Τεχνολογία Υπερήχων Hielscher

Υπερηχητική προετοιμασία δείγματος για τις δοκιμασίες ELISA

Οι δοκιμασίες όπως το ELISA χρησιμοποιούνται ευρέως για τη διάγνωση in vitro, την ανίχνευση πρωτεϊνών που σχετίζονται με ασθένειες και τον ποιοτικό έλεγχο (π.χ. παρακολούθηση αλλεργιογόνων τροφίμων). Η προετοιμασία του υπερηχητικού δείγματος είναι μια γρήγορη, αξιόπιστη και αναπαραγώγιμη τεχνική για να lyse κύτταρο και να απομονώσει ενδοκυτταρικές πρωτεΐνες, DNA, RNA και οργανίδια. Hielscher Ultrasonics προσφέρει διάφορες υπερηχητικές λύσεις για την κατάλληλη προετοιμασία των μεμονωμένων δειγμάτων, πολλαπλά φιαλίδια, καθώς και για πλάκες μικροτιτήρη και 96-καλά πλάκες.

Elisa – Ανοσοπροσροφητική δοκιμασία συνδεδεμένη με ένζυμο

Elisa σημαίνει ένζυμο-συνδεδεμένη ανοσοπροσροφητική δοκιμασία και είναι μια ευρέως χρησιμοποιούμενη τεχνική βιοχημικής ανάλυσης της κατηγορίας των ligand-δεσμευτικές δοκιμασίες. Στο ELISA, προστίθεται ένα υγρό δείγμα σε μια σταθερή στερεά φάση με ειδικές ιδιότητες σύνδεσης. Κανονικά, η σταθερή στερεά φάση εφαρμόζεται ως επικάλυψη σε μια πλάκα καλά ή πλάκα ELISA. Στη συνέχεια, διάφορα υγρά αντιδραστήρια προστίθενται διαδοχικά, επωάζονται και πλένονται, έτσι ώστε τελικά μια οπτική αλλαγή (π.χ. ανάπτυξη χρώματος από το προϊόν μιας ενζυμικής αντίδρασης) εμφανίζεται στο τελικό υγρό στο πηγάδι. Η οπτική αλλαγή επιτρέπει τη μέτρηση της ποσότητας του αναλύτη με “ανάγνωση". Για την ποσοτική ανάγνωση, χρησιμοποιείται φασματοφωτόμετρο, φθορόμετρο ή φωτιστικό για την ανίχνευση και μέτρηση της έντασης του εκπεμπόμενου φωτός. Η ευαισθησία της ανίχνευσης επηρεάζεται από την ενίσχυση του σήματος κατά τη διάρκεια των αναλυτικών αντιδράσεων. Δεδομένου ότι οι αντιδράσεις ενζύμων διερευνώνται καλά και αξιόπιστες διαδικασίες ενίσχυσης, τα ένζυμα χρησιμοποιούνται για τη δημιουργία του σήματος. Τα ένζυμα συνδέονται με τα αντιδραστήρια ανίχνευσης σε σταθερές αναλογίες για να καταστεί δυνατή η ακριβής ποσοτικός προσδιορισμός, γεγονός που εξηγεί επίσης την ονομασία "ενζυμική" ανοσοπροσροφητική δοκιμασία.
Καθώς οι δοκιμασίες ELISA εκτελούνται σε πλάκες μικροτιτήρη / πλάκες 96-well, είναι γνωστή ως τεχνική δοκιμασίας με βάση την πλάκα και χρησιμοποιείται π.χ. σε κλινικές in vitro διαγνωστικές, ερευνητικές, ανάπτυξη φαρμάκων κ.λπ.
Η τεχνική ELISA χρησιμοποιείται συχνά ως διαγνωστικό εργαλείο στην ιατρική, τη βιοτεχνολογία, την παθολογία των φυτών και αποτελεί επίσης σημαντική μέτρηση ποιοτικού ελέγχου σε πολλές βιομηχανίες.

Πλήρης διαμόρφωση Vialtvali: VialTweeter sonotrode σε υπερήχων επεξεργαστή UP200St

Η μονάδα προετοιμασίας δείγματος υπερήχων VialTweeter χρησιμοποιείται για κυτταρική λύση και εκχύλιση πρωτεΐνης πριν από τις δοκιμασίες ELISA

Αίτηση για πληροφορίες




Σημειώστε τις Πολιτική Απορρήτου.


Υπερηχητική προετοιμασία δείγματος πριν από την ELISA

Πριν από τη δοκιμασία ELISA μπορεί να πραγματοποιηθεί, τα δείγματα απαιτούν βήματα προετοιμασίας τέτοια κυτταρική λύση και εκχύλιση των ενδοκυτταρικών πρωτεϊνών, DNA, RNA κ.λπ. Το πλεονέκτημα της υπερηχητικής λύσης κυττάρων και της απομόνωσης πρωτεϊνών είναι η υψηλή αποδοτικότητα, η αξιοπιστία και η αναπαραγωγιμότητα του. Όλοι αυτοί οι παράγοντες είναι σημαντικοί για την απόκτηση διαγνωστικών και ερευνητικών αποτελεσμάτων υψηλής ποιότητας

Πλεονεκτήματα της υπερηχητικής λύσης πριν από την ELISA

  • Ομοιογενής επεξεργασία δείγματος
  • Πλήρης λύση
  • Πλήρης εκχύλιση πρωτεΐνης (π.χ. αντισώματα, DNA)
  • Βέλτιστη προσαρμογή στον τύπο κελιού
  • Για οποιοδήποτε μέγεθος δείγματος
  • αναπαραγώγιμος
  • Ελεγχόμενη θερμοκρασία
  • Αυτόματη πρωτόκολλο δεδομένων στην κάρτα SD

Πρωτόκολλο για την προ-ELISA υπερηχητική λύση κυττάρων

Probe-τύπου insonifier UP200St για λύση

  • Για κυτταρικές καλλιέργειες: Πριν από τη λύση των υπερηχητικών κυττάρων, τα κύτταρα φυγοκέντρησης για 5 λεπτά σε 270 x g σε ένα μικροκεντρικό. Αφαιρέστε το υπερκείμενο με αναρρόφηση και επαναιωρούμε τα κύτταρα σε 30 – 100 μL ρυθμιστικού διαλύματος RIPA. Στη συνέχεια, επωάστε το σφαιρίδιο κυττάρων στον πάγο για 30 λεπτά.
  • Τώρα, το δείγμα κυττάρων είναι έτοιμο για την υπερηχητική λύση:
    Χρησιμοποιήστε έναν υπερηχητικό καθετήρα τύπου (π.χ. Uf200 ः t με καθετήρα S26d2) ή μια συσκευή πολλαπλών δειγμάτων υπερήχων (π.χ. VialTweeter για ταυτόχρονη υπερήχηση έως 10 φιαλιδίων ή το UIP400MPT για πλάκες μικροτιτλοτέρας / πλάκες 96 φρεατίων) ανάλογα με την ποσότητα των δειγμάτων που πρέπει να προετοιμάσετε.
    Για την υπερήχηση τύπου καθετήρα ενός μόνο δείγματος, τοποθετήστε τα κύτταρα σε σωλήνες μικροκεντροχείωσης 1,5 mL.
  • Προ-ρυθμίστε τη διάρκεια υπερήχων σας, συνολική εισροή ενέργειας, λειτουργία κύκλου και / ή τα όρια θερμοκρασίας στο ψηφιακό μενού του ultrasonicator. Αυτό εξασφαλίζει εξαιρετικά αξιόπιστη υπερήχηση και επαναληψιμότητα.
  • Ενέστε το sonotrode και ενεργοποιήστε τη συσκευή υπερήχων. Μετακινήστε απαλά το μικρο-άκρο του υπερηχητικού καθετήρα μέσω του δείγματος για να υπερήχηση του δείγματος ομοιόμορφα.
    Για τα περισσότερα κύτταρα, υπερήχων λύση θα ολοκληρωθεί μετά από 2 -4 κύκλους των 10 sec υπερήχηση.
  • Μετά την υπερήχηση, αφαιρέστε το sonotrode από το δείγμα. Τα δείγματα πρέπει να επωάζονται στον πάγο επί 5 λεπτά. Στη συνέχεια, φυγοκεντρείται σε 10.000 x g για 20 λεπτά για να σφαιρίδιο τα συντρίμμια. Μεταφέρετε τα υπερναττικά σε νέο σωλήνα μικροκεντροποίησης. Ετικέτα των αναλύτη και κατάστημα σε -20°C.
  • Το υπερηχητικό sonotrode μπορεί να καθαριστεί με το σκούπισμα σωστά με το οινόπνευμα ή sonicate σε ένα ποτήρι που γεμίζουν με το οινόπνευμα, π.χ. αιθανόλη 70%. Όλοι οι υπερηχητικοί ανιχνευτές που γίνονται από το τιτάνιο είναι αυτόκλειστοι.

Για ομογενικά ιστών:

  • Ξεπλύνετε τον ιστό με παγωμένο PBS (0,01M, pH=7.4) για να αφαιρέσετε καλά το υπερβολικό αίμα αιμόλυσης.
  • Ζυγίστε τον ιστό (νεφρό, καρδιά, πνεύμονας, σπλήνα κ.λπ.) και το macerate σε μικρά κομμάτια, τα οποία ομογενοποιούνται σε PBS. Ο απαιτούμενος όγκος PBS σχετίζεται με το βάρος του ιστού. Κατά κανόνα, 1g ιστού απαιτεί περίπου 9mL PBS. Συνιστάται να προσθέσετε κάποιο αναστολέα πρωτεάσης στο PBS. (Το ρυθμιστικό διάλυμα RIPA ή υποτονικής λύσης που περιέχει το κοκτέιλ αναστολέων πρωτεάσης και φωσφατάσης μπορεί να χρησιμοποιηθεί εναλλακτικά.)
  • Ανάλογα με το μέγεθος του ιστού, μια σύντομη θεραπεία δίνης (περίπου 1-2 λεπτά σε 15 δευτερόλεπτα παλμούς) μπορεί να είναι χρήσιμη για την προ-θεραπεία του ιστού.
  • Τοποθετήστε ένα μικρο-άκρο, π.χ. S26d2, στον υπερηχητικό σας. Τοποθετήστε το σωλήνα δείγματος με τον ιστό σε ένα λουτρό πάγου.
  • Υπερήχηση του δείγματος με ultrasonicator σας, π.χ. UP200St (80% πλάτος) για 1 λεπτό σε λειτουργία παλμού (15sec, 15sec παύση). Κρατήστε το δείγμα στο λουτρό πάγου.
  • Στη συνέχεια, τα ομογενή φυγοκεντρούνται για να αποκτήσουν συγκεκριμένες ομάδες (κυτταροσόλη, πυρηνική, μιτοχονδριακή ή λυσοσωμική) προκειμένου να εμπλουτιστεί η πρωτεΐνη για ανάλυση. Με τη φυγοκέντρηση του δείγματος για 5 λεπτά σε 5000×g, ανακτάται το υπερκείμενο.
Το sonotrode MTP-24-8-96 έχει οκτώ υπερήχους καθετήρες για την υπερήχηση των φρεατίων των πλακών μικροτιτήρα.

Το sonotrode MTP-24-8-96 έχει οκτώ υπερήχους καθετήρες για την υπερήχηση των φρεατίων των πλακών μικροτιτήρα.

Αξιόπιστος έλεγχος θερμοκρασίας κατά τη διάρκεια της υπερήχησης

Η θερμοκρασία είναι ένας κρίσιμος παράγοντας που επηρεάζει τη διαδικασία και είναι ιδιαίτερα σημαντικός για τη θεραπεία βιολογικών δειγμάτων, π.χ. για την πρόληψη της θερμικής υποβάθμισης των πρωτεϊνών. Καθώς όλες οι μηχανικές τεχνικές προετοιμασίας του δείγματος, η υπερήχηση δημιουργεί θερμότητα. Ωστόσο, η θερμοκρασία των δειγμάτων μπορεί να ελεγχθεί καλά όταν χρησιμοποιείτε τις συσκευές Hielscher Ultrasonics. Σας παρουσιάζουμε διάφορες επιλογές για την παρακολούθηση και τον έλεγχο της θερμοκρασίας των δειγμάτων σας κατά την προετοιμασία τους με ένα υπερηχητικό καθετήρα τύπου ή το VialTweeter προ-αναλυτικά.

  1. Παρακολούθηση της θερμοκρασίας του δείγματος: Όλοι οι ψηφιακοί επεξεργαστές υπερήχων Hielscher είναι εξοπλισμένοι με ένα έξυπνο λογισμικό και έναν αισθητήρα θερμοκρασίας με δυνατότητα σύνδεσης. Συνδέστε τον αισθητήρα θερμοκρασίας στη συσκευή υπερήχων (π.χ. Uf200 ः t, UP200St, VialTweeter, UIP400MTP) και τοποθετήστε το άκρο του αισθητήρα θερμοκρασίας σε έναν από τους σωλήνες δείγματος. Μέσω ψηφιακής έγχρωμης οθόνης αφής, μπορείτε να ορίσετε στο μενού του επεξεργαστή υπερήχων ένα συγκεκριμένο εύρος θερμοκρασίας για την υπερήχηση του δείγματός σας. Ο υπερηχητικός παράγοντας θα σταματήσει αυτόματα όταν επιτευχθεί η μέγιστη θερμοκρασία και θα σταματήσει μέχρι να μειωθεί η θερμοκρασία του δείγματος στη χαμηλότερη τιμή της καθορισμένης θερμοκρασίας ∆. Στη συνέχεια, η υπερήχηση ξεκινά αυτόματα και πάλι. Αυτή η έξυπνη λειτουργία αποτρέπει την υποβάθμιση που προκαλείται από τη θερμότητα.
  2. Όσον αφορά την υπερηχητική μονάδα πολλαπλών δειγμάτων VialTweeter, το μπλοκ τιτανίου, το οποίο περιέχει τους σωλήνες δείγματος, μπορεί να προψυχωθεί. Τοποθετήστε το μπλοκ VialTweeter (μόνο το sonotrode χωρίς μετατροπέα!) στο ψυγείο ή τον καταψύκτη για να προψύξετε το μπλοκ τιτανίου βοηθά στην αναβολή της αύξησης της θερμοκρασίας του δείγματος. Εάν είναι δυνατόν, το ίδιο το δείγμα μπορεί να προψυκτιστεί πάρα πολύ.
  3. Χρησιμοποιήστε ένα λουτρό πάγου ή ξηρό πάγο για να κρυώσει κατά τη διάρκεια υπερήχηση. Τοποθετήστε το δείγμα σωλήνα σας (ες) κατά τη διάρκεια υπερήχηση σε ένα λουτρό πάγου. Για το VialTweeter, χρησιμοποιήστε ένα ρηχό δίσκο γεμάτο με ξηρό πάγο και τοποθετήστε το VialTweeter στον ξηρό πάγο έτσι ώστε η θερμότητα μπορεί να διαλύσει γρήγορα.

Οι πελάτες σε όλο τον κόσμο χρησιμοποιούν το Hielscher καθετήρα-ultrasonicators, καθώς και το multi-δείγμα υπερήχων μονάδες VialTweeter και UIP400MTP για την καθημερινή εργασία προετοιμασίας του δείγματος τους σε βιολογικά, βιοχημικά, ιατρικά και κλινικά εργαστήρια. Το ευφυές λογισμικό και ο έλεγχος θερμοκρασίας των επεξεργαστών Hielscher, η θερμοκρασία ελέγχεται αξιόπιστα και η θερμότητα-προκληθείσα υποβάθμιση δειγμάτων αποφεύχθηκε. Υπερήχων προετοιμασία δείγματος με Hielscher υπερήχων λύσεις προσφέρει εξαιρετικά αξιόπιστα και αναπαραγώγιμα αποτελέσματα!

Επικοινωνήστε μαζί μας! / Ρωτήστε μας!

Ζητήστε περισσότερες πληροφορίες

Παρακαλούμε χρησιμοποιήστε την παρακάτω φόρμα για να ζητήσετε πρόσθετες πληροφορίες σχετικά με υπερήχους επεξεργαστές, εφαρμογές και τιμή. Θα χαρούμε να συζητήσουμε τη διαδικασία σας μαζί σας και να σας προσφέρουμε ένα υπερηχητικό σύστημα που πληροί τις απαιτήσεις σας!









Παρακαλείστε να σημειώσετε ότι η Πολιτική Απορρήτου.


Ultrasonic high-shear homogenizers are used in lab, bench-top, pilot and industrial processing.

Hielscher Υπερήχων κατασκευάζει υψηλής απόδοσης υπερήχων ομογενοποιητές για την ανάμειξη εφαρμογών, διασποράς, γαλακτωματοποίηση και εκχύλιση σε εργαστήριο, πιλοτική και βιομηχανική κλίμακα.

Λογοτεχνία / Αναφορές



Γεγονότα που αξίζει να γνωρίζουμε

Τύποι ELISA

Υπάρχουν διάφοροι τύποι ELISA, οι οποίοι διακρίνονται από την αρχή της λειτουργίας τους. Είναι γνωστές ως άμεση ELISA, έμμεση ELISA, σάντουιτς ELISA, ανταγωνιστική ELISA, και αντίστροφη ELISA. Παρακάτω, σας παρουσιάζουμε μια επισκόπηση των διαφόρων τύπων ELISA και των κύριων χαρακτηριστικών και διαφορών τους.
Το ELISA μπορεί να εκτελείται σε ποιοτική ή ποσοτική μορφή. Τα ποιοτικά αποτελέσματα παρέχουν ένα απλό θετικό ή αρνητικό αποτέλεσμα, ενώ σε ποσοτική ELISA η οπτική πυκνότητα (OD) του δείγματος συγκρίνεται με μια τυπική καμπύλη, η οποία είναι συνήθως μια σειριακή αραίωση ενός γνωστού διαλύματος συγκέντρωσης του μορίου-στόχου.

Άμεση ELISA

Η άμεση ELISA είναι η πιο απλή μορφή δοκιμασίας του Elisa, όπου χρησιμοποιείται μόνο ένα πρωτογενές αντίσωμα με την ένδειξη ενζύμου και δεν απαιτούνται δευτερεύοντα αντισώματα. Το αρχικό αντίσωμα με την ένδειξη ενζύμου συνδέεται απευθείας με τον στόχο, δηλαδή το αντιγόνο. Το ρυθμιστικό διάλυμα αντιγόνου προστίθεται σε κάθε πηγάδι μιας πλάκας μικροτιληφτήρα (συνήθως 96 καλά πλάκες, πλάκες ELISA), όπου προσκολλάται στην πλαστική επιφάνεια μέσω αλληλεπιδράσεων φόρτισης. Όταν το ένζυμο που συνδέεται με το κύριο αντίσωμα αντιδρά με το υπόστρωμά του, παράγει ένα ορατό σήμα που μπορεί να μετρηθεί μέσω φασματοφωτόμετρου, φθορόμετρου ή φωτιστικού.

Έμμεση ELISA

Για την έμμεση δοκιμή ELISA, απαιτούνται τόσο πρωτογενές αντίσωμα όσο και δευτερεύον αντίσωμα. Ωστόσο, σε αντίθεση με την άμεση ELISA, δεν είναι το κύριο αντίσωμα, αλλά το δευτερεύον αντίσωμα χαρακτηρίζεται με ένα ένζυμο. Το αντιγόνο ακινητοποιείται στην πλάκα του φρεατίου και δεσμεύεται από το κύριο αντίσωμα. Στη συνέχεια, το ενζυμικό δευτερεύον αντίσωμα συνδέεται με το πρωτεύον αντίσωμα. Τέλος, το ένζυμο που συνδέεται με το δευτερεύον αντίσωμα αντιδρά με το υπόστρωμά του για να παράγει ένα ορατό σήμα που μπορεί να ανιχνευθεί.

Σάντουιτς ELISA

Ενώ στις άμεσες και έμμεσες δοκιμές ELISA, το αντιγόνο ακινητοποιείται και επικαλυφθεί στην επιφάνεια της πλάκας καλά, στο σάντουιτς ELISA το αντίσωμα ακινητοποιείται στην πλαστική επιφάνεια της πλάκας ELISA. Τα ακινητοποιημένα αντισώματα στο σάντουιτς ELISA είναι γνωστά ως αντισώματα σύλληψης. Επιπλέον στα αντισώματα σύλληψης, στο σάντουιτς ELISA απαιτούνται επίσης τα αποκαλούμενα αντισώματα ανίχνευσης. Τα αντισώματα ανίχνευσης περιλαμβάνουν ένα μη επισημασμένο πρωτεύον αντίσωμα ανίχνευσης και ένα ενζυμικό-χαρακτηρισμένο δευτερεύον αντίσωμα ανίχνευσης.
Σταδιακά, το αντιγόνο ενδιαφέροντος συνδέεται με το αντίσωμα σύλληψης ακινητοποιημένο με την πλάκα. Στη συνέχεια, το κύριο αντίσωμα ανίχνευσης συνδέεται με το αντιγόνο. Στη συνέχεια, το δευτερεύον αντίσωμα ανίχνευσης συνδέεται με το κύριο αντίσωμα ανίχνευσης. Στο τελικό βήμα αντίδρασης, το ένζυμο αντιδρά με το υπόστρωμά του για να παράγει ένα ορατό σήμα που μπορεί να ανιχνευθεί οπτικά.

Ανταγωνιστική ELISA

Η ανταγωνιστική ELISA, γνωστή και ως αναστολή ELISA, είναι ο πιο σύνθετος τύπος ELISA επειδή περιλαμβάνει τη χρήση ενός αντιγόνου αναστολέα. Κάθε μία από τις τρεις μορφές, άμεση, έμμεση, και σάντουιτς ELISA, μπορεί να προσαρμοστεί στην ανταγωνιστική μορφή ELISA. Στην ανταγωνιστική ELISA, το αντιγόνο αναστολέα και το αντιγόνο ενδιαφέροντος ανταγωνίζονται για τη σύνδεση με το πρωτεύον αντίσωμα.
Για την ανταγωνιστική ELISA, το μη επισημασμένο αντίσωμα επωάζεται παρουσία του αντιγόνου του, δηλαδή του δείγματος. Αυτά τα δεσμευμένα συγκροτήματα αντισωμάτων/αντιγόνων προστίθενται έπειτα σε ένα αντιγόνο-ντυμένο καλά.
Η πλάκα πλένεται, έτσι ώστε να αφαιρούνται τα μη δεσμευμένα αντισώματα. Ανταγωνιστική ELISA έχει το όνομά του λόγω του γεγονότος ότι το περισσότερο αντιγόνο είναι στο δείγμα, τα περισσότερα συμπλέγματα αντιγόνου-αντισωμάτων σχηματίζονται. Αυτό σημαίνει ότι υπάρχουν λιγότερα μη δεσμευμένα αντισώματα διαθέσιμα για να συνδεθούν με το αντιγόνο στο πηγάδι και τα αντιγόνα πρέπει να ανταγωνίζονται για ένα διαθέσιμο αντίσωμα. Προστίθεται ένα δευτερεύον αντίσωμα, που ταιριάζει με το πρωτεύον αντίσωμα. Αυτό το δεύτερο αντίσωμα συνδέεται με το ένζυμο. Όταν προστίθεται το υπόστρωμα, τα υπόλοιπα ένζυμα παράγουν ένα χρωμογόνο ή φθορισμού σήμα.
Σε αυτό το σημείο, η αντίδραση διακόπτεται για να αποφευχθεί ο ενδεχόμενος κορεσμός του σήματος.
Μερικά ανταγωνιστικά κιτ ELISA περιλαμβάνουν ένα ενζυμικό αντιγόνο αντί για ένα ενζυμικό αντί για ένα ενζυμικό αντί για αντισώματα που συνδέονται με το ένζυμο. Το χαρακτηρισμένο αντιγόνο ανταγωνίζεται για τις κύριες περιοχές δέσμευσης αντισωμάτων με το αντιγόνο δειγμάτων (χωρίς ετικέτα). Όσο λιγότερο αντιγόνο στο δείγμα, τόσο πιο χαρακτηρισμένο αντιγόνο διατηρείται στο πηγάδι και τόσο ισχυρότερο είναι το σήμα.

Αντίστροφη ELISA

Το Reverse ELISA δεν χρησιμοποιεί πλάκες καλά, αλλά αφήνει τα αντιγόνα εναιωρμένα στο υγρό δοκιμής. Η αντίστροφη δοκιμή ELISA μετρά την ποσότητα δεσμευμένου αντισώματος μέσω αντιγόνου. Αναπτύχθηκε ειδικά για την ανίχνευση και διερεύνηση της πρωτεΐνης φακέλου του ιού του Δυτικού Νείλου και πώς είναι σε θέση να βρει ειδικά αντισώματα για τον ιό.

Ενζυμικός δείκτης που χρησιμοποιείται για την ELISA

Ο παρακάτω κατάλογος παρέχει τους πιο κοινούς ενζυμικούς δείκτες που χρησιμοποιούνται στις δοκιμασίες ELISA, οι οποίοι επιτρέπουν τη μέτρηση των αποτελεσμάτων της δοκιμασίας μετά την ολοκλήρωση.

  • OPD (ο-φαινυλενοδιαμίνη διυδροχλωρική) μετατρέπεται κεχριμπάρι για την ανίχνευση HRP (Υπεροξειδάση χρένο), το οποίο χρησιμοποιείται συχνά ως συζευγμένα πρωτεΐνη.
  • TMB (3,3′,5,5′-τετραμεθυλοβενζιδίνη) γίνεται μπλε κατά την ανίχνευση HRP και γίνεται κίτρινο μετά την προσθήκη θειικού ή φωσφορικού οξέος.
  • ABTS (2,2′-Το Αζινόμπις [3-αιθυλοβενζοθειαζολίνη-6-σουλφονικό οξύ]-ιναμμώνιο αλάτι) γίνεται πράσινο κατά την ανίχνευση hrp.
  • PNPP (p-νιτροφαινυλυδύλιο, άλας δινάτριο) γίνεται κίτρινο κατά την ανίχνευση αλκαλική φωσφατάσης.