Trombotsüütide rikas seerumi ultraheli ettevalmistamine
- Trombotsüüte rikkalik plasma (PRP) on vereplasma, mida on trombotsüütidega rikastatud ja mida kasutatakse meditsiiniliseks ja esteetiliseks raviks.
- Ultraheli lüüsi ja konditsioneerimine on väga tõhus meetod trombotsüütide rikaste plasmade valmistamiseks.
- Hielscher Ultrasonics pakub erinevaid ultraheli süsteeme, mis vastavad vere töötlemise nõuetele (nt puhta ruumi sisestamiseks ja väljastamiseks).
Trombite rikas seerum
Sonikatsioon on usaldusväärne ja lihtne meetod trombotsüütide lüüsimiseks autoloogses vereseerumis, et vabastada kasvufaktorid. Trombotsüütide derivaatide fraktsioonid – tuntud ka kui autoloogne konditsioneeritud seerum (ACS) – kasutatakse kudede parandamiseks või esteetiliseks raviks. Optimaalsete tulemuste saamiseks rikastatakse PRP enne süstimist.
Selleks, et valmistada rikastatud plasma rakkude kasvufaktoritega, on ultraheliga töötlemine väga tõhus ja efektiivne meetod rakumembraanide lüüsimiseks ja trombotsüütide vabastamiseks peaaegu täielikult rakkude kasvufaktoritest. Ultraheli lüüsi ja konditsioneerimisega võib kasutada isegi koaguleeritud verd.
PRP-i konditsioneerimine ultrahelitöötlusega on mugav ja kulutõhus viis kontsentreeritud kasvufaktorite saamiseks.
Trombotsüütide rikas plasma ultraheli lüüs (PRP)
Ultraheli lüüsifektid
Vere-seerumi ultraheliravi tagajärjeks on trombotsüütide homogeenne lüüsi, et vabastada põimunud kasvufaktorid (kasvufaktor AB (PDGF-AB), kasvufaktor AA (PDGF-AA), kasvufaktor BB (PDGF-BB), vaskulaarne endoteeli kasvufaktor (VEGF), kasvufaktori β (TGF-β), epidermise kasvufaktori (EGF), insuliinisarnase kasvufaktori (IGF), epiteelirakkude kasvufaktori ECGF ja fibroblastilise kasvufaktori (FGF)) transformeerimiseks. Trombotsüüdid ja nende alfa-graanulid häirivad ultraheliga töötlemist, kasutades nähtust akustilise kavitatsioon. Trombotsüütide lüüsi ultraheli kavitatsioon vähendab võimaliku negatiivset mõju korduva külmutus-sulamismeetodi kasvufaktori aktiivsusele.
Ultraheli PRP ettevalmistamise protokoll
Ligikaudu Värskelt kogutud autoloogne vereproov 16 ml värskelt kokku pandud 8-10 korda torus, nii et vere ja antikoagulandid oleksid hästi segunenud. Seejärel tsentrifuugitakse proovi toatemperatuuril 20 minutit toatemperatuuril 1800 g juures. Pärast tsentrifuugimist moodustavad trombotsüüdid ja mononukleaarsed rakud valkjas kihi plasmakihi põhjaosas, mis on tuntud kui trombotsüütidega rikastatud plasma (PRP). Ülemine kiht on tuntud trombotsüütide halb plasmast (PPP). Mononukleaarsed rakud võib eemaldada või jääda proovidesse. Sageli jäävad mononukleaarsed rakud PRP-proovile, et vältida täiendavaid samme, mis kannavad saastumise ohtu.
Märkus: autoloogse PRP ultraheliravi tuleb läbi viia steriilsetes tingimustes.
PRP ja PPP eraldatakse ja kogutakse. PPP-le lisatakse 1,5 ml 10% kaltsiumkloriidi lahust, samal ajal lisatakse PRP 0,5 ml 5% etanooli. Mõlemad suspensioonid segatakse õrnalt ja lastakse seista toatemperatuuril 5 minutit. Lõpuks lisatakse PRP suspensioonile 1 ml PPP-d ja lastakse seista kuni fibriini hüübe moodustab.
Ultraheliravi: Kuna moodustunud trombotsüütide geel toimib vabanemate kasvufaktorite reservuaari kujul, tuleb vabade kasvufaktorite vabastamiseks purustada fibriini geel. Ultraheli lüüsi ja kasvufaktori vabanemise parameetrid on järgmised: Sonikaat koos Uf200 ः t või UP200St (200W, 26 kHz) sonotrodega S26d2 proovi katseklaasis. Vereproovi ülekuumenemise vältimiseks saab ultrahelitöötlust teostada pulseerivates tsüklites (nt 10 sekundit, 30 sekundit väljas). Proov tuleks jahutada jahutamiseks jääl, et temperatuur oleks optimaalselt hoitud vahemikus 2 – 5 ° C. Pärast sonikeerimist tsentrifuugitakse proovi 5 minutit 16000 g juures. toatemperatuuril. Supernatant kogutakse ja seda saab säilitada -70 ° C juures.
Trombotsüütide kontsentratsioon PRP-fraktsioonis oli rikastatud 1,7 – 4,5 korda ultraheliga töödeldud meetodil, võrreldes kirjanduse keskmise trombotsüütide arvuga täisveres.
PRP-d on kombineeritud rasvade tüvirakuravi (ultraheliga vabastatud autoloogsed tüvirakud rasvkoest, segatud PRP-ga ja süstitakse tagasi patsiendi kudedesse).
Ultraheli seadmed
Hielscher Ultrasonics on kogenud ja usaldusväärse ultraheli tehnoloogia ekspert. Meie ultraheli seadmeid kasutatakse lüüsimiseks, ekstraheerimiseks ja proovi ettevalmistamiseks kogu maailmas – otseselt ja kaudselt. autoklaavitav sama hästi kui ühekordselt kasutatav tarvikud tagavad a saastevaba autoloogsete vereproovide ravi. Enamikku meie süsteeme saab kasutada ultraheli-lüüsimiseks tüvirakud ja PRP, mis muudab meie ultraheli seadmete majanduslikult veelgi efektiivsemaks.
Alljärgnev tabel loetleb meie ultraheli seadmed, mis sobivad trombotsüütide rikaste plasmade valmistamiseks ja nende soovitatava proovi mahuni. Samuti on saadaval suuremad ultraheliuksejad ja kohandatud süsteemid.
| Seade | Võimsus [W] | Freq [kHz] | Tüüp | Maht [ml] | ||
|---|---|---|---|---|---|---|
| VialTweeter | 200 | 26 | iseseisev | 0.5 | – | 1.5 |
| UP50H | 50 | 30 | käeshoitav või standmounted | 0.01 | – | 250 |
| UP100H | 100 | 30 | käeshoitav või standmounted | 0.01 | – | 500 |
| Uf200 ः t | 200 | 26 | käeshoitav või standmounted | 0.1 | – | 1000 |
| UP200St | 200 | 26 | seisma jäänud | 0.1 | – | 1000 |
| UP400St | 400 | 24 | seisma jäänud | 5.0 | – | 2000 |
| UP200St-SonoStep | 200 | 26 | iseseisev | 30 | – | 500 |
| GDmini2 | 200 | 26 | saastevaba voolukamber | |||
Palun võtke meiega täna ühendust! Meil on hea meel, et aitate leida optimaalset ultraheli seadet!
Võta meiega ühendust! / Küsi meiega!
GDmini2 UP200St-TD anduril (200 vatti)
Kirjandus / viited
- Fortunato, TM; Beltrami, Ch .; Emanueli, C.; De pank, PA; Pula, G. (2016): trombotsüülasaadi geel ja endoteeli eellased stimuleerivad mikrovaskulaarset võrgu moodustumist in vitro: koetehnoloogia tähendusi. Sci. Rep 6, 2016.
