Solutions tampons préparées par ultrasons
Les tampons de lyse peuvent être préparés efficacement et rapidement à l'aide d'homogénéisateurs de tissus à ultrasons. Les ultrasons étant un outil idéal pour mélanger, dissoudre et disperser, ils permettent une préparation fiable et conviviale des tampons de lyse.
Préparation par ultrasons des tampons de lyse
Les homogénéisateurs de tissus à ultrasons sont un outil courant pour la désintégration, la lyse et l'extraction des cellules, et sont donc disponibles dans la plupart des laboratoires. La préparation des tampons de lyse est une application secondaire des ultrasons de type sonde.
Le tampon de lyse est une solution utilisée pour ouvrir (lyser) les cellules et libérer leur contenu en vue d'une analyse en aval. La composition spécifique du tampon de lyse peut varier en fonction du type de cellules à lyser et de l'application en aval. Cependant, un tampon de lyse typique contient des composants tels que des détergents, des sels et des inhibiteurs de protéase. Les sels tampons (par exemple Tris-HCl) et les sels ioniques (par exemple NaCl) sont couramment utilisés pour réguler le pH et l'osmolarité du lysat.
Pour fabriquer un tampon de lyse, les composants sont mélangés dans les concentrations et les pH appropriés. Le mélange est généralement agité ou secoué jusqu'à ce que les composants soient dissous et que la solution soit homogène.
L'homogénéisation par ultrasons est une méthode qui peut être utilisée pour obtenir un bon tampon de lyse en améliorant le mélange et la dissolution des composants. Dans cette méthode, les ondes ultrasoniques – normalement dans la gamme de 20 à 30 kHz – sont appliquées au mélange, ce qui crée des bulles de cavitation qui s'effondrent et génèrent une énergie locale intense, entraînant un cisaillement mécanique et le mélange des composants.
Le processus d'homogénéisation par ultrasons peut contribuer à briser les amas ou les agrégats des composants et à garantir que la solution est mélangée de manière uniforme. Par conséquent, ce tampon de lyse amélioré peut conduire à une désintégration cellulaire plus efficace et à des rendements plus élevés du matériel extrait. En outre, l'homogénéisation ultrasonique peut réduire le temps nécessaire à la fabrication d'un tampon de lyse par rapport aux méthodes traditionnelles d'agitation.
Dans l'ensemble, l'homogénéisation par ultrasons est un outil puissant pour améliorer la qualité et l'efficacité de la préparation du tampon de lyse.

L'homogénéisateur de laboratoire à ultrasons UP200Ht est populaire dans les laboratoires de recherche pour la préparation des échantillons, la lyse, l'extraction, la fragmentation et la dissolution de l'ADN.
Protocole de préparation du tampon de lyse ultrasonique
Il s'agit d'un protocole général pour la préparation d'un tampon de lyse à l'aide d'un appareil à ultrasons de type sonde :
Matériel :
- Détergent(s) au choix (par exemple Triton X-100, SDS, CHAPS)
- Sel(s) au choix (par exemple NaCl, KCl)
- Inhibiteurs de protéase (par exemple PMSF, aprotinine, leupeptine)
- appareil à ultrasons
- agitateur
- Eau déionisée
- pH-mètre ou bandelettes pH
Instructions étape par étape :
- Déterminer la composition du tampon de lyse en fonction des cellules ou des tissus à lyser et des applications en aval pour lesquelles vous utiliserez le lysat. Préparer les solutions mères de détergents, de sels et d'inhibiteurs de protéase aux concentrations souhaitées.
- Ajouter les solutions mères de détergents, de sels et d'inhibiteurs de protéase dans un bécher ou une fiole.
- Ajouter de l'eau désionisée pour porter le volume à la quantité de tampon souhaitée.
- Mélanger les composants à l'aide d'un agitateur afin d'obtenir une solution pré-mélangée.
- Mesurer le pH du tampon à l'aide d'un pH-mètre ou de bandes pH, et ajuster le pH si nécessaire avec de petites quantités d'acide ou de base.
- Utiliser l'appareil à ultrasons à sonde pour homogénéiser la solution de pré-mélange afin d'obtenir une solution très homogène. Il faut donc soniquer la solution pendant quelques secondes jusqu'à ce qu'elle soit bien mélangée et que les éventuels amas ou agrégats soient brisés. La durée et la puissance de la sonication peuvent être optimisées en fonction du tampon de lyse et de l'appareil à ultrasons utilisés.
- Après l'ultrasonisation, mesurer à nouveau le pH du tampon et l'ajuster si nécessaire.
- Filtrer le tampon à travers un filtre de 0,2 micron pour éliminer tout débris ou agrégat qui aurait pu se former pendant la sonication.
- Le tampon de lyse est maintenant prêt à l'emploi.
Remarque : la composition exacte et le pH du tampon de lyse peuvent varier en fonction des cellules ou des tissus à lyser et des applications en aval. Le protocole ci-dessus est une ligne directrice générale et peut devoir être optimisé pour des applications spécifiques.
Les homogénéisateurs à ultrasons sont couramment utilisés pour la désintégration des cellules et l'extraction des molécules intracellulaires. Par conséquent, de nombreuses applications de lyse utilisent la sonication de type sonde non seulement pour la préparation du tampon de lyse, mais aussi pour la désintégration et l'extraction mécaniques des cellules.
Cela fait des homogénéisateurs de tissus à ultrasons un outil polyvalent pour les laboratoires et explique la large utilisation des ultrasons en microbiologie, en biotechnologie et dans les sciences de la vie.
homogénéisateurs ultrasoniques de laboratoire
Hielscher Ultrasonics fabrique et fournit des homogénéisateurs à ultrasons et des sondes (sonotrodes) de différentes puissances et volumes d'échantillons. Cela nous permet de vous proposer le perturbateur ultrasonique le mieux adapté à la préparation de vos échantillons. Nous mettons l'accent sur une qualité supérieure, un confort d'utilisation exceptionnel et des résultats de sonification fiables. Tous les appareils à ultrasons numériques sont dotés d'un logiciel intelligent, de la programmation et du préréglage des protocoles de sonication, de la télécommande du navigateur, du contrôle de la température, de l'éclairage de l'échantillon ainsi que de l'enregistrement automatique des données sur une carte SD intégrée.
Conception, fabrication et conseil – Qualité Made in Germany
Les ultrasons Hielscher sont réputés pour leur qualité et leur conception de haut niveau. La robustesse et la facilité d'utilisation permettent une intégration harmonieuse de nos ultrasons dans les installations industrielles. Les conditions difficiles et les environnements exigeants sont facilement gérés par les ultrasons Hielscher.
Hielscher Ultrasonics est une entreprise certifiée ISO et met l'accent sur les ultrasons de haute performance, dotés d'une technologie de pointe et d'une grande convivialité. Bien entendu, les ultrasons Hielscher sont conformes à la norme CE et répondent aux exigences des normes UL, CSA et RoHs.
Le tableau ci-dessous vous donne un aperçu de nos différents ultrasons de laboratoire :
VialTweeter à UP200St | 200W | 26kHz | ultrasonication de petits flacons, par exemple, Eppendorf 1,5ml |
UP50H | 50W | 30 kHz | homogénéisateur de laboratoire de poche ou colonnes individuelles |
UP100H | 100W | 30 kHz | homogénéisateur de laboratoire de poche ou colonnes individuelles |
UP200Ht | 200W | 26kHz | homogénéisateur de laboratoire de poche ou colonnes individuelles |
UP200St | 200W | 26kHz | homogénéisateur de laboratoire colonnes individuelles |
UP400St | 400W | 24kHz | homogénéisateur de laboratoire colonnes individuelles |
SonoStep | 200W | 26kHz | réacteur de laboratoire en combinant, ultrasonication, une pompe, d'un agitateur et d'un récipient |
GDmini2 | 200W | 26kHz | cellule d'écoulement sans contamination |
Corne de cuivre | 200W | 26kHz | bain ultrasonique intense pour flacons et béchers |
UIP400MTP | 400W | 24kHz | système ultrasonique pour plaques multi-puits / plaques de microtitration |

cuphorn à ultrasons pour la sonication intense de tubes et de flacons fermés pour l'homogénéisation stérile des échantillons.
Contactez nous! / Demandez nous!

Homogénéisateur de laboratoire à ultrasons UP400St est couramment utilisé pour la préparation du tampon de lyse et la désintégration cellulaire qui s'ensuit.
Littérature / Références
- Fernandes, Luz; Santos, Hugo; Nunes-Miranda, J.; Lodeiro, Carlos; Capelo, Jose (2011): Ultrasonic Enhanced Applications in Proteomics Workflows: single probe versus multiprobe. Journal of Integrated OMICS 1, 2011.
- Priego-Capote, Feliciano; Castro, María (2004): Analytical uses of ultrasound – I. Sample preparation. TrAC Trends in Analytical Chemistry 23, 2004. 644-653.
- Welna, Maja; Szymczycha-Madeja, Anna; Pohl, Pawel (2011): Quality of the Trace Element Analysis: Sample Preparation Steps. In: Wide Spectra of Quality Control; InTechOpen 2011.
- Nico Böhmer, Andreas Dautel, Thomas Eisele, Lutz Fischer (2012): Recombinant expression, purification and characterisation of the native glutamate racemase from Lactobacillus plantarum NC8. Protein Expr Purif. 2013 Mar;88(1):54-60.
- Brandy Verhalen, Stefan Ernst, Michael Börsch, Stephan Wilkens (2012): Dynamic Ligand-induced Conformational Rearrangements in P-glycoprotein as Probed by Fluorescence Resonance Energy Transfer Spectroscopy. J Biol Chem. 2012 Jan 6;287(2): 1112-27.
- Claudia Lindemann, Nataliya Lupilova, Alexandra Müller, Bettina Warscheid, Helmut E. Meyer, Katja Kuhlmann, Martin Eisenacher, Lars I. Leichert (2013): Redox Proteomics Uncovers Peroxynitrite-Sensitive Proteins that Help Escherichia coli to Overcome Nitrosative Stress. J Biol Chem. 2013 Jul 5; 288(27): 19698–19714.
- Elahe Motevaseli, Mahdieh Shirzad, Seyed Mohammad Akrami, Azam-Sadat Mousavi, Akbar Mirsalehian, Mohammad Hossein Modarressi (2013): Normal and tumour cervical cells respond differently to vaginal lactobacilli, independent of pH and lactate. ed Microbiol. 2013 Jul; 62(Pt 7):1065-1072.

Hielscher Ultrasonics fabrique des homogénéisateurs à ultrasons de haute performance à partir d'une technologie de pointe. laboratoires à taille industrielle.