Ultraheli rakendused MonkeyPox Virus

Ultraheli on oluline töötlemismeetod ahvirõugete viiruse (MPXV) eraldamiseks analüütilistest proovidest, viiruse DNA killustumiseks ja ahvirõugete vaktsiini tootmiseks. Proovide ettevalmistamiseks enne diagnostikat ja analüüsi (PCR, ELISA jne) kasutatakse ultraheli rakkude lüüsimiseks, et vabastada ahvirõugete viirus raku sisemusest ja / või dna fragmenteerimiseks. Vaktsiinide tootmisel ulatuvad rakendused viiruseosakeste / DNA ettevalmistamisest, kapseldamisest ravimikandjatesse ja inokulaatide formuleerimisest.
Allpool leiate üksikasjalikku teavet ultraheli ahvirõugete viiruse proovide ettevalmistamise ja ultraheli abil MPXV vaktsiini tootmise kohta.

 

Mida leiate sellelt lehelt:

Infonõue




Pange tähele, et meie Privaatsuspoliitika.


Suure jõudlusega ultrasonikaatorid on kriitiline töötlemisvahend paljude vaktsiinide tootmisel.

See 2x 1kW ultrasonikaatorite süsteem pideva vooluga tööks on paigaldatud vaktsiinitootmisrajatisse.

Ultraheli lüüs ja DNA killustumine enne polümeraasi ahelreaktsiooni (PCR)

Ahvirõugete viirusinfektsioon tuvastatakse nukleiinhappe amplifikatsiooni testimisega (NAAT), kasutades reaalajas või tavapärast polümeraasi ahelreaktsiooni (PCR), et tuvastada viiruse DNA ainulaadseid järjestusi. Proov (nt ninaneelust või nahabiopsiast) sisaldab viirust rakkudes.
Analüüsimiseks tuleb viirus rakkudest vabastada ja viiruse DNA tuleb PCR-i jaoks killustada.

Ultraheli lüüs:

Ultraheliator UP200Ht mikrotipiga S26d2 bioloogiliste proovide ultraheli lüüsi jaoksUltraheli rakkude häirimine / lüüs on usaldusväärne ja tõhus meetod viiruste eraldamiseks rakuproovidest ja seega eelistatavam tehnika keemilistele ainetele, nagu lüsosüüm, proteinaas K ja erinevad detergendid, mida alternatiivselt kasutatakse raku lüüsi ja DNA vabanemise saavutamiseks.
Selliste keemiliste reaktiivide kasutamine nõuab siiski aeganõudvat proovide ettevalmistamist mitmes etapis enne PCR-analüüsi, et vältida PCR-reaktsiooni pärssimist. Kuna PCR-inhibiitorid mõjutavad amplifikatsiooni efektiivsust, võivad eemaldamata inhibiitorite koguse väikesed variatsioonid põhjustada PCR-produkti amplifikatsiooni suuri erinevusi (Diaco, 1995).
Ultraheli lüüsi eeliseks on see, et rakustruktuuride täielik katkestamine ja DNA vabanemine ilma lüüsimisreaktiivide vajaduseta ja aeganõudev proovi ettevalmistamine on soovitav. (vrd Fykse et al., 2003)

Ultraheli DNA killustatus:

Ultraheli DNA killustumine on lihtne ja usaldusväärne, kuna tekitab DNA fragmente, mis on häälestatavad pikkuses (basepairs, bp). Ultraheli abil saab DNA-d tõhusalt killustada sihitud DNA pikkuseni. Ultraheli parameetrite täpne kontroll ja keerukad jahutusvõimalused takistavad DNA lagunemist.
Loe lähemalt ultraheli DNA killustatuse kohta!

 

Video näitab ultraheli proovi ettevalmistamise süsteemi UIP400MTP, mis võimaldab usaldusväärset proovi ettevalmistamist mis tahes standardse mitme kaevu plaadiga, kasutades suure intensiivsusega ultraheli. UIP400MTP tüüpilised rakendused hõlmavad rakkude lüüsi, DNA-d, RNA-d ja kromatiini lõikamist ning valkude ekstraheerimist.

Ultrasonikaator UIP400MTP multi-well plaadi ultrahelitöötluseks

Infonõue




Pange tähele, et meie Privaatsuspoliitika.


Ultraheli rakendused Monkeypoxi viiruse vaktsiinis

Ultraheli kasutatakse selliste vaktsiinide tootmiseks nagu ahvirõugete vaktsiinid. Ahvirõugete viiruse vastu kasutatavad vaktsiinid on praegu elusviiruse vaktsiinid. Äsja välja töötatud vaktsiinid võivad kasutada muid platvorme, näiteks DNA-põhist Praegu sisaldab modifitseeritud Vaccinia Ankara viurs, nõrgestatud, mittereplikatiivne ortopoksviirus. Samuti sisaldab see Tris (tris-aminometaan) ja naatriumkloriidi. Vaktsiin võib sisaldada ka väikeses koguses DNA-d ja valku kanaembrüo fibroblastirakkudest, mida kasutatakse vaktsiiniviiruse, bensonaasi ja antibiootiliste ühendite, näiteks gentamütsiini ja tsiprofloksatsiini kasvatamiseks.

Ultraheli homogeniseerimist kasutatakse nõrgestatud elus nõrgestatud viiruse vaktsiinide, DNA vaktsiinide, mitmevalentsete DNA kokteilide, mRNA vaktsiinide, rekombinantsete valguvaktsiinide, viirusetaoliste osakeste vaktsiinide jne tootmisel.

Ultraheli rakendused vaktsiini tootmisel ulatuvad

  • viiruseosakeste ja -ainete hajumine
  • emulgeerimine
  • viiruste inaktiveerimine
  • ravimikandja koostis (NLC, SLN)
  • kapseldamine
  • ainete lahustamine
  • abiainete valmistamine
  • Degaseerimine / de-aeratsioon

 

Põhjalikumat teavet ultraheli rakenduste kohta leiate vaktsiinide paremaks tootmiseks!

Monkeypoxi viiruse ultraheli isoleerimise protokoll

Stittelaari (2005) uurimisrühm kasutas ultraheli lüüsi, et vabastada ahvirõugete viirus nii kasvu peremeesrakukultuurist kui ka nakatunud primaatide kurgu vahetuste kaudu saadud rakkudest.

Monkeypoxi vaktsiini valmistamine:

Ahvirõugete viiruseid kasvatati spetsiifilise patogeenivabadel kanaembrüo fibroblastrakkudel. Pärast 1-2-päevast inkubeerimist koguti viiruserakkude suspensioon ühe külmsulatustsükliga ja kontsentreeriti seejärel tsentrifuugimise teel. Pellet resuspendeeriti ja allutati mitmele ultraheli homogeniseerimise ringile.

Monkeypoxi viiruse isoleerimine vaktsineeritud makaakidest:

Proovid külmutati-sulatati kolm korda ja ultraheliga CupHorn. Kahte lahjendust (1:10 ja 1:100) transpordikeskkonnas, millele oli lisatud 1% veise looteseerumit, kasutati Vero raku monokihtide inokuleerimiseks kuue süvendiga plaatidel. Pärast 1 h inkubeerimist temperatuuril 37 °C eemaldati inokulaadid ja asendati söötmega, millele oli lisatud 1% veise looteseerumit. Monokihte kultiveeriti 5 päeva 37 °C juures ja värviti kristallvioleti lahusega.
(vrd Stittelaar et al., 2005)

Selles videos näitame teile 2 kilovatti ultraheli süsteemi tekstisiseseks tööks puhastatavas kapis. Hielscher varustab ultraheli seadmeid peaaegu kõikidele tööstusharudele, nagu keemiatööstus, farmaatsia, kosmeetika, naftakeemiaprotsessid ja lahustipõhised ekstraheerimisprotsessid. See puhastatav roostevabast terasest kapp on mõeldud kasutamiseks ohtlikes piirkondades. Selleks võib klient suletud kappi puhastada lämmastiku või värske õhuga, et vältida tuleohtlike gaaside või aurude sattumist kappi.

2x 1000 vatti ultrasonikaatorid puhastatavas kapis paigaldamiseks ohtlikesse piirkondadesse

Ultrasonikaatorid viiruseanalüüsiks ja vaktsiinide tootmiseks

Hielscher Ultrasonics lai tooteportfell pakub ideaalset ultrasonikaatorit uurimis- ja analüüsilaboritele ning tööstusliku vaktsiini tootmiseks.
Hielscher Ultrasonics on spetsialiseerunud suure jõudlusega ultrasonikaatorite ja sono-bioreaktorite projekteerimisele, tootmisele ja levitamisele kasutamiseks uurimis- ja analüüsilaborites ning rakendamiseks tööstuslikus vaktsiinitootmises (nt. vaktsiinid, Api)
Hielscher Ultrasonics ultraheli protsessi parameetrite täpne kontroll' intelligentne tarkvaraSonikatsiooni saab rakendada avatud anumatele, suletud pidevalt segatavatele reaktoritele ja pideva läbivooluga reaktoritele. Kõik ultraheli süsteemide osad, mis puutuvad kokku vedela keskkonnaga, on valmistatud roostevabast terasest, titaanist või klaasist. Autoklaavitavad osad ja sanitaarseadmed tagavad tootmise farmaatsiaklassi tingimused.
Automaatne andmete salvestamine: Intelligentne tarkvara salvestab parameetrid ultrahelitöötluse protsessi automaatselt integreeritud SD mälukaardile. Kõigi protsessiparameetrite täpne kontroll tagab, et Reprodutseeritavus, tootmise standardiminening hõlbustab farmaatsiatoodete ohutusstandardite täitmist.
Hielscher ULTRASONICS’ ultraheli protsessorid on väga usaldusväärsed ja neid saab täpselt kontrollida. Kõiki tööstuslikke ultrasonikaatoreid saab reguleerida, et pakkuda täielikku vahemikku madalamast kuni väga kõrge amplituudini. Hielscheri ultraheli süsteemide töökindlus võimaldab 24/7 operatsiooni raskeveokite ja nõudlikes keskkondades.

Alljärgnev tabel annab teile ülevaate meie ultrahelihitiste ligikaudse töötlemisvõimsusest:

partii Köide flow Rate Soovitatavad seadmed
mitme kaevu / mikrotiiterplaadid N/a Led, mida sa ei pea booking.com-i külastajaid vastu
1 kuni 500 ml 10 kuni 200 ml / min UP100H
10 kuni 2000 ml 20 kuni 400 ml / min Uf200 ः t, UP400St
0.1 kuni 20 l 0.2 kuni 4 l / min UIP2000hdT
10 kuni 100 l 2 kuni 10 l / min UIP4000hdT
N/a 10 kuni 100 l / min UIP16000
N/a suurem klastri UIP16000

Võta meiega ühendust! / Küsi meiega!

Küsige lisateavet

Palun kasutage allolevat vormi, et küsida lisateavet ultraheli protsessorite, rakenduste ja hinna kohta. Meil on hea meel arutada teie protsessi teiega ja pakkuda teile ultraheli süsteem, mis vastab teie vajadustele!









Palun pange tähele, et meie Privaatsuspoliitika.


Ultraheli homogenisaatorid on DNA lõikamiseks usaldusväärsed

Ultraheli DNA murdepinna
Kohandatud Jkwchuist CC-BY-SA.03 alusel



Kirjandus/viited

  • Stittelaar, Koert; Amerongen, Geert; Kondova, Ivanela; Kuiken, Thijs; Lavieren, Rob; Pistoor, Frank; Niesters, Hubert; Doornum, Gerard; Van der Zeijst, Bernard; Mateo, Luis; Chaplin, Paul; Osterhaus, Albert (2005): Modified Vaccinia Virus Ankara Protects Macaques against Respiratory Challenge with Monkeypox Virus. Journal of Virology 79, 2005. 7845-51.
  • Shah Purvin, Parameswara Rao Vuddanda, Sanjay Kumar Singh, Achint Jain, and Sanjay Singh (2014): Pharmacokinetic and Tissue Distribution Study of Solid Lipid Nanoparticles of Zidovudine in Rats. Journal of Nanotechnology, Volume 2014.
  • J. Robin Harris, Andrei Soliakova, Richard J. Lewis, Frank Depoix, Allan Watkinson, Jeremy H. Lakeya (2012): Alhydrogel® adjuvant, ultrasonic dispersion and protein binding: a TEM and analytical study. Micron Volume 43, Issues 2–3, February 2012, 192-200.
  • Doron Melamed, Gabriel Leitner, E. Dan Heller (1991): A Vaccine against Avian Colibacillosis Based on Ultrasonic Inactivation of Escherichia coli. Avian Diseases Vol. 35, No. 1 (Jan. – Mar., 1991), 17-22.
  • Huang C-F, Wu T-C, Wu C-C, Lee C-C, Lo W-T, Hwang K-S, Hsu M-L, Peng H-J. (2011): Sublingual vaccination with sonicated Salmonella proteins and mucosal adjuvant induces mucosal and systemic immunity and protects mice from lethal enteritis. APMIS 119, 2011. 468–78.

Faktid Tasub teada

Ahvirõugete viirus

Ahvirõuged (MPV, MPXV või hMPXV) on kaheahelalise DNA viiruse liik, mis põhjustab viiruslikku zoonootilist haigust. Seda haigust tuntakse ahvirõugete nakkusena ja see võib esineda inimestel ja loomadel. See kuulub perekonda Orthopoxvirus perekonnas Poxviridae. Ahvirõugete viirus on üks inimese ortopoksviirustest koos variola (VARV), lehmarõugete (CPX) ja vaktsiini (VACV) viirustega. Ortopoksviirustele on iseloomulikud suured tellisekujulised viiruseosakesed, mis sisaldavad kaheahelalist DNA genoomi umbes 200 000 bp.

ELISA analüüs

ELISA tähistab ensüümiga seotud immunosorbentanalüüsi ja on märgistatud immunoanalüüs, mida peetakse immunoanalüüside kuldstandardiks. ELISA on immunoloogiline test, mida hinnatakse selle kõrge diagnostilise tundlikkuse tõttu ja mida kasutatakse molekulide, sealhulgas antikehade, antigeenide, valkude, glükoproteiinide ja hormoonide tuvastamiseks ja kvantifitseerimiseks. ELISA põhimõte põhineb antigeeni ja antikeha koostoimel. Selle antigeeni-antikeha interaktsiooni kaudu seonduvad spetsiifilised antikehad selle sihtantigeeniga. Ainult siis, kui koostoime toimub, võib substraat seonduda ensüümiga ja täheldada järgnevat substraadi muundamist, mis tähendab, et saadakse positiivne tulemus.


Suure jõudlusega ultraheli! Hielscheri tootevalik hõlmab kogu spektrit alates kompaktsest labori ultraheliaatorist üle pink-top üksuste kuni täistööstuslike ultrahelisüsteemideni.

Hielscher Ultrasonics toodab suure jõudlusega ultraheli homogenisaatoreid Lab et tööstuslik suurus.