Ylivertaiset katekiiniuutteet ultraäänellä
Katekiinien ultraääniuutto
Ultraääniuutto on ei-terminen menetelmä, joka perustuu puhtaasti mekaanisten voimien käyttöön. Matalataajuiset, voimakkaat ultraääniaallot kytketään ultraäänianturin (sonotrodin) välityksellä nestemäiseen väliaineeseen. Akustisen kavitaation voimakkaat leikkausvoimat rei’ittävät ja hajottavat solukalvoja, tehostavat aineensiirtoa solun sisäosan ja liuottimen välillä sekä vapauttavat solunsisäiset yhdisteet liuottimeen.
Vihreän teen (Camellia sinensis) uuttomenetelmiä käsittelevässä laajassa katsauksessaan Banerjee ja Chatterjee (2015) havaitsivat, että anturityyppiset ultraäänilaitteet ovat huomattavasti tehokkaampia kuin ultraäänikylvyt. Lisäksi kirjoittajat toteavat, että ultraääniuutto on ensisijainen menetelmä teen katekiinien uuttamiseen, koska uuttaminen on tehokkaampaa alemmassa lämpötilassa. Tämä estää lämpöherkkien yhdisteiden lämpöhajoamisen ja säilyttää niiden lääkinnällisen arvon. Uuttaminen korkeassa lämpötilassa johtaa usein polyfenolien hajoamiseen ja lisää proteiinien ja pektiinin vapautumista, mikä heikentää teen aistinvaraista laatua aiheuttamalla saostumista eli niin sanottua cream-ilmiötä. Ultraäänikäsittelyn etu perustuu sen ei-termiseen mekanismiin. Tutkimuksessaan tutkijat osoittivat, että ultraääniuutto 65°C:ssa voi lisätä teen polyfenolisaantoa verrattuna perinteiseen uuttoon 85°C:ssa. Ultraääniuutto toimii kuitenkin myös huoneenlämmössä. Ei-termisenä uuttomenetelmänä ultraäänilaitteet käyttävät mekaanisia voimia solujen avaamiseen ja bioaktiivisten yhdisteiden, kuten polyfenolien ja katekiinien, vapauttamiseen liuottimeen ylivertaisella tehokkuudella.
Ultraääniuutto tuottaa suuren saannon laadukkaita ravintoaineita. Ei-termisenä prosessina ultraääniuutto välttää lämpöherkkien ravintoaineiden häviämisen.
Ultraääniuutto voidaan tehdä myös huoneenlämmössä tai jäähdytetyissä nesteissä. Lue tästä lisää ultraäänellä kylmäuutetusta teestä!
- Liuottimeton / vesipohjainen
- Suuri uuttosaanto
- Laadukkaat uutteet
- Täyden yhdistekirjon uutteet
- Nopea prosessi
- Ekologinen, ympäristöystävällinen
- Helppo ja turvallinen käyttö
- Vähäinen huoltotarve
- Nopea sijoitetun pääoman tuotto
Ultraääniuutin UIP2000hdT (2kW), jossa on jatkuvasti sekoitettava panosreaktori
Tapaustutkimus katekiinien ultraääniuutosta
Ultraääniuutossa voidaan käyttää erilaisia liuottimia, kuten vettä, etanolia, veden ja etanolin seosta, isopropanolia, kasviöljyä, glyserolia jne.
Vuonna 2018 tehdyssä tutkimuksessa Ayyildiz ym. vertasivat ultraääniuuttoa, jossa liuottimina käytettiin vettä ja etanolia, perinteiseen kuumavesiuuttoon. Tässä pilottimittakaavan tutkimuksessa he käyttivät Hielscher UIP2000hd (2kW, 20kHz) -ultraäänilaitetta sekä panosprosessissa että jatkuvassa läpivirtausprosessissa.
Tulokset osoittivat, että ultraääniuutto etanolilla oli merkitsevästi (p < 0,05) tehokkaampi suurempien EGCG-, EGC-, ECG- ja EC-saantojen saavuttamisessa kuin perinteinen kuumavesiuutto ja vesipohjainen ultraääniuutto. Optimoiduissa prosessiolosuhteissa ultraääniuutolla etanolilla saatiin lähes 100% enemmän EGCG:tä kuin perinteisellä kuumavesiuutolla ja lähes 50% enemmän kuin ultraääniuutolla vedellä. EGCG:n ultraääniuuton optimaaliset olosuhteet etanolia käytettäessä olivat 66.53ºC, 43,75 min ja 67,81% etanolia.
Ultraääniuutto on ensisijainen menetelmä teen katekiinien uuttamiseen, koska se tehostaa uuttamista alemmassa lämpötilassa säilyttäen niiden antioksidanttisen aktiivisuuden.
