Τεχνολογία Υπερήχων Hielscher

Υπερηχητική λύση των δειγμάτων μελανογάστερων Drosophila

Drosophila melanogaster is widely used in laboratories as model organism. Therefore, pre-analytical preparation steps such as lysis, cell disruption, protein extraction and DNA shearing of Drosophila melanogaster samples must be frequently carried out. Ultrasonic dismembrators are reliable and efficient and can used to perform various tasks such as lysis, protein extraction or DNA fragmentation at ease by only adjusting ultrasonic process parameters. Ultrasonic homogenizers are thereby flexible tools with a broad range of applications.

Υπερηχητική λύση και εκχύλιση πρωτεΐνης

Drosophila melanogaster is widely used as model organism in biological labs. Find here protocols for lysis, protein extracion and DNA shearing of D. melanogaster samples.Η λύση, η διαλυτοποίηση των κυττάρων, η ομογενοποίηση ιστών και η εξαγωγή πρωτεΐνης είναι τυπικές εργασίες για υπερηχητικούς δημυτοματιστές σε βιολογικά εργαστήρια. Οι υπερηχητικοί δημυαλωτές και οι διακόπτες κυττάρων είναι κατάλληλοι για την ομογενοποίηση των ζωικών ιστών, των εντόμων (π.χ., Drosophila melanogaster, C. elegans) ή των δειγμάτων εγκαταστάσεων. Μεταγενέστερες εφαρμογές υπερήχων είναι η λύση των κυτταρικών εναιωρημάτων και σφαιριδίων, καθώς και η εκχύλιση των ενδοκυτταρικών πρωτεϊνών.
Υπερήχων λύση και εκχύλιση πρωτεΐνης είναι εξαιρετικά αξιόπιστες και αναπαραγώγιμες διαδικασίες, οι οποίες μπορούν να εκτελεστούν με βάση καθιερωμένα πρωτόκολλα. Δεδομένου ότι η υπερηχητική ένταση διαδικασίας μπορεί να ρυθμιστεί ακριβώς μέσω των παραμέτρων υπερήχων όπως το πλάτος, ο τρόπος κύκλων/σφυγμού, η θερμοκρασία και ο όγκος δειγμάτων, μόλις αποδειχθούν τα πρωτόκολλα μπορούν να επαναληφθούν με το ίδιο αποτέλεσμα επανειλημμένως.

Πλεονεκτήματα της προετοιμασίας δειγμάτων υπερήχων

  • υψηλής απόδοσης
  • Ρυθμιζόμενο σε συγκεκριμένο υλικό δείγματος
  • Κατάλληλο για κάθε όγκο
  • Μη θερμική επεξεργασία
  • επαναλήψιμα αποτελέσματα
  • Απλό και ασφαλές

Υπερηχητικός κατακερματισμός DNA και RNA

After cell lysis and protein extraction, a common required step in sample preparation is the shearing and fragmentation of DNA, RNA, and chromatin, e.g. before chromatin immunoprecipitation (ChIP). DNA and RNA fragmentation can be reliably achieved by breaking the covalent bonds that hold the DNA together by physical forces. Using physical shearing such as sonication, at first the DNA strands are broken, then the DNA is fragmented into smaller pieces.
Ο υπερηχητικός κατακερματισμός DNA είναι αξιόπιστος και αποδοτικός στην διάτμηση του DNA σε ένα στοχοθετημένο μήκος, π.χ. 500bp (ζεύγη βάσεων). Τα σημαντικότερα πλεονεκτήματα του υπερηχητικού κατακερματισμού DNA περιλαμβάνουν τον ακριβή έλεγχο των παραμέτρων και της έντασης της διαδικασίας υπερήχων. Οι παράμετροι διαδικασία υπερήχων μπορεί να ρυθμιστεί με τη ρύθμιση της έντασης υπερήχων, κύκλους και το χρόνο με ακρίβεια. Αυτό καθιστά δυνατή τη δημιουργία επιθυμητών μεγεθών DNA και το στοχευμένο μήκος του DNA μπορεί να παραχθεί αξιόπιστα καθώς και να αναπαραχθεί. Υπερήχων ψαλίδισμα DNA είναι επίσης ιδανικό για τη δημιουργία υψηλού μοριακού βάρους θραύσματα DNA.

Ultrasonicator UP200Ht with microtip S26d2 for ultrasonic lysis of Drosophila samples

Υπερήχων Uf200 ः t with 2mm microtip S26d2 for the sonication of Drosophila samples

Αίτηση για πληροφορίες




Σημειώστε τις Πολιτική Απορρήτου.


Πρωτόκολλα για υπερήχων Λύση της Drosophila melanogaster

Παρακάτω μπορείτε να βρείτε διάφορα πρωτόκολλα για την υπερηχητική υποβοηθούμενη λύση, εκχύλιση πρωτεΐνης, και dna ή χρωματίνη κατακερματισμό των δειγμάτων Drosophila.

Υπερηχητική λύση για τη διασταύρωση ανοσοκαταπίσθησης (CLIP) Δοκιμασία

CLIP assay was performed as previously reported with some modifications. Approximately 20 mg ovaries from 0- to 1-day-old wild-type females were UV crosslinked (3 × 2000 μJ/cm2), homogenized on ice in 1 mL RCB buffer (50 mM HEPES pH 7.4, 200 mM NaCl, 2.5 mM MgCl2, 0.1% Triton X-100, 250 mM sucrose, 1 mM DTT, 1× EDTA-free Complete Protease Inhibitors, 1 mM PMSF) supplemented with 300 U RNAseOUT and placed on ice for 30 min. The homogenate was sonicated on ice, at 80% power, five times in 20 s bursts with a 60 s rest in between using the Hielscher Ultrasonic Processor UP100H (100 W, 30 kHz) και φυγοκεντρείται (16000 × g επί 5 λεπτά στους 4°C). Το διαλυτό εκχύλισμα ήταν προδιαλευτερωμένο με 20 μl διναμπάδες πρωτεΐνης-G για 20 λεπτά στους 4°C. Μετά την αφαίρεση των δειγμάτων για ανοσοανοποίηση και ποσοτικοποίηση της εισόδου RNA (1%), το HP1 ανοσολογήθηκε με αντίσωμα αντικ-HP1 9A9 από 450 μl προεκλεισμένο εκχύλισμα με επώαση για 4 ώρες με 50 μl protein-G dynabads. Τα ανοσοπροσπασιτικά πλύθηκαν 4 φορές με το RCB. Για να εξοπλιστεί το ανοσοπροενάιξο RNAs, οι σφαιρωτοποιημένες χάντρες βράστηκαν σε 100 μL νερού που υποβλήθηκαν σε UltraPure DEPC για 5 λεπτά. 900 μL Αντιδραστήριο Qiazol προστέθηκε στο υπερκείμενο που ανακτήθηκε για την προετοιμασία RNA. Το RNA καθαρισμένο χρησιμοποιήθηκε ως πρότυπο για να συνθέσει cDNA χρησιμοποιώντας oligo dT, τυχαία εξαερήμωση και Εκθέτη αντίστροφη transcriptase ΙΙΙ σύμφωνα με το πρωτόκολλο του κατασκευαστή.
(Cassale et al. 2019)

Υπερηχητική λύση για τη δοκιμασία ανοσοπροευθυνοποίησης χρωματίνης

Chromatin immunoprecipitation was performed according to the method described by Menet with minor modifications. Approximately 20 mg ovaries from 0- to 1-day-old wild-type females were homogenized in 1 mL of NEB buffer (10 mM HEPES-Na at pH 8.0, 10 mM NaCl, 0.1 mM EGTA-Na at pH 8, 0.5 mM EDTA-Na at pH 8, 1 mM DTT, 0.5% NP-40, 0.5 mM Spermidine, 0.15 mM Spermine, 1× EDTA- free Complete Protease Inhibitors) with a homogenizer / immersion disperser 1 min (at 3000 rpm). The homogenate was transferred to a pre-chilled glass dounce and 15 full strokes were applied with a tight pestle. Free nuclei were then centrifuged at 6000xg for 10 min at 4°C. The nuclei-containing pellets were resuspended in 1 mL of NEB and centrifuged at 20000 × g for 20 min on sucrose gradient (0.65 mL of 1.6 M sucrose in NEB, 0.35 mL of 0.8 M sucrose in NEB). The pellet was resuspended in 1 mL of NEB and formaldehyde to a final concentration of 1%. Nuclei were cross-linked for 10 min at room temperature and quenched by adding 1/10 vol of 1.375 M glycine. The nuclei were collected by centrifugation at 6000 × g for 5 min. Nuclei were washed twice in 1 mL of NEB and resuspended in 1 mL of Lysis Buffer (15 mM HEPES-Na at pH 7.6, 140 mM NaCl, 0.5 mM EGTA, 1 mM EDTA at pH 8, 1% Triton X-100, 0.5 mM DTT, 0.1% Na Deoxycholate, 0.1% SDS, 0.5% N-lauroylsarcosine and 1× EDTA-free Complete Protease Inhibitors). Nuclei were sonicated using a Hielscher Ultrasonic Processor UP100H (100 W, 30 kHz) έξι φορές για 20 s και 1 λεπτό στον πάγο. Οι sonicated πυρήνες φυγοκεντρήθηκαν στους 13000 × g για 4 λεπτά στους 4°C. Η πλειοψηφία των sonicated χρωματίνη ήταν 500 έως 1000 ζεύγη βάσης (bp) σε μήκος. Για κάθε ανοσοκαταστολή, επωάστηκαν 15 μg χρωματίνης παρουσία 10 μg μονοκλωνικού αντισώματος HP1 9A9 (3 ώρες στους 4°C σε περιστρεφόμενο τροχό). Στη συνέχεια, προστέθηκαν 50 μl πρωτεΐνης dynabadeds G και η επώαση συνεχίστηκε κατά τη διάρκεια της νύχτας στους 4°C. Τα υπερκείμενοι απορρίφθηκαν και τα δείγματα πλύθηκαν δύο φορές στο ρυθμιστικό διάλυμα λύσης (κάθε πλύσιμο 15 λεπτά στους 4 °C) και δύο φορές στο TE Buffer (1 mM EDTA, 10 mM TrisHCl στο pH 8). Η χρωματίνη εκλούστηκε από χάντρες σε δύο βήματα. πρώτα σε 100 μl buffer eluition 1 (10 mM EDTA, 1% SDS, 50 mM TrisHCl σε pH 8) στους 65°C επί 15 λεπτά, ακολουθούμενη από φυγοκέντρηση και ανάκτηση του υπερκείμενου. Το υλικό χάντρες εκ νέου εξήχθη σε 100 μl TE + 0,67% SDS. Το συνδυασμένο έκλουστο (200 μl) επωάστηκε κατά τη διάρκεια της νύχτας στους 65°C για να αντιστραφεί η διασταύρωση και υποβλήθηκε σε επεξεργασία με 50 μg/ml RNaseA για 15 λεπτά στους 65°C και κατά 500 μg/ml Πρωτεϊνάση Κ για 3 ώρες στους 65°C. Τα δείγματα ήταν φαινόλης-χλωροφόρμιο που εξάγονται και η αιθανόλη κατακρημνίζεται. Το DNA επαναιωρήθηκε σε 25 μl νερού. Για τη μεγιστοποίηση των μοριακών αναλύσεων με ανοσοανεπιενιέρυπτο DNA, τα υποψήφια γονίδια ενισχύθηκαν σε ζεύγη μέσω ενός βελτιστοποιημένου πρωτοκόλλου duplex-PCR χρησιμοποιώντας δύο διαφορετικά σύνολα αστάρι που έχουν παρόμοιες θερμοκρασίες τήξης σε μία μόνο αντίδραση.
(Casale et al. 2019)

UP200St TD_CupHorn για την έμμεση υπερήχηση των δειγμάτων

UP200St TD_CupHorn για την έμμεση υπερήχηση δειγμάτων όπως το DNA και η διάτμηση χρωματίνης

Υψηλής απόδοσης υπερηχητικοί διασπαστές κυττάρων για τα βιολογικά δείγματα

Hielscher Ultrasonics είναι από μακρού έμπειρος συνεργάτης σας, όταν πρόκειται για υψηλής απόδοσης ultrasonicators για διαταραχή των κυττάρων, λύση, εκχύλιση πρωτεΐνης, DNA, RNA, και χρωματίνη κατακερματισμό, καθώς και άλλα προ-αναλυτικά βήματα προετοιμασίας του δείγματος. Προσφέροντας ένα ολοκληρωμένο χαρτοφυλάκιο υπερήχων ομογενοποιητές εργαστήριο και μονάδες προετοιμασίας δειγμάτων, Hielscher έχει την ιδανική συσκευή υπερήχων για τη βιολογική εφαρμογή και τις απαιτήσεις σας.
Probe-τύπου insonifier UP200St για λύσηΚλασικός υπερηχητικός καθετήρας τύπου με μικρο-άκρο, όπως UP200St (200W, βλέπε εικόνα αριστερά) ή μία από τις μονάδες προετοιμασίας δείγματος υπερήχων VialTweeter ή UP200ST_TD_CupHorn με VialHolder είναι τα αγαπημένα μοντέλα στην έρευνα και αναλυτικά εργαστήρια. Ο κλασικός υπερηχητικός καθετήρας είναι ιδανικός, όταν προετοιμάζετε λιγότερα δείγματα πρέπει να λυθούν, να εξαχθούν ή να κατακερματιστούν. Οι μονάδες παρασκευής δείγματος VialTweeter και UP200St_TD_CupHorn επιτρέπουν την ταυτόχρονη υπερήχηση έως 10 ή 5 φιαλιδίων, αντίστοιχα.
Εάν πρέπει να υποβληθούν σε επεξεργασία υψηλοί αριθμοί δείγματος (π.χ. πλάκες 96 φρεατίων, πλάκες μικροτιαγύτερων κ.λπ.), UIP400MTP είναι η ιδανική ρύθμιση υπερήχων. Το UIP400MTP λειτουργεί σαν ένα μεγαλύτερο cuphorn, το οποίο είναι γεμάτο με νερό και έχει αρκετό χώρο για να κρατήσει πλάκες μικρο-καλά. Τροφοδοτημένος από έναν ισχυρό υπερηχητικό επεξεργαστή 400 watt, το UIP400MTP παραδίδει μια πολύ ομοιόμορφη και έντονη υπερήχηση των πολυ-καλά πλακών προκειμένου να διαταραχθούν τα κύτταρα, τα δείγματα lyse, τα σφαιρίδια διαλυτοποίησης, οι πρωτεΐνες εξαγωγής ή το dna διάτμησης.

Ακριβής έλεγχος μέσω έξυπνου λογισμικού

Οι βιομηχανικοί επεξεργαστές της Hielscher της σειράς hdT μπορούν να λειτουργούν άνετα και φιλικά προς το χρήστη μέσω του τηλεχειριστηρίου του προγράμματος περιήγησης.Όλες οι λύσεις υπερήχων Hielscher από 200 watt και άνω είναι εξοπλισμένες με ψηφιακή έγχρωμη οθόνη αφής και έξυπνο λογισμικό. Μέσω των έξυπνων δεδομένων protocolling όλες οι παραμέτρους διαδικασία υπερήχων αποθηκεύονται αυτόματα ως αρχείο CSV σε ένα ενσωματωμένο SD-κάρτα μόλις το ultrasonicator έχει ξεκινήσει. Αυτό κάνει την έρευνα και την πρωτόκολλο πολύ πιο βολικό. Μετά τις δοκιμές υπερήχων ή την προετοιμασία του δείγματος, μπορείτε απλά να επανεξετάσει τις παραμέτρους υπερήχων του κάθε λειτουργία υπερήχων και να τις συγκρίνουν.
Via the intuitive menu, numerous parameter can be preset before sonication: For instance, to control the temperature in the sample and to prevent its thermal degradation, an upper limit of sample temperature can be set. A pluggable temperature sensor, which comes with the ultrasonic unit, gives the ultrasonic processor feedback on the actual sonication temperature. When the upper temperature limit is reached, the ultrasonic device pauses until the lower limit of the set ∆T is reached and starts then automatically sonicating again.
Εάν υπερήχηση με μια συγκεκριμένη εισροή ενέργειας απαιτείται, μπορείτε να προκαθορίσετε την τελική υπερηχητική ενέργεια του τρεξίματος υπερήχων. Φυσικά, υπερήχων παλμούς και τον τρόπο κύκλου μπορεί να ρυθμιστεί ξεχωριστά, πάρα πολύ.
Για να επαναχρησιμοποιήσετε τις πιο επιτυχημένες παραμέτρους υπερήχων σας, μπορείτε να αποθηκεύσετε διάφορες λειτουργίες υπερήχων (π.χ. χρόνο υπερήχησης, ένταση, λειτουργία κύκλου κ.λπ.) ως προκαθορισμένες λειτουργίες, έτσι ώστε να μπορούν να είναι εύκολο και γρήγορα ξεκίνησε και πάλι.
Για μεγαλύτερη λειτουργική ευκολία, όλες οι ψηφιακές μονάδες υπερήχων μπορούν να λειτουργήσουν μέσω του τηλεχειριστηρίου του προγράμματος περιήγησης σε οποιοδήποτε κοινό πρόγραμμα περιήγησης (π.χ., InternetExplorer, Safari, Chrome κ.λπ.). Η σύνδεση LAN είναι μια απλή εγκατάσταση τοποθέτησης plug-n-play και δεν απαιτεί πρόσθετη εγκατάσταση λογισμικού.
Εμείς στο Hielscher γνωρίζουμε ότι η επιτυχής υπερήχηση των βιολογικών δειγμάτων απαιτεί ακρίβεια και επαναληψιμότητα. Ως εκ τούτου, σχεδιάσαμε ultrasonicators μας ως έξυπνες συσκευές με όλα τα χαρακτηριστικά που επιτρέπουν μια αποτελεσματική, αξιόπιστη, αναπαραγώγιμη και βολική προετοιμασία του δείγματος.

Επικοινωνήστε μαζί μας τώρα και πείτε μας για τα βιολογικά σας δείγματα και τα απαιτούμενα βήματα προετοιμασίας. Θα σας προτείνουμε την πιο κατάλληλη συσκευή προετοιμασίας δείγματος υπερήχων και θα σας βοηθήσουμε με πρόσθετες πληροφορίες, όπως πρωτόκολλα και συστάσεις.

The table below gives you an indication of the approximate processing capacity of our ultrasonic systems from ultrasonic micro-tips and classic ultrasonic homogenizers to MultiSample ultrasonicators for the convenient, reliable preparation of numerous samples:

Μαζική Όγκος Ρυθμός ροής Προτεινόμενες συσκευές
Πλάκες 96 φρεατίων / μικροτιετών μ.δ. UIP400MTP
10 φιαλίδια à 0,5 έως 1,5mL μ.δ. VialTweeter σε UP200St
CupHorn για έμμεση υπερήχηση, π.χ. έως 5 φιαλίδια μ.δ. UP200ST_TD_CupHorn
0.01 έως 250mL 5 έως 100mL/min UP50H
0.01 έως 500mL 10 έως 200 ml / λεπτό UP100H
00,02 έως 1L 20 έως 400mL / λεπτό Uf200 ः t / / UP200St
10 έως 2000mL 20 έως 400mL / λεπτό Uf200 ः t, UP400St
0.25 έως 5L 00,05 έως 1L/λεπτό UIP500hdT

Επικοινωνήστε μαζί μας! / Ρωτήστε μας!

Ζητήστε περισσότερες πληροφορίες

Παρακαλούμε χρησιμοποιήστε την παρακάτω φόρμα για να ζητήσετε πρόσθετες πληροφορίες σχετικά με υπερήχους επεξεργαστές, εφαρμογές και τιμή. Θα χαρούμε να συζητήσουμε τη διαδικασία σας μαζί σας και να σας προσφέρουμε ένα υπερηχητικό σύστημα που πληροί τις απαιτήσεις σας!









Παρακαλείστε να σημειώσετε ότι η Πολιτική Απορρήτου.


The VialTweeter is a MultiSample Ultraonicator that allows for reliable sample preparation under precisely controlled temperature conditions.

Η υπερηχητική μονάδα προετοιμασίας πολλαπλών δειγμάτων VialTweeter επιτρέπει την ταυτόχρονη υπερήχηση έως και 10 φιαλιδίων. Με τη συσκευή σύσφιξης VialPress, μπορούν να πιεστούν έως και 4 επιπλέον σωλήνες στο μπροστινό μέρος για έντονη υπερήχηση.

Λογοτεχνία / Αναφορές



Hielscher Ultrasonics supplies high-performance ultrasonic homogenizers from lab to industrial size.

Υπερήχων υψηλής απόδοσης! Σειρά προϊόντων Hielscher καλύπτει το πλήρες φάσμα από το συμπαγές εργαστήριο ultrasonicator πάνω από πάγκο-top μονάδες σε πλήρη βιομηχανική υπερήχων συστήματα.


Γεγονότα που αξίζει να γνωρίζουμε

Μεταβολομική

Metabolomics is the study of small molecules, known as metabolites, present within cells, biofluids, tissues or organisms. These small molecules and their interactions within a biological system are summarized under the umbrella term “metabolome” and the research field is called metabolomics. The metabolome research is closely connected with the rapidly emerging field of precision medicine. The understanding of the metabolome and its relation to various diseases helps to develop disease prevention and clinical care strategies whilst individual variability in environment, lifestyle, genetics, and molecular phenotype. In order to release metabolite molecules from cells, ultrasonication is frequently used in biological laboratories for pre-analytical sample preparation such as cell disruption, lysis and the extraction of proteins, lipids and other molecules.