ულტრაბგერითი ქსოვილის ჰომოგენიზატორები
- ულტრაბგერითი გამოკვლევა უსაფრთხოა & ქსოვილის ჰომოგენიზაციის ეფექტური მეთოდი.
- ულტრაბგერითი აპლიკაციები მოიცავს მოსამზადებელ ქსოვილს და სუსპენზიებს, ცილების, დნმ/რნმ-ის და აქტიური ნაერთების ექსტრაქციას, ასევე ფერმენტების და საფუარის აქტივაციას/ინაქტივაციას.
- ზონდის ტიპის ულტრაბგერითი ჰომოგენიზატორების ზუსტი კონტროლირებადი საშუალებას იძლევა ქსოვილის ნიმუშების საიმედო მომზადება.
ქსოვილის ჰომოგენიზაცია ულტრაბგერითი ზონდების გამოყენებით
ქსოვილის ჰომოგენიზაცია არის ნიმუშის მომზადების პროცესი, სადაც ცხოველური და მცენარეული უჯრედები ან მიკროორგანიზმები მზადდება უჯრედშიდა ნივთიერების, როგორიცაა ცილები, დნმ ან რნმ-ის ექსტრაქციამდე. უჯრედის მემბრანა უნდა გასკდეს უჯრედის შიგთავსის გასათავისუფლებლად. უჯრედის კედლის გატეხვის შემდეგ უჯრედშიდა მაკრომოლეკულები ცურავს ბუფერულ ხსნარში ისე, რომ ორგანელები, ცილები და დნმ/რნმ ხელმისაწვდომი გახდება. ულტრაბგერითი ქსოვილის ჰომოგენიზატორები და უჯრედების დამრღვევები ძალიან ეფექტური საშუალებებია უჯრედების დაშლის, ლიზისისა და ექსტრაქციისთვის.
ზონდის ტიპის ულტრაბგერითი აპარატები (მაგ. 200 ვატიანი ძლიერი UP200St) არის ქსოვილის საიმედო ჰომოგენიზატორები და ფართოდ გამოიყენება ნიმუშის მოსამზადებლად.
ულტრაბგერითი ქსოვილის ჰომოგენიზატორები vs ალტერნატიული ლიზისის ტექნიკა
თქვენ შეიძლება ჰკითხოთ საკუთარ თავს უჯრედების დაშლის რომელი ტექნიკა და ქსოვილის ჰომოგენიზაციის რომელი მოწყობილობაა საუკეთესო ვარიანტი თქვენი ლაბორატორიისთვის. ქვემოთ შეგიძლიათ იხილოთ რამდენიმე არგუმენტი, რომლებიც საუბრობენ ულტრაბგერითი ლიზისა და ქსოვილის ჰომოგენიზაციის შესახებ, რადგან ულტრაბგერითი გამოყოფას რამდენიმე უპირატესობა აქვს ჰომოგენიზაციის ალტერნატიულ მეთოდებთან შედარებით:
- ეფექტურობა: ულტრაბგერითი ჰომოგენიზაცია არის სწრაფი და ეფექტური მეთოდი ქსოვილებისა და უჯრედების დარღვევისთვის. ულტრაბგერითი ქსოვილის ჰომოგენიზატორები იყენებენ აკუსტიკური კავიტაციის მუშაობის პრინციპს. ეს მეთოდი ძალზე ეფექტურია და შეუძლია უჯრედების დაშლა რამდენიმე წამში. იმის გამო, რომ ინტენსივობის დონე შეიძლება დარეგულირდეს რბილიდან ინტენსიურამდე, ბგერითი დამუშავება განსაკუთრებით ეფექტურია მძიმე ან ბოჭკოვანი ქსოვილებისთვის, რომელთა ჰომოგენიზაცია რთულია სხვა მეთოდების გამოყენებით.
- მოერიდეთ ჯვარედინი დაბინძურებას: Hielscher გთავაზობთ მძლავრ ულტრაბგერითი ქსოვილის ჰომოგენიზატორების, რომლებიც ამზადებენ ნიმუშს არაპირდაპირი სონიკაციის სამკურნალოდ. UIP400MTP-ით (იდეალურია მიკროტიტრებისა და მულტიტუარებისთვის), ასევე VialTweeter-ით და CupHorn-ით (იდეალურია ფლაკონებისთვის, მილებისა და ჭიქებისთვის) Hielscher გთავაზობთ ულტრაბგერითი უჯრედების დარღვევის მოწყობილობას უკონტაქტო ჰომოგენიზაციისთვის, რაც ამცირებს ჯვარედინი დაბინძურების რისკს. ნიმუშებს შორის. ის ასევე ამცირებს დამაბინძურებლების შეყვანის რისკს სახეხი ზედაპირებიდან ან ჰომოგენიზაციის სხვა მოწყობილობებიდან.
