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अल्ट्रासोनिकेशन के साथ तैयार बफर समाधान

अल्ट्रासोनिक ऊतक homogenizers का उपयोग कर Lysis बफ़र्स कुशलतापूर्वक और जल्दी तैयार किया जा सकता है। चूंकि अल्ट्रासोनिकेटर मिश्रण, भंग और फैलाव के लिए एक सपना उपकरण हैं, इसलिए वे लाइसिस बफ़र्स की एक विश्वसनीय और उपयोगकर्ता के अनुकूल तैयारी की अनुमति देते हैं।

अल्ट्रासोनिक Lysis बफ़र्स की तैयारी

अल्ट्रासोनिक ऊतक homogenizers सेल व्यवधान, lysis और निष्कर्षण के लिए एक आम उपकरण हैं, इसलिए अधिकांश प्रयोगशालाओं में उपलब्ध हैं। जांच-प्रकार के अल्ट्रासोनिकेटर के लिए एक माध्यमिक अनुप्रयोग लाइसिस बफर की तैयारी है।

सेल व्यवधान, प्रोटीन निष्कर्षण और अल्ट्रासाउंड के साथ lysis बफर तैयारी प्रयोगशालाओं में एक कुशल नमूना तैयारी विधि है.लाइसिस बफर एक समाधान है जिसका उपयोग खुली (लाइज़) कोशिकाओं को तोड़ने और डाउनस्ट्रीम विश्लेषण के लिए उनकी सामग्री को छोड़ने के लिए किया जाता है। लाइसिस बफर की विशिष्ट संरचना lysed कोशिकाओं के प्रकार और बहाव अनुप्रयोग के आधार पर भिन्न हो सकती है। हालांकि, एक विशिष्ट लाइसिस बफर में डिटर्जेंट, लवण और प्रोटीज इनहिबिटर जैसे घटक होते हैं। बफरिंग लवण (जैसे ट्रिस-एचसीएल) और आयनिक लवण (जैसे एनएसीएल) का उपयोग आमतौर पर लाइसेट के पीएच और परासरण को विनियमित करने के लिए किया जाता है।
एक lysis बफर बनाने के लिए, घटकों को उचित सांद्रता और पीएच में एक साथ मिलाया जाता है। मिश्रण को आमतौर पर तब तक हिलाया या हिलाया जाता है जब तक कि घटक भंग न हो जाएं और समाधान सजातीय न हो।
अल्ट्रासोनिक समरूपीकरण एक ऐसी विधि है जिसका उपयोग घटकों के मिश्रण और विघटन में सुधार करके एक अच्छा लाइसिस बफर बनाने में मदद करने के लिए किया जा सकता है। इस विधि में, अल्ट्रासाउंड तरंगें – आम तौर पर 20 से 30 kHz की सीमा में – मिश्रण पर लागू होते हैं, जो गुहिकायन बुलबुले बनाता है जो ढह जाते हैं और तीव्र स्थानीय ऊर्जा उत्पन्न करते हैं, जिससे यांत्रिक कतरनी और घटकों का मिश्रण होता है।
अल्ट्रासोनिक समरूपता प्रक्रिया घटकों के किसी भी गुच्छे या समुच्चय को तोड़ने में मदद कर सकती है, और यह सुनिश्चित कर सकती है कि समाधान समान रूप से मिश्रित है। नतीजतन, इस तरह के बेहतर lysis बफर अधिक कुशल सेल व्यवधान और निकाले गए सामग्री की उच्च पैदावार के लिए नेतृत्व कर सकते हैं. इसके अतिरिक्त, अल्ट्रासोनिक समरूपता पारंपरिक सरगर्मी या झटकों के तरीकों की तुलना में एक lysis बफर बनाने के लिए आवश्यक समय को कम कर सकती है।
कुल मिलाकर, अल्ट्रासोनिक homogenization lysis बफर तैयारी की गुणवत्ता और दक्षता में सुधार के लिए एक शक्तिशाली उपकरण है।

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UP200Ht अल्ट्रासोनिक homogenizer एक स्टैंड पर घुड़सवार अनुसंधान, उद्योग और उत्पादन में कई अनुप्रयोगों का उपयोग किया जाता है।

अल्ट्रासोनिक लैब homogenizer UP200Ht नमूना प्रस्तुत करने, lysis, निष्कर्षण, डीएनए विखंडन और भंग के लिए अनुसंधान प्रयोगशालाओं में लोकप्रिय है।

अल्ट्रासोनिक Lysis बफर तैयारी के लिए प्रोटोकॉल

यह एक जांच-प्रकार अल्ट्रासोनिकेटर का उपयोग करके एक lysis बफर बनाने के लिए एक सामान्य प्रोटोकॉल है:
 
सामग्री:

  • पसंद का डिटर्जेंट (जैसे: ट्राइटन X-100, SDS, CHAPS)
  • पसंद के नमक (ओं) (जैसे NaCl, KCl)
  • प्रोटीज इनहिबिटर (जैसे पीएमएसएफ, एप्रोटिनिन, ल्यूपेप्टिन)
  • अल्ट्रासोनिकेटर
  • स्टरर
  • विआयनीकृत पानी
  • पीएच मीटर या पीएच स्ट्रिप्स

 
 
चरण-दर-चरण निर्देश:

  1. उन कोशिकाओं या ऊतक के आधार पर लाइसिस बफर की संरचना निर्धारित करें जिन्हें आप लाइसिंग कर रहे हैं, और डाउनस्ट्रीम एप्लिकेशन जिनके लिए आप लाइसेट का उपयोग करेंगे। वांछित सांद्रता पर डिटर्जेंट, लवण और प्रोटीज अवरोधकों के स्टॉक समाधान तैयार करें।
  2. एक बीकर या फ्लास्क के लिए डिटर्जेंट, लवण और प्रोटीज अवरोधकों के स्टॉक समाधान जोड़ें।
  3. बफर की वांछित मात्रा तक मात्रा लाने के लिए विआयनीकृत पानी जोड़ें।
  4. प्री-मिक्स समाधान प्राप्त करने के लिए स्टिरर का उपयोग करके घटकों को मिलाएं।
  5. पीएच मीटर या पीएच स्ट्रिप्स का उपयोग करके बफर के पीएच को मापें, और एसिड या बेस की थोड़ी मात्रा के साथ आवश्यकतानुसार पीएच को समायोजित करें।
  6. प्री-मिक्स समाधान को समरूप बनाने के लिए जांच-प्रकार अल्ट्रासोनिकेटर का उपयोग करें ताकि एक अत्यधिक समरूप समाधान प्राप्त हो। इसलिए, कुछ सेकंड के लिए समाधान को सोनिकेट करें जब तक कि समाधान अच्छी तरह से मिश्रित न हो जाए और कोई भी गुच्छे या समुच्चय टूट न जाएं। सोनीशन की अवधि और शक्ति को उपयोग किए गए विशिष्ट लाइसिस बफर और अल्ट्रासोनिकेटर के आधार पर अनुकूलित किया जा सकता है।
  7. अल्ट्रासोनिकेशन के बाद, बफर के पीएच को फिर से मापें और आवश्यकतानुसार समायोजित करें।
  8. किसी भी मलबे या समुच्चय है कि sonication के दौरान गठन किया है हो सकता है को हटाने के लिए एक 0.2 माइक्रोन फिल्टर के माध्यम से बफर फ़िल्टर.
  9. lysis बफर अब उपयोग के लिए तैयार है.

 
नोट: सटीक संरचना और lysis बफर के पीएच lysed किया जा रहा कोशिकाओं या ऊतक और बहाव अनुप्रयोगों के आधार पर भिन्न हो सकते हैं. उपरोक्त प्रोटोकॉल एक सामान्य दिशानिर्देश है और इसे विशिष्ट अनुप्रयोगों के लिए अनुकूलित करने की आवश्यकता हो सकती है।
 
अल्ट्रासोनिक homogenizers आमतौर पर सेल व्यवधान और इंट्रासेल्युलर अणुओं के निष्कर्षण के लिए उपयोग किया जाता है। इसलिए कई lysis अनुप्रयोगों जांच प्रकार sonication न केवल lysis बफर की तैयारी के लिए, लेकिन यह भी यांत्रिक सेल व्यवधान und निष्कर्षण के लिए उपयोग करते हैं.
यह अल्ट्रासोनिक ऊतक homogenizers प्रयोगशालाओं के लिए एक बहुमुखी उपकरण बनाता है और सूक्ष्म जीव विज्ञान, जैव प्रौद्योगिकी और जीवन विज्ञान में ultrasonicators के व्यापक उपयोग की व्याख्या करता है।

यह वीडियो क्लिप Hielscher अल्ट्रासोनिक homogenizer UP100H से पता चलता है, एक ultrasonicator व्यापक रूप से प्रयोगशालाओं में नमूना तैयार करने के लिए इस्तेमाल किया।

अल्ट्रासोनिक Homogenizer UP100H

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अल्ट्रासोनिक लैब Homogenizers

लैब अल्ट्रासोनिकेटर UP200Ht (200W, 26kHz) नमूना तैयार करने, समरूपीकरण, सेल lysis, सेल निलंबन के घुलनशीलता, प्रोटीन निष्कर्षण, डीएनए विखंडन, पायसीकरण, फैलाव और मिश्रण अनुप्रयोगों के लिए।Hielscher Ultrasonics विभिन्न पावर रेटिंग और सैंपल वॉल्यूम पर अल्ट्रासोनिक होमोजेनाइज़र और प्रोब्स (sonotrodes) का निर्माण और आपूर्ति करता है। यह हमें आपको आपके नमूना तैयार करने के लिए सबसे उपयुक्त अल्ट्रासोनिक विघटनकर्ता प्रदान करने की अनुमति देता है। हम उच्चतम गुणवत्ता, उत्कृष्ट उपयोगकर्ता-आराम और विश्वसनीय sonication परिणामों पर ध्यान केंद्रित करते हैं। सभी डिजिटल अल्ट्रासोनिकेटर में स्मार्ट सॉफ्टवेयर, प्रोग्रामिंग और सोनीशन प्रोटोकॉल, ब्राउज़र रिमोट कंट्रोल, तापमान नियंत्रण, नमूना रोशनी के साथ-साथ अंतर्निहित एसडी-कार्ड पर स्वचालित डेटा रिकॉर्डिंग की पूर्व-सेटिंग होती है।

डिजाइन, विनिर्माण और परामर्श – गुणवत्ता जर्मनी में निर्मित

Hielscher अल्ट्रासोनिकेटर अपने उच्चतम गुणवत्ता और डिजाइन मानकों के लिए प्रसिद्ध हैं। मजबूती और आसान संचालन औद्योगिक सुविधाओं में हमारे अल्ट्रासोनिकेटर के सुचारू एकीकरण की अनुमति देता है। किसी न किसी स्थिति और मांग वातावरण आसानी से Hielscher ultrasonicators द्वारा नियंत्रित कर रहे हैं।

Hielscher Ultrasonics एक आईएसओ प्रमाणित कंपनी है और अत्याधुनिक प्रौद्योगिकी और उपयोगकर्ता-मित्रता की विशेषता वाले उच्च प्रदर्शन अल्ट्रासोनिकेटर पर विशेष जोर देती है। बेशक, Hielscher अल्ट्रासोनिकेटर सीई के अनुरूप हैं और उल, सीएसए और RoHs की आवश्यकताओं को पूरा करते हैं।

नीचे दी गई तालिका आपको हमारे विभिन्न प्रयोगशाला अल्ट्रासोनिकेटर का अवलोकन देती है:

UP200St पर VialTweeter 200डब्ल्यू 26kHz छोटे शीशियों की अल्ट्रासोनिकेशन, जैसे एप्पेंडोर्फ 1.5mL
यूपी50एच 50 डब्ल्यू 30kHz हैंडहेल्ड या स्टैंडमाउंटेड लैब होमोजेनाइज़र
यूपी100एच 100W 30kHz हैंडहेल्ड या स्टैंडमाउंटेड लैब होमोजेनाइज़र
यूपी200एचटी 200डब्ल्यू 26kHz हैंडहेल्ड या स्टैंडमाउंटेड लैब होमोजेनाइज़र
यूपी200सेंट 200डब्ल्यू 26kHz स्टैंडमाउंटेड लैब होमोजेनाइज़र
UP400St 400W 24kHz स्टैंडमाउंटेड लैब होमोजेनाइज़र
सोनोस्टेप 200डब्ल्यू 26kHz लैब रिएक्टर संयोजन, अल्ट्रासोनिकेशन, पंप, स्टिरर और पोत
जीडीमिनी2 200डब्ल्यू 26kHz संदूषण मुक्त प्रवाह सेल
कपहॉर्न 200डब्ल्यू 26kHz शीशियों और बीकर के लिए तीव्र अल्ट्रासोनिक स्नान
UIP400MTP 400W 24kHz मल्टी-वेल प्लेट्स? माइक्रोटिटर प्लेट्स के लिए अल्ट्रासोनिक सिस्टम
वर्दी और तेजी से बाँझ नमूना समरूपता के लिए 5 बंद ट्यूबों और शीशियों तक वर्दी और तीव्र sonication के लिए अल्ट्रासोनिक cuphorn।

अल्ट्रासोनिक CupHorn नमूनों के बाँझ समरूपीकरण के लिए बंद ट्यूबों और शीशियों के गहन sonication के लिए।

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अल्ट्रासोनिक जांच-प्रकार homogenizer UP400St एक सजातीय lysis बफर समाधान बनाने के लिए लवण और डिटर्जेंट भंग करने के लिए प्रयोग किया जाता है।

अल्ट्रासोनिक लैब homogenizer UP400St आमतौर पर लाइसिस बफर तैयारी और बाद में सेल व्यवधान के लिए उपयोग किया जाता है।



साहित्य/सन्दर्भ


उच्च प्रदर्शन अल्ट्रासोनिक्स! Hielscher की उत्पाद श्रृंखला पूर्ण औद्योगिक अल्ट्रासोनिक सिस्टम के लिए बेंच-टॉप इकाइयों पर कॉम्पैक्ट लैब अल्ट्रासोनिकेटर से पूर्ण स्पेक्ट्रम को कवर करती है।

Hielscher Ultrasonics से उच्च प्रदर्शन अल्ट्रासोनिक homogenizers बनाती है प्रयोगशाला तक औद्योगिक आकार।

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