Hoe Hielscher ultrasone weefselhomogenisators gebruiken
Voordat intracellulaire macromoleculen zoals eiwitten, organellen, enzymen of actieve stoffen worden gezuiverd of gekarakteriseerd, is het essentieel om een efficiënte methode te gebruiken voor weefsellyse en celdesintegratie. Ultrasoon is een zeer effectieve techniek voor celpreparatie, waarbij intracellulaire materialen snel vrijkomen in een bufferoplossing. De mechanische schuifkrachten die worden gegenereerd tijdens ultrasone weefselhomogenisatie kunnen nauwkeurig worden aangepast aan specifieke materialen. Dit maakt zachte preparatie van zachte weefsels of DNA/RNA afschuiving met mildere sonicatie mogelijk, maar ook intense ultrasone cavitatie voor destructieve celdisruptie (bijv. voor nannochloropsis, gist).
Hieronder vindt u een selectie van weefsels, cellen en ander biologisch materiaal met aanbevolen sonicatieprotocollen en richtlijnen voor het efficiënt voorbereiden van uw monsters met behulp van een ultrasone weefselhomogenisator of celvergruizer.
Hoe bereid je lysaten, homogenaten en extracten van biologisch materiaal?
In alfabetische volgorde:
Acetobacter suboxydans
Actinomyces
ALP- en LDH-activiteit
Bepaling van ALP- en LDH-activiteit en eiwitgehalte
Bevroren celmonsters werden gedurende 20 minuten op ijs ontdooid, gevolgd door cellyse met PBS met 1% Triton X-100 gedurende 50 minuten op ijs. Tijdens de cellyse werd elk monster gedurende 1 minuut bij 80 W gesoniteerd met een ultrasone processor. UP100H (Hielscher Ultrasonics).
Apparaataanbeveling:
UP100H
Referentie/Onderzoekspaper:
Bernhardt, A. et al. (2008): Gemineraliseerd collageen - een kunstmatige, extracellulaire botmatrix - verbetert de osteogene differentiatie van beenmergstromale cellen.
Amorf tricalciumfosfaat (ATCP)
ATCP-nanodeeltjes, die een uitzonderlijk reactieve precursor zijn voor de vorming van hydroxyapatiet, werden gedispergeerd in chloroform met 5% (w/w) Tween20 met verwijzing naar PLGA met behulp van het Hielscher ultrasoonapparaat UP400S bij 320 W gedurende 5 min. met gepulseerde intervallen (50%) om de deeltjes te laten ontspannen.
Apparaataanbeveling:
UP400S
Referentie/Onderzoekspaper:
Mohn, Dirk; Ege, Duygu; Feldman, Kirifl; Schneider, Oliver D.; Imfeld, Thomas; Boccaccini, Aldo R. (2014): Bolvormige calciumfosfaat nanodeeltjesvullers maken polymeerverwerking van botfixatieapparaten met hoge bioactiviteit mogelijk. The Free Library 01 mei 2010. 21 januari 2014.
anthocyanen
Anthocyanen: di-glucosiden, monoglucosiden, geacyleerde monoglucosiden en geacyleerde di-glucosiden van peonidine, malvidine, cyanidine, petunidine en delphinidine: extractie uit druivenschil in 40 sec.; pH 5,0; verhouding materiaal/extractievloeistof 1:6.
Apparaataanbeveling:
UP100H
Antrachinonen
Extractie van antrachinonen uit de wortels van Morinda citrifolia
Apparaataanbeveling:
UP400S
Abrikozenpitten
Ultrasone voorbehandeling voor het extraheren van olie uit de zaden van Jatropha curcas L. om de extractie te verbeteren.
Apparaataanbeveling:
UP400S
Artemisia selengensis Turcz
Extractie van Rutine (1,0 g gemalen monster in 30 ml methanol) bij 25°C in 5-10 min.
Apparaataanbeveling:
UP50H
Aspergillus flavus
Ultrasone inactivering van Aspergillus flavus in Sabouraud groeimedium
Apparaataanbeveling:
UP200S
B. sphaericus / Bacillus sphaericus
Bacillus anthracis sterne 34F2 sporen
Ultrasone verwijdering van sporen van Bacillus anthracis sterne 34F2, Bacillus cereus ATCC 21281 en Bacillus thuringiensis ATCC 33680. Het gebruik van 150 ppm natriumhypochloriet in combinatie met ultrasoon geluid leidde tot inactivering van sporen.
Apparaataanbeveling:
UP200S bij 100% amplitude
Referentie/Onderzoekspaper:
amarthi, S.R. et al.: Effectiveness of Ultrasound in Desoiling Bacillus spp spores Embedded in Complex Food Matrices Attached to Various Contact Surfaces.
Bacillus cereus ATCC 21281 sporen
Ultrasone verwijdering van sporen van Bacillus anthracis sterne 34F2, Bacillus cereus ATCC 21281 en Bacillus thuringiensis ATCC 33680. Het gebruik van 150 ppm natriumhypochloriet in combinatie met ultrasoon geluid leidde tot inactivering van sporen.
Apparaataanbeveling:
UP200S bij 100% amplitude
Referentie/Onderzoekspaper:
amarthi, S.R. et al.: Effectiveness of Ultrasound in Desoiling Bacillus spp spores Embedded in Complex Food Matrices Attached to Various Contact Surfaces.
Bacillus subtilis
Ultrasoon geluid met hoog vermogen en lage frequentie in kleine volumes bacteriesuspensie resulteert in een voortdurende afname van het aantal bacteriële cellen, d.w.z. de dodingssnelheid overheerst. In grotere volumes resulteert sonicatie in een aanvankelijke stijging van het aantal cellen, wat duidt op een ontmenging van de bacteriën, maar deze aanvankelijke stijging daalt vervolgens als de ontmenging is voltooid en de dodingssnelheid belangrijker wordt.
Apparaataanbeveling:
UP200St
Referentie/Onderzoekspaper:
Joyce, E.; Phull, S. S.; Lorimer, J. P.; Mason, T. J. (2003): De ontwikkeling en evaluatie van ultrageluid voor de behandeling van bacteriesuspensies. Een onderzoek naar frequentie, vermogen en sonificatietijd op gekweekte Bacillus-soorten. Ultrason. Sonochem. 10/2003. pp. 315-318.
Barley's Alpha-amylase
Stimuleren of remmen van de activiteit van alfa-amylase van gerst: Het monster (10 g gerstzaden) werd gedispergeerd in 80 ml leidingwater bij directe sonicatie met ultrasone intensiteit van 20, 60 en 100% amplitude, cyle van 50% en met extra agitatie. De sonotrode werd ongeveer 9 mm in de oplossing gedompeld. De oplossing werd verwerkt bij een constante temperatuur van 30C° gedurende 5, 10 en 15 minuten.
Apparaataanbeveling:
UP200Samplitudes: 20, 60 en 100%; stijl van 50%; Sonotrode S3, 30C°.
Referentie/Onderzoekspaper:
Yaldagard et al. (2008): Effect van ultrasoon vermogen op de activiteit van alfa-amylase van gerst bij de behandeling van zaden na het zaaien
Brandnetel
Celdisruptie/doden van mesozoöplankton: door sonicatie onder de volgende omstandigheden van vier stroomsnelheden (200, 400, 520 en 800 lh-1) en vier amplitudes (25, 50, 75 en 100 %) werd een dodende werking tussen 61 en 97 % bereikt.
