अल्ट्रासोनिकेशन के साथ तैयार बफर समाधान

अल्ट्रासोनिक ऊतक homogenizers का उपयोग कर Lysis बफ़र्स कुशलतापूर्वक और जल्दी तैयार किया जा सकता है। चूंकि अल्ट्रासोनिकेटर मिश्रण, भंग और फैलाव के लिए एक सपना उपकरण हैं, इसलिए वे लाइसिस बफ़र्स की एक विश्वसनीय और उपयोगकर्ता के अनुकूल तैयारी की अनुमति देते हैं।

अल्ट्रासोनिक Lysis बफ़र्स की तैयारी

अल्ट्रासोनिक ऊतक homogenizers सेल व्यवधान, lysis और निष्कर्षण के लिए एक आम उपकरण हैं, इसलिए अधिकांश प्रयोगशालाओं में उपलब्ध हैं। जांच-प्रकार के अल्ट्रासोनिकेटर के लिए एक माध्यमिक अनुप्रयोग लाइसिस बफर की तैयारी है।

लाइसिस बफर एक समाधान है जिसका उपयोग खुली (लाइज़) कोशिकाओं को तोड़ने और डाउनस्ट्रीम विश्लेषण के लिए उनकी सामग्री को छोड़ने के लिए किया जाता है। लाइसिस बफर की विशिष्ट संरचना lysed कोशिकाओं के प्रकार और बहाव अनुप्रयोग के आधार पर भिन्न हो सकती है। हालांकि, एक विशिष्ट लाइसिस बफर में डिटर्जेंट, लवण और प्रोटीज इनहिबिटर जैसे घटक होते हैं। बफरिंग लवण (जैसे ट्रिस-एचसीएल) और आयनिक लवण (जैसे एनएसीएल) का उपयोग आमतौर पर लाइसेट के पीएच और परासरण को विनियमित करने के लिए किया जाता है।
एक lysis बफर बनाने के लिए, घटकों को उचित सांद्रता और पीएच में एक साथ मिलाया जाता है। मिश्रण को आमतौर पर तब तक हिलाया या हिलाया जाता है जब तक कि घटक भंग न हो जाएं और समाधान सजातीय न हो।
अल्ट्रासोनिक समरूपीकरण एक ऐसी विधि है जिसका उपयोग घटकों के मिश्रण और विघटन में सुधार करके एक अच्छा लाइसिस बफर बनाने में मदद करने के लिए किया जा सकता है। इस विधि में, अल्ट्रासाउंड तरंगें – आम तौर पर 20 से 30 kHz की सीमा में – मिश्रण पर लागू होते हैं, जो गुहिकायन बुलबुले बनाता है जो ढह जाते हैं और तीव्र स्थानीय ऊर्जा उत्पन्न करते हैं, जिससे यांत्रिक कतरनी और घटकों का मिश्रण होता है।
अल्ट्रासोनिक समरूपता प्रक्रिया घटकों के किसी भी गुच्छे या समुच्चय को तोड़ने में मदद कर सकती है, और यह सुनिश्चित कर सकती है कि समाधान समान रूप से मिश्रित है। नतीजतन, इस तरह के बेहतर lysis बफर अधिक कुशल सेल व्यवधान और निकाले गए सामग्री की उच्च पैदावार के लिए नेतृत्व कर सकते हैं. इसके अतिरिक्त, अल्ट्रासोनिक समरूपता पारंपरिक सरगर्मी या झटकों के तरीकों की तुलना में एक lysis बफर बनाने के लिए आवश्यक समय को कम कर सकती है।
कुल मिलाकर, अल्ट्रासोनिक homogenization lysis बफर तैयारी की गुणवत्ता और दक्षता में सुधार के लिए एक शक्तिशाली उपकरण है।

अल्ट्रासोनिक Lysis बफर तैयारी के लिए प्रोटोकॉल

यह एक जांच-प्रकार अल्ट्रासोनिकेटर का उपयोग करके एक lysis बफर बनाने के लिए एक सामान्य प्रोटोकॉल है:
 
सामग्री:

• पसंद का डिटर्जेंट (जैसे: ट्राइटन X-100, SDS, CHAPS)
• पसंद के नमक (ओं) (जैसे NaCl, KCl)
• प्रोटीज इनहिबिटर (जैसे पीएमएसएफ, एप्रोटिनिन, ल्यूपेप्टिन)
• अल्ट्रासोनिकेटर
• स्टरर
• विआयनीकृत पानी
• पीएच मीटर या पीएच स्ट्रिप्स

 
 
चरण-दर-चरण निर्देश:

1. उन कोशिकाओं या ऊतक के आधार पर लाइसिस बफर की संरचना निर्धारित करें जिन्हें आप लाइसिंग कर रहे हैं, और डाउनस्ट्रीम एप्लिकेशन जिनके लिए आप लाइसेट का उपयोग करेंगे। वांछित सांद्रता पर डिटर्जेंट, लवण और प्रोटीज अवरोधकों के स्टॉक समाधान तैयार करें।
2. एक बीकर या फ्लास्क के लिए डिटर्जेंट, लवण और प्रोटीज अवरोधकों के स्टॉक समाधान जोड़ें।
3. बफर की वांछित मात्रा तक मात्रा लाने के लिए विआयनीकृत पानी जोड़ें।
4. प्री-मिक्स समाधान प्राप्त करने के लिए स्टिरर का उपयोग करके घटकों को मिलाएं।
5. पीएच मीटर या पीएच स्ट्रिप्स का उपयोग करके बफर के पीएच को मापें, और एसिड या बेस की थोड़ी मात्रा के साथ आवश्यकतानुसार पीएच को समायोजित करें।
6. प्री-मिक्स समाधान को समरूप बनाने के लिए जांच-प्रकार अल्ट्रासोनिकेटर का उपयोग करें ताकि एक अत्यधिक समरूप समाधान प्राप्त हो। इसलिए, कुछ सेकंड के लिए समाधान को सोनिकेट करें जब तक कि समाधान अच्छी तरह से मिश्रित न हो जाए और कोई भी गुच्छे या समुच्चय टूट न जाएं। सोनीशन की अवधि और शक्ति को उपयोग किए गए विशिष्ट लाइसिस बफर और अल्ट्रासोनिकेटर के आधार पर अनुकूलित किया जा सकता है।
7. अल्ट्रासोनिकेशन के बाद, बफर के पीएच को फिर से मापें और आवश्यकतानुसार समायोजित करें।
8. किसी भी मलबे या समुच्चय है कि sonication के दौरान गठन किया है हो सकता है को हटाने के लिए एक 0.2 माइक्रोन फिल्टर के माध्यम से बफर फ़िल्टर.
9. lysis बफर अब उपयोग के लिए तैयार है.

 
नोट: सटीक संरचना और lysis बफर के पीएच lysed किया जा रहा कोशिकाओं या ऊतक और बहाव अनुप्रयोगों के आधार पर भिन्न हो सकते हैं. उपरोक्त प्रोटोकॉल एक सामान्य दिशानिर्देश है और इसे विशिष्ट अनुप्रयोगों के लिए अनुकूलित करने की आवश्यकता हो सकती है।
 
अल्ट्रासोनिक homogenizers आमतौर पर सेल व्यवधान और इंट्रासेल्युलर अणुओं के निष्कर्षण के लिए उपयोग किया जाता है। इसलिए कई lysis अनुप्रयोगों जांच प्रकार sonication न केवल lysis बफर की तैयारी के लिए, लेकिन यह भी यांत्रिक सेल व्यवधान und निष्कर्षण के लिए उपयोग करते हैं.
यह अल्ट्रासोनिक ऊतक homogenizers प्रयोगशालाओं के लिए एक बहुमुखी उपकरण बनाता है और सूक्ष्म जीव विज्ञान, जैव प्रौद्योगिकी और जीवन विज्ञान में ultrasonicators के व्यापक उपयोग की व्याख्या करता है।

अल्ट्रासोनिक लैब Homogenizers

Hielscher Ultrasonics विभिन्न पावर रेटिंग और सैंपल वॉल्यूम पर अल्ट्रासोनिक होमोजेनाइज़र और प्रोब्स (sonotrodes) का निर्माण और आपूर्ति करता है। यह हमें आपको आपके नमूना तैयार करने के लिए सबसे उपयुक्त अल्ट्रासोनिक विघटनकर्ता प्रदान करने की अनुमति देता है। हम उच्चतम गुणवत्ता, उत्कृष्ट उपयोगकर्ता-आराम और विश्वसनीय sonication परिणामों पर ध्यान केंद्रित करते हैं। सभी डिजिटल अल्ट्रासोनिकेटर में स्मार्ट सॉफ्टवेयर, प्रोग्रामिंग और सोनीशन प्रोटोकॉल, ब्राउज़र रिमोट कंट्रोल, तापमान नियंत्रण, नमूना रोशनी के साथ-साथ अंतर्निहित एसडी-कार्ड पर स्वचालित डेटा रिकॉर्डिंग की पूर्व-सेटिंग होती है।

डिजाइन, विनिर्माण और परामर्श – गुणवत्ता जर्मनी में निर्मित

Hielscher अल्ट्रासोनिकेटर अपने उच्चतम गुणवत्ता और डिजाइन मानकों के लिए प्रसिद्ध हैं। मजबूती और आसान संचालन औद्योगिक सुविधाओं में हमारे अल्ट्रासोनिकेटर के सुचारू एकीकरण की अनुमति देता है। किसी न किसी स्थिति और मांग वातावरण आसानी से Hielscher ultrasonicators द्वारा नियंत्रित कर रहे हैं।

Hielscher Ultrasonics एक आईएसओ प्रमाणित कंपनी है और अत्याधुनिक प्रौद्योगिकी और उपयोगकर्ता-मित्रता की विशेषता वाले उच्च प्रदर्शन अल्ट्रासोनिकेटर पर विशेष जोर देती है। बेशक, Hielscher अल्ट्रासोनिकेटर सीई के अनुरूप हैं और उल, सीएसए और RoHs की आवश्यकताओं को पूरा करते हैं।

नीचे दी गई तालिका आपको हमारे विभिन्न प्रयोगशाला अल्ट्रासोनिकेटर का अवलोकन देती है: