precyzyjną kontrolę nad parametrami sonikacji, umożliwiając jednolitą obróbkę we wszystkich dołkach i eliminując zmienność między próbkami. Metoda ta jest szybsza, bardziej wydajna i skalowalna, dzięki czemu idealnie nadaje się do zastosowań o wysokiej wydajności przy jednoczesnym zachowaniu powtarzalności i integralności wrażliwych kultur komórkowych. Badanie porównawcze można znaleźć tutaj!