Alpha-Synuclein Fragmentation using the VialTweeter Sonicator

α-synuclein 피브릴 및 리본은 과학 연구에서 더 작은 피브릴 단편 또는 개별 단백질 분자를 생성하기 위해 단편화되며, 이는 다양한 실험 기술을 사용하여 더 쉽게 분석할 수 있습니다. VialTweeter Sonicator는 효율적이고 신뢰할 수있는 알파 - 시누클레인 단편화를 위해 가장 일반적으로 사용되는 초음파 발생기 중 하나입니다.

연구중인 α-Synuclein

정확히 동일한 조건에서 알파-시누클레인 피브릴의 단편화를 위한 여러 샘플의 동시용 VialTwitter.알파 synuclein fibrils는 Parkinson 질병 및 Lewy 몸체를 가진 치매를 포함하여 치매의 특정 모양과 같은 neurodegenerative 무질서와 강하게 관련되는 단백질 집합체입니다. 알파-시누클레인 피브릴에 초점을 맞춘 연구는 질병 진행에서 그들의 역할을 이해하고 잠재적인 치료 개입을 개발하는 것을 목표로 합니다. 알파 synuclein 섬유를 더 작은 파편으로 나눔으로써, 연구원은 그들의 특정한 구조상 특징을 조사할 수 있습니다. 예를 들어, 알파-시누클레인 피브릴을 단편화하면 연구원은 단백질, 지질 또는 소분자와 같은 다른 분자와의 상호 작용을 조사할 수 있습니다. 더 작은 단편을 생성함으로써, 이러한 상호 작용 파트너에 대한 결합 부위와 친화도를 보다 효과적으로 조사할 수 있습니다. 더 작은 α-Syn 프리브릴과 리본도 변형된 독성 및 생화학적 효과를 나타낼 수 있습니다. 따라서 빠르고 간단한 시료 처리로 재현 가능한 결과를 생성하는 신뢰할 수 있고 효율적인 단편화 기법이 중요합니다.
초음파 Alpha-Syn 단편화: VialTweeter 초음파 발생기는 정확히 동일한 조건에서 최대 10 개의 바이알을 동시에 초음파 처리하는 확립 된 초음파 샘플 준비 시스템입니다. 프로그래밍 가능한 설정을 통해 동일한 실험을 간단하고 빠르게 다시 실행할 수 있어 알파-시누클레인 피브릴 단편화에서 매우 신뢰할 수 있고 재현 가능한 결과를 얻을 수 있습니다.

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The VialTweeter Sonicator is one of the most commonly used ultrasonicators for efficient and reliable alpha-synuclein fragmentation.

VialTweeter 초음파 처리기 다수 알파 synuclein 표본의 동시 초음파 단편화를 위해.

 

VialTweeter는 교차 오염없이 정확히 동일한 조건에서 최대 10 개의 바이알을 동시에 초음파 처리할 수있는 독특한 초음파 시스템입니다.

닫힌 유리알의 초음파 처리를 위한 VialTweeter와 UP200St

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초음파 발생기를 사용한 α-Synuclein 샘플 준비

알파-시누클레인 피브릴을 연구하는 한 가지 방법은 초음파 처리와 같은 기술을 사용하여 추출 및 단편화를 포함합니다. 초음파 처리는 고강도, 저주파 초음파를 사용하여 단백질 응집체를 파괴하고 분해하여 더 작은 섬유 또는 개별 단백질 분자를 방출하는 과정입니다. 초음파 발생기 VialTweeter는 이러한 목적을 위해 α 시누클레인 관련 연구에서 일반적으로 사용되는 장치입니다.

수많은 연구 연구는 효율적이고 신뢰할 수있는 α-synuclein fibril 단편화를 위해 Hielscher VialTweeter를 사용하는 알파 - 시누클레인 피브릴 초음파 처리의 정확한 샘플 준비 프로토콜을 설명합니다. 피브릴을 초음파로 단편화함으로써 연구자들은 결과 생성물을 분석하고 구조, 독성 및 다른 분자와의 상호 작용을 검사할 수 있습니다. 이 연구는 신경 퇴행의 기저에 있는 메커니즘에 대한 중요한 통찰력을 제공하고 잠재적으로 새로운 치료 표적을 식별합니다. VialTweeter 초음파 발생기를 사용하는 잘 정립 된 α-synuclein 초음파 처리 프로토콜은 신뢰할 수 있고 재현 가능한 결과를 제공합니다.

알파 synuclein fibril 단편화 VialTweeter 초음파 발생기

위 이미지: unfragmented alpha-synuclein fibrils
하단 이미지: VialTweeter 초음파 발생기를 사용한 초음파로 단편화된 알파-시누클레인 피브릴
(연구 및 이미지: ©Dieriks et al., 2022)

α-Synuclein Fibrils의 초음파 단편화 – 프로토콜

수많은 연구자들이 균일 한 α-synuclein fibril 단편을 생산하기 위해 VialTweeter 초음파 발생기를 선호되는 단편화 기법으로 사용하기 때문에 확립 된 프로토콜을 쉽게 사용할 수 있습니다. 아래에서 몇 가지 예시적인 단편화 프로토콜을 찾을 수 있습니다.
 

 
ClearTau 종자 준비: ClearTau 피브릴을 dH2O에서 10μM로 희석하고 VialTweeter가 있는 초음파 발생기 UP200St를 사용하여 튜브 내에서 1초 동안 1초 동안 70% 진폭으로 초음파 처리했습니다. 씨앗은 전자 현미경으로 특징 지어졌습니다.
ThS 형광 측정: ClearTau 피브릴을 dH2O에서 2.5μM로 희석하고 VialTweeter와 함께 UP200St를 사용하여 튜브 내에서 1초 동안 1초 동안 70% 진폭으로 초음파 처리했습니다. 2.5μM 전장 Tau 4R2N 단량체를 대조군으로 사용하였다. 100 μl 반응에 100 μl의 ThS (10 μM)를 첨가하여 1.25 μM의 최종 단백질 농도를 수득했습니다. 단일 시점 ThS 형광은 445nm에서 여기하고 485nm에서 방출을 기록하면서 FLUOstar Omega microplate 리더에 설정된 96개의 잘 투명한 바닥 플레이트를 사용하여 측정되었습니다.
(참조: Limorenko et al., 2023)
 
초음파 처리를 사용하여 균일 한 α-synuclein 길이 : α-syn 피브릴 및 리본의 길이 이질성은 75 % 진폭, 0.5 초 펄스로 설정된 VialTweeter의 2-ml Eppendorf 튜브의 얼음에서 20 분 동안 초음파 처리에 의해 감소되었다.
(Bousset et al., 2013 참조)
 
인간 재조합 단량체 WT 또는 S129A a-Syn 및 이들이 생성하는 섬유소 다형체 및 a-Syn 1-110의 품질 관리가 수행되었습니다. 그 후, 섬유소 다형체를 VialTweeter 초음파기의 2mL Eppendorf 튜브에서 20분 동안 초음파 처리하여 단편화하여 세포내이입에 적합한 평균 크기가 42-52nm인 섬유소 입자를 생성했습니다.
(Shrivastava et al., 2020 참조)
 

Ultarsonic 단편화는 알파-시누클레인 섬유와 리본을 균일하게 단편화하는 매우 신뢰할 수 있고 효율적인 방법입니다. VialTwitter는 α-syn 단편화에 가장 일반적으로 사용되는 초음파 발생기 중 하나입니다.

5개의 fibrillar α-Syn 다형체의 특성화. (A) VialTweeter(하단 레인)로 단편화 전(상단 레인)과 후, 음α 염색된 -Syn fibrillar polymorphs fibrils, ribbons, fibrils-91, fibrils-65 및 fibrils-110의 투과 전자 현미경 사진이 표시됩니다. (B) 단편화된 fibrillar polymorphs의 길이 분포가 표시됩니다. 히스토그램이 파생된 fibrillar assemblies의 수(n)가 표시됩니다.
(연구 및 이미지: Shrivastava et al., 2020)

 
α-Syn 피브릴을 VialTweeter의 2ml Eppendorf 튜브에서 20분 동안 초음파 처리하여 단편화하여 TEM 분석으로 평가한 평균 크기 42-52nm의 피브릴 입자를 생성했습니다.
(참조: Negrini et al., 2022)
 
재현탁 된 fibrils91 (PBS에서)은 바이알 트위터 초음파 발생기를 사용하여 2mL Eppendorf 튜브에서 20 분 동안 초음파 처리하여 세포 배양에 첨가하기 전에 단편화하고, 분취하고, 액체 질소에서 급속 동결하고, -80 °C에서 사용할 때까지 저장했습니다.
(Vajhøj et al., 2021 참조)
 

Sonicator UIP400MTP 멀티 웰 플레이트에서 알파 - 시누클레인 피브릴 단편화를위한 것입니다.

Sonicator UIP400MTP 멀티 웰 플레이트에서 알파 - 시누클레인 피브릴 단편화를위한 것입니다.

Sonicator UIP400MTP 멀티 웰 플레이트에서 알파 - 시누클레인 피브릴 단편화를위한 것입니다.

α-Syn 단편화를 위한 VialTweeter 및 Lab Sonicators

신뢰할 수 있는 알파-시누클레인 피브릴 단편화를 위한 2.0mL Eppendorf 튜브가 있는 VialTweeterHielscher 초음파는 전 세계적으로 최첨단 초음파의 선도적 인 제조업체로 인정 받고 있습니다. 전 세계 주요 연구 실험실에서 신뢰할 수 있고 확립 된 당사의 초음파기는 중요한 실험에 탁월한 품질과 성능을 제공합니다.
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이 튜토리얼은 실험실, 분석 및 연구에서 용해, 세포 파괴, 단백질 분리, DNA 및 RNA 단편화와 같은 샘플 준비 작업에 가장 적합한 초음파 발생기 유형을 설명합니다. 응용 분야, 시료 부피, 시료 수 및 처리량에 이상적인 초음파 처리기 유형을 선택하십시오. Hielscher 초음파는 당신에게 이상적인 초음파 균질화기를 가지고 있습니다!

과학 및 분석에서 세포 파괴 및 단백질 추출을위한 완벽한 초음파 발생기를 찾는 방법

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Design, Manufacturing and ConsultingQuality Made in Germany

Hielscher ultrasonicators are well-known for their highest quality and design standards. Robustness and easy operation allow the smooth integration of our ultrasonicators into industrial facilities. Rough conditions and demanding environments are easily handled by Hielscher ultrasonicators.

Hielscher 초음파는 ISO 인증 회사이며 최첨단 기술과 사용자 친화성을 갖춘 고성능 초음파기에 특히 중점을 둡니다. 물론, Hielscher 초음파 발생기는 CE를 준수하며 UL, CSA 및 RoHs의 요구 사항을 충족합니다.
 
아래 표는 실험실 크기의 초음파기의 대략적인 처리 용량을 나타냅니다.
 

Recommended DevicesBatch Volume유량
UIP400MTP다중 웰/마이크로타이터 플레이트n.a.
초음파 cuphorn바이알 또는 비커용 CupHornn.a.
GD미니2초음파 마이크로 플로우 반응기n.a.
바이알트위터0.5 ~ 1.5mLn.a.
업100H1 to 500mL10 to 200mL/min
UP200HT입니다., UP400세인트10 to 2000mL20 to 400mL/min

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VialTweeter 및 기타 초음파 발생기, 알파-시누클레인 단편화, 프로토콜 및 가격에 대한 추가 정보를 요청하려면 아래 양식을 사용하십시오. 우리는 귀하와 귀하의 공정에 대해 논의하고 샘플 준비 요구 사항을 충족하는 초음파 발생기를 제공하게되어 기쁩니다!









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비디오는 고강도 초음파를 사용하여 모든 표준 멀티 웰 플레이트의 신뢰할 수있는 샘플 준비를 할 수있는 초음파 샘플 준비 시스템 UIP400MTP를 보여줍니다. UIP400MTP의 전형적인 응용 분야는 세포 용해, DNA, RNA 및 크로마틴 전단뿐만 아니라 단백질 추출을 포함한다.

멀티 웰 플레이트 초음파 처리를위한 초음파 처리기 UIP400MTP

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멀티 샘플 소닉세이터 VialTweeter는 최대 10개의 작은 바이알과 최대 5개의 더 큰 테스트 튜브를 수용할 수 있습니다.

바이알트위터 일반적으로 사전 분석 샘플 준비 단계로 알파-시누클레인 피브릴을 단편화하는 데 사용됩니다.



문학 / 참고 문헌


고성능 초음파! Hielscher 제품군은 소형 실험실 초음파기부터 벤치 탑 장치에 이르기까지 전체 산업 초음파 시스템에 이르기까지 전체 스펙트럼을 포괄합니다.

Hielscher 초음파는 고성능 초음파 균질화기를 제조합니다. 산업 규모.


귀하의 프로세스에 대해 논의하게 되어 기쁩니다.

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