Jak používat ultrazvukové homogenizátory tkání Hielscher
Před purifikací nebo charakterizací intracelulárních makromolekul, jako jsou proteiny, organely, enzymy nebo účinné látky, je nezbytné použít účinnou metodu lyze tkání a dezintegrace buněk. Ultrasonikace je vysoce účinná technika přípravy buněk, která rychle uvolňuje intracelulární materiál do pufru. Mechanické smykové síly vznikající při ultrazvukové homogenizaci tkání lze přesně nastavit podle konkrétního materiálu. To umožňuje šetrnou přípravu měkkých tkání nebo střihání DNA/RNA mírnější sonikací, stejně jako intenzivní ultrazvukovou kavitaci pro destruktivní dezintegraci buněk (např. u nannochloropsis, kvasinek).
Níže uvádíme výběr tkání, buněk a dalšího biologického materiálu s doporučenými sonikačními protokoly a pokyny pro efektivní přípravu vašich vzorků pomocí ultrazvukového homogenizátoru tkání nebo drtiče buněk.
Laboratorní ultrasonikátor UP200Ht (200W, 26kHz) pro úlohy přípravy vzorků
Jak připravit lyzáty, homogenáty a extrakty z biologických materiálů
V abecedním pořadí:
Acetobacter suboxydans
Actinomyces
Aktivita ALP a LDH
Ultrazvuková aplikace:
Stanovení aktivity ALP a LDH a obsahu proteinů
Zmrazené vzorky buněk byly rozmrazovány 20 min na ledu, poté následovala lyze buněk pomocí PBS obsahujícího 1% Triton X-100 po dobu 50 min na ledu. Během lyze buněk byl každý vzorek sonikován 1 min při 80 W ultrazvukovým procesorem UP100H (Hielscher Ultrasonics).
Doporučené zařízení:
UP100H
Reference/ výzkumná práce:
Bernhardt, A. et al. (2008): Mineralizovaný kolagen – umělá extracelulární kostní matrice – zlepšuje osteogenní diferenciaci stromálních buněk kostní dřeně.
Stanovení aktivity ALP a LDH a obsahu proteinů
Zmrazené vzorky buněk byly rozmrazovány 20 min na ledu, poté následovala lyze buněk pomocí PBS obsahujícího 1% Triton X-100 po dobu 50 min na ledu. Během lyze buněk byl každý vzorek sonikován 1 min při 80 W ultrazvukovým procesorem UP100H (Hielscher Ultrasonics).
Doporučené zařízení:
UP100H
Reference/ výzkumná práce:
Bernhardt, A. et al. (2008): Mineralizovaný kolagen – umělá extracelulární kostní matrice – zlepšuje osteogenní diferenciaci stromálních buněk kostní dřeně.
Amorfní fosforečnan vápenatý (ATCP)
Ultrazvuková aplikace:
Nanočástice ATCP, které jsou mimořádně reaktivním prekurzorem pro tvorbu hydroxyapatitu, byly dispergovány v chloroformu obsahujícím 5 % (w/w) Tween20 vztaženo na PLGA pomocí ultrazvukového zařízení Hielscher UP400S při 320W po dobu 5 min s použitím pulzních intervalů (50%), aby byla umožněna relaxace částic.
Doporučené zařízení:
UP400S
Reference/ výzkumná práce:
Mohn, Dirk; Ege, Duygu; Feldman, Kirifl; Schneider, Oliver D.; Imfeld, Thomas; Boccaccini, Aldo R. (2014): Sférická nanočásticová plniva fosforečnanu vápenatého umožňují polymerní zpracování zařízení pro fixaci kosti s vysokou biologickou aktivitou. The Free Library 01. května 2010. 21. ledna 2014.
Nanočástice ATCP, které jsou mimořádně reaktivním prekurzorem pro tvorbu hydroxyapatitu, byly dispergovány v chloroformu obsahujícím 5 % (w/w) Tween20 vztaženo na PLGA pomocí ultrazvukového zařízení Hielscher UP400S při 320W po dobu 5 min s použitím pulzních intervalů (50%), aby byla umožněna relaxace částic.
Doporučené zařízení:
UP400S
Reference/ výzkumná práce:
Mohn, Dirk; Ege, Duygu; Feldman, Kirifl; Schneider, Oliver D.; Imfeld, Thomas; Boccaccini, Aldo R. (2014): Sférická nanočásticová plniva fosforečnanu vápenatého umožňují polymerní zpracování zařízení pro fixaci kosti s vysokou biologickou aktivitou. The Free Library 01. května 2010. 21. ledna 2014.
Antokyany
Ultrazvuková aplikace:
Antokyany: diglukosidy, monoglukosid, acylované monoglukosidy a acylované diglukosidy peonidinu, malvidinu, kyanidinu, petunidinu a delfinidinu: extrakce ze slupek hroznů za 40 s; pH 5,0; poměr materiál/extrakční rozpouštědlo 1:6.
Doporučené zařízení:
UP100H
Antokyany: diglukosidy, monoglukosid, acylované monoglukosidy a acylované diglukosidy peonidinu, malvidinu, kyanidinu, petunidinu a delfinidinu: extrakce ze slupek hroznů za 40 s; pH 5,0; poměr materiál/extrakční rozpouštědlo 1:6.
Doporučené zařízení:
UP100H
Antrachinony
Ultrazvuková aplikace:
Extrakce antrachinonů z kořenů Morinda citrifolia
Doporučené zařízení:
UP400S
Extrakce antrachinonů z kořenů Morinda citrifolia
Doporučené zařízení:
UP400S
Meruňková jádra
Ultrazvuková aplikace:
Ultrazvuková předúprava před extrakcí oleje ze semen Jatropha curcas L. ke zlepšení extrakce.
Doporučené zařízení:
UP400S
Ultrazvuková předúprava před extrakcí oleje ze semen Jatropha curcas L. ke zlepšení extrakce.
Doporučené zařízení:
UP400S
Artemisia selengensis Turcz
Ultrazvuková aplikace:
Extrakce rutinu (1,0g mletého vzorku ve 30 mL methanolu) při 25°C za 5–10 min.
Doporučené zařízení:
UP50H
Extrakce rutinu (1,0g mletého vzorku ve 30 mL methanolu) při 25°C za 5–10 min.
Doporučené zařízení:
UP50H
Aspergillus flavus
Ultrazvuková aplikace:
Ultrazvuková inaktivace Aspergillus flavus v Sabouraudově růstovém médiu
Doporučené zařízení:
UP200S
Ultrazvuková inaktivace Aspergillus flavus v Sabouraudově růstovém médiu
Doporučené zařízení:
UP200S
B. sphaericus / Bacillus sphaericus
Spory Bacillus anthracis sterne 34F2
Ultrazvuková aplikace:
Ultrazvukové odstranění spor Bacillus anthracis sterne 34F2, Bacillus cereus ATCC 21281 a Bacillus thuringiensis ATCC 33680. Použití 150 ppm chlornanu sodného spolu s ultrazvukem skutečně vedlo k inaktivaci spor.
Doporučené zařízení:
UP200S při 100% amplitudě
Reference/ výzkumná práce:
Pamarthi, S.R. et al.: Účinnost ultrazvuku při odšpinění spor Bacillus spp uložených v komplexních potravinových matricích připojených k různým kontaktním povrchům.
Ultrazvukové odstranění spor Bacillus anthracis sterne 34F2, Bacillus cereus ATCC 21281 a Bacillus thuringiensis ATCC 33680. Použití 150 ppm chlornanu sodného spolu s ultrazvukem skutečně vedlo k inaktivaci spor.
Doporučené zařízení:
UP200S při 100% amplitudě
Reference/ výzkumná práce:
Pamarthi, S.R. et al.: Účinnost ultrazvuku při odšpinění spor Bacillus spp uložených v komplexních potravinových matricích připojených k různým kontaktním povrchům.
Spory Bacillus cereus ATCC 21281
Ultrazvuková aplikace:
Ultrazvukové odstranění spor Bacillus anthracis sterne 34F2, Bacillus cereus ATCC 21281 a Bacillus thuringiensis ATCC 33680. Použití 150 ppm chlornanu sodného spolu s ultrazvukem skutečně vedlo k inaktivaci spor.
Doporučené zařízení:
UP200S při 100% amplitudě
Reference/ výzkumná práce:
Pamarthi, S.R. et al.: Účinnost ultrazvuku při odšpinění spor Bacillus spp uložených v komplexních potravinových matricích připojených k různým kontaktním povrchům.
Ultrazvukové odstranění spor Bacillus anthracis sterne 34F2, Bacillus cereus ATCC 21281 a Bacillus thuringiensis ATCC 33680. Použití 150 ppm chlornanu sodného spolu s ultrazvukem skutečně vedlo k inaktivaci spor.
Doporučené zařízení:
UP200S při 100% amplitudě
Reference/ výzkumná práce:
Pamarthi, S.R. et al.: Účinnost ultrazvuku při odšpinění spor Bacillus spp uložených v komplexních potravinových matricích připojených k různým kontaktním povrchům.
Bacillus subtilis
Ultrazvuková aplikace:
Vysoce výkonný nízkofrekvenční ultrazvuk v malých objemech bakteriální suspenze vede k nepřetržitému snižování počtu bakteriálních buněk, tj. převažuje míra usmrcování. Ve větších objemech vede sonikace k počátečnímu nárůstu počtu buněk, což naznačuje rozbíjení shluků bakterií, tento počáteční nárůst však následně klesá, jakmile rozbíjení shluků skončí a míra usmrcování nabývá na významu.
Doporučené zařízení:
UP200St
Reference/ výzkumná práce:
Joyce, E.; Phull, S. S.; Lorimer, J. P.; Mason, T. J. (2003): Vývoj a hodnocení ultrazvuku pro léčbu bakteriálních suspenzí. Studie frekvence, výkonu a doby sonikace na kultivovaných druzích Bacillus. Ultrazvuk. Sonochem. 10/2003. str. 315-318.
Vysoce výkonný nízkofrekvenční ultrazvuk v malých objemech bakteriální suspenze vede k nepřetržitému snižování počtu bakteriálních buněk, tj. převažuje míra usmrcování. Ve větších objemech vede sonikace k počátečnímu nárůstu počtu buněk, což naznačuje rozbíjení shluků bakterií, tento počáteční nárůst však následně klesá, jakmile rozbíjení shluků skončí a míra usmrcování nabývá na významu.
Doporučené zařízení:
UP200St
Reference/ výzkumná práce:
Joyce, E.; Phull, S. S.; Lorimer, J. P.; Mason, T. J. (2003): Vývoj a hodnocení ultrazvuku pro léčbu bakteriálních suspenzí. Studie frekvence, výkonu a doby sonikace na kultivovaných druzích Bacillus. Ultrazvuk. Sonochem. 10/2003. str. 315-318.
Ječná alfa-amyláza
Ultrazvuková aplikace:
Stimulace nebo inhibice aktivity alfa-amylázy ječmene: Vzorek (10 g semen ječmene) byl dispergován v 80 ml vody z vodovodu přímou sonikací při ultrazvukové intenzitě 20, 60 a 100% amplitudy, cyklu 50% a s dodatečným mícháním. Sonotroda byla ponořena přibližně 9 mm do roztoku. Roztok byl zpracováván při konstantní teplotě 30C° po dobu 5, 10 a 15 min.
Doporučené zařízení:
UP200S, amplitudy: 20, 60 a 100%; cyklus 50%; sonotroda S3, 30C°.
Reference/ výzkumná práce:
Yaldagard et al. (2008): Vliv ultrazvukového výkonu na aktivitu ječné alfa-amylázy při ošetření semen po výsevu
Stimulace nebo inhibice aktivity alfa-amylázy ječmene: Vzorek (10 g semen ječmene) byl dispergován v 80 ml vody z vodovodu přímou sonikací při ultrazvukové intenzitě 20, 60 a 100% amplitudy, cyklu 50% a s dodatečným mícháním. Sonotroda byla ponořena přibližně 9 mm do roztoku. Roztok byl zpracováván při konstantní teplotě 30C° po dobu 5, 10 a 15 min.
Doporučené zařízení:
UP200S, amplitudy: 20, 60 a 100%; cyklus 50%; sonotroda S3, 30C°.
Reference/ výzkumná práce:
Yaldagard et al. (2008): Vliv ultrazvukového výkonu na aktivitu ječné alfa-amylázy při ošetření semen po výsevu
Nauplie svijonožců
Ultrazvuková aplikace:
Dezintegrace buněk / usmrcování mezozooplanktonu: sonikací za následujících podmínek čtyř průtoků (200, 400, 520 a 800 lh-1) a čtyř amplitud (25, 50, 75 a 100 %) bylo dosaženo míry usmrcení mezi 61 a 97 %.
Doporučené zařízení:
UIP2000hd
Reference/ výzkumná práce:
Viitaslo et al. (2005): Ozone, Ultraviolet Light, Ultrasound and Hydrogen Peroxide As Ballast Water Treatments – Experiments with Mesozooplankton In Low Saline- Brackish Water.
Dezintegrace buněk / usmrcování mezozooplanktonu: sonikací za následujících podmínek čtyř průtoků (200, 400, 520 a 800 lh-1) a čtyř amplitud (25, 50, 75 a 100 %) bylo dosaženo míry usmrcení mezi 61 a 97 %.
Doporučené zařízení:
UIP2000hd
Reference/ výzkumná práce:
Viitaslo et al. (2005): Ozone, Ultraviolet Light, Ultrasound and Hydrogen Peroxide As Ballast Water Treatments – Experiments with Mesozooplankton In Low Saline- Brackish Water.
Kmeny bifidobakterií: B. breve ATCC 15700, B. animalis subsp. lactis (BB-12), B. longum (BB-46)
Ultrazvuková aplikace:
Destrukce bakteriálních buněk a uvolnění ß-galaktosidázy z kmenů bifidobakterií: B. breve ATCC 15700, B. animalis subsp. Lactis (BB-12), B. longum (BB-46): 100 mL pasterizovaného mléka smíchaného s bakteriální kulturou bylo ošetřeno ultrazvukem. Kavitace způsobuje destrukci bakteriálních buněk a současně uvolnění ß-galaktosidázy.
Doporučené zařízení:
UIP1000hd: amplituda: 10%, výkon: 80W, amplituda: 100%, výkon: 200W; sonotroda BS2d34; 15–30 min.
Reference/ výzkumná práce:
Hung et al. (2009): Ultrazvukem podporovaná fermentace jogurtu s probiotiky.
Destrukce bakteriálních buněk a uvolnění ß-galaktosidázy z kmenů bifidobakterií: B. breve ATCC 15700, B. animalis subsp. Lactis (BB-12), B. longum (BB-46): 100 mL pasterizovaného mléka smíchaného s bakteriální kulturou bylo ošetřeno ultrazvukem. Kavitace způsobuje destrukci bakteriálních buněk a současně uvolnění ß-galaktosidázy.
Doporučené zařízení:
UIP1000hd: amplituda: 10%, výkon: 80W, amplituda: 100%, výkon: 200W; sonotroda BS2d34; 15–30 min.
Reference/ výzkumná práce:
Hung et al. (2009): Ultrazvukem podporovaná fermentace jogurtu s probiotiky.
Buňky BL21(DE3) pAtHNL (buňky Arabidopsis thaliana)
Ultrazvuková aplikace:
Dezintegrace buněk: 15 g buněk BL21-(DE3)_pAtHNL bylo pomalu suspendováno v 50 mM pufru fosforečnanu draselného (pH 7,5) při 0 degC.
Doporučené zařízení:
UP200S + sonotroda S14D: při 70W/cm2 (4 x 5 min), chlazeno v ledové lázni
Reference/ výzkumná práce:
Okrob, D. a kol. (2009): Hydroxynitrillyáza z Arabidopsis thaliana: Identifikace reakčních parametrů pro syntézu enantiočistého kyanohydrinu čistým a imobilizovaným katalyzátorem. Adv. Synth. Katalánština. 2011, 353, 2399 – 2408.
Dezintegrace buněk: 15 g buněk BL21-(DE3)_pAtHNL bylo pomalu suspendováno v 50 mM pufru fosforečnanu draselného (pH 7,5) při 0 degC.
Doporučené zařízení:
UP200S + sonotroda S14D: při 70W/cm2 (4 x 5 min), chlazeno v ledové lázni
Reference/ výzkumná práce:
Okrob, D. a kol. (2009): Hydroxynitrillyáza z Arabidopsis thaliana: Identifikace reakčních parametrů pro syntézu enantiočistého kyanohydrinu čistým a imobilizovaným katalyzátorem. Adv. Synth. Katalánština. 2011, 353, 2399 – 2408.
Krvinky (červené a bílé)
Boldin z listů boldovníku (Peumus boldus Molina)
Ultrazvuková aplikace:
Důležitou účinnou látkou v boldu je boldin ((S)-2,9-dihydroxy-1,10-dimethoxiaporphine), který je vedle katechinu ((2S,3R)-2-(3,4-dihydroxy-phenyl)-3,4-dihydro-1(2H)-benzopyran-3,5,7-triol) hlavní složkou alkaloidní a flavonoidní frakce listů bolda. Boldin je silné antioxidační činidlo, které podléhá peroxidativnímu poškození zprostředkovanému volnými radikály a působí jako účinný lapač hydroxylových radikálů.
Postup extrakce: Při typickém postupu extrakce byly vzorky listů bolda extrahovány 1L destilované vody za atmosférického tlaku pomocí ultrazvukového přístroje UIP1000hd v dávkovém a průtokovém režimu. Doba extrakce se pohybuje mezi 10 a 40 min, při ultrazvukové intenzitě 10 až 23 W/cm2, v teplotním rozmezí 10 až 70°C. Nejlepších výsledků bylo dosaženo za následujících podmínek: ultrazvuková intenzita 23 W/cm2 po dobu 40 min při teplotě 36°C
Výsledky: Výsledky analýzy ukazují, že vysoce výkonná sonikace zvyšuje uvolňování analytů z rostlinné matrice bolda výrazně lépe ve srovnání s konvenční metodou: stejný výtěžek byl sonikací uvolněn za 30 min, zatímco konvenční doba extrakce činila 2h.
Chemat (2013) a spolupracovníci prokázali, že ultrazvukem asistovaná extrakce zvyšuje účinnost extrakce rostlin a současně zkracuje dobu extrakce při zvýšené koncentraci extraktů (stejné množství rozpouštědla a rostlinného materiálu). Analýza ukázala, že optimalizované podmínky byly: sonikační výkon 23 W/cm2 s UIP1000hd po dobu 40 min a teplota 36°C. Optimalizované parametry ultrazvukové extrakce poskytují lepší extrakci ve srovnání s konvenční macerací z hlediska doby procesu (30 min místo 120 min), vyššího výtěžku, vyšší energetické účinnosti, lepší čistoty, vyšší bezpečnosti a lepší kvality produktu.
Doporučené zařízení:
UIP1000hd se sonotrodou BS2d34 a průtokovou celou
Reference/ výzkumná práce:
Petigny, L.; Périno-Issartier, S.; Wajsman, J.; Chemat, F. (2013): Dávková a kontinuální ultrazvukem asistovaná extrakce listů boldo (Peumus boldus Mol.). Mezinárodní žurnál molekulární vědy 14, 2013. 5750-5764.
Důležitou účinnou látkou v boldu je boldin ((S)-2,9-dihydroxy-1,10-dimethoxiaporphine), který je vedle katechinu ((2S,3R)-2-(3,4-dihydroxy-phenyl)-3,4-dihydro-1(2H)-benzopyran-3,5,7-triol) hlavní složkou alkaloidní a flavonoidní frakce listů bolda. Boldin je silné antioxidační činidlo, které podléhá peroxidativnímu poškození zprostředkovanému volnými radikály a působí jako účinný lapač hydroxylových radikálů.
Postup extrakce: Při typickém postupu extrakce byly vzorky listů bolda extrahovány 1L destilované vody za atmosférického tlaku pomocí ultrazvukového přístroje UIP1000hd v dávkovém a průtokovém režimu. Doba extrakce se pohybuje mezi 10 a 40 min, při ultrazvukové intenzitě 10 až 23 W/cm2, v teplotním rozmezí 10 až 70°C. Nejlepších výsledků bylo dosaženo za následujících podmínek: ultrazvuková intenzita 23 W/cm2 po dobu 40 min při teplotě 36°C
Výsledky: Výsledky analýzy ukazují, že vysoce výkonná sonikace zvyšuje uvolňování analytů z rostlinné matrice bolda výrazně lépe ve srovnání s konvenční metodou: stejný výtěžek byl sonikací uvolněn za 30 min, zatímco konvenční doba extrakce činila 2h.
Chemat (2013) a spolupracovníci prokázali, že ultrazvukem asistovaná extrakce zvyšuje účinnost extrakce rostlin a současně zkracuje dobu extrakce při zvýšené koncentraci extraktů (stejné množství rozpouštědla a rostlinného materiálu). Analýza ukázala, že optimalizované podmínky byly: sonikační výkon 23 W/cm2 s UIP1000hd po dobu 40 min a teplota 36°C. Optimalizované parametry ultrazvukové extrakce poskytují lepší extrakci ve srovnání s konvenční macerací z hlediska doby procesu (30 min místo 120 min), vyššího výtěžku, vyšší energetické účinnosti, lepší čistoty, vyšší bezpečnosti a lepší kvality produktu.
Doporučené zařízení:
UIP1000hd se sonotrodou BS2d34 a průtokovou celou
Reference/ výzkumná práce:
Petigny, L.; Périno-Issartier, S.; Wajsman, J.; Chemat, F. (2013): Dávková a kontinuální ultrazvukem asistovaná extrakce listů boldo (Peumus boldus Mol.). Mezinárodní žurnál molekulární vědy 14, 2013. 5750-5764.
Hovězí sérový albumin (BSA)
Ultrazvuková aplikace:
Mikroenkapsulace v kopolymeru kyseliny mléčné a glykolové za 40 s.
Doporučené zařízení:
GDmini
Reference/ výzkumná práce:
Freitas et al. (2005): Průtoková ultrazvuková emulgace kombinovaná se statickým mikromícháním pro aseptickou výrobu mikrokuliček extrakcí rozpouštědlem.
Mikroenkapsulace v kopolymeru kyseliny mléčné a glykolové za 40 s.
Doporučené zařízení:
GDmini
Reference/ výzkumná práce:
Freitas et al. (2005): Průtoková ultrazvuková emulgace kombinovaná se statickým mikromícháním pro aseptickou výrobu mikrokuliček extrakcí rozpouštědlem.
Mozkový kmen + nadledvina
Ultrazvuková aplikace:
Disperze a analýza nukleotidů; velikost vzorku: vzorky 10 mg v 10 ml kapaliny.
Doporučené zařízení:
UP50H
Disperze a analýza nukleotidů; velikost vzorku: vzorky 10 mg v 10 ml kapaliny.
Doporučené zařízení:
UP50H
Candida albicans
Sacharidy, polysacharidy a další funkční sloučeniny
Ultrazvuková aplikace:
Extrakce sacharidů, polysacharidů a dalších funkčních látek
Doporučené zařízení:
UP200St
Extrakce sacharidů, polysacharidů a dalších funkčních látek
Doporučené zařízení:
UP200St
Kyselina karnosová z rozmarýnu
Ultrazvuková aplikace:
Extrakce kyseliny karnosové, účinné látky, z rozmarýnu.
Doporučené zařízení:
UP400S
Extrakce kyseliny karnosové, účinné látky, z rozmarýnu.
Doporučené zařízení:
UP400S
Kapsaicinoidy
Ultrazvuková aplikace:
Extrakce kapsaicinoidů (kapsaicin, nordihydrokapsaicin) z chilli papriček: Kapsaicinoidy z papriček Capsicum frutescens byly získány ultrazvukovou extrakcí za následujících podmínek: rozpouštědlo: 95% (v/v) ethanol, poměr rozpouštědlo/hmotnost 10 ml/g, doba sonikační extrakce 40 min, teplota extrakce 45°C. Výtěžek extrakce: 85% kapsaicinoidů
Doporučené zařízení:
UP400S
Extrakce kapsaicinoidů (kapsaicin, nordihydrokapsaicin) z chilli papriček: Kapsaicinoidy z papriček Capsicum frutescens byly získány ultrazvukovou extrakcí za následujících podmínek: rozpouštědlo: 95% (v/v) ethanol, poměr rozpouštědlo/hmotnost 10 ml/g, doba sonikační extrakce 40 min, teplota extrakce 45°C. Výtěžek extrakce: 85% kapsaicinoidů
Doporučené zařízení:
UP400S
Karotenoidy, beta-karotenoidy
cDNA
Ultrazvuková aplikace:
Poly-A RNA byla purifikována pomocí soupravy Dynabeads mRNA purification kit (Invitrogen) podle pokynů výrobce a 30 min při 37°C ošetřena TURBO DNase (Ambion; 0,2 jednotky/1 μg RNA). Syntéza prvního a druhého řetězce proběhla podle protokolu výrobce. Přibližně 500ng dvouřetězcové cDNA bylo fragmentováno sonikací pomocí zařízení Hielscher UTR200. DNA byla rozdělena ve 2% agarózovém gelu s vysokým rozlišením a byly vyříznuty fragmenty 230–270 bp.
Doporučené zařízení:
UTR200 nebo TD_CupHorn
Reference/ výzkumná práce:
Delft, J. van; Gaj, St.; Lienhard,M.; Albrecht, M. W.; Kirpiy, A.; Brauers, K.; Claessen, S.; Lizarraga, D.; Lehrach, H.; Herwig, R.; Kleinjans, J. (2012): RNA-Seq poskytuje nové poznatky o transkriptomových odpovědích vyvolaných karcinogenem benzo[a]pyrene. Toxicological Sciences 130/2, 2012. 427–439.
Poly-A RNA byla purifikována pomocí soupravy Dynabeads mRNA purification kit (Invitrogen) podle pokynů výrobce a 30 min při 37°C ošetřena TURBO DNase (Ambion; 0,2 jednotky/1 μg RNA). Syntéza prvního a druhého řetězce proběhla podle protokolu výrobce. Přibližně 500ng dvouřetězcové cDNA bylo fragmentováno sonikací pomocí zařízení Hielscher UTR200. DNA byla rozdělena ve 2% agarózovém gelu s vysokým rozlišením a byly vyříznuty fragmenty 230–270 bp.
Doporučené zařízení:
UTR200 nebo TD_CupHorn
Reference/ výzkumná práce:
Delft, J. van; Gaj, St.; Lienhard,M.; Albrecht, M. W.; Kirpiy, A.; Brauers, K.; Claessen, S.; Lizarraga, D.; Lehrach, H.; Herwig, R.; Kleinjans, J. (2012): RNA-Seq poskytuje nové poznatky o transkriptomových odpovědích vyvolaných karcinogenem benzo[a]pyrene. Toxicological Sciences 130/2, 2012. 427–439.
Caryophanon latum
Ultrazvuková aplikace:
Extrakce glukosaminu, kyseliny muramové, alaninu, kyseliny glutamové a lysinu z caryophanon datum.
Doporučené zařízení:
UP100H
Extrakce glukosaminu, kyseliny muramové, alaninu, kyseliny glutamové a lysinu z caryophanon datum.
Doporučené zařízení:
UP100H
Celulóza
Ultrazvuková aplikace:
Homogenizace / příprava izotopově homogenní celulózy.
Doporučené zařízení:
UP200S; v ledové lázni
Reference/ výzkumná práce:
Laumer et al. (2009): Nový přístup k homogenizaci celulózy pro použití mikromnožství pro analýzy stabilních izotopů.
Homogenizace / příprava izotopově homogenní celulózy.
Doporučené zařízení:
UP200S; v ledové lázni
Reference/ výzkumná práce:
Laumer et al. (2009): Nový přístup k homogenizaci celulózy pro použití mikromnožství pro analýzy stabilních izotopů.
Nanokrystaly celulózy (CNC) připravené z CNC eukalyptové celulózy
Ultrazvuková aplikace:
Nanokrystaly celulózy (CNC) připravené z eukalyptové celulózy CNCs byly modifikovány reakcí s methyladipoylchloridem, CNCm, nebo se směsí kyseliny octové a sírové, CNCa. Za tímto účelem byly lyofilizované CNCs, CNCm a CNCa redispergovány v čistých rozpouštědlech (EA, THF nebo DMF) při 0,1 wt% magnetickým mícháním přes noc při (24 ± 1) C, a následně sonikovány po dobu 20 min v sonikační lázni s použitím UP100H Hielscher Ultrasonics (Německo), vybaveného sonotrodou 130 W/cm2, při 24 ± 1 degC. Poté byl k disperzi CNC přidán CAB tak, aby výsledná koncentrace polymeru byla 0,9 wt%.
Doporučené zařízení:
UP100H; při 24 degC po dobu 20 min.
Reference/ výzkumná práce:
Blachechen, L. S. a kol. (2013): Souhra koloidní stability nanokrystalů celulózy a jejich dispergovatelnost v matrici acetátu butyrátu celulózy. Celulóza 2013.
Nanokrystaly celulózy (CNC) připravené z eukalyptové celulózy CNCs byly modifikovány reakcí s methyladipoylchloridem, CNCm, nebo se směsí kyseliny octové a sírové, CNCa. Za tímto účelem byly lyofilizované CNCs, CNCm a CNCa redispergovány v čistých rozpouštědlech (EA, THF nebo DMF) při 0,1 wt% magnetickým mícháním přes noc při (24 ± 1) C, a následně sonikovány po dobu 20 min v sonikační lázni s použitím UP100H Hielscher Ultrasonics (Německo), vybaveného sonotrodou 130 W/cm2, při 24 ± 1 degC. Poté byl k disperzi CNC přidán CAB tak, aby výsledná koncentrace polymeru byla 0,9 wt%.
Doporučené zařízení:
UP100H; při 24 degC po dobu 20 min.
Reference/ výzkumná práce:
Blachechen, L. S. a kol. (2013): Souhra koloidní stability nanokrystalů celulózy a jejich dispergovatelnost v matrici acetátu butyrátu celulózy. Celulóza 2013.
Celulóza z bagasy cukrové třtiny
Analýza ChIP
Ultrazvuková aplikace:
Ultrasonikace se používá k lyzi buněk za účelem uvolnění chromatinu. K fragmentaci chromatinu se používá mírná (pulzní) sonikace. Ultrazvuk navíc urychluje vazbu protilátek na cílové proteiny, a tím zkracuje dobu imunoprecipitace.
Doporučené zařízení:
UP100H
Reference/ výzkumná práce:
Basselet, P. a kol. (2008): Zpracování vzorků pro analýzu enterohemoragické Escherichia coli (EHEC) založenou na čipech DNA.
Lauri, A. (2005): Molekulární analýza vývoje okvětních lístků pomocí X-ChIP a dvouhybridní technologie. Disertační práce, Univerzita v Kolíně nad Rýnem, 2005.
Ultrasonikace se používá k lyzi buněk za účelem uvolnění chromatinu. K fragmentaci chromatinu se používá mírná (pulzní) sonikace. Ultrazvuk navíc urychluje vazbu protilátek na cílové proteiny, a tím zkracuje dobu imunoprecipitace.
Doporučené zařízení:
UP100H
Reference/ výzkumná práce:
Basselet, P. a kol. (2008): Zpracování vzorků pro analýzu enterohemoragické Escherichia coli (EHEC) založenou na čipech DNA.
Lauri, A. (2005): Molekulární analýza vývoje okvětních lístků pomocí X-ChIP a dvouhybridní technologie. Disertační práce, Univerzita v Kolíně nad Rýnem, 2005.
Chromatin
Ultrazvuková aplikace:
Střihání chromatinu
Doporučené zařízení:
UP400S; při 30% amplitudě a cyklu 0,5; na ledu.
Reference/ výzkumná práce:
Oh et al. (2003): Acetyl-CoA Carboxylase Gene Is Regulated by Sterol Regulatory Element-binding Protein-1 in Liver.
Střihání chromatinu
Doporučené zařízení:
UP400S; při 30% amplitudě a cyklu 0,5; na ledu.
Reference/ výzkumná práce:
Oh et al. (2003): Acetyl-CoA Carboxylase Gene Is Regulated by Sterol Regulatory Element-binding Protein-1 in Liver.
Extrakce chromatinu
Ultrazvuková aplikace:
Lyzát buněk MEL DS19 byl sonikován v 10 cyklech po 20 s při 70% maximálního výkonu pomocí 200W ultrazvukového procesoru Hielscher UP200H
Doporučené zařízení:
UP200H; 70% maximálního výkonu; pulzní režim: 10 cyklů po 20 s.
Reference/ výzkumná práce:
Kang, H. Ch. a kol. (2010): PIAS1 reguluje lokalizaci CP2c a tvorbu aktivního promotorového komplexu v expresi a-globinu specifického pro erytroidní buňky. Nukleové kyseliny Res. 38/ 16, 2010. str. 5456–5471.
Lyzát buněk MEL DS19 byl sonikován v 10 cyklech po 20 s při 70% maximálního výkonu pomocí 200W ultrazvukového procesoru Hielscher UP200H
Doporučené zařízení:
UP200H; 70% maximálního výkonu; pulzní režim: 10 cyklů po 20 s.
Reference/ výzkumná práce:
Kang, H. Ch. a kol. (2010): PIAS1 reguluje lokalizaci CP2c a tvorbu aktivního promotorového komplexu v expresi a-globinu specifického pro erytroidní buňky. Nukleové kyseliny Res. 38/ 16, 2010. str. 5456–5471.
Chromatografie
Ultrazvuková aplikace:
Sonikace adsorbentu v rozpouštědle odstraní aglomeráty během několika sekund a připraví homogenní, snadno plnitelnou kolonu. Relevantní pro přípravu adsorbentu (např. silikagelu) před sloupcovou chromatografií.
Doporučené zařízení:
UP400S
Sonikace adsorbentu v rozpouštědle odstraní aglomeráty během několika sekund a připraví homogenní, snadno plnitelnou kolonu. Relevantní pro přípravu adsorbentu (např. silikagelu) před sloupcovou chromatografií.
Doporučené zařízení:
UP400S
Perloočky
Ultrazvuková aplikace:
Dezintegrace buněk mezozooplanktonu
Doporučené zařízení:
UP2000hd s průtokovou celou
Reference/ výzkumná práce:
Viitaslo et al. (2005): Ozone, Ultraviolet Light, Ultrasound and Hydrogen Peroxide As Ballast Water Treatments – Experiments with Mesozooplankton In Low Saline- Brackish Water.
Dezintegrace buněk mezozooplanktonu
Doporučené zařízení:
UP2000hd s průtokovou celou
Reference/ výzkumná práce:
Viitaslo et al. (2005): Ozone, Ultraviolet Light, Ultrasound and Hydrogen Peroxide As Ballast Water Treatments – Experiments with Mesozooplankton In Low Saline- Brackish Water.
Dospělci a kopepoditová stadia klanonožců
Ultrazvuková aplikace:
Dezintegrace buněk mezozooplanktonu: sonikací za následujících podmínek čtyř průtoků (200, 400, 520 a 800 lh-1) a čtyř amplitud (25, 50, 75 a 100%) bylo dosaženo míry usmrcení mezi 87 a 99%.
Doporučené zařízení:
UIP2000hd s průtokovou celou
Reference/ výzkumná práce:
Viitaslo et al. (2005): Ozone, Ultraviolet Light, Ultrasound and Hydrogen Peroxide As Ballast Water Treatments – Experiments with Mesozooplankton In Low Saline- Brackish Water.
Dezintegrace buněk mezozooplanktonu: sonikací za následujících podmínek čtyř průtoků (200, 400, 520 a 800 lh-1) a čtyř amplitud (25, 50, 75 a 100%) bylo dosaženo míry usmrcení mezi 87 a 99%.
Doporučené zařízení:
UIP2000hd s průtokovou celou
Reference/ výzkumná práce:
Viitaslo et al. (2005): Ozone, Ultraviolet Light, Ultrasound and Hydrogen Peroxide As Ballast Water Treatments – Experiments with Mesozooplankton In Low Saline- Brackish Water.
Naupliová stadia klanonožců
Ultrazvuková aplikace:
Dezintegrace buněk mezozooplanktonu: sonikací za následujících podmínek čtyř průtoků (200, 400, 520 a 800 lh-1) a čtyř amplitud (25, 50, 75 a 100%) bylo dosaženo míry usmrcení mezi 87 a 99%.
Doporučené zařízení:
UIP2000hd s průtokovou celou
Reference/ výzkumná práce:
Viitaslo et al. (2005): Ozone, Ultraviolet Light, Ultrasound and Hydrogen Peroxide As Ballast Water Treatments – Experiments with Mesozooplankton In Low Saline- Brackish Water.
Dezintegrace buněk mezozooplanktonu: sonikací za následujících podmínek čtyř průtoků (200, 400, 520 a 800 lh-1) a čtyř amplitud (25, 50, 75 a 100%) bylo dosaženo míry usmrcení mezi 87 a 99%.
Doporučené zařízení:
UIP2000hd s průtokovou celou
Reference/ výzkumná práce:
Viitaslo et al. (2005): Ozone, Ultraviolet Light, Ultrasound and Hydrogen Peroxide As Ballast Water Treatments – Experiments with Mesozooplankton In Low Saline- Brackish Water.
Buňky COS7
Ultrazvuková aplikace:
Lyze ve 400 μl pufru
Doporučené zařízení:
UP200S; 7 cyklů
Reference/ výzkumná práce:
Zaim (2005): Analyse von Nesprin-2 Defizienten Mäusen.
Lyze ve 400 μl pufru
Doporučené zařízení:
UP200S; 7 cyklů
Reference/ výzkumná práce:
Zaim (2005): Analyse von Nesprin-2 Defizienten Mäusen.
Cryptosporidium parvum
Ultrazvuková aplikace:
Ultrazvuková inaktivace Cryptosporidium parvaum (prvoci) ve vodě.
Doporučené zařízení:
UP400S
Reference/ výzkumná práce:
Tsukamoto, I.; Yim, B.; Stavarache, C. E.; Furuta, M.; Hashiba, K.; Maeda, Y. (2004): Inaktivace Saccharomyces cerevisiae ultrazvukovým ozářením. Ultrazvuková sonochemie 11/2004. str. 61–65.
Ultrazvuková inaktivace Cryptosporidium parvaum (prvoci) ve vodě.
Doporučené zařízení:
UP400S
Reference/ výzkumná práce:
Tsukamoto, I.; Yim, B.; Stavarache, C. E.; Furuta, M.; Hashiba, K.; Maeda, Y. (2004): Inaktivace Saccharomyces cerevisiae ultrazvukovým ozářením. Ultrazvuková sonochemie 11/2004. str. 61–65.
Kubozomy
Ultrazvuková aplikace:
Kubozomy – buď prázdné, nebo dopované molekulami fluoroforu – byly připraveny dispergováním příslušného množství monooleinu v roztoku Pluronic F108 pomocí ultrazvukového přístroje UP100H. Pro získání fluorescenčních kubozomů byl fluorofor před dispergováním v Pluronic F108 dispergován v roztaveném monooleinu šetrnou sonikací. Stejný postup byl použit, když byly fluorescenční kubozomy navíc naplněny kvercetinem.
Vzorek: velikost vzorku: 4 mL – přibližně 96,4 wt% vody, 3,3 wt % monooleinu, 0,3 wt% Pluronic F108. Procentuální podíl fluoroforu byl 2,5 × 10−3 a 2,8 × 10−3 wt%. Množství přidaného kvercetinu: 6,4 × 10−6 wt%.
Sonikace: UP100H, amplituda 90%, pulzní cyklus 0,9, po dobu 10 min.
Doporučené zařízení:
UP100H
Reference/ výzkumná práce:
Murgia, S.; Bonacchi,S.; Falchi, A. M.; Lampis, S.; Lippolis, V.; Meli, V.; Monduzzi, M.; Prodi, L.; Schmidt, J.; Talmon, Y.; Caltagirone, C. (2013): Fluorescenční kubozomy s léčivy: Všestranné nanočástice pro potenciální teranotické aplikace. Langmuir 29, 2013. 6673-6679.
Kubozomy – buď prázdné, nebo dopované molekulami fluoroforu – byly připraveny dispergováním příslušného množství monooleinu v roztoku Pluronic F108 pomocí ultrazvukového přístroje UP100H. Pro získání fluorescenčních kubozomů byl fluorofor před dispergováním v Pluronic F108 dispergován v roztaveném monooleinu šetrnou sonikací. Stejný postup byl použit, když byly fluorescenční kubozomy navíc naplněny kvercetinem.
Vzorek: velikost vzorku: 4 mL – přibližně 96,4 wt% vody, 3,3 wt % monooleinu, 0,3 wt% Pluronic F108. Procentuální podíl fluoroforu byl 2,5 × 10−3 a 2,8 × 10−3 wt%. Množství přidaného kvercetinu: 6,4 × 10−6 wt%.
Sonikace: UP100H, amplituda 90%, pulzní cyklus 0,9, po dobu 10 min.
Doporučené zařízení:
UP100H
Reference/ výzkumná práce:
Murgia, S.; Bonacchi,S.; Falchi, A. M.; Lampis, S.; Lippolis, V.; Meli, V.; Monduzzi, M.; Prodi, L.; Schmidt, J.; Talmon, Y.; Caltagirone, C. (2013): Fluorescenční kubozomy s léčivy: Všestranné nanočástice pro potenciální teranotické aplikace. Langmuir 29, 2013. 6673-6679.
Dekkera bruxellensis
Ultrazvuková aplikace:
Ultrazvuková inaktivace Dekkera bruxellensis ve vodě
Doporučené zařízení:
UIP1500hd
Reference/ výzkumná práce:
Borthwick, K. A. J.; Coakley, W. T.; McDonnell, M. B.; Nowotny, H.; Beneš, E.; Grfschl, . M (2005): Vývoj nového kompaktního sonikátoru pro narušení buněk. J. Mikrobio. Pervitin. 60/2005. s. 207–216. / Lörincz, A. (2004): Ultrazvukové buněčné narušení kvasinek v suspenzích na bázi vody. Biosys. Angl. 89/ 2004. str. 297–308. / Tsukamoto, I.; Yim, B.; Stavarache, C. E.; Furuta, M.; Hashiba, K.; Maeda, Y. (2004): Inaktivace Saccharomyces cerevisiae ultrazvukovým ozářením. Ultrazvuk. Sonochem. 11/2004. str. 61–65.
Ultrazvuková inaktivace Dekkera bruxellensis ve vodě
Doporučené zařízení:
UIP1500hd
Reference/ výzkumná práce:
Borthwick, K. A. J.; Coakley, W. T.; McDonnell, M. B.; Nowotny, H.; Beneš, E.; Grfschl, . M (2005): Vývoj nového kompaktního sonikátoru pro narušení buněk. J. Mikrobio. Pervitin. 60/2005. s. 207–216. / Lörincz, A. (2004): Ultrazvukové buněčné narušení kvasinek v suspenzích na bázi vody. Biosys. Angl. 89/ 2004. str. 297–308. / Tsukamoto, I.; Yim, B.; Stavarache, C. E.; Furuta, M.; Hashiba, K.; Maeda, Y. (2004): Inaktivace Saccharomyces cerevisiae ultrazvukovým ozářením. Ultrazvuk. Sonochem. 11/2004. str. 61–65.
Dekkera/Brettanomyces bruxellensis
Ultrazvuková aplikace:
Inaktivace za 90–120 s.
Doporučené zařízení:
UIP1500hd
Reference/ výzkumná práce:
viz výše
Inaktivace za 90–120 s.
Doporučené zařízení:
UIP1500hd
Reference/ výzkumná práce:
viz výše
DNA
Ultrazvuková aplikace:
Fragmentace DNA: 2 min sonikace 100μL pomocí UP100H nebo 4 min sonikace 100μL pomocí UTR200.
Doporučené zařízení:
UP100H, UTR200 nebo VialTweeter
Reference/ výzkumná práce:
Larguinho M. et al. (2010): Vývoj rychlé a účinné strategie fragmentace DNA založené na ultrazvuku.
Fragmentace DNA: 2 min sonikace 100μL pomocí UP100H nebo 4 min sonikace 100μL pomocí UTR200.
Doporučené zařízení:
UP100H, UTR200 nebo VialTweeter
Reference/ výzkumná práce:
Larguinho M. et al. (2010): Vývoj rychlé a účinné strategie fragmentace DNA založené na ultrazvuku.
Buňky S2 Drosophila melanogaster
Ultrazvuková aplikace:
Extrakce buněčných proteinů z buněk Drosophila melanogaster S2: Zmrazené buňky S2 (1,56108) byly lyzovány v 1 mL ledově chladného homogenizačního pufru (100 mM Tris-HCl pH 7,5, 1% SDS) a ponechány 10 min na ledu. Lyze buněk byla dokončena ultrasonikací na ledu (6615 impulzů, pulz 0,5 s; intenzita 75%) ultrazvukovým procesorem Hielscher UP200S.
Doporučené zařízení:
UP200S (200W), intenzita 75%, pulzní režim: 6615 impulzů, pulz 0,5 s.
Reference/ výzkumná práce:
Schwientek, T. a kol. (2007): Sériový lektinový přístup k O-glykoproteomu mucinového typu buněk Drosophila melanogaster S2. Proteomika 7, 2007. str. 3264-3277.
Extrakce buněčných proteinů z buněk Drosophila melanogaster S2: Zmrazené buňky S2 (1,56108) byly lyzovány v 1 mL ledově chladného homogenizačního pufru (100 mM Tris-HCl pH 7,5, 1% SDS) a ponechány 10 min na ledu. Lyze buněk byla dokončena ultrasonikací na ledu (6615 impulzů, pulz 0,5 s; intenzita 75%) ultrazvukovým procesorem Hielscher UP200S.
Doporučené zařízení:
UP200S (200W), intenzita 75%, pulzní režim: 6615 impulzů, pulz 0,5 s.
Reference/ výzkumná práce:
Schwientek, T. a kol. (2007): Sériový lektinový přístup k O-glykoproteomu mucinového typu buněk Drosophila melanogaster S2. Proteomika 7, 2007. str. 3264-3277.
Deriváty E. coli
Ultrazvuková aplikace:
Dezintegrace buněk derivátů E. coli: Zmrazené pelety odpovídající objemu vzorku Vculture = 4/OD mL byly resuspendovány v 580 μL 10 mM pufru fosforečnanu draselného pH 7, 1 mM EDTA. Bylo přidáno 20 μL lysozymu (koncentrace 1 g L-1) a buněčná suspenze byla inkubována na ledu přibližně 30 min. Poté byly buňky dezintegrovány kontinuální ultrasonikací ultrazvukovým přístrojem (UP 200S Ultraschallprozessor, Dr. Hielscher GmbH, Teltow) na ledu při amplitudě 50 % po dobu 20 s. Rozpustné a nerozpustné buněčné frakce byly odděleny centrifugací při 13 000 rpm po dobu 20 min. Nerozpustné proteiny byly dvakrát promyty 10 mM pufrem fosforečnanu draselného pH 7, 1 mM EDTA a uchovávány při –20°C.
Doporučené zařízení:
UP200S s 50% amplitudou
Reference/ výzkumná práce:
HA (2005): Optimalizace produkce aktivních rekombinantních proteinů, zkoumání vlivu malých proteinů Escherichia coli, IbpA a IbpB na in vivo reaktivaci inkluzních tělísek.
Dezintegrace buněk derivátů E. coli: Zmrazené pelety odpovídající objemu vzorku Vculture = 4/OD mL byly resuspendovány v 580 μL 10 mM pufru fosforečnanu draselného pH 7, 1 mM EDTA. Bylo přidáno 20 μL lysozymu (koncentrace 1 g L-1) a buněčná suspenze byla inkubována na ledu přibližně 30 min. Poté byly buňky dezintegrovány kontinuální ultrasonikací ultrazvukovým přístrojem (UP 200S Ultraschallprozessor, Dr. Hielscher GmbH, Teltow) na ledu při amplitudě 50 % po dobu 20 s. Rozpustné a nerozpustné buněčné frakce byly odděleny centrifugací při 13 000 rpm po dobu 20 min. Nerozpustné proteiny byly dvakrát promyty 10 mM pufrem fosforečnanu draselného pH 7, 1 mM EDTA a uchovávány při –20°C.
Doporučené zařízení:
UP200S s 50% amplitudou
Reference/ výzkumná práce:
HA (2005): Optimalizace produkce aktivních rekombinantních proteinů, zkoumání vlivu malých proteinů Escherichia coli, IbpA a IbpB na in vivo reaktivaci inkluzních tělísek.
Antigen Echinococcus granulosus
Ultrazvuková aplikace:
Lyze a dezintegrace buněk: Homogenizovaný vzorek rozpustného proteinu dospělých E. granulosus, připravený zmrazováním a rozmrazováním v kapalném dusíku a při 42◦C, byl sonikován při 110V, 170W po dobu 3×15 s na ledu. Poté byl vzorek centrifugován 15min při 10 000g. Koncentrace proteinu byla měřena Bradfordovou metodou a vzorek byl uchováván při -20◦C.
Doporučené zařízení:
UP200S; 170W, chlazení na ledu; 3 x 15 s.
Reference/ výzkumná práce:
Tabar et al. (2010): Sérodiagnostika hydatidózy ovcí s Hydatidovou tekutinou, Protoscolexem a celotělovým antigenem Echinococcus granulosus.
Lyze a dezintegrace buněk: Homogenizovaný vzorek rozpustného proteinu dospělých E. granulosus, připravený zmrazováním a rozmrazováním v kapalném dusíku a při 42◦C, byl sonikován při 110V, 170W po dobu 3×15 s na ledu. Poté byl vzorek centrifugován 15min při 10 000g. Koncentrace proteinu byla měřena Bradfordovou metodou a vzorek byl uchováván při -20◦C.
Doporučené zařízení:
UP200S; 170W, chlazení na ledu; 3 x 15 s.
Reference/ výzkumná práce:
Tabar et al. (2010): Sérodiagnostika hydatidózy ovcí s Hydatidovou tekutinou, Protoscolexem a celotělovým antigenem Echinococcus granulosus.
Escherichia coli Gr-
Ultrazvuková aplikace:
Ultrazvuková inaktivace Escherchia coli Gr- v mléce a džusech.
Doporučené zařízení:
UP100H
Reference/ výzkumná práce:
Zenker, M.; Heinz, V.; Knorr, D. (2003): Aplikace ultrazvukem asistovaného tepelného zpracování pro konzervaci a zachování kvality tekutých potravin. J Food Prot 66/2003. s. 1642–1649.
Ultrazvuková inaktivace Escherchia coli Gr- v mléce a džusech.
Doporučené zařízení:
UP100H
Reference/ výzkumná práce:
Zenker, M.; Heinz, V.; Knorr, D. (2003): Aplikace ultrazvukem asistovaného tepelného zpracování pro konzervaci a zachování kvality tekutých potravin. J Food Prot 66/2003. s. 1642–1649.
Escherichia coli Gr- ve fyziologickém roztoku
Ultrazvuková aplikace:
Ultrazvuková inaktivace Escherchia coli Gr- ve fyziologickém roztoku.
Doporučené zařízení:
UP100H
Reference/ výzkumná práce:
Kachna, H.; Zedník, T. J.; Phull, S. S.; Lorimer, J. P. (2004): Vliv sonikace na mikrobiální dezinfekci pomocí chlornanu. Ultrazvuk. Sonochem. 11/ 2004. str. 173–176.
Ultrazvuková inaktivace Escherchia coli Gr- ve fyziologickém roztoku.
Doporučené zařízení:
UP100H
Reference/ výzkumná práce:
Kachna, H.; Zedník, T. J.; Phull, S. S.; Lorimer, J. P. (2004): Vliv sonikace na mikrobiální dezinfekci pomocí chlornanu. Ultrazvuk. Sonochem. 11/ 2004. str. 173–176.
Escherichia coli Gr- ve vodě
Ultrazvuková aplikace:
Ultrazvuková inaktivace Escherchia coli Gr- ve vodě.
Doporučené zařízení:
UP100H
Reference/ výzkumná práce:
Furuta, M.; Jamaguči, M.; Tsukamoto, T.; Yim, B.; Stavarache, C. E.; Hasiba, K.; Maeda, Y. (2004): Inaktivace Escherichia coli ultrazvukovým ozářením. Ultrazvuk. Sonochem. 11/2004. str. 57–60.
Ultrazvuková inaktivace Escherchia coli Gr- ve vodě.
Doporučené zařízení:
UP100H
Reference/ výzkumná práce:
Furuta, M.; Jamaguči, M.; Tsukamoto, T.; Yim, B.; Stavarache, C. E.; Hasiba, K.; Maeda, Y. (2004): Inaktivace Escherichia coli ultrazvukovým ozářením. Ultrazvuk. Sonochem. 11/2004. str. 57–60.
Glaukom, terč zrakového nervu
Ultrazvuková aplikace:
Fragmentace RNA z hlav zrakového nervu (z očí potkanů): Hlava zrakového nervu (ONH) byla zmrazena na suchém ledu a před extrakcí uchovávána při 80°C. RNA byla izolována sonikací zmrazených hlav zrakového nervu v extrakčním pufru soupravy pomocí sondy MS 0.5 (UP50H) a poté podle pokynů dodaných se soupravou Arcturus, včetně ošetření DNázou k odstranění veškeré DNA. Purifikovaná RNA byla kvantifikována.
Doporučené zařízení:
UP50H se sondou MS0.5
Reference/ výzkumná práce:
Johnson et al. (2007): Global Changes in Optic Nerve Head Gene Expression after Exposure to Elevated Intraocular Pressure in a Rat Glaucoma Model.
Fragmentace RNA z hlav zrakového nervu (z očí potkanů): Hlava zrakového nervu (ONH) byla zmrazena na suchém ledu a před extrakcí uchovávána při 80°C. RNA byla izolována sonikací zmrazených hlav zrakového nervu v extrakčním pufru soupravy pomocí sondy MS 0.5 (UP50H) a poté podle pokynů dodaných se soupravou Arcturus, včetně ošetření DNázou k odstranění veškeré DNA. Purifikovaná RNA byla kvantifikována.
Doporučené zařízení:
UP50H se sondou MS0.5
Reference/ výzkumná práce:
Johnson et al. (2007): Global Changes in Optic Nerve Head Gene Expression after Exposure to Elevated Intraocular Pressure in a Rat Glaucoma Model.
Glykosaminoglykan chondroitinsulfát (CS)
Ultrazvuková aplikace:
Stanovení CS testem s dimethylmethylenovou modří
Resuspendace buněk: Pelety CS v mikrocentrifugačních zkumavkách byly resuspendovány v 0,5 ml roztoku papainu 0,1mg/ml v Hanksově vyváženém solném roztoku (HBSS) pomocí pulzů ultrazvukové sonotrody (UP 100H, Hielscher Ultrasonics GmbH, Německo) při cyklu 1 a 100 % amplitudě po dobu 3 s. Poté probíhalo štěpení při 60 °C po dobu 24 h.
Pro enzymovou imunoanalýzu (ELISA) byly buňky poté suspendovány v destilované a deionizované vodě v koncentraci 106 buněk/ml a uchovávány přes noc v mrazáku při –70°C, aby se usnadnila lyze buněk. Buňky pak byly homogenizovány ultrasonikací po dobu 40 s pomocí ultrazvukového homogenizátoru tkání Hielscher UP100H.
Doporučené zařízení:
UP100H
Reference/ výzkumná práce:
Vandrovcová et al. (2011): Vliv kolagenových a chondroitin sulfátových (CS) povlaků na poly- (laktid-ko-glykolid) (PLGA) na buňkách podobných osteoblastům MG 63. Physiol. Res. 60; 2011. 797-813.
Stanovení CS testem s dimethylmethylenovou modří
Resuspendace buněk: Pelety CS v mikrocentrifugačních zkumavkách byly resuspendovány v 0,5 ml roztoku papainu 0,1mg/ml v Hanksově vyváženém solném roztoku (HBSS) pomocí pulzů ultrazvukové sonotrody (UP 100H, Hielscher Ultrasonics GmbH, Německo) při cyklu 1 a 100 % amplitudě po dobu 3 s. Poté probíhalo štěpení při 60 °C po dobu 24 h.
Pro enzymovou imunoanalýzu (ELISA) byly buňky poté suspendovány v destilované a deionizované vodě v koncentraci 106 buněk/ml a uchovávány přes noc v mrazáku při –70°C, aby se usnadnila lyze buněk. Buňky pak byly homogenizovány ultrasonikací po dobu 40 s pomocí ultrazvukového homogenizátoru tkání Hielscher UP100H.
Doporučené zařízení:
UP100H
Reference/ výzkumná práce:
Vandrovcová et al. (2011): Vliv kolagenových a chondroitin sulfátových (CS) povlaků na poly- (laktid-ko-glykolid) (PLGA) na buňkách podobných osteoblastům MG 63. Physiol. Res. 60; 2011. 797-813.
Buňky HaCaT
Ultrazvuková aplikace:
Lyze buněk HaCaT pro imunoprecipitaci chromatinu (ChIP): Buňky HaCaT byly fixovány 1% formaldehydem po dobu 10 minut při 37uC. Fixované buňky byly lyzovány v pufru RIPA a sonikovány na ledu 100W ultrazvukovým zařízením při amplitudě = 1 a pracovním cyklu = 100% ve 12 jednominutových (12 x 1 min) pulzech.
Doporučené zařízení:
UP100H; po dobu 12 min na ledu,
Reference/ výzkumná práce:
Zhang et al. (2007): Basonuclin reguluje podmnožinu genů ribozomální RNA v buňkách HaCaT.
Lyze buněk HaCaT pro imunoprecipitaci chromatinu (ChIP): Buňky HaCaT byly fixovány 1% formaldehydem po dobu 10 minut při 37uC. Fixované buňky byly lyzovány v pufru RIPA a sonikovány na ledu 