Peptidszintézis hatékony a szonikálás segítségével

A szilárd fázisú peptidszintézis (SPPS) a peptidszintézis gyakori módszere. Ultrasonication egy megbízható eszköz, hogy fokozza a szilárd fázisú peptid szintézis, ami magasabb hozamok, jobb tisztaság, nincs versenyzés és jelentősen felgyorsult reakciósebesség. A Hielscher Ultrasonics különböző ultrahangos megoldásokat kínál a peptidszintézishez, a dekoltázshoz és a feloldáshoz.

Ultrahangos peptidszintézis

Ultrasonication már széles körben alkalmazzák, mint fokozó módszer szerves szintézis és jól ismert előnyeiről, mint például drasztikusan csökkent reakcióidő, magasabb hozamok, kevesebb melléktermékek, a kezdeményezés utak, amelyek nem érhetők el más módon, és / vagy jobb szelektivitás. Nagy előnyök is érhetők el, ha a szonikálás peptidszintézis reakciókhoz kapcsolódik. A kutatási eredmények kimutatták, hogy ultrahangosan asszisztált peptidszintézis eléri a nagy tisztaságú peptidek optimalizált hozamát, rövid reakcióidőn belül versenyzés nélkül.

Az ultrahangos peptidszintézis előnyei

  • Magas peptidhozamok
  • Lényegesen gyorsabb szintézis
  • Magasabb peptid tisztaság
  • Nincs versenyzés
  • Különböző peptidek párhuzamos szintézise
  • Lineáris skálázható bármely kötetre

Információkérés




Jegyezzük fel Adatvédelmi irányelvek.


Ultrahangos cuphorn több reaktoredény egységes szonikálásához, pl. a jobb peptidszintézishez.

Ultrahangos cuphorn az egységes szonikálás több reaktor edények jobb peptid szintézis.

A Merrifield szilárd fázisú peptidszintézis sematikus ábrázolása, amelyet szonikálással fokozhat.

A Merrifield szilárd fázisú peptidszintézist bemutató grafika. Ultrasonication használják, hogy támogassák és fokozza a szintézis reakció, valamint a dekoltázs a szintetizált peptidek a gyanta.
Grafika: ©Conejos-Sanchez et al., 2014)

Szilárd fázisú peptidszintézis ultrahanggal javítva

A szilárd fázisú peptidszintézis (SPPS) egy olyan kémiai reakció, amely lehetővé teszi egy peptidlánc összeszerelését az aminosavszármazékok egymást követő reakcióin keresztül egy oldhatatlan porózus támogatásra. A hagyományos szilárd fázisú peptidszintézis azonban viszonylag nem hatékony és lassú folyamat. Ezért a peptidszintézis ultrahangos intenzívebbé tétele nagyra becsült eszköz a peptidek hatékonyabb és gyorsabb szintéziséhez.
Silva et al. (2021) összehasonlította a "klasszikus" fluorenil-methoxycarbonyl (Fmoc)-szilárd fázisú peptidszintézist (SPPS) az ultrahanggal (US) támogatott SPPS-szel, amely három peptid, nevezetesen a 3(FGFR3) fibroblaszt növekedési faktor receptor 3 (FGFR3)-specifikus Pep1 (VSPPLTLGQLLS-NH2) peptid és a Pep2 (RQMATADEA-NH2) és Pep3 (AAVALLPAVLLALLACELLQMATADEA-NH2) peptidek előkészítésén alapul.
Az USA-val támogatott SPPS 14-szeres (Pep1) és 4-szeres időcsökkentést (Pep2) eredményezett a peptid összeszerelésében a "klasszikus" módszerhez képest. Érdekes módon az ultrahanggal támogatott SPPS nagyobb tisztaságú (82%) pep1-et eredményezett, mint a "klasszikus" SPPS (73%). A jelentős időcsökkentés és a magas nyers peptid tisztasága arra késztette a kutatócsoportot, hogy az USA-val támogatott SPPS-t alkalmazza a Pep3 nagy peptidre, amely nagyszámú hidrofób aminosavat és homooligó-szekvenciát mutat. Figyelemre méltó, hogy ennek a 25 mer peptidnek a szintézisét kevesebb mint 6 óra (347 perc) alatt, mérsékelt tisztaságban (kb. 49%) érték el.

Ultrahangos szilárd fázisú peptid szintézis (US-SPPS) egy hatékony technika peptid szintézis megakadályozza a versenyzés.

Gyorsabb peptidszintézis szilárd fázisú peptidszintézissel ultrahangos keveréssel.
(Tanulmány és elemzés: Wołczański et al., 2019)

Merlino és munkatársai (2019) átfogó tanulmányt is végeztek az Fmoc-alapú szilárd fázisú peptidszintézis ultrahangos hatásairól, amely lehetővé tette a különböző biológiailag aktív peptidek szintézisét (akár 44 merig), figyelemre méltó anyag- és reakcióidő-megtakarítással. Kimutatták, hogy az ultrahangos kezelés nem súlyosbítja a fő mellékhatásokat, és javította a peptidek szintézisét “nehéz szekvenciák”, az ultrahangosan támogatott szilárd fázisú peptidszintézis (US-SPPS) elhelyezése a jelenlegi nagy hatékonyságú peptid szintetikus stratégiák közé.

A peptidek ultrahangos (szonikus) szintéziséhez szükséges nagy teljesítményű rendszerek rendelkezésre állása jelentősen javítja a szintézis arányát és növeli a nyers termékek tisztaságát. (vö. Wołczański et al., 2019)

Ultrahangos peptid szintézis ad magas hozamú peptidek nagy tisztaságú, míg a racemization megakadályozható.

A versenyzés vizsgálata. Összehasonlítja a modellek jelentős 1H NMR spektrumát, a peptideket manuálisan szintetizálták a klasszikus megközelítéssel szobahőmérsékleten vs ultrahangos módszerrel emelkedett hőmérsékleten. Az Ő és Cys kémiai eltolódásai α protonok és az Acm metiléncsoportja (bal panelek), a Val ɣ-metil protonjai (jobb panelek) azt mutatják, hogy a 70 ° C-on történő szonikálás nem okoz versenyzést.
(Tanulmány és elemzés: Wołczański et al., 2019)

A peptidek ultrahangos dekoltázsa

Szilárd fázisú peptidszintézis (SPPS) után a szintetizált peptideket ki kell vágni a polimer gyantákból. Ezt a lépést deprotectionnak is nevezik. Amikor összehasonlítjuk a gyanta peptid dekoltázsának gyakori rázkódását és ultrahangos kezelését, a rázási módszer kb. 1 órát igényel, míg az ultrahangos dekoltázs 15-20 perc alatt elvégezhető. Az ultrahangos peptid dekoltázs alkalmazható a védett aminosavak és peptidek dekoltázsára, amelyek benzicil-észter kötéseken keresztül kapcsolódnak a polisztirol gyantákhoz.

Ultrahangos dekoltázs egy gyors és megbízható technika elválasztani szintetizált peptidek polisztirol gyanta.

A polisztirol gyanta peptidjeinek ultrahangos hasadása magas peptid hozamot biztosít nagy tisztaságú, versenyzés nélkül, gyors eljárás keretében.
(tanulmány és grafika: ©Anuradha és Ravindranath, 1995)

Ultrahangosan izgatott reaktor a jobb peptidszintézis érdekében.

Ultrahangosan izgatott reaktor a jobb és gyorsított peptidszintézis érdekében. A kép azt mutatja, hogy a ultrasonicator UP200St kevert üvegreaktorban.

Információkérés




Jegyezzük fel Adatvédelmi irányelvek.


Nagy teljesítményű ultrahangos készülékek a peptidszintézishez
Hielscher Ultrasonics kínál különböző ultrahangos megoldás a közvetlen és közvetett szonikálás. Az erőteljes és pontosan szabályozható ultrahangos processzorok pontosan a megfelelő mennyiségű ultrahang energiát szolgáltatják a reakcióedénybe. Akár fecskendőket, csöveket, többkútlemezeket vagy üvegreaktorokat használ szintézisedényként, a Hielscher Ultrasonics a legmegfelelőbb ultrahangosítót kínálja a peptid alkalmazásához.