Tehokkaat ultraääniuuttimet
Hielscher Ultrasonics -uuttojärjestelmiä käytetään maailmanlaajuisesti elintarvike- ja lääketeollisuudessa laadukkaiden kasviuutteiden kaupalliseen tuotantoon ravintolisissä ja lääkkeissä käytettäviksi. Halusitpa tuottaa pienempiä eriä kylmäuutettua teetä tai käsitellä suuria määriä laadukkaita polyfenoli- / katekiiniuutteita, Hielscher Ultrasonics tarjoaa sinulle sopivan ultraääniuuttimen. Ultraäänilaitteet ovat helppoja ja turvallisia käyttää. Helppokäyttöinen ohjelmisto ja digitaalinen ohjaus kosketusnäytön kautta mahdollistavat tarkan prosessinohjauksen. Ultraäänilaitteiden (Hielscher) kestävä rakenne mahdollistaa käytön 24/7 suurella kuormituksella ja vaativissa ympäristöissä.
Anturityyppinen ultraäänilaite UP100H katekiinien uuttamiseen teen lehdistä
Prosessin standardointi Hielscher Ultrasonics -laitteilla
Elintarvike- ja lääkelaatuiset uutteet tulisi tuottaa hyvien tuotantotapojen (GMP) mukaisesti ja standardoituja prosessimäärityksiä noudattaen. Hielscher Ultrasonics -digitaalisissa uuttojärjestelmissä on älykäs ohjelmisto, jonka avulla ultraäänikäsittelyprosessin tarkka määrittäminen ja ohjaaminen on helppoa. Automaattinen tiedontallennus tallentaa kaikki ultraääniprosessin parametrit, kuten ultraäänienergian (kokonais- ja nettoenergian), amplitudin, lämpötilan ja paineen (kun lämpötila- ja paineanturit on asennettu), päivämäärä- ja aikaleimoineen sisäänrakennetulle SD-kortille. Näin voit tarkastella jokaista ultraäänellä käsiteltyä erää. Samalla varmistetaan toistettavuus ja jatkuvasti korkea tuotelaatu.
Alla oleva taulukko antaa käsityksen ultraäänilaitteidemme likimääräisestä käsittelykapasiteetista:
| Panostilavuus | Tilavuusvirta | Suositellut laitteet |
|---|---|---|
| 1–500mL | 10–200mL/min | UP100H |
| 10–2 000mL | 20–400mL/min | UP200Ht, UP400St |
| 0,1–20L | 0,2–4L/min | UIP2000hdT |
| 10–100L | 2–10L/min | UIP4000hdT |
| n.a. | 10–100L/min | UIP16000 |
| n.a. | suurempi | laiteryhmä: UIP16000 |
Ota yhteyttä! / Kysy meiltä!
Suuritehoiset ultraäänihomogenisaattorit laboratoriomittakaavasta aina pilottimittakaavaan ja teolliseen mittakaavaan.
Kirjallisuus / lähteet
- Ayyildiz, Sena Saklar; Karadeniz, Bulent; Sagcanb, Nihan; Bahara, Banu; Us, Ahmet Abdullah; Alasalvar, Cesarettin (2018): Epigallokatekiinigallaatin uuttamisen parametrien optimointi vihreästä teestä perinteisillä kuumavesi- ja ultraääniavusteisilla menetelmillä. Food and Bioproducts Processing 111 (2018). 37–44.
- Banerjee, S., Chatterjee, J. (2015): Tehokkaat uuttostrategiat teen (Camellia sinensis) biomolekyyleille. J. Food Sci. Technol. 52, 2015. 3158–3168.
- Martín-García Beatriz; Pasini, Federica; Verardo, Vito; Díaz-de-Cerio, Elixabet; Tylewicz, Urszula; Gómez-Caravaca, Ana María; Caboni Maria Fiorenza (2019): Proantosyanidiinien sonotrodiavusteisen ultraääniuuton optimointi panimomäskistä. Antioxidants 2019, 8, 282.
- Petigny L., Périno-Issartier S., Wajsman J., Chemat F. (2013): Boldon lehtien (Peumus boldus Mol.) ultraääniavusteinen panosuutto ja jatkuva uutto. International journal of Molecular Science 14, 2013. 5750–5764.
- K.S. Suslick, K. Othmer, ”Kemiantekniikan tietosanakirja”; 4. painos. J. Wiley & Sons: New York, 1998, osa 26, s. 517–541.
Hyödyllistä tietoa
Ultraääniuutto – toimintaperiaate
Ultraääniuutto on mekaaninen menetelmä solunsisäisten yhdisteiden vapauttamiseen ja eristämiseen solumatriiseista, kuten kasvisoluista. Kun suuritehoisia ultraääniaaltoja kytketään lietteeseen (joka koostuu esimerkiksi maseroiduista kasvihiukkasista vedessä tai liuottimessa), erittäin energiset ultraääniaallot synnyttävät kavitaatiota. Kavitaatioilmiö aiheuttaa väliaineessa paikallisesti äärimmäisiä lämpötiloja, paineita, kuumenemis- ja jäähtymisnopeuksia, paine-eroja ja suuria leikkausvoimia. Kun kavitaatiokuplat luhistuvat kiinteiden aineiden (kuten hiukkasten, kasvisolujen, kudosten jne.) pinnalla, mikrosuihkut ja hiukkasten väliset törmäykset aiheuttavat esimerkiksi pinnan kuoriutumista, eroosiota ja hiukkasten hajoamista. Lisäksi kavitaatiokuplien luhistuminen nestemäisissä väliaineissa synnyttää makroturbulenssia ja mikrosekoittumista.
Ultraäänellä säteilyttäminen on tehokas tapa tehostaa aineensiirtoprosesseja, sillä ultraäänikäsittely synnyttää kavitaatiota ja siihen liittyviä mekanismeja, kuten nestesuihkujen aiheuttamaa mikroliikettä, materiaalin puristumista ja laajenemista, joista seuraa soluseinämien hajoaminen, sekä suuria kuumenemis- ja jäähtymisnopeuksia.
Ultraääniuutto kasvisoluista: mikroskooppinen poikkileikkaus (TS) osoittaa solujen ultraääniuuton aikaisen toimintamekanismin (suurennus 2000x) [lähde: Vilkhu ym. 2011]
Kasvimateriaalin ultraäänikäsittely pilkkoo kasvisolujen matriisia ja tehostaa sen hydratoitumista. Chemat ym. (2015) toteavat, että bioaktiivisten yhdisteiden ultraääniuutto kasveista perustuu erilaisiin erillisiin tai yhdistettyihin mekanismeihin, joita ovat pilkkoutuminen, eroosio, kapillaarisuus, rakenteen hajoaminen ja sonoporaatio. Nämä vaikutukset hajottavat soluseinämää, parantavat aineensiirtoa työntämällä liuotinta soluun ja imemällä kasviyhdisteitä sisältävää liuotinta ulos sekä varmistavat nesteen liikkumisen mikrosekoittumisen avulla.
Mitkä ovat ultraääniuuton tärkeimmät edut?
- Nopea prosessi ja suuri tuotantomäärä
- Pieni energiankulutus
- Pienemmät käsittelykustannukset
- Ei-terminen teknologia
- Korkeampi puhtaus
- Ympäristöystävällinen teknologia
Akustinen kavitaatio ja sen vaikutukset
Nesteessä ultraääniaallot synnyttävät voimakkaita, vuorottelevia korkea- ja matalapainesyklejä, jotka johtavat kavitaatiokuplien muodostumiseen. Useiden painesyklien aikana kavitaatiokuplat kasvavat, kunnes ne saavuttavat rajan, jossa kupla ei enää pysty absorboimaan lisää energiaa. Tässä vaiheessa kupla luhistuu rajusti. Kuplan luhistuessa syntyy äärimmäisiä olosuhteita, kuten korkeita, jopa 5 000K:n lämpötiloja, jopa 2 000atm:n paineita, erittäin suuria kuumenemis- ja jäähtymisnopeuksia sekä paine-eroja. Koska kuplan luhistumisen dynamiikka on nopeampaa kuin aineen- ja lämmönsiirto, luhistuvan ontelon energia rajoittuu hyvin pienelle alueelle, jota kutsutaan myös ”kuumaksi pisteeksi”. Kavitaatiokuplan luhistuminen synnyttää myös mikroturbulenssia, nestesuihkuja, joiden nopeus on jopa 280m/s, ja niistä aiheutuvia leikkausvoimia. Tätä ilmiötä kutsutaan ultraäänikavitaatioksi tai akustiseksi kavitaatioksi.
Katekiinit
Vihreän teen tiedetään sisältävän runsaasti polyfenoleja, kuten kahvihappoa, gallushappoa, katekiinia, epikatekiinia, gallokatekiinia, katekiinigallaattia, gallokatekiinigallaattia, epikatekiinigallaattia, epigallokatekiinia ja epigallokatekiinigallaattia (EGCG). Tämä tekee vihreästä teestä suositun terveysvaikutteisen elintarvikkeen, jota nautitaan juomana ja uutteena. EGCG on tunnettu katekiini, jota esiintyy runsaasti vihreän teen kuivatuissa lehdissä (7 380 mg / 100 g), valkoisessa teessä (4 245 mg / 100 g) ja pienempinä määrinä mustassa teessä (936 mg / 100 g). Mustan teen valmistuksen aikana katekiinit muuntuvat pääosin teaflaviineiksi ja tearubigiineiksi polyfenolioksidaasien vaikutuksesta.
Epigallokatekiinigallaatin (EGCG) terveyshyödyt
Katekiinien ryhmässä epigallokatekiinigallaatti (EGCG) on tutkituin ja lupaavin yhdiste. EGCG:llä on monia hyödyllisiä vaikutuksia syöpää ehkäisevistä, antioksidatiivisista, tulehdusta, fibroosia ja kollagenaasia ehkäisevistä vaikutuksista immuunijärjestelmää vahvistaviin ja ikääntymistä ehkäiseviin vaikutuksiin. Siksi sitä nautitaan vihreänä teenä sekä ravintolisinä, kuten kapseleina, jauheina, tabletteina jne.
Tutkimukset viittaavat siihen, että katekiinit, kuten epigallokatekiinigallaatti (EGCG), saattavat vähentää tulehdusta ja voivat ehkäistä tiettyjä kroonisia sairauksia, kuten sydänsairauksia, diabetesta ja joitakin syöpämuotoja.
EGCG ja sen syöpää ehkäisevät vaikutukset
Koska syöpä on usein hengenvaarallinen sairaus, EGCG:n syöpää ehkäiseviä ominaisuuksia tutkitaan intensiivisesti. Tutkimukset viittaavat siihen, että EGCG voi estää kasvainten syntyä vähentämällä tai poistamalla karsinogeenien vaikutuksia. On havaintoja, jotka viittaavat siihen, että EGCG ehkäisee dietyylinitrosamiinin aiheuttamaa, lihavuuteen liittyvää maksakasvainten syntyä estämällä IGF/IGF-1R-akselin toimintaa, lievittämällä hyperinsulinemiaa ja vähentämällä kroonista tulehdusta. Toinen EGCG:n syöpää ehkäisevän vaikutuksen mekanismi on angiogeneesin estäminen ja siten kasvainten lisääntymisen hillitseminen.
EGCG ja sen antioksidatiiviset vaikutukset
Ihmiskehossa tapahtuu lukemattomia antioksidatiivisia prosesseja, jotka edistävät terveyttä, voimaa ja hyvinvointia. EGCG on antioksidantti. Antioksidantit voivat suojata soluvaurioilta sieppaamalla vapaita radikaaleja ja neutraloimalla niitä. EGCG:n rakenteen fenolirenkaat toimivat elektronien ja vapaiden radikaalien sieppaajina, estävät reaktiivisten happilajien muodostumista ja vähentävät siten oksidatiivisen stressin aiheuttamia vaurioita.
EGCG ja sen tulehdusta ehkäisevät vaikutukset
Tulehdusta voivat aiheuttaa sairaudet, krooninen stressi ja ympäristön saastuminen. Keho reagoi tällaisiin stressitekijöihin tulehduksella, jolle ovat ominaisia suuren immuunisolumäärän kertyminen tulehduskohtiin sekä tulehdusta edistävien sytokiinien ja reaktiivisten happi- ja typpilajien (ROS/RNS) vapautuminen. ROS/RNS liittyvät transkriptiotekijä NF-B:n ja aktivaattoriproteiini-(AP-)1:n aktivoitumiseen. Aktivoitumisen jälkeen NF-jB ja AP-1 siirtyvät solulimasta tumaan ja lisäävät useiden tulehdukseen liittyvien geenien ilmentymistä, mikä johtaa voimistuneeseen tulehdusvasteeseen ja kudosvaurioihin.
EGCG estää NF-B:n ja AP-1:n välittymistä siten, että iNOS:n ja COX-2:n ilmentyminen vähenee pääasiassa typpioksidin, peroksinitriitin ja muiden ROS/RNS-lajien sieppaamisen kautta ja tulehdustekijöiden tuotanto vähenee.
EGCG ja sen luunmuodostusta edistävät vaikutukset
Osteoporoosi on vakava sairaus, jolle ovat ominaisia luumatriisin rappeutuminen ja luuntiheyden väheneminen. EGCG:llä on luun aineenvaihduntaa sääteleviä vaikutuksia. EGCG voi aiheuttaa osteoklastien apoptoosia ja estää osteoklastien muodostumista estämällä NF-B:n ja IL-1b:n muodostumista. Lisäksi se voi edistää mineralisoituneiden luukyhmyjen muodostumista.
[Ks. Chenyu Chu; Jia Deng; Yi Man; Yili Qu (2017): Green Tea Extracts Epigallocatechin-3-gallate for Different Treatments. BioMed Research International Vol. 2017]