- მოქნილობა: ულტრაბგერითი ჰომოგენიზაცია შეიძლება გამოყენებულ იქნას სხვადასხვა ზომისა და მოცულობის ნიმუშით, მცირე მოცულობიდან ქსოვილის დიდ ნიმუშებამდე. გარდა ამისა, ულტრაბგერითი ჰომოგენიზაცია ასევე შესაფერისია ნიმუშის ტიპების ფართო სპექტრისთვის, მათ შორის მცენარეული ქსოვილების, ცხოველური ქსოვილებისა და მიკრობული კულტურებისთვის. ულტრაბგერითი გამოკვლევის ინტენსივობა და ხანგრძლივობა შეიძლება დარეგულირდეს სხვადასხვა ტიპის ქსოვილებისთვის დარღვევის დონის ოპტიმიზაციისთვის.
- განმეორებადობა: ულტრაბგერითი ჰომოგენიზაცია უზრუნველყოფს თანმიმდევრულ შედეგებს და იძლევა ჰომოგენიზაციის პარამეტრების ზუსტი კონტროლის საშუალებას, როგორიცაა სიმძლავრის გამომუშავება და სონიკაციის დრო. ეს ხელს უწყობს ექსპერიმენტული მონაცემების გამეორებას და სიზუსტეს.
- ბიომოლეკულების შენარჩუნება: ზონდის ტიპის ულტრაბგერითი მკურნალობა არათერმული მკურნალობაა. ეს ნიშნავს, რომ მისი გავლენა არ არის დაფუძნებული სითბოზე. თუმცა, ყოველი მექანიკური დამუშავება წარმოქმნის სითბოს თერმოდინამიკის მეორე კანონის შესაბამისად. ეს ნიშნავს, რომ ნიმუში თბება უფრო ხანგრძლივ ხმოვან დროს. Hielscher-ის უახლესი ულტრაბგერითი აპარატები აღჭურვილია ტემპერატურის სენსორებით და ჭკვიანი ტემპერატურის მონიტორინგის პროგრამული უზრუნველყოფით. გაგრილების დახვეწილი პარამეტრები საშუალებას იძლევა თავიდან აიცილოს სითბოს დეგრადაცია და ხელს უწყობს სითბოსადმი მგრძნობიარე ბიომოლეკულების აქტივობის შენარჩუნებას, როგორიცაა ფერმენტები და ცილები.
- Დროის დაზოგვა: ზონდის ტიპის ულტრაბგერითი გამოკვლევის მაღალი ეფექტურობა იძლევა ქსოვილების სწრაფ ჰომოგენიზაციას, რაც დაზოგავს დროს სხვა მეთოდებთან შედარებით, რომლებიც საჭიროებენ ქსოვილის უფრო ფართო ფიზიკურ მანიპულირებას.
ულტრაბგერითი ქსოვილის ჰომოგენიზაცია გთავაზობთ რამდენიმე უპირატესობას ჰომოგენიზაციის ალტერნატიულ მეთოდებთან შედარებით. სწორედ ამიტომ, ულტრაბგერითი ქსოვილის ჰომოგენიზატორები არის უჯრედების დაშლის სასურველი ტექნიკა სხვადასხვა კვლევისა და სამრეწველო პროგრამებში.
ქსოვილის ჰომოგენიზაციის პროტოკოლის მაგალითი ულტრაბგერითი ზონდის გამოყენებით:
ულტრაბგერითი ხელს უწყობს ქსოვილის ჰომოგენიზაციას მარტივი ოპერაციით და სწრაფი ჰომოგენიზაციის პროცედურებით. ამავდროულად, ულტრაბგერითი პროცესის პარამეტრების ზუსტი კონტროლი და მონიტორინგი შესაძლებელია ისე, რომ შედეგები იყოს საიმედო და რეპროდუცირებადი.
მასალები:
- ქსოვილის ნიმუში (მაგ. ღვიძლი, ტვინი, კუნთი)
- ბუფერი (მაგ. PBS, Tris-HCl)
- პროტეაზას ინჰიბიტორი კოქტეილი
- ულტრაბგერითი ჰომოგენიზატორი (ზონდის ტიპის)
- ყინული
- მიკროცენტრიფუგის მილები
- პიპეტები
ულტრაბგერითი ქსოვილის ჰომოგენიზაციის პროტოკოლი:
შენიშვნა: სონიკაციის ხანგრძლივობისა და ინტენსივობის ოპტიმიზაცია შეიძლება საჭირო გახდეს ქსოვილის ტიპზე, ასაკზე და ჯანმრთელობის მდგომარეობაზე, ისევე როგორც ქვემოთ მოყვანილ სპეციფიკურ აპლიკაციებზე. ასევე მნიშვნელოვანია ბუფერის, პროტეაზას ინჰიბიტორების და სხვა დანამატების ფრთხილად შერჩევა ჰომოგენატის მოსავლიანობისა და ხარისხის ოპტიმიზაციისთვის.
ქსოვილის ულტრაბგერითი ჰომოგენიზატორი UP200Ht 2 მმ რქით / ზონდით უჯრედების დაშლის, ლიზისის, უჯრედების ჰომოგენიზაციისა და ხსნარებისთვის, ასევე ცილების ექსტრაქციისთვის.
Hielscher ულტრაბგერითი ქსოვილის ჰომოგენიზატორების ძირითადი უპირატესობები
- სწრაფი და ეფექტური დაფქვა, ჰომოგენიზაცია, ლიზისი & უჯრედების დაშლა, ან მოპოვება ძლიერი ულტრაბგერითი კავიტაციის გზით
- მარტივი და ინტუიციური გამოყენება და ოპერაცია (აირჩიეთ ანალოგური ან ციფრული ვერსია)
- პროდუქტთან კონტაქტის ზედაპირების მარტივი გაწმენდა სონოტროდის გაჟონვის გზით (CIP გაწმენდა ადგილზე/ SIP სტერილიზაცია ადგილზე)
- ხმის დამცავი ყუთი (ლაბორატორიული მოწყობილობების ხმის დამცავი ყუთი მთლიანად დამზადებულია აკრილის მინისგან ნებისმიერი კუთხით სრული ხილვადობისთვის)
- პროცესის პარამეტრებზე სრული კონტროლი მოწყობილობაზე ციფრული სენსორული დისპლეით (ციფრული ულტრაბგერითი) ან დენის მრიცხველის საშუალებით (ანალოგური მოწყობილობებისთვის)
- ტემპერატურის ინტეგრირებული კონტროლი (მნიშვნელოვანია სითბოსადმი მგრძნობიარე, ლაბილური ქსოვილის ნიმუშებისთვის)
- პაუზები ჰომოგენიზაციის გაშვებაში შეიძლება ინდივიდუალურად განისაზღვროს და წინასწარ დაყენდეს ციფრულ მენიუში
- ყველა ციფრული მოწყობილობა აღჭურვილია მონაცემთა ავტომატური ჩაწერით (ინტეგრირებული SD/USB-ComboCard-ზე), ჩართული ტემპერატურის სენსორით და ბრაუზერის დისტანციური მართვის პულტით.
- მრავალნიმუშიანი მკურნალობა VialTweeter, ჭიქის რქა ან 4- ან 8-თითის სონოტროდების გამოყენებით (მაგ. ლაბორატორიული რობოტების პროცესებში ინტეგრაციისთვის)
- მცირე და ფართომასშტაბიანი აპლიკაციებისთვის
ნიმუშის მომზადება ულტრაბგერითი ზონდი UP100H.
ქვემოთ მოყვანილი ცხრილი გაძლევთ მითითებას ჩვენი ულტრაბგერითი ქსოვილის ჰომოგენიზატორების დამუშავების სავარაუდო შესაძლებლობებზე უჯრედების დაშლის, ლიზისისა და ექსტრაქციისთვის:
| სურათების მოცულობა | Დინების სიჩქარე | რეკომენდებული მოწყობილობები |
|---|---|---|
| მრავალ ჭაბურღილის ფირფიტები | ნ/ა | UIP400MTP |
| ფლაკონები, პატარა ჭიქა | ნ/ა | ულტრაბგერითი CupHorn |
| 10 ფლაკონამდე | ნ/ა | VialTweeter |
| 1-დან 500 მლ-მდე | 10-დან 200 მლ/წთ-მდე | UP100H |
| 10-დან 2000 მლ-მდე | 20-დან 400 მლ/წთ-მდე | UP200Ht, UP400 ქ |
| 0.1-დან 20ლ-მდე | 0.2-დან 4ლ/წთ-მდე | UIP2000hdT |
Დაგვიკავშირდით! / Გვკითხე ჩვენ!
ულტრაბგერითი CupHorn დახურული მილებისა და ფლაკონების ინტენსიური გაჟონვისთვის ნიმუშების სტერილური ჰომოგენიზაციისთვის.
იპოვეთ ოპტიმალური ულტრაბგერითი ქსოვილის ჰომოგენიზატორი თქვენი აპლიკაციისთვის
Hielscher ულტრაბგერითი ქსოვილის ჰომოგენიზატორები ხელმისაწვდომია ულტრაბგერითი გამომავალი დიაპაზონით 50 W-დან 16,000 W-მდე (16 kW).
ლაბორატორიის თანამშრომლები კმაყოფილი არიან Hielscher-ის ულტრაბგერითი ლაბორატორიული ჰომოგენიზატორების მარტივი და ინტუიციური მუშაობით. სპეციფიკური მოთხოვნებიდან გამომდინარე, Hielscher მოწყობილობებს გააჩნია ციფრული ან ანალოგური კონტროლი.
- VialTweeter არის მძლავრი ულტრაბგერითი ჰომოგენიზატორი, რომელიც იძლევა 10-მდე ფლაკონის ან ტესტის მილის ერთდროული გაჟღერების საშუალებას იმავე ინტენსივობით. არაპირდაპირი ბგერითი გამოსხივების გამო, ჯვარედინი დაბინძურება და ნიმუშის დაკარგვა მთლიანად არის აცილებული. დასუფთავება და გაწმენდა მინიმუმამდეა დაყვანილი ერთჯერადი ფლაკონების გამოყენების გამო. ბლოკი სონოტროდი არის ავტოკლავირებადი.
- UIP400MTP Plate-Sonicator იდეალურია, როდესაც მუშაობთ მიკროტიტრებთან და მრავალ ჭაბურღილიან ფირფიტებთან, როგორიცაა 96 ჭაბურღილის ფირფიტები. უბრალოდ მოათავსეთ თქვენი მულტიბელური ფირფიტა ან პეტრის ჭურჭელი UIP400MTP-ში და ყველა ნიმუში ერთგვაროვნად გაჟღერდება. UIP400MTP Plate-Sonicator-ით, მაღალი გამტარუნარიანობის ნიმუშის დამუშავება ხდება მარტივი და ეფექტური!
- ზონდის ტიპის ლაბორატორიული ულტრაბგერითების დიაპაზონში ჰომოგენიზატორები შეიძლება შეირჩეს 50 ვატიანი, 100 ვატი, 200 ვატი და 400 ვატი.
UP50H (50W)
UP100H (100W)
UP200Ht / UP200St (200W)
UP400St (400W)
ულტრაბგერითი ქსოვილის ჰომოგენიზატორების გამოყენება და გამოყენება
ულტრაბგერითი ჰომოგენიზატორები ჩვეულებრივ გამოიყენება ქსოვილის დაფქვისთვის, უჯრედების დაშლისთვის & ბიოლოგიური ნიმუშების ლიზისი და ჰომოგენიზაცია მოლეკულურ დიაპაზონში უჯრედშიდა ნივთიერების ექსტრაქციამდე. ნიმუშების კონტროლირებადი სონიკაციით, ყველა ეტაპი ლიზისიდან ექსტრაქციამდე და ჰომოგენიზაციამდე შეიძლება განხორციელდეს იგივე ულტრაბგერითი უჯრედის დამრღვევის გამოყენებით.
ულტრაბგერითი ჰომოგენიზატორების დიდი უპირატესობა მდგომარეობს იმაში, რომ ადვილად რეგულირდება დენის შეყვანა და ხმოვანი ინტენსივობა. Hielscher ულტრაბგერითი უჯრედების დამრღვევები (ლიზერები) საშუალებას გაძლევთ გააკონტროლოთ ბგერის ინტენსივობა ამპლიტუდის რეგულირებით 20%-დან 100%-მდე.
უწყვეტი მოქმედების ალტერნატიულად, ულტრაბგერითი ჰომოგენიზატორი შეიძლება დაყენდეს ციკლურ რეჟიმში, მაგ., სითბოს მგრძნობიარე ქსოვილის გაჟღერებისთვის. პულსური რეჟიმში გაჟღერება ნიშნავს, რომ ულტრაბგერითი წარმოქმნის მაღალი ინტენსიური ულტრაბგერითი ტალღების პერიოდულ ციკლებში. სონიკაციის პერიოდის ხანგრძლივობა და დასვენების დრო შეიძლება ინდივიდუალურად დადგინდეს მომხმარებლის მიერ.
ზე პულსირებული გაჟონვა, დასვენების პერიოდში, გაჟღენთილი მასალა შეიძლება დაუბრუნდეს მოსვენებულ მდგომარეობას და ნიმუში შეიძლება გაცივდეს (დასვენების დროის გამოყენება სითბოს გაფრქვევისთვის). ამრიგად, დამუშავების ინტენსივობა შეიძლება ზუსტად დაყენდეს ქსოვილის შესაბამისად და მცირდება ნიმუშის არასასურველი გათბობა.
ულტრაბგერითი ქსოვილის ჰომოგენიზატორები გამძლეა და მოსახერხებელია მომხმარებლისთვის, ხოლო აწარმოებენ საიმედო შედეგებს, რომლებიც უზრუნველყოფენ განმეორებადობას პროცესის ყველა მნიშვნელოვან პარამეტრზე სრული კონტროლის გამო.
ულტრაბგერითი ქსოვილის დაფქვის, უჯრედების დაშლის, ლიზისის, ექსტრაქციისა და ჰომოგენიზაციის საერთო აპლიკაციების სფეროები გვხვდება ბიოლოგიურ და ფარმაცევტულ ლაბორატორიებში, მიკრობიოლოგიაში, პროტეომულ და გენომურ კვლევებში (მაგ. ცილის გამოშვება Western blotting-მდე და ფერმენტთან დაკავშირებული იმუნოსორბენტული ანალიზი ELISA), ასევე ბოტანიკური ექსტრაქტებისა და ბიოაქტიური ნაერთების წარმოება კვების, ფარმაცევტული და კოსმეტიკური მრეწველობისთვის.
- დააწკაპუნეთ აქ კონკრეტული პროცესის რეკომენდაციებისთვის ნიმუშის მომზადების, ქსოვილის ჰომოგენიზაციის, ლიზისისა და ექსტრაქციის შესახებ (მაგ. უჯრედები, ბაქტერიები, სპორები, აქტიური ნაერთები)!
- წაიკითხეთ აქ, რატომ არის სონიკატორები შეუცვლელი ინსტრუმენტი პროტეომის კვლევისთვის!
- შეიტყვეთ, თუ როგორ აადვილებს სონიფიკაცია გენომიურ კვლევას!
ლიტერატურა / ლიტერატურა
- Nico Böhmer, Andreas Dautel, Thomas Eisele, Lutz Fischer (2012): Recombinant expression, purification and characterisation of the native glutamate racemase from Lactobacillus plantarum NC8. Protein Expr Purif. 2013 Mar;88(1):54-60.
- Brandy Verhalen, Stefan Ernst, Michael Börsch, Stephan Wilkens (2012): Dynamic Ligand-induced Conformational Rearrangements in P-glycoprotein as Probed by Fluorescence Resonance Energy Transfer Spectroscopy. J Biol Chem. 2012 Jan 6;287(2): 1112-27.
- Claudia Lindemann, Nataliya Lupilova, Alexandra Müller, Bettina Warscheid, Helmut E. Meyer, Katja Kuhlmann, Martin Eisenacher, Lars I. Leichert (2013): Redox Proteomics Uncovers Peroxynitrite-Sensitive Proteins that Help Escherichia coli to Overcome Nitrosative Stress. J Biol Chem. 2013 Jul 5; 288(27): 19698–19714.
- Elahe Motevaseli, Mahdieh Shirzad, Seyed Mohammad Akrami, Azam-Sadat Mousavi, Akbar Mirsalehian, Mohammad Hossein Modarressi (2013): Normal and tumour cervical cells respond differently to vaginal lactobacilli, independent of pH and lactate. ed Microbiol. 2013 Jul; 62(Pt 7):1065-1072.
ფაქტები, რომელთა ცოდნაც ღირს
ულტრაბგერითი ქსოვილის ჰომოგენიზატორები ხშირად მოიხსენიება, როგორც ზონდი, ბგერითი ლიზერი, ულტრაბგერითი დამშლელი, ულტრაბგერითი საფქვავი, სონო გამანადგურებელი, სონიფიკატორი, ბგერითი დაშლა, უჯრედის დამრღვევი, ულტრაბგერითი დისპერსერი ან გამხსნელი. განსხვავებული ტერმინები წარმოიქმნება სხვადასხვა აპლიკაციებიდან, რომლებიც შეიძლება შესრულდეს სონიკით.
Hielscher Ultrasonics აწარმოებს მაღალი ხარისხის ულტრაბგერითი ჰომოგენიზატორების შერევას აპლიკაციების, დისპერსიის, ემულსიფიკაციისა და ექსტრაქციისთვის ლაბორატორიულ, საპილოტე და სამრეწველო მასშტაბებზე.