Apparaataanbeveling:
UIP2000hd
Referentie/Onderzoekspaper:
Viitaslo et al. (2005): Ozon, ultraviolet licht, ultrageluid en waterstofperoxide als ballastwaterbehandeling – Experimenten met mesozoöplankton in brak water met een laag zoutgehalte.
Bifidobacteriestammen: B. breve ATCC 15700, B. animalis subsp. Lactis (BB-12), B. longum (BB-46).
Bacteriecelvernietiging en afgifte van ß-galactosidase van Bifidobacteriestammen: B. breve ATCC 15700, B. animalis subsp. Lactis (BB-12), B. longum (BB-46): 100 ml gepasteuriseerde melk vermengd met de bacteriecultuur werd toegepast met ultrasoon geluid. Cavitatie veroorzaakt de vernietiging van de bacteriecellen en tegelijkertijd het vrijkomen van ß-galactosidase.
Apparaataanbeveling:
UIP1000hd: amplitude: 10%, vermogen: 80W, amplitude: 100%, vermogen: 200W; Sonotrode BS2d34; 15-30 min.
Referentie/Onderzoekspaper:
Hung et al. (2009): Ultrasound Aided Yogurt Fermentation with Probiotics.
BL21(DE3) pAtHNL cellen (cellen van Arabidopsis thaliana)
Celdisruptie: 15 g BL21-(DE3)_pAtHNL cellen werden langzaam gesuspendeerd in 50 mM kaliumfosfaatbuffer (pH 7,5) bij 0 degC.
Apparaataanbeveling:
UP200S + sonotrode S14D: bij 70W/cm2 (4 x 5 min), gekoeld in een ijsbad
Referentie/Onderzoekspaper:
Okrob, D. et al (2009): Hydroxynitril Lyase van Arabidopsis thaliana: Identification of Reaction Parameters for Enantiopure Cyanohydrin Synthesis by Pure and Immobilized Catalyst. Adv. Synth. Catal. 2011, 353, 2399 - 2408.
Bloedcellen (rood en wit)
Boldine van Boldobladeren (Peumus boldus Molina)
Een belangrijke werkzame stof in boldo is boldine ((S)-2,9-dihydroxy-1,10-dimethoxiaporafine), dat naast catechine ((2S,3R)-2-(3,4-dihydroxyfenyl)-3,4-dihydro-1(2H)-benzopyran-3,5,7-triol) de belangrijkste componenten zijn van de alkaloïde- en flavonoïdefractie in boldobladeren. Boldine is een sterke antioxidant die peroxidatieve schade door vrije radicalen ondergaat en fungeert als een efficiënte beschermer van hydroxylradicalen.
Extractieprocedure: Voor een typische extractieprocedure werden monsters van boldobladeren geëxtraheerd met 1 liter gedestilleerd water bij atmosferische druk met behulp van de ultrasoonator UIP1000hd in batch- en doorstroommodus. De extractietijd ligt tussen 10 en 40 minuten, met een ultrasone intensiteit van 10 tot 23 W/cm2en een temperatuurbereik van 10 tot 70 °C. De beste resultaten werden bereikt onder de volgende omstandigheden: ultrasone intensiteit van 23 W/cm2 gedurende 40 min. bij een temperatuur van 36°C
Resultaten: De analyseresultaten laten zien dat sonicatie met hoog vermogen de afgifte van analyten van plantaardig matrixmateriaal van Boldo aanzienlijk verbetert in vergelijking met de conventionele methode: door sonicatie werd in 30 minuten een gelijke hoeveelheid vrijgegeven, terwijl de conventionele extractietijd 2 uur was.
Chemat (2013) en collega's hebben aangetoond dat ultrasoon ondersteunde extractie de efficiëntie van de plantenextractie verbetert en tegelijkertijd de extractietijd verkort bij een verhoogde concentratie van de extracten (dezelfde hoeveelheid oplosmiddel en plantmateriaal). Uit analyse bleek dat de geoptimaliseerde condities waren: sonicatievermogen 23 W/cm2 met UIP1000hd gedurende 40 min. en een temperatuur van 36°C. De geoptimaliseerde parameters van de ultrasone extractie zorgen voor een betere extractie vergeleken met een conventionele maceratie in termen van procestijd (30 min. in plaats van 120 min.), hogere opbrengst, hogere energie-efficiëntie, verbeterde reinheid, hogere veiligheid en betere productkwaliteit.
Apparaataanbeveling:
UIP1000hd met sonotrode BS2d34 en flowcel
Referentie/Onderzoekspaper:
Petigny, L.; Périno-Issartier, S.; Wajsman, J.; Chemat, F. (2013): Batch- en continue ultrageluidondersteunde extractie van Boldobladeren (Peumus boldus Mol.). Internationaal Tijdschrift voor Moleculaire Wetenschap 14, 2013. 5750-5764.
Rundsserumalbumine (BSA)
Micro-inkapseling in poly(melkzuur-co-glycolzuur) in 40 sec.
Apparaataanbeveling:
GDmini
Referentie/Onderzoekspaper:
Freitas et al. (2005): Doorstroom ultrasone emulsificatie gecombineerd met statisch micromixen voor aseptische productie van microsferen door middel van vloeistofextractie.
Hersenstam + bijnier
Dispersie en nucleotidenanalyse; monstergrootte: 10 mg monsters in 10 ml vloeistof.
Apparaataanbeveling:
UP50H
Candida albicans
Koolhydraten, polysachariden en andere functionele verbindingen
Extractie van koolhydraten, polysachariden en andere functionele verbindingen
Apparaataanbeveling:
UP200St
Carnosinezuur uit rozemarijn
Extractie van carnosinezuur, een werkzame stof, uit rozemarijn.
Apparaataanbeveling:
UP400S
Capsaïcinoïden
Extractie van capsaïcinoïden (capsaïcine, nordihydrocapsaïcine) uit chilipepers: Capsaïcinoïden uit Capsicum frutescens pepers werd verkregen via ultrasone extractie onder de volgende omstandigheden: oplosmiddel: 95% (v/v) ethanol, oplosmiddel/massaverhouding van 10 ml/g, 40 min. ultrasone extractietijd, 45°C extractietemperatuur. Extractierendement: 85% van de capsaïcinoïden.
Apparaataanbeveling:
UP400S
Carotenoïden, bètacarotenoïden
cDNA
Poly-A RNA werd gezuiverd met de Dynabeads mRNA zuiveringsset (Invitrogen) volgens de instructies van de fabrikant en werd behandeld gedurende 30 minuten bij 37 ° C met TURBO DNase (Ambion; 0,2 eenheden / 1 ug RNA). Eerste- en tweedestrengsynthese volgde het protocol van de fabrikant. Ongeveer 500ng dubbelstrengs cDNA werd gefragmenteerd door sonicatie met Hielscher's UTR200. DNA werd geparcelleerd in 2% hoge-resolutie agarose gel en 230-270 bp fragmenten werden gesneden.
Apparaataanbeveling:
UTR200 of TD_CupHorn
Referentie/Onderzoekspaper:
Delft, J. van; Gaj, St.; Lienhard,M.; Albrecht, M. W.; Kirpiy, A.; Brauers, K.; Claessen, S.; Lizarraga, D.; Lehrach, H.; Herwig, R.; Kleinjans, J. (2012): RNA-Seq biedt nieuwe inzichten in de transcriptoomreacties geïnduceerd door de kankerverwekkende stof benzo[a]pyreen. Toxicologische Wetenschappen 130/2, 2012. 427-439.
Caryophanon latum
Extractie van glucosamine, muraminezuur, alanine, glutaminezuur en lysine uit caryophanon datum.
Apparaataanbeveling:
UP100H
cellulose
Homogenisering/bereiding van isotopisch homogene cellulose.
Apparaataanbeveling:
UP200Sin een ijsbad
Referentie/Onderzoekspaper:
Laumer et al. (2009): A novel approach for the homogenization of cellulose to use microamounts for stable isotope analyses.
Cellulose nanokristallen (CNC) bereid uit eucalyptus cellulose CNC's
Cellulose nanokristallen (CNC) bereid uit eucalyptuscellulose CNC's werden gemodificeerd door de reactie met methyladipoylchloride, CNCm, of met een mengsel van azijnzuur en zwavelzuur, CNCa. Daarom werden gevriesdroogde CNC's, CNCm en CNCa opnieuw gedispergeerd in zuivere oplosmiddelen (EA, THF of DMF) bij 0,1 wt%, door magnetisch roeren gedurende een nacht bij (24 ± 1) C, gevolgd door 20 minuten in een sonicatiebad met UP100H Hielscher Ultrasonics (Duitsland), uitgerust met een 130 W/cm2 sonotrode, bij 24 ± 1 degC. Daarna werd CAB toegevoegd aan de CNC-dispersie, zodat de uiteindelijke polymeerconcentratie 0,9 wt% was.
Apparaataanbeveling:
UP100H; bij 24 degC gedurende 20 min.
Referentie/Onderzoekspaper:
Blachechen, L. S. et al (2013): Interplay of colloidal stability of cellulose nanocrystals and their dispersibility in cellulose acetate butyrate matrix. Cellulose 2013.
Cellulose uit suikerrietbagasse
ChIP-test
Ultrasoon wordt gebruikt voor cellyse om het chromatine vrij te maken. Milde (gepulseerde) sonicatie wordt gebruikt om het chromatine te fragmenteren. Bovendien versnelt ultrasoon geluid de binding van antilichamen aan doeleiwitten en verkort daardoor de immunoprecipitatietijd.
Apparaataanbeveling:
UP100H
Referentie/Onderzoekspaper:
Basselet, P. et al. (2008): Monsterverwerking voor DNA-chiparraygebaseerde analyse van enterohemorragische Escherichia coli (EHEC).
Lauri, A. (2005): Moleculaire analyse van de ontwikkeling van bloemblaadjes door X-ChIP en two-hybrid technologie. Proefschrift Universiteit van Keulen 2005.
chromatine
Scheren van chromatine
Apparaataanbeveling:
UP400S; bij 30% amplitude en 0,5 cyclus; op ijs.
Referentie/Onderzoekspaper:
Oh et al. (2003): Acetyl-CoA Carboxylase Gene Wordt Gereguleerd Door Sterol Regulatory Element-binding Protein-1 in de Lever.
Chromatine-extractie
Het lysaat van MEL DS19-cellen werd gesonitiseerd met 10 ronden van 20 seconden elk bij 70% van de maximale output met de Hielscher 200W ultrasone processor UP200H.
Apparaataanbeveling:
UP200H70% van maximaal vermogen; pulsmodus: 10 cycli van elk 20 sec.
Referentie/Onderzoekspaper:
Kang, H. Ch. et al (2010): PIAS1 reguleert CP2c lokalisatie en actieve promotor complex vorming in erytroïde cel-specifieke a-globine expressie. Nucleic Acids Res. 38/16, 2010. pp. 5456-5471.
chromatografie
Sonicatie van het adsorbens in het oplosmiddel verwijdert agglomeraten binnen enkele seconden en bereidt een uniforme, gemakkelijk te vullen kolom voor. Relevant voor adsorbensvoorbereiding (bijv. silicagel) voorafgaand aan kolomchromatografie.
Apparaataanbeveling:
UP400S
Cladoceranen
Celverstoring van mesozoöplankton
Apparaataanbeveling:
UP2000hd met doorstroomcel
Referentie/Onderzoekspaper:
Viitaslo et al. (2005): Ozon, ultraviolet licht, ultrageluid en waterstofperoxide als ballastwaterbehandeling – Experimenten met mesozoöplankton in brak water met een laag zoutgehalte.
Volwassen copepoden en copepodieten
Celdisruptie van mesozoöplankton: door sonicatie onder de volgende omstandigheden van vier stroomsnelheden (200, 400, 520 en 800 lh-1) en vier amplitudes (25, 50, 75 en 100%) werd een dodingspercentage tussen 87 en 99% bereikt.
Apparaataanbeveling:
UIP2000hd met doorstroomcel
Referentie/Onderzoekspaper:
Viitaslo et al. (2005): Ozon, ultraviolet licht, ultrageluid en waterstofperoxide als ballastwaterbehandeling – Experimenten met mesozoöplankton in brak water met een laag zoutgehalte.
Naupliën van roeipootkreeftjes
Celdisruptie van mesozoöplankton: door sonicatie onder de volgende omstandigheden van vier stroomsnelheden (200, 400, 520 en 800 lh-1) en vier amplitudes (25, 50, 75 en 100%) werd een dodingspercentage tussen 87 en 99% bereikt.
Apparaataanbeveling:
UIP2000hd met doorstroomcel
Referentie/Onderzoekspaper:
Viitaslo et al. (2005): Ozon, ultraviolet licht, ultrageluid en waterstofperoxide als ballastwaterbehandeling – Experimenten met mesozoöplankton in brak water met een laag zoutgehalte.
COS7-cellen
Lysis in 400 μl buffer
Apparaataanbeveling:
UP200S7 cycli
Referentie/Onderzoekspaper:
Zaim (2005): Analyse van Nesprin-2 Defizienten Mäusen.
Cryptosporidium parvaum
Ultrasone inactivering van Cryptosporidium parvaum (protozoa) in water.
Apparaataanbeveling:
UP400S
Referentie/Onderzoekspaper:
Tsukamoto, I.; Yim, B.; Stavarache, C. E.; Furuta, M.; Hashiba, K.; Maeda, Y. (2004): Inactivation of Saccharomyces cerevisiae by ultrasonic irradiation. Ultrasonics Sonochemistry 11/2004. pp. 61-65.
kubosomen
kubosomen – leeg of gedoteerd met fluormoleculen – werden bereid door de juiste hoeveelheid monoolein te dispergeren in een oplossing van Pluronic F108 met behulp van de ultrasoon UP100H. Om fluorescerende cubosomen te verkrijgen werd de fluorofoor gedispergeerd in het gesmolten monoolein door middel van zachte sonificatie vóór dispersie in Pluronic F108. Dezelfde procedure werd gevolgd toen de fluorescerende cubosomen ook geladen werden met quercetine.
Monster: monstergrootte: 4 ml – ongeveer 96,4 wt% water, 3,3 wt% monooleïne, 0,3 wt% Pluronic F108. Het percentage fluoroforen was 2,5 × 10-3 en 2,8 × 10-3 wt%. Hoeveelheid toegevoegde quercetine: 6,4 × 10-6 wt%.
Sonificatie: UP100Hamplitude 90%, pulscyclus 0,9, gedurende 10 minuten.
Apparaataanbeveling:
UP100H
Referentie/Onderzoekspaper:
Murgia, S.; Bonacchi,S.; Falchi, A. M.; Lampis, S.; Lippolis, V.; Meli, V.; Monduzzi, M.; Prodi, L.; Schmidt, J.; Talmon, Y.; Caltagirone, C. (2013): Drug-Loaded Fluorescerende Cubosomes: Veelzijdige nanodeeltjes voor potentiële therapeutische toepassingen. Langmuir 29, 2013. 6673-6679.
Dekkera bruxellensis
Ultrasone inactivering van Dekkera bruxellensis in water
Apparaataanbeveling:
UIP1500hd
Referentie/Onderzoekspaper:
Borthwick, K.A.J.; Coakley, W.T.; McDonnell, M.B.; Nowotny, H.; Benes, E.; Grfschl, .M (2005): Development of a novel compact sonicator for cell disruption. J. Microbio. Meths. 60/2005. pp. 207-216. / Lörincz, A. (2004): Ultrasonic cellular disruption of yeast in water-based suspensions. Biosys. Eng. 89/2004. pp. 297-308. / Tsukamoto, I.; Yim, B.; Stavarache, C. E.; Furuta, M.; Hashiba, K.; Maeda, Y. (2004): Inactivation of Saccharomyces cerevisiae by ultrasonic irradiation. Ultrason. Sonochem. 11/2004. pp. 61-65.
Dekkera/ Brettanomyces bruxellensis
Inactivatie in 90-120 sec.
Apparaataanbeveling:
UIP1500hd
Referentie/Onderzoekspaper:
zie boven
DNA
DNA-fragmentatie: 2 min. sonicatie van 100 µl met UP100H of 4 min. sonicatie van 100 µl met UTR200.
Apparaataanbeveling:
UP100H, UTR200 of VialTweeter
Referentie/Onderzoekspaper:
Larguinho M. et al. (2010): Ontwikkeling van een snelle en efficiënte ultrasone strategie voor DNA-fragmentatie.
Drosophila melanogaster S2-cellen
Extractie van cellulaire eiwitten uit Drosophila melanogaster S2 cellen: Bevroren S2 cellen (1,56108) werden gelyseerd in 1 mL ijskoude homogenisatiebuffer (100 mM Tris-HCl pH 7,5, 1% SDS) en gedurende 10 minuten in ijs gelaten. Cel lysis werd voltooid door ultrasone trillingen op ijs (6615 bursts, 0,5 s puls; 75% intensiteit) met een Hielscher UP200S ultrasone processor.
Apparaataanbeveling:
UP200S (200 W), 75% intensiteitpulsmodus: 6615 uitbarstingen, puls van 0,5 s.
Referentie/Onderzoekspaper:
Schwientek, T. et al. (2007): Een seriële lectine benadering van het mucine-type O-glycoproteoom van Drosophila melanogaster S2 cellen. Proteomics 7, 2007. pp. 3264-3277.
E. coli-derivaten
Celdisruptie van E. coli-derivaten: De bevroren pellets die overeenkomen met het monstervolume van Vculture = 4/OD ml werden geresuspendeerd in 580 pi 10 mM kaliumfosfaatbuffer pH 7, 1 mM EDTA. 20 pi lysozym (concentratie van 1 g L-1) werd toegevoegd en de celsuspensie werd gedurende ongeveer 30 minuten geïncubeerd op ijs. Daarna werden de cellen onderbroken door continue ultrasoonbehandeling met een ultrasoonapparaat (UP 200S Ultraschallprozessor, Dr. Hielscher GmbH, Teltow) op ijs, bij een amplitude van 50% gedurende 20 sec. De oplosbare en onoplosbare celfracties werden gescheiden door centrifugeren bij 13000 rpm gedurende 20 minuten. De onoplosbare eiwitten werden tweemaal gewassen met de 10 mM kaliumfosfaatbuffer pH 7, 1 mM EDTA en bewaard bij -20°C.
Apparaataanbeveling:
UP200S met 50% amplitude
Referentie/Onderzoekspaper:
HA (2005): Optimisation of active recombinant protein production, exploring the impact of small heat-shock proteins of Escherichia coli, IbpA and IbpB, on in vivo reactivation of inclusion bodies.
Echinococcus granulosus Antigeen
Cellyse en desintegratie: Het gehomogeniseerde monster van eiwitoplosbaar van volwassen E. granulosus, bereid door vriesdooi in vloeibare stikstof en 42◦C, is gesonitiseerd bij 110V, 170W voor 3×15 sec op ijs. Daarna werd het monster 15min gecentrifugeerd bij 10000g. De eiwitconcentratie werd gemeten met de Bradford-methode en opgeslagen bij -20◦C.
Apparaataanbeveling:
UP200S; 170W, koelen op ijs; 3 x 15 sec.
Referentie/Onderzoekspaper:
Tabar et al. (2010): Serodiagnosis of Sheep Hydatidosis with Hydatid Fluid, Protoscolex and Whole Body of Echinococcus granulosus Antigen.
Escherchia coli Gr-
Ultrasone inactivering van Escherchia coli Gr- in melk en sappen.
Apparaataanbeveling:
UP100H
Referentie/Onderzoekspaper:
Zenker, M.; Heinz, V.; Knorr, D. (2003): Application of ultrasound assisted thermal processing for preservation and quality retention of liquid foods. J Food Prot 66/2003. pp. 1642-1649.
Escherchia coli Gr- in zoutoplossing
Ultrasone inactivering van Escherchia coli Gr- in zoutoplossing.
Apparaataanbeveling:
UP100H
Referentie/Onderzoekspaper:
Duckhouse, H.; Mason, T. J.; Phull, S. S.; Lorimer, J. P. (2004): The effect of sonication on microbial disinfection using hypochlorite. Ultrason. Sonochem. 11/ 2004. pp. 173-176.
Escherchia coli Gr- in water
Ultrasone inactivering van Escherchia coli Gr- in water.
Apparaataanbeveling:
UP100H
Referentie/Onderzoekspaper:
Furuta, M.; Yamaguchi, M.; Tsukamoto, T.; Yim, B.; Stavarache, C. E.; Hasiba, K.; Maeda, Y. (2004): Inactivation of Escherichia coli by ultrasonic irradiation. Ultrason. Sonochem. 11/2004. pp. 57-60.
Glaucoom, optische zenuwkop
RNA-fragmentatie van optische zenuwkoppen (van rattenogen): De optische zenuwkop (ONH) werd bevroren op droog ijs en bewaard bij 80 ° C vóór de extractie. RNA werd geïsoleerd door het soniceren van de bevroren zenuwkoppen in de kit extractiebuffer met behulp van een MS 0,5 sonde (UP50H) en vervolgens, na de instructies van de Arcturus kit, inclusief DNase behandeling om eventueel DNA te verwijderen. Gezuiverd RNA werd gekwantificeerd.
Apparaataanbeveling:
UP50H met sonde MS0,5
Referentie/Onderzoekspaper:
Johnson et al. (2007): Global Changes in Optic Nerve Head Gene Expression after Exposure to Elevated Intraocular Pressure in a Rat Glaucoma Model.
Glycosaminoglycaan chondroïtinesulfaat (CS)
Bepalen van CS door dimethylmethyleenblauw assay
Resuspensie van cellen: CS-pellets in microcentrifugebuizen werden geresuspendeerd in 0,5 ml van een 0,1mg/ml papaïneoplossing in Hank's gebalanceerde zoutoplossing (HBSS) met behulp van pulsen van een ultrasone hoorn (UP 100H, Hielscher Ultrasonics GmbH, Duitsland) bij cyclus 1 en 100% amplitude gedurende 3 sec. Daarna vond digestie plaats bij 60 °C gedurende 24 uur.
Voor de Enzyme-linked Immunosorbent Assay (ELISA) werden de cellen vervolgens gesuspendeerd in gedestilleerd en gedeïoniseerd water in een concentratie van 106 cellen/ml en werden ze een nacht in een vriezer bij -70 °C bewaard om cellyse te vergemakkelijken. De cellen werden vervolgens gehomogeniseerd door middel van ultrasoonbehandeling gedurende 40 seconden met de Hielscher ultrasone weefselhomogenisator UP100H.
Apparaataanbeveling:
UP100H
Referentie/Onderzoekspaper:
Vandrovcova et al. (2011): Influence of Collagen and Chondroitin Sulfate (CS) Coatings on Poly-(Lactide-co-Glycolide) (PLGA) on MG 63 Osteoblast-Like Cells. Physiol. Res. 60; 2011. 797-813.
HaCaT-cellen
Lysis van HaCaT-cellen voor chromatine-immunoprecipitatie (ChIP): HaCaT cellen werden gefixeerd met 1% formaldehyde gedurende 10 minuten bij 37uC. De gefixeerde cellen werden gelyseerd in de RIPA-buffer en op ijs gesoneerd met een ultrasoon apparaat van 100 W bij amplitude = 1 en duty cycle = 100% in 12 pulsen van één minuut (12 x 1 min.).
Apparaataanbeveling:
UP100Hgedurende 12 minuten op ijs,
Referentie/Onderzoekspaper:
Zhang et al. (2007): Basonuclin reguleert een subset van Ribosomal RNA-genen in HaCaT-cellen.
Heparine: Depolymerisatie van heparine
Met de ultrasone methode kan heparine met een laag molecuulgewicht (LMWH) worden geproduceerd. Daarom ondergaat heparine een waterstofperoxide-gekatalyseerde radicale depolymerisatie. De reactie verloopt zeer snel en duurt minder dan 1 uur, terwijl het fysisch-chemische depolymerisatieproces gebaseerd is op milde reactieomstandigheden, geen agressieve of toxische reagentia vereist en een product oplevert dat vrij is van chemische artefacten. Het ultrasone proces is dus zeer geschikt voor de productie op grote schaal van LMWH, maar ook van analogen geproduceerd uit natuurlijke gesulfateerde polysacchariden.
Ultrasone procedure:
Voor de fysisch-chemische depolymerisatie van ongefractioneerde heparine door middel van ultrasone radicale depolymerisatie werd heparine opgelost in water tot een eindconcentratie van 25 mg/mL (5 ml). Het reactiemengsel werd gesonitiseerd met een ultrasoonapparaat van het probe-type UP50H. De ultrasone processor was uitgerust met een sonde (microtip MS3) met een diameter van 3 mm, die een amplitude van 180 μm had. De processor genereerde mechanische longitudinale trillingen met een frequentie van 30 kHz die werden opgewekt door elektrische excitatie. Het reactiemengsel werd op 60 °C gehouden in een Radleys® reactor en ultrasone golven werden toegepast als een puls van 0,5 seconde om verhitting van het mengsel te voorkomen. Een nulaliquot (250 μl) werd vóór het starten van de reactie uit de oplossing verwijderd door gelijktijdige toevoeging van waterstofperoxide en toepassing van ultrasone golven. Waterstofperoxide werd toegevoegd om een uiteindelijke verhouding waterstofperoxide/heparine (m/m) van 0,15 (3,75 mg/ml) te verkrijgen.
Apparaataanbeveling:
UP50H met sonotrode MS3
Referentie/Onderzoekspaper:
Achour, Oussama; Bridiau, Nicolas; Godhbani, Azza; Le Joubioux, Florian; Bordenave Juchereau, Stephanie; Sannier, Fredéric; Piot, Jean-Marie; Fruitier Arnaudin, Ingrid; Maugard, Thierry (2013): Ultrasoon gestuurde bereiding van een laagmoleculaire heparine (LMWH) met antistollingsactiviteit. Koolhydraatpolymeren 97; 2013. 684-689.
hop
Extractie van actieve bestanddelen / kruidenextracten in water en ethanol.
Apparaataanbeveling:
UP400S
Lactobacillus (lysis/ DNA-isolatie van verschillende Lactobacillus-stammen)
Lactobacillus-stammen: L. pontis, L. sanfranciscensis, L. farciminis, L. panis, L. oris, L. vaginalis en L. reuteri, L. sp.
Procedure: Voor de DNA-isolatie van enkele kolonies, werd een ultrasone lysis protocol ontwikkeld. Eén kolonie (met een diameter van 2 tot 3 mm) werd gesuspendeerd in 100 μl lysisbuffer (20 mM EDTA, 10 mM Tris [pH 7,9], 1% Triton X-100, 500 mM guanidine-HCl, 250 mM NaCl). De cellen werden gelyseerd door 1 minuut ultrasoonbehandeling met een probe-type ultrasoonapparaat. UP50H. Na toevoeging van 150 μl koude ethanol (-20°C) werd het mengsel gecentrifugeerd over een centrifugekolom van de QIAamp tissue kit en uiteindelijk geëlueerd met 60 μl buffer (10 mM Tris [pH 7,5]).
Om een hulpmiddel te hebben voor een snelle en betrouwbare identificatie van enkelvoudige pure culturen, werd de PCR-assay gecombineerd met een snelle DNA-isolatieprocedure. Tijdrovende enzymatische lysisprocedures en variabele gevoeligheid van bacteriën voor lysozym werden overwonnen door ultrasone behandeling van de cellen, met daaropvolgende zuivering en concentratie door DNA te binden aan een silicamatrix. Het celmateriaal van één kolonie bleek voldoende voor de PCR.
Apparaataanbeveling:
UP50H
Referentie/Onderzoekspaper:
Müller, M. R. A. (2000): Characterization of the Microbial Ecosystem of Cereal Fermentations using Molecular Biological Methods. Proefschrift Universiteit van Keulen, 2000.
Lactobacillus acidophilus Gr+
Ultrasone inactivering van Lactobacillus acidophilus Gr+ in melk en sappen.
Apparaataanbeveling:
UIP500hd
Referentie/Onderzoekspaper:
Zenker, M.; Heinz, V.; Knorr, D. (2003): Application of ultrasound assisted thermal processing for preservation and quality retention of liquid foods. J Food Prot 66/2003. pp. 1642-1649.
Legionella pneumophila Gr+ in verdund medium
Ultrasone inactivatie van Legionella pneumophila Gr+ in verdund medium.
Apparaataanbeveling:
UIP500hd
Referentie/Onderzoekspaper:
Dadjour, M. F.; Ogino, C.; Matsumura, S.; Nakamura, S.; Shimizu N. (2006): Desinfection of Legionella pneumophila by ultrasonic treatment with TiO2. Water Res 40/2006. pp.1137-1142.
Leuconostoc mesenteroides
Leukocytenlysozymactiviteit in myelocytische leukemie: de celsuspensie werd 15 min. met ultrasone trillingen behandeld en de monsters werden getest op lysozymactiviteit. De lysozymconcentratie van de leukocyten ug./10 cellen werd bepaald.