- Hamid, MSA; Yusof, Ashril; Ali, Mohamed Razif Mohamed (2014): vereliistakute rikkalik plasma (PRP) akuutse lihaskahjustuse korral: süstemaatiline ülevaade. PLOS ONE 9. köide, 2. väljaanne, 2014.
Faktid Tasub teada
Trombotsüütide rikas plasma
Trombotsüüte rikkalik plasma sisaldab kasvufaktorit AB (PDGF-AB), trombotsüütide kasvufaktorit AA (PDGF-AA), trombotsüütide kasvutegurit BB (PDGF-BB), vaskulaarse endoteeli kasvufaktorit (VEGF), transformeerivat kasvufaktorit β (TGF -β), epidermaalse kasvufaktori (EGF), insuliinisarnase kasvufaktori (IGF), epiteelirakkude kasvufaktori ECGF ja fibroblastilise kasvufaktori (FGF), mis on olulised stimulandid rakkude kasvu ja uuendamiseks.
Autoloogne kliirensi seerum (ACS)
Autoloogsed konditsioneeritud plasma (ACP) on trombotsüütide rikas plasma, mis on ekstraheeritud autoloogse vere, mida kasutatakse regeneratsiooni toetamiseks erinevaid ortopeedilisi tingimusi ja kirurgilised protseduurid. Konditsioneeritud seerum valmistatakse, eraldades plasma teistest verekomponentidest (nt erütrotsüüdid) ja keskenduge sellele. AKV on trombotsüütide (PRP) plasma. PRP on üldine termin plasma tüüpi, mis sisaldab oluliselt suuremat trombotsüütide kontsentratsiooni võrreldes tervete verega. See ekstraheeritakse täisverest. AKV peamiste komponentide hulka kuuluvad trombotsüüdid (trombotsüüdid) ja mitmed kasvufaktorid, mis mängivad olulist rolli tervendamisprotsessis. Erinevalt teistest trombotsüütide rikkalikust plasmakontsentratsioonist eristatakse AKV sisaldust valgete vereliblede madala kontsentratsiooniga, nagu neutrofiilide granulotsüütide sisaldus, mis võib olla kahjulik raviprotsessile, kui need esinevad suurtes kontsentratsioonides.
Trombotsüütide rikas plasmast injektsioonid
Trombotsüüteplasma kasutatakse süstimiseks nii regeneratiivses meditsiinis kui ka kosmeetilistes protseduurides. PRP-i rakendamine lubab märkimisväärselt kiirendada lihaste paranemist ja lihaste taastumist. Lisaks kasutatakse seda edukalt põletiku, artriidi, valu, haavade, aeglaselt ravitavate avatud haavade ja tõsiste nahapõletuste ravimiseks. PRP sisaldab kõrgeid kasvufaktoreid, mis stimuleerivad ja kaitsevad paranemisrakke, et kahjustatud kude on remonditud.
Kosmeetikatoodete jaoks on PRP efektiivne juuste kasvu, naha uuendamise (tuntud ka kui vampiiri ravi) stimuleerimiseks.
Trombotsüütide päritolu kasvufaktorid (PDGF)
Trombotsüütide päritolu kasvufaktor (PDGF) viitab faktoritele PDGF-A, PDGF-B, PDGF-C ja PDGF-D. See on nelja ligandi signaalivõrk (PDGF-A, PDGF-B, PDGF-C ja PDGF-D) ja kaks retseptorit, PDGFR-alfa ja PDGFR-beeta.
Kasvu tegurid või valgud reguleerivad rakkude kasvu ja jagunemist. Kuna peamine mitogeen on leitud trombotsüütide moodustumise ajal trombotsüütidest vabanenud imetajate seerumis, mängib ta olulist rolli veresoonte moodustumisel (angiogenees), olemasolevate veresoonte kudede veresoonte kasvu.