A Hielscher ultrahangos rendszerek ideálisak a

  • testreszabott peptidek
  • nagyszabású peptidtermelés
  • peptid könyvtárak

Sok peptidszintézis fecskendőkben (pl. sült fecskendőreaktorokban) történik. Hielscher ultrahangos fecskendő keverő szonikál a peptid oldatot, amely az ultrahang hullámokat a fecskendő falán keresztül a folyadékba kapcsolja. Az ultrahangos fecskendő keverő az egyik legnépszerűbb ultrahangos megoldás a peptidek ultrahangos asszisztált szintéziséhez.
Az ultrahangos cuphorn alkalmas eszköz legfeljebb 5 reaktoredény szonikálására, míg a VialTweeter akár tíz reakciócsövet és öt nagyobb edényt is képes tárolni a befogó tartozékon keresztül.
Más reaktortípusokhoz, mint például a Merrifield vagy Kamysz szilárd fázisú reaktor és más polipropilén vagy boroszilikát edények / reaktorok esetében a Hielscher testreszabott szorító ultrahangos rendszereket kínál a közvetett szonikáláshoz.
A többdimenziós / mikrotiter lemezek szilárd fázisú peptidszintéziséhez az UIP400MTP az ideális eszköz. Ultrahangos kavitáció közvetetten párosul egységesen a számos minta kutak kiváló tömegátadás és szintézis reakció. Nézze meg az alábbi videót, hogy megnézze a UIP400MTP akcióban!
Természetesen a nagyobb strirred üvegreaktorok, például az oldatfázis szintéziséhez, könnyen felszerelhetők bármilyen méretű ultrahangos szondákkal (más néven szonotródákkal vagy ultrahangos szarvakkal).

A Hielscher ultrasonicators előnyei a peptidszintézishez

  • különböző ultrasonicator típusok
  • közvetlen és közvetett szonikálás
  • pontos intenzitásszabályozás
  • pontos hőmérséklet-szabályozás
  • folyamatos vagy pulzáló ultrahang
  • intelligens funkciók, programozható eszközök
  • Bármilyen kötethez elérhető
  • lineáris skálázhatóság
Az UIP400MTP ultrahangos homogenizátor képes szonikálni multi-well-lemezek és mikro-titer-lemezek sejtlízis, DNS fragmentáció, diszpergálás vagy homogenizálás.

UIP400MTP több jól illeszkedő szonikáláshoz

Lépjen kapcsolatba velünk! / Kérdezz minket!

Kérjen bővebb információt

Kérjük, használja az alábbi űrlapot, hogy kérjen további információkat ultrahangos processzorok, alkalmazások és az ár. Örömmel megvitatjuk önnel a folyamatot, és olyan ultrahangos rendszert kínálunk Önnek, amely megfelel az Ön igényeinek!









Kérjük, vegye figyelembe Adatvédelmi irányelvek.


Ultrahangos magas nyíró homogenizátorokat használnak laboratóriumi, asztali, kísérleti és ipari feldolgozásban.

Hielscher Ultrasonics gyárt nagy teljesítményű ultrahangos homogenizátorok keverésalkalmazások, diszperziós, emulgeálás és extrakciós laboratóriumi, kísérleti és ipari méretű.



Irodalom / Referenciák

Tudni érdemes

Peptidek

A peptidek olyan vegyületek, amelyekben több aminosav kapcsolódik amid kötéseken, úgynevezett peptidkötéseken keresztül. Összetett szerkezetekben kötött – jellemzően 50 vagy több aminosavból áll , ezeket a nagy peptid struktúrákat fehérjéknek nevezik. A peptidek az élet alapvető építőkövei, és számos funkciót töltenek be a szervezetben.

Peptidszintézis

A szerves kémiában, a molekuláris biológiában és az élettudományban a peptidszintézis a peptidek előállításának folyamata. A peptideket kémiailag szintetizálják az egyik aminosav karboxilcsoportjának kondenzációs reakciójával egy másik aminosav aminosav aminosavcsoportjára. A csoportok (védőcsoportok) stratégiáit általában annak érdekében használják, hogy elkerüljék a nem kívánt mellékhatásokat a különböző aminosav oldalláncokkal.
A kémiai (in vitro) peptidszintézis leggyakrabban a bejövő aminosav (C-végállomás) karboxilcsoportjának a növekvő peptidlánc N-végállomásához való összekapcsolásával kezdődik. Ezzel a C-to-N szintézissel ellentétben az élő szervezetekben a hosszú peptidek természetes fehérje bioszintézise ellentétes irányban történik. Ez azt jelenti, hogy a bioszintézisben a bejövő aminosav N-végállomása a fehérjelánc C-végállomásához (N-to-C) kapcsolódik.
A peptidszintézis legtöbb kutatási és fejlesztési protokollja szilárd fázisú módszereken alapul, míg az oldatfázis szintézis módszerei a peptidek nagyszabású ipari termelésében találhatók.


Nagy teljesítményű ultrahang! A Hielscher termékskálája lefedi a teljes spektrumot a kompakt laboratóriumi ultrasonicatortól a padtetős egységeken át a teljes ipari ultrahangos rendszerekig.

Hielscher Ultrahang gyárt nagy teljesítményű ultrahangos homogenizátorok Labor nak nek ipari méretben.