Apparaataanbeveling:
UP50H
Leukocytaire isozym-activiteit in myelocytische leukemie
Monstervoorbereiding: celsuspensie werd ultrasoon behandeld en monsters werden getest op lysozymactiviteit. De lysozymconcentratie van de leukocyten ug/106 werd bepaald.
Apparaataanbeveling:
UP200St
liposomen
Vorming van SUV's
Klik hier om meer te lezen over de ultrasone bereiding van liposomen!
Apparaataanbeveling:
UP50H3 cycli van 5 min. in een ijsbad.
Malachietgroen
Sonofotokatalytische afbraak van malachietgroen (een sterk bactericide): De fotokatalytische afbraak alleen is aanzienlijk sneller dan de sonolytische afbraak, de efficiëntie kan worden verbeterd door de twee processen te koppelen. Malachietgroen, een sterk bactericide, is zeer ecotoxisch voor mariene bacteriën, maar het wordt omgezet in organische stoffen die minder of niet toxisch zijn.
Apparaataanbeveling:
UP400S
Mangiferine acylering
Mangiferine (1,3,6,7-tetrahydroxy-2-[3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxaan-2-yl]xanthen-9-on; formule: C19H18O11) is een polyfenol met een C-glycosylxanthonenstructuur dat in veel plantensoorten voorkomt. Mangiferine vertoont verschillende farmacologische activiteiten. De regioselectieve acylering van mangiferine kan zeer efficiënt worden gekatalyseerd door lipase onder ultrasone trillingen. Vergeleken met de conventionele methoden blinkt de ultrasoon geassisteerde katalyse uit door de voordelen van een kortere reactietijd en een hogere opbrengst. De optimale omstandigheden voor de ultrasone acylering van mangiferine werden als volgt gevonden:
lipase: PCL, acyldonor: vinylacetaat; reactieoplosmiddel: DMSO, reactietemperatuur: 45 degC, ultrasoon vermogen: 200W; substraatverhouding: acyldonor/mangiferine 6/1, enzymbelasting: 6 mg/ml
De regioselectieve acyleringopbrengst was tot 84%.
Apparaataanbeveling:
UP200St of UP200Ht
Referentie/Onderzoekspaper:
cp.: Wang, Z.; Wang, R.; Tian, J.; Zhao, B; Wei, X.F.; Su, Y.L.; Li, C.Y.; Cao, S.G.; Wang, L. (2010): Het effect van ultrageluid op lipase-gekatalyseerde regioselectieve acylering van mangiferine in niet-waterige oplosmiddelen. J. Asian Nat Prod. Res. 12/1, 2010. 56-63.
Extractie van moleculen
Extractieprotocol voor extractie uit gips, rheoliet, basalt, edfell as en obsidiaanglas:
Een monster van 1 g regoliet of steenslag werd onderworpen aan vloeistofextractie onder ultrasone bestraling om doelmoleculen te extraheren en op te lossen. Daarom werd 3 ml MeOH P80 toegevoegd aan 1 g analoog monster in een glazen reageerbuis en gedurende 20 minuten gesoneerd met een ultrasoon sondeapparaat. UP50H ingesteld op 40% amplitude. Het mengsel liet men 10 minuten staan en het troebele supernatant dat zich boven het gesedimenteerde analoge monster had gevormd, werd gedecanteerd in centrifugebuizen van 1,5 ml. Om verlies van geëxtraheerde componenten door adsorptie aan oppervlakken van de hydrofobe polymeercentrifugebuizen tot een minimum te beperken, werden de buisjes eerst geblokkeerd met 0,5% (w/v) BSA in 100 mM HEPES pH 7,4. De supernatanten werden geklaard. De supernatanten werden geklaard door centrifugeren bij 17000 G gedurende 10 minuten en bewaard bij 2 - 8 °C in glazen flesjes totdat ze werden getest in de immunoassay.
Apparaataanbeveling:
UP50H
Referentie/Onderzoekspaper:
Rix, C.(2012): Leven detecteren op Mars en de Life Marker Chip: Antilichaam-assays voor het detecteren van organische moleculen in vloeistofextracten van Marsmonsters. Proefschrift Cranfield University 2012.
Muisleverpellets
De pellets werden gewassen en gedurende 5 minuten gesonitiseerd met nog eens 0,5 mL LB2 en gecentrifugeerd bij 12.000 g gedurende nog eens 20 minuten, en de resulterende twee fracties supernatant werden verzameld. Ten slotte werden de pellets opgelost in 0,5 mL buffer met 40 mM tris base, 5 M ureum, 2 M thioureum, 4% CHAPS, 100 mM DTT, 0,5% (v/v) biolyte 3-10 (LB3), en werden ze gesonitiseerd en gecentrifugeerd bij 12.000 g gedurende 20 minuten.
Apparaataanbeveling:
UP200S; gedurende 5min.
Referentie/Onderzoekspaper:
Gazzana et al. (2009): Een update over het muizenleverproteoom.
Muisleversuspensie
Homogenisatie van het monster om cellysaat te produceren.
Apparaataanbeveling:
UP200S; voor 3 x 20 sec.
Referentie/Onderzoekspaper:
Gazzana et al. (2009): Een update over het muizenleverproteoom.
Penicillium digitatum
Ultrasone inactivatie van Penicillium digitatum (een plantenpathogeen) in Sabouraud groeimedium.
Apparaataanbeveling:
UP200St
Referentie/Onderzoekspaper:
López-Malo, A.; Palou, E.; Jiménez-Fernández, M.; Alzamora, S. M.; Guerrero, S. (2005): Multifactoriële schimmelinactivatie met een combinatie van thermosonicatie en antimicrobiële stoffen. J. Food Eng. 67/2005. pp. 87-93.
Fycocyanine uit Spirulina platensis (Arthrospira platensis)
Extractie van fycocyanine uit Spirulina platensis (Arthrospira platensis) cellen.
Apparaataanbeveling:
UP400S
Plantencellen en plantenweefsel
30% verpakte plantencellen (W/V) en gedestilleerd water worden verstoord door sonicatie gedurende 1-15 min.; desintegratie van plantenweefsel: 1 g gedroogd weefsel gesuspendeerd in alcohol wordt gedesintegreerd tijdens sonicatie van ongeveer 5 min.
Apparaataanbeveling:
UP100H
Bloedplaatjes
Bereiding van bloedplaatjeslysaat: Disruptie in 1-5 min.
Apparaataanbeveling:
UP200Ht
Pleurotus tuberregium
Extractie van polysachariden uit de eetbare schimmel Pleurotus tuberregium
Apparaataanbeveling:
UP400S
Poly(melkzuur-co-glycolzuur) (PLGA)
Bereiding van boviene serumalbumine (BSA) geladen poly(lactisch-co-glycolzuur) (PLGA) door sonicatie in 40 sec.
Apparaataanbeveling:
Dmini; voor 40sec.
Referentie/Onderzoekspaper:
Freitas et al. (2005): Doorstroom ultrasone emulsificatie gecombineerd met statisch micromixen voor aseptische productie van microsferen door middel van vloeistofextractie.
Polyfenolen uit appel
Ultrasone extractie van polyfenolen uit appel. Oplosmiddel: waterig. Verhoogde opbrengst met 6%; sonicatie-intensiteit: 20-75Ws/ml; procestemperatuur: verwarmd tot 80 degC.
