Ultrahangos minta-előkészítés THC-analízishez
- Az ultrahangos extrakció bevált módszer a THC előállítására, de analitikai célokra is használható.
- Az ultrahangos kezelés gyakori minta-előkészítési módszer a kannabisztermékek teljes THC-tartalmának elemzéséhez.
- A mintákon a TLC-, GC- és HPLC-analízis előtt ultrahangos extrakciót végeznek.
Ultrahangos THC-extrakció
A THC, vagyis a tetrahidrokannabinol (delta-9-tetrahidrokannabinol) az a vegyület, amely a marihuána pszichológiai hatásainak többségét okozza. A kannabiszfajoknak több mint 400 különböző fajtája ismert. Az adott kannabiszfajtától függően a kannabisz THC-tartalma akár mindössze 0,3 wt% is lehet. Más fajtákban a THC-tartalom akár a 20 wt%-ot is elérheti.
A különböző kannabisztermékek között is jelentős eltérések vannak: a marihuána átlagos THC-koncentrációja 1 és 5% között mozog; a hasis THC-tartalma 5 és 15% között van, a hasisolajé pedig átlagosan 20%. A rekreációs célra fogyasztott marihuánaadagok THC-tartalma rendkívül változó, és minél alacsonyabb a marihuána THC-tartalma, annál többet kell a fogyasztónak felhasználnia a kívánt hatások eléréséhez.
Az ultrahangos minta-előkészítést a THC-tartalom elemzésére használják
- a rekreációs célú THC-termékek minőség-ellenőrzéséhez,
- a gyógyszerészeti THC-termékek minőségének meghatározásához,
- a kábítószerként használt kender és a rostkender megkülönböztetéséhez.
A THC-analízishez általában a következő kromatográfiás módszereket használják: vékonyréteg-kromatográfia (TLC), gázkromatográfia (GC) és nagy teljesítményű folyadékkromatográfia (HPLC)
Ultrahangos minta-előkészítési protokoll TLC-analízishez
Minta-előkészítés: A minták előkészítéséhez a szárított növényi anyagot macerálni kell, majd homogén porrá kell őrölni. Az ultrahangos extrakcióhoz 500mg kannabisznövényből készített port és 5mL metanol-kloroform elegyet (9 : 1 arányban) kevernek össze egy mintatartó üvegben. Az ultrahangos kezeléshez használható ultrahangos készülék mikroheggyel, a VialTweeter vagy az ultrahangos CupHorn. Az ultrahangos kezelés időtartama kb. 5 min. Ezután hagyja a mintát legalább 5 min ideig állni. Hígítsa a tiszta felülúszót az extrakciós eleggyel (v/v: 1 : 10). Szabad THC: 1μL a TLC-lemezre
Dekarboxilezés: Az extraktum 100μL-ét szárazra párologtatják. A maradékot 180℃-on melegítik 4 min ideig. Adjon hozzá 500μL metanol-kloroform elegyet (v/v 9 : 1). Végezzen ultrahangos kezelést 5 min ideig. Hígítsa a tiszta felülúszót az extrakciós eleggyel (v/v: 1 : 10).
Kalibrálás: 20ng, 60ng, 100ng, 140ng
HPTLC:
TLC szilikagél F-254, Merck 5729
TLC scanner II, CATS3 szoftver, Camag Muttenz Eluens:
Etil-acetát : Toluol : Kloroform = 3 : 17 : 0,25 (v/v/v)
Kromatográfia utáni származékképzés: Fast Blue só 0,1% 0,1 M NaOH-ban
Denzitometria 550 nm-en
Tetrahidrokannabinol (Δ9-THC) analízishez és extrakcióhoz
Ultrahangos minta-előkészítési protokoll GC-analízishez
Minta-előkészítés: A szárított növényi anyagot macerálják, majd homogén porrá őrlik. Az extrakcióhoz 500mg kannabisznövényből készített port és 10mL metanol-hexán elegyet (9 : 1 arányban) kevernek össze egy mintatartó üvegben. Az ultrahangos kezeléshez használható szondás ultrahangos készülék mikroheggyel, a VialTweeter vagy az ultrahangos CupHorn. Kezelje a mintát ultrahanggal 15–20 min ideig. Rázza fel a mintát, és hagyja legalább 5 min ideig állni. Hígítsa a tiszta felülúszót az extrakciós eleggyel (v/v 1: 20).
Dekarboxilezés: a betétben
Injektorhőmérséklet: 250℃
Kalibrálás: 5 ng/μL és 250 ng/μL között
GC: HP 6890 készülék 5973 MSD és 7683 automatikus mintavevő használatával; injektálás: 1μL, splitless idő: 2 min.
Oszlop: HP-5 MS, 30m, átmérő: 250 μm, filmvastagság: 0,25 μm
Vivőgáz: He, 35 psi, állandó térfogatáram: 4 mL/min.
Kemence: 100℃ 1min. ideig; hőmérséklet-emelés 15℃ /min. sebességgel 280℃-ig; 280℃ 5 min ideig. MSD: SCAN: m/e 35 – 550
Ultrahangos minta-előkészítési protokoll HPLC-analízishez
Minta-előkészítés (a GC-előkészítéshez hasonlóan): A szárított növényi anyagot macerálják, majd homogén porrá őrlik. Az extrakcióhoz 500mg kannabisznövényből készített port és 10mL metanol-hexán elegyet (9 : 1 arányban) kevernek össze egy mintatartó üvegben. Az ultrahangos kezeléshez használható szondás ultrahangos készülék mikroheggyel, a VialTweeter vagy az ultrahangos CupHorn. Kezelje a mintát ultrahanggal 15–20 min ideig. Rázza fel a mintát, és hagyja legalább 5 min ideig állni. Hígítsa a tiszta felülúszót az extrakciós eleggyel (v/v 1: 20).
VialTweeter ultrahangos minta-előkészítéshez
Előoszlop: LiChrospher 60, RP-Select B, 5μm (Merck 50963)
Oszlop: LiChroCart 125-4, Lichrospher 60, RP-Select B, 5 μm (Merck 50829)
Eluens: izokratikus, 36% TEAP 25 mmol/L, 64% acetonitril; mennyiségi meghatározás 210nm-en
Kalibrálás: 0,001 – 0,10 μg/μL
Kalibrálás: 0,01 – 0,50 μg/μL
Retenciós idő: CBD: 6,2 min.; CBN: 8,0 min.; THC: 9,4 min.; THC-A: 11,0 min
Kimutatási határ (LOD): CBD 0,5%, CBN 0,5%, THC 0,15%, THC-A 1%
UP200St mikroheggyel a minták ultrahangos kezeléséhez
Szakirodalom/Hivatkozások
- Werner Bernhard, Franziska Penitschka, Alain Broillet, Prisma Regenscheit (2006): THC-tartalmú kendernövény igazságügyi kémiai elemzései. A vékonyréteg-kromatográfiától a GC-n át a HPLC-módszerig. Applica 2006.
Hasznos tudnivalók
A marihuána a nőivarú kannabisznövény szárított virágaiból, valamint az alattuk elhelyezkedő levelekből és szárakból áll. Ez a legszélesebb körben fogyasztott forma, és kb. 3% és 20% közötti THC-t tartalmaz. A marihuána egyes, intenzíven nemesített formáinak THC-tartalma meghaladja a 30%-ot. A marihuána az összes többi THC-tartalmú kannabisztermék-változat alapanyaga. Ahhoz, hogy a legnagyobb mennyiségben jelen lévő kannabinoid, a tetrahidrokannabinolsav (THCA) pszichoaktív THC-vé alakuljon, dekarboxilezési folyamatot kell elindítani. Ezért a kannabiszt és extraktumait melegíteni vagy vízteleníteni kell a dekarboxilezés kiváltásához.
A kief a kannabisz leveleiből és virágaiból kiszitált, trichómákban gazdag por megnevezése. Por formájában fogyasztják, vagy tömörítik, és hasislepényekben használják fel.
Hasis vagy hash: tömény gyantalepény vagy gyantagolyó, amelyet préselt kiefből vagy a növény felületéről lekapart és golyókká formált gyantából készítenek. Tisztaságától és eredetétől függően különböző színekben fordul elő, a feketétől az aranybarnáig. Fogyasztható szájon át vagy füstölve, például pipában, vízipipában, bongban, buborékoltatós vízipipában, párologtatóban, forró késsel, jointban elszívva, kannabiszvirágzattal vagy dohánnyal keverve, palackban összegyűjtött füst belélegzésével, illetve élelmiszerek összetevőjeként.
A kannabisztinktúra a kannabinoidok alkoholos kivonatának megnevezése. A tinktúra elkészítéséhez a kannabinoidokat magas alkoholtartalmú szeszekkel (többnyire gabonaalkohollal) extrahálják a kannabisznövényből.
A hasisolaj oldószeres extrakcióval előállított, megszilárdult vagy viszkózus masszává alakított, kannabinoidokat tartalmazó gyantás mátrix. A hasisolaj a pszichoaktív vegyület magas koncentrációja miatt az egyik legerősebb hatású kannabisztermék. A butánnal és szuperkritikus szén-dioxiddal extrahált hasisolaj használata az utóbbi időben egyre népszerűbbé vált.
Az áztatással készült kivonatok a kannabisz áztatással készült kivonatainak különböző típusait jelentik, amelyek az előállításukhoz használható nem illékony oldószerek széles választéka miatt különböznek egymástól. Ilyen kivonat készítéséhez a kannabisz növényi anyagát oldószerrel keverik össze, majd préselik és szűrik, hogy az olajok a növényből az oldószerbe kerüljenek. Gyakran használt oldószer a kakaóvaj, a tejből készült vaj, az étolaj, a glicerin és a bőrhidratáló készítmények.
Az orvosi marihuána a kannabisznövény orvos által javasolt gyógynövényes kezelésként történő alkalmazását, valamint a szintetikus THC és kannabinoidok használatát jelenti. Ez az alkalmazás általában orvosi rendelvényt igényel, a forgalmazás pedig rendszerint a helyi jogszabályok által meghatározott keretek között történik. Számos kutatás kimutatta, hogy a kannabisz vagy származékainak használata hatásos például a kemoterápia okozta hányinger és hányás, a neuropátiás fájdalom és a szklerózis multiplex ellen.