Biofilmek leválasztása a nagy mintaáteresztő képességű UIP400MTP ultrahangos kezelőberendezéssel
A többlyukú lemezekhez és 96 lyukú lemezekhez tervezett, nagy mintaáteresztő képességű ultrahangos kezelőberendezések nélkülözhetetlen eszközök a biofilmkutatásban, különösen a biofilmek lyukakból, csövekből, tüskékről és Petri-csészékből történő leválasztásához és eltávolításához. Ezek az ultrahangos kezelőberendezések számos minta egyidejű feldolgozását teszik lehetővé, javítva a hatékonyságot és az egyenletességet. A Hielscher nagy mintaáteresztő képességű UIP400MTP ultrahangos kezelőberendezése ideális többlyukú lemezek, 96 lyukú lemezek, több cső vagy Petri-csésze ultrahangos kezelésére. Az egyenletes ultrahangos rezgés és kavitáció megbízhatóan eltávolítja a biofilmeket a lemez aljáról. Ezáltal a többlyukú lemezekhez készült UIP400MTP ultrahangos kezelőberendezés ideális minta-előkészítő eszköz a biofilmek eltávolításához, biofilmvizsgálatokhoz, valamint baktériumok és mikrobák kutatásához.
UIP400MTP ultrahangos kezelőberendezés többlyukú lemezekhez, biofilmek leválasztására és eltávolítására nagy mintaáteresztő képességű minta-előkészítés során:
- Bakteriális biofilmek
- Eukarióta biofilmek
- Gombák által képzett biofilmek
- Archeák által képzett biofilmek
- Polimikrobiális biofilmek / Több fajból álló biofilmek
- Fogászati biofilmek (plakk)
- Tengeri biofilmek
- Környezeti biofilmek
- Orvostechnikai eszközökön kialakuló biofilmek
- Tenyésztett sejtek szuszpenziói
Nagy mintaáteresztő képességű UIP400MTP ultrahangos kezelőberendezés biofilmek eltávolítására többlyukú lemezekből, 96 lyukú lemezekből, csövekből és Petri-csészékből.
Biofilmek leválasztása és eltávolítása ultrahangos kezeléssel
A Hielscher nagy mintaáteresztő képességű UIP400MTP ultrahangos kezelőberendezését többlyukú és 96 lyukú lemezek megbízható és egyenletes ultrahangos kezelésére tervezték. A biofilmkutatásban nélkülözhetetlen, többlyukú lemezekhez készült UIP400MTP ultrahangos kezelőberendezés megbízható technológiát kínál a biofilmek többlyukú lemezekből, csövekből és Petri-csészékből történő leválasztásához és eltávolításához. A nagy mintaáteresztő képességű minta-előkészítést lehetővé tevő UIP400MTP növeli a biofilmvizsgálatok és más kapcsolódó vizsgálatok hatékonyságát és egyenletességét, így ez az ultrahangos kezelőberendezés mind az akadémiai, mind az ipari mikrobiológiai kutatásban nélkülözhetetlen.
Biofilmek eltávolítása ultrahangos kezeléssel: A biofilmek leválasztásához ellenőrzött körülmények között hagyják kialakulni a biofilmeket a többlyukú lemez lyukaiban. Ezután a lemezt az ultrahangos kezelőberendezésbe helyezik, ahol az olyan paramétereket, mint az idő, az amplitúdó és a frekvencia, a biofilm típusának sajátos követelményei és a kísérleti célok szerint állítják be. Az ultrahanghullámok minden lyukban kavitációt hoznak létre, hatékonyan megbontva a biofilm mátrixát és leválasztva a sejteket.
Ultrahangos minta-előkészítés biofilmekhez: A biofilmvizsgálatokban a nagy mintaáteresztő képességű ultrahangos kezelőberendezéseknek számos alkalmazása van. Az ultrahangos kezelés után a leválasztott biofilmsejtek összegyűjthetők, és mennyiségük különféle vizsgálatokkal, például kristályibolya-festéssel, az életképes sejtek számlálásával vagy biomasszaméréssel meghatározható. Emellett a biofilmek antimikrobiális szerekkel kezelhetők, majd ultrahangos kezelésnek vethetők alá, hogy értékeljék e szerek hatékonyságát a biofilmek megbontásában. A leválasztott biofilmsejtek genomikai és proteomikai vizsgálatokhoz is hasznosak, mivel DNS, RNS és fehérjék kivonására használhatók további molekuláris elemzés céljából.
A nagy mintaáteresztő képességű ultrahangos kezelőberendezések számos előnyt kínálnak. Több minta egyidejű feldolgozását teszik lehetővé, időt és munkát takarítva meg, továbbá minden lyuk egyenletes kezelését biztosítják, csökkentve a változékonyságot és javítva az eredmények reprodukálhatóságát. Ezek az eszközök nagyszabású vizsgálatokra is alkalmasak, lehetővé téve a biofilmek kialakulásának, megbontásának és kezelésének nagy mintaáteresztő képességű szűrővizsgálatát.
(A) 2% glükózt tartalmazó TSB-t tartalmazó lemez, amelyet biofilmképzésre, a sejtek visszanyerésére, valamint a MIC és az MBCB meghatározására használtak; (B) Tüskékkel ellátott fedél staphylococcus-biofilmek kialakításához.
A tüskéken kialakult biofilmsejteket a Hielscher UIP250MTP ultrahangos kezelőberendezésével 5 min alatt választották le, a sejtek visszanyerésére szolgáló friss tápközeget tartalmazó 96 lyukú lemezekben.
(Kép és tanulmány: ©de Oliveira et al., 2016)
UIP400MTP ultrahangos kezelőberendezés 96 lyukú lemezekhez mikrotiter- és többlyukú lemezek ultrahangos kezelésére
Az ultrahangos biofilmeltávolítás jelentősége a biofilmkutatásban
Az ultrahangos biofilmeltávolítás eredményessége, egyenletessége, hatékonysága és sokoldalúsága miatt kulcsfontosságú a biofilmkutatásban. Biztosítja a biofilmek alapos és egyenletes megbontását, elősegítve a pontos és reprodukálható elemzést a különféle biofilmvizsgálatokban. Ezek a vizsgálatok, köztük a kristályibolya-festés, az életképes sejtek számlálása, az ATP-biolumineszcencia, az XTT-redukció, a mikroszkópos elemzés és a nukleinsavak/fehérjék kivonása, átfogó betekintést nyújtanak a biofilmek kialakulásába, életképességébe, szerkezetébe és a kezelésekre adott válaszába.
Az ultrahangos kezelés kíméletesen leválasztja és eltávolítja a biofilmet a szilárd hordozókról, például a lemezek aljáról, tüskékről, csapokról vagy fedőlemezekről.
- A biofilmek hatékony megbontása:
Kavitáció: Az ultrahanghullámok kavitációs buborékokat hoznak létre, amelyek összeomlásukkor erős nyíróerőket keltenek, hatékonyan megbontva a biofilmek összetett szerkezetét.
Alapos leválasztás: Biztosítja a biofilmsejtek alapos leválasztását a felületekről, ami kulcsfontosságú a pontos mennyiségi meghatározáshoz és elemzéshez. - Egyenletesség és reprodukálhatóság:
Egyenletes kezelés: A nagy mintaáteresztő képességű ultrahangos kezelőberendezések az ultrahangos energia egyenletes eloszlását biztosítják az összes mintában, csökkentve a változékonyságot és javítva a reprodukálhatóságot.
Szabványosítás: Lehetővé teszi a biofilmek megbontására szolgáló protokollok szabványosítását, ami megbízhatóbb és jobban összehasonlítható eredményekhez vezet. - Hatékonyság:
Nagy mintaáteresztő képesség: Lehetővé teszi több minta egyidejű feldolgozását, időt takarítva meg és növelve a feldolgozható minták számát a biofilmvizsgálatokban.
Automatizálás: Könnyen integrálható automatizált munkafolyamatokba, tovább növelve a hatékonyságot és csökkentve a kézi munkát. - Az életképesség és az épség megőrzése:
Ellenőrzött körülmények: Az olyan paraméterek, mint az idő és az intenzitás, finoman beállíthatók a biofilmek megbontásához a sejtek életképességének vagy épségének veszélyeztetése nélkül, ami fontos a későbbi vizsgálatokhoz. - Sokoldalúság:
Széles körű alkalmazhatóság: Különféle biofilmtípusokhoz (bakteriális, gombák által képzett, több fajból álló) alkalmas, és kompatibilis a biofilmkutatásban használt különböző felületekkel és anyagokkal.
A többlyukú lemezekhez készült UIP400MTP ultrahangos kezelőberendezés számos előnyt kínál, amelyek nélkülözhetetlen eszközzé teszik a nagy mintaáteresztő képességű minta-előkészítésben.
A Hielscher Ultrasonics különféle ultrahangos kezelőberendezéseket kínál, köztük szondás, érintésmentes és nagy mintaáteresztő képességű modelleket. Lépjen kapcsolatba velünk most! Műszaki szakértőink örömmel egyeztetnek Önnel feldolgozási igényeiről, és ajánlanak a biofilmekkel kapcsolatos alkalmazásához leginkább megfelelő ultrahangos kezelőberendezést.
A mikrotiterlemezekhez készült UIP400MTP ultrahangos kezelőberendezés biofilmek kutatási célú leválasztására szolgál
Szakirodalom / Hivatkozások
- FactSheet UIP400MTP Multi-well Plate Sonicator – Non-Contact Sonicator – Hielscher Ultrasonics
- UIP400MTP-Multi-well-Plate-Sonicator-Infographic
- De Oliveira A, Cataneli Pereira V, Pinheiro L, Moraes Riboli DF, Benini Martins K, Ribeiro de Souza da Cunha MDL (2016): Antimicrobial Resistance Profile of Planktonic and Biofilm Cells of Staphylococcus aureus and Coagulase-Negative Staphylococci. International Journal of Molecular Sciences 17(9):1423; 2016.
- Martins KB, Ferreira AM, Pereira VC, Pinheiro L, Oliveira A, Cunha MLRS (2019): In vitro Effects of Antimicrobial Agents on Planktonic and Biofilm Forms of Staphylococcus saprophyticus Isolated From Patients With Urinary Tract Infections. Frontiers in Microbiology 2019.
Gyakran ismételt kérdések a biofilmkutatásról
Mi a biofilmek leggyakoribb hordozója?
A laboratóriumi kutatásban a biofilmek leggyakoribb hordozója a mikrotiterlemez. A mikrotiterlemezeket, különösen a 96 lyukú formátumot, széles körben használják sokoldalúságuk, egyszerű használatuk és a különféle analitikai technikákkal való kompatibilitásuk miatt.
Melyik a legjobb 96 lyukú lemez biofilmekhez?
A biofilmvizsgálatokhoz legjobb 96 lyukú lemez több tényezőtől függ, köztük a vizsgált biofilm típusától, a kísérleti elrendezéstől és a kutatás sajátos követelményeitől. A biofilmvizsgálatokhoz gyakran ajánlott 96 lyukú lemezek közé azonban a következők tartoznak:
- Corning® Costar® 3596 96-well Clear Flat Bottom Plate: Ezt a lemezt gyakran használják nagy optikai átlátszósága miatt, amely előnyös a képalkotás és a spektrofotometriás vizsgálatok során.
- Nunc™ MicroWell™ 96-Well Plates: Ezek a lemezek egyenletes lyukméreteikről és nagy optikai átlátszóságukról ismertek. Különféle felületkezelésekkel kaphatók a különböző sejttenyésztési típusok támogatására.
- Greiner Bio-One CELLSTAR® 96-Well Microplate: Ezt a lemezt gyakran használják biofilmvizsgálatokhoz, mert a lyukak minősége egyenletes, és különféle felületi bevonatokkal, például szövettenyésztéshez kezelt vagy kis kötőképességű felületekkel kapható.
- Fekete, átlátszó aljú 96 lyukú lemezek: A fluoreszcencia- vagy lumineszcenciaméréseket igénylő vizsgálatokhoz az átlátszó aljú fekete lemezek (pl. Corning® 3603) ideálisak, mivel minimalizálják a lyukak közötti áthallást és javítják a jel detektálását.
- Hidrofób vagy hidrofil bevonatú lemezek: A biofilm és a mikroorganizmus jellegétől függően előnyösek lehetnek a tapadást elősegítő vagy gátló, speciális bevonatú lemezek. Például a hidrofób lemezek alkalmasak lehetnek bizonyos baktériumok által képzett biofilmekhez.
- Kifejezetten biofilmekhez készült lemezek: Egyes gyártók kifejezetten biofilmkutatásra tervezett lemezeket kínálnak. Ezek a lemezek gyakran jobb felületi tulajdonságokkal rendelkeznek, amelyek elősegítik a biofilmek kialakulását, és biofilmvizsgálatokhoz optimalizáltak.
Amikor 96 lyukú lemezt választ biofilmvizsgálatokhoz, vegye figyelembe az alábbi szempontokat:
- Anyag és felületkezelés: Válasszon olyan lemezanyagot és felületkezelést, amely támogatja a vizsgált biofilmképző mikroorganizmusok tapadását és növekedését.
Optikai átlátszóság: Az optikai méréseket tartalmazó vizsgálatokhoz gondoskodjon arról, hogy a lemez nagy optikai átlátszóságú legyen. - A lyukak kialakítása: Vegye figyelembe a lyukak alakját és mélységét, amelyek befolyásolhatják a biofilmek növekedését, valamint a későbbi kezelések vagy mérések hatékonyságát.
- Kompatibilitás a berendezésekkel: Győződjön meg arról, hogy a lemez kompatibilis az ultrahangos kezelőberendezésével, az inkubátorával és a vizsgálatban használt minden egyéb berendezéssel. A Hielscher többlyukú lemezekhez készült ultrahangos kezelőberendezése minden szabványos mikrotiter- és többlyukú lemezzel kompatibilis.
Végső soron a legjobb választás a biofilmkutatás sajátos követelményeitől és az érintett mikroorganizmusok jellemzőitől függ.
Milyen tipikus biofilmvizsgálatokat alkalmaznak a kutatásban?
A kutatásban és a diagnosztikában különféle vizsgálatokat alkalmaznak a biofilmek tanulmányozására és osztályozására. Az ultrahangos kezelés gyakori minta-előkészítési lépés a biofilm eltávolítására a szilárd hordozójáról, így a biofilm vizsgálatok és elemzések számára hozzáférhetővé válik.
- Kristályibolya-festés:
Cél: A biofilm teljes biomasszájának mennyiségi meghatározása.
Módszer: A biofilmeket kristályibolya-festékkel festik meg, majd a festéket oldatba viszik, és spektrofotometriásan mérik.
Alkalmazás: A biofilmképződés és az antimikrobiális szerek hatásainak értékelésére használják. - Életképes sejtek számlálása (CFU-vizsgálat):
Cél: Az életképes biofilmsejtek számának meghatározása.
Módszer: A leválasztott biofilmsejtekből hígítási sort készítenek, majd agarra szélesztik őket a telepképző egységek (CFU-k) megszámlálásához.
Alkalmazás: A biofilmsejtek életképességének és az antimikrobiális hatékonyságnak az értékelése. - ATP-biolumineszcencia:
Cél: A biofilmsejtek metabolikus aktivitásának mérése.
Módszer: Az ATP-szinteket biolumineszcens vizsgálattal határozzák meg mennyiségileg.
Alkalmazás: A biofilm életképességét és metabolikus állapotát jelzi. - XTT-redukciós vizsgálat:
Cél: A sejtek metabolikus aktivitásának értékelése.
Módszer: A metabolikusan aktív sejtek az XTT-reagenst redukálják, így színes formazántermék keletkezik, amelynek mennyiségét spektrofotometriásan határozzák meg.
Alkalmazás: A biofilmsejtek életképességének és a kezelések hatásának értékelésére használják. - Mikroszkópos elemzés:
Cél: A biofilm szerkezetének és összetételének megjelenítése.
Módszer: A technikák közé tartozik a fénymikroszkópia, a konfokális lézerpásztázó mikroszkópia (CLSM) és a pásztázó elektronmikroszkópia (SEM).
Alkalmazás: Részletes betekintést nyújt a biofilm felépítésébe, eloszlásába és a kezelések hatásaiba. - DNS, RNS és fehérjék kivonása:
Cél: A biofilmsejtek genetikai és proteomikai profiljának elemzése.
Módszer: A biofilmsejteket lizálják, hogy nukleinsavakat és fehérjéket vonjanak ki további elemzéshez (pl. PCR, qPCR, szekvenálás, proteomika).
Alkalmazás: A biofilmekben a génexpresszió, a genetikai sokféleség és a fehérjeexpresszió vizsgálata. - Biofilmgátlási és -eradikációs vizsgálatok:
Cél: Vegyületek szűrővizsgálata annak megállapítására, hogy képesek-e megelőzni a biofilmek kialakulását vagy felszámolni a már kialakult biofilmeket.
Módszer: A biofilmeket potenciális biofilmellenes szerekkel kezelik, és a megbontást a fent említett vizsgálatokkal értékelik.
Alkalmazás: Gyógyszerkutatás és biofilmellenes terápiák fejlesztése.
A Hielscher Ultrasonics nagy teljesítményű ultrahangos homogenizátorokat gyárt a laboratóriumi mérettől az ipari méretig.