Apparaataanbeveling:
UIP2000hd
Referentie/Onderzoekspaper:
Vilkhu, K.; Manasseh, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Ultrasoon herstel en modificatie van voedselingrediënten. In: Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011): Ultrasone technologieën voor voeding en bioprocessing. New York: Springer, 2011. pp. 345-368.
Polyfenolen uit zwarte thee
Ultrasone extractie van polyfenolen uit zwarte thee. Oplosmiddel: waterig. Verhoogde opbrengst met 6-18%; sonicatie-intensiteit: 8-10Ws/ml; omgevingsdruk, procestemperatuur: verwarmd tot 90 degC.
Apparaataanbeveling:
UIP2000hd
Referentie/Onderzoekspaper:
Vilkhu, K.; Manasseh, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Ultrasoon herstel en modificatie van voedselingrediënten. In: Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011): Ultrasone technologieën voor voeding en bioprocessing. New York: Springer, 2011. pp. 345-368.
Polyfenolen uit druivendraf
Ultrasone extractie van polyfenolen uit druivendraf. Oplosmiddel: waterig. Verhoogde opbrengst met 11-35%; sonicatie-intensiteit: 20-75Ws/ml; omgevingsdruk.
Apparaataanbeveling:
UIP2000hd
Referentie/Onderzoekspaper:
Vilkhu, K.; Manasseh, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Ultrasoon herstel en modificatie van voedselingrediënten. In: Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011): Ultrasone technologieën voor voeding en bioprocessing. New York: Springer, 2011. pp. 345-368.
Polyfenolen, aminozuur en cafeïne uit groene thee
Extractie van actieve bestanddelen uit groene thee in water
Apparaataanbeveling:
UP400S
Varkensvlees: Pekelen van varkenslende
Voor ultrasoon ondersteund pekelen werden varkenshaasjes (Longissimus dorsi) ondergedompeld in natriumchloride pekel (40 g L-1) en behandeld bij 5°C met laagfrequent ultrasoon geluid (20 kHz) bij lage intensiteit (2-4 W/cm-2). Het effect van de ultrasone behandeling op de microstructuur van varkensweefsel, denaturatie van eiwitten, waterbindend vermogen (WBC), watervasthoudend vermogen (WHC), diffusiecoëfficiënt van natriumchloride (D) en het textuurprofiel van vlees (TPA) werd onderzocht. De resultaten toonden aan dat de ultrasone behandeling gunstige microstructurele veranderingen in het vleesweefsel veroorzaakte. Het watervasthoudend vermogen en de textuureigenschappen werden verbeterd door de ultrasone behandeling in vergelijking met zowel getrommelde als statisch gepekelde monsters. Deze positieve effecten waren echter sterk afhankelijk van de ultrasone intensiteit. Hogere intensiteiten en/of langere behandelingstijden veroorzaakten denaturatie van eiwitten. Het model met constante diffusiecoëfficiënt was in staat om de NaCl diffusiekinetiek tijdens het pekelen nauwkeurig te beschrijven. Ultrasone behandeling verbeterde de zoutverspreiding aanzienlijk in vergelijking met monsters die gepekeld werden onder statische omstandigheden en de diffusiecoëfficiënt nam exponentieel toe met toenemende ultrasone intensiteit.
Apparaataanbeveling:
UP200Ht met sonotrode S26d40
Referentie/Onderzoekspaper:
Siro, I.; Ven, Cs.; Balla, Cs.; Jonas, G.; Zeke, I.; Friedrich, L. (2009): Toepassing van een ultrasoon geassisteerde uithardingstechniek voor het verbeteren van de diffusie van natriumchloride in varkensvlees. Tijdschrift voor Levensmiddelentechnologie 91/2, 2009. 353-362.
Porfyra yezoensis
Ultrasone afbraak van polysacchariden van Porphyra yezoensis: 50 ml van 1,0 g/100 ml oplossing van polysacchariden van Porphyra yezoensis (drooggewicht) werd gedurende 4 uur met een UP400S gesoneerd.
Apparaataanbeveling:
UP400Sgepulseerd ultrageluid (cycli: 2 sec aan/ 2 sec uit) bij 20°C.
Poeders
Vermalen, deagglomereren en dispergeren tot kleine, relatief uniforme deeltjesgrootte.
Apparaataanbeveling:
UP200St
Rattenbotten
Lever van ratten
Verstoring en homogenisatie van weefsel met een UP400S.
Apparaataanbeveling:
UP400S3 keer gedurende 30 seconden; op ijs.
Referentie/Onderzoekspaper:
Oh et al. (2003): Gen voor acetyl-CoA-carboxylase wordt gereguleerd door Sterol Regulatory Element-binding Protein-1 in de lever. Journal of Biological Chemistry 2003.
Huid van ratten
Rawolfia Serpentina
Rebaudioside A
Monsters van 10 g droge en gemalen steviabladeren werden geëxtraheerd in 100 ml water onder continu roeren (met een magneetroerder). De pH-waarde werd geregeld met 0,01 M pH 7 natriumfosfaat. Het monster werd in een glazen bekerglas van 150 ml gedaan en met een ultrasoonapparaat van het probe-type (UIP500hd20 kHz, 500 W). De punt van de sonotrode werd ongeveer 1,5 cm in de slurry van stevia bladeren gedompeld. Het ultrasone apparaat werd ingesteld op een uitgangsvermogen van 350 W. Een milde sonicatiebehandeling van 350 W gedurende 5-10 minuten bij een constante procestemperatuur van 30°C gaf een opbrengst van rebaudioside A van 30-34 g per 100 g monster. Na de sonicatie werd de extractoplossing gecentrifugeerd en afgefiltreerd door een 0,45 μm microporeus membraan; het filtraat werd gebruikt voor de analyse van het totale rebaudioside A-gehalte. Het extractierendement van het totale gehalte aan rebaudioside A werd geanalyseerd met HPLC.
Door de oplosmiddelvrije ultrasonisch ondersteunde extractie werd een hoge opbrengst van rebaudioside A verkregen in vergelijking met traditionele extractiemethoden zoals warmte-extractie of maceratie.
Apparaataanbeveling:
UIP500hd
Rijstzetmeel
Ontwrichting, zetmeelisolatie en verbreking van niet-covalente bindingen tussen eiwit en zetmeel in een rijstbloemslurry (33%) in 20 – 40 min.
Apparaataanbeveling:
UP500hd; 20 – 40 min.
Rotiferen
Celdisruptie van mesozoöplankton: door sonicatie onder de volgende omstandigheden van vier stroomsnelheden (200, 400, 520 en 800lh-1) en vier amplitudes (25, 50, 75 en 100%) werd een dodingspercentage tussen 58 en 85% bereikt.
Apparaataanbeveling:
UP2000 met doorstroomcel
Referentie/Onderzoekspaper:
Viitaslo et al. (2005): Ozon, ultraviolet licht, ultrageluid en waterstofperoxide als ballastwaterbehandeling – Experimenten met mesozoöplankton in brak water met een laag zoutgehalte. Tijdschrift voor mariene milieutechniek, 8(1), 35-55.
S. fragilis
sacharomyces cerevisiae
Verstoring
Apparaataanbeveling:
UP400S
Referentie/Onderzoekspaper:
Guerrero, S,; López-Malo, A.; Alzamora, S. M. (2001): Effect van ultrageluid op de overleving van Saccharomyces cerevisiae: invloed van temperatuur, pH en amplitude. Innov. Food Sci. Emerg Technol. 2/2001. pp. 31-39.
sacharomyces cerevisiae
Ultrasone inactivering van Saccharomyces cerevisiae in Sabouraud groeimedium en in een zoutoplossing.
Apparaataanbeveling:
UP400S
Referentie/Onderzoekspaper:
Yap, A.; Jiranek, V.; Grbin, P.; Barnes, M.; Bates, D. (2007): Studies naar de toepassing van hoogvermogen ultrasoon voor het reinigen en desinfecteren van vaten en planken. Austr. NZ Wine Indust. J. 22(3)/ 2007. pp. 96-104.
Saffraan, crocus sativus
Extractie van actieve bestanddelen (smaak- en kleurstoffen).
Klik hier om meer te lezen over de extractie van saffraan!
Apparaataanbeveling:
UP50H
Referentie/Onderzoekspaper:
Kadkhodaee et al. (2007): Ultrasone extractie van actieve bestanddelen uit saffraan. Acta Hortic. 739, 2007. 417-425.
Salmonella Senftenberg 775W Gr-
Ultrasone inactivering van Salmonella Senftenberg 775W Gr- in McIlvaine citraat-fosfaatbuffer of voedingsbouillon.
Apparaataanbeveling:
UP100H
Referentie/Onderzoekspaper:
Álvarez, I.; Manas, P.; Virto, R.; Condón, S. (2006): Inactivering van Salmonella Senftenberg 775W door ultrasone golven onder druk bij verschillende wateractiviteiten. Int. J. Food Microbiol. 108/2006. pp. 218-225.
Salvia miltiorrhiza knot
Extractie van biologisch actieve stoffen: natriumdanshensu en vier tanshinonen (dihydrotanshione I, tanshinone I, cryptotanshinone en tanshinone IIA).
Apparaataanbeveling:
UP100H
Salvia Officinalis
Extractie van actieve bestanddelen uit Salvia Officinalis (salie) in minder dan 2 uur.
Apparaataanbeveling:
UP50H
serum
Schapen cyste levers, longen en positief bloed (Echinococcus granulosus antigenen)
Schapen cyste levers, longen en positief bloed (Echinococcus granulosus antigenen in lammeren): Het monster werd vervolgens gedurende 2 × 15 sec op ijs gesoniteerd totdat er geen intacte protoscolices meer zichtbaar waren.
Apparaataanbeveling:
UP200S2 x 15 sec.
Referentie/Onderzoekspaper:
Tabar et al. (2009): Antilichaamrespons tegen hydatidenvloeistof, protoscolex en het gehele lichaam van Echinococcus granulosus antigenen in lammeren. Tijdschrift voor diergeneeskundig onderzoek, Volume 10, Issue 3; 2009. 283-288.
Sorbitantrioleaat, ethanol (als oplosmiddel) en Bi-2212 poeder
Deagglomereer een slurry die het dispergeermiddel Sorbitantrioleaat, ethanol (als oplosmiddel) en Bi-2212 poeder bevat.
Apparaataanbeveling:
UP200S; gedurende 3 min.
Referentie/Onderzoekspaper:
Mora et al. (2009): Fabricage van supergeleidende coatings op structurele keramische tegels.
Soja-isoflavonen
Ultrasone extractie van soja-isoflavonen in water en oplosmiddel. Verhoogde opbrengst tot 15% in extractie-efficiëntie.
Apparaataanbeveling:
UP200St
Referentie/Onderzoekspaper:
Rostagno et al. (2003), gerefereerd door Vilkhu, K.; Manasseh, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Ultrasoon herstel en wijziging van voedselingrediënten. In: Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011): Ultrasone technologieën voor voeding en bioprocessing. New York: Springer, 2011. pp. 345-368.
Soja-eiwit
Ultrasone extractie van soja-eiwit in water en alkali (natriumhydroxide). Verhoogde opbrengst met 53%. Inline sonicatie bleek efficiënter dan batch-extractie (inline sonicatie gaf een 23% hogere opbrengst dan batch sonicatie).
Apparaataanbeveling:
UIP1000hd voor batch/beker en met flowcelreactor voor inline sonicatie.
Referentie/Onderzoekspaper:
Moulton en Wang (1982), gerefereerd door Vilkhu, K.; Manasseh, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Ultrasoon herstel en wijziging van voedselingrediënten. In: Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011): Ultrasone technologieën voor voeding en bioprocessing. New York: Springer, 2011. pp. 345-368.
Spermakoppen (menselijk)
Spermastaarten (menselijk)
Stevia rebaudiana Bert.
Ultrasone extractie van steviosideglycoside uit monsters van 10 g droge bladeren van Stevia rebaudiana met vier deeltjesgroottes (0,315 mm, 2 mm, 6,3 mm en verpulverde droge bladeren) werden gemengd met verschillende oplosmiddelen: gedistilleerd water en water/ethanolmengsels (55% en 70%) met verschillende monstergewicht-volumeverhoudingen oplosmiddel: 1/10, 1/8, 1/5 (w/v) en vervolgens blootgesteld aan ultrasoon geluid bij kamertemperatuur. Sonificatietijd: < 5 min. Apparaataanbeveling:
UP200St
Neem contact met ons op! / Vraag het ons!
Ultrasoonapparaten met hoge prestaties voor elke grootte
Hielscher Ultrasonics celdisruptoren en weefselhomogenisatoren zijn verkrijgbaar in elke maat voor elk volume. Of u nu kleine monsters, massamonsters zoals 96-well platen, middelgrote volumes of vrachtwagenladingen per uur moet sonificeren, ons portfolio biedt de ideale ultrasoonhomogenisator voor uw toepassing. Compacte, handbediende ultrasone homogenisatoren zijn optimaal voor laboratoria en onderzoek, terwijl onze industriële serie alles omvat tussen 0,5kW tot 16kW per ultrasone processor. Hielscher ultrasone processors kunnen in clusters worden geïnstalleerd, zodat u vrijwel elk volume kunt verwerken. De robuustheid van Hielscher's ultrasoonapparatuur maakt een 24/7 werking mogelijk bij zware belasting en in veeleisende omgevingen.
De geavanceerde en slimme software zorgt voor de hoogste procescontrole en het gebruiksgemak van de operator. Alle sonicatiegegevens worden automatisch opgeslagen op een ingebouwde SD-kaart. Andere slimme functies zijn het vooraf instellen en opslaan van sonicatieparameters, LAN-verbinding en afstandsbediening via een browser.
De onderstaande tabel geeft een indicatie van de verwerkingscapaciteit van onze sonicators op laboratoriumformaat voor het homogeniseren van weefsels en andere taken op het gebied van monstervoorbereiding:
Aanbevolen apparaten | Batchvolume | Debiet |
---|---|---|
UIP400MTP sonificator voor 96-wells platen | multi-well/microtiterplaten | n.v.t. |
Ultrasone kopHoorn | CupHorn voor flesjes of bekerglas | n.v.t. |
GDmini2 | ultrasone microstroomreactor | n.v.t. |
VialTweeter | 0.5 tot 1.5mL | n.v.t. |
UP100H | 1 tot 500 ml | 10 tot 200 ml/min |
UP200Ht, UP200St | 10 tot 1000 ml | 20 tot 200 ml/min |
UP400St | 10 tot 2000 ml | 20 tot 400 ml/min |
Ultrasone zeefschudder | n.v.t. | n.v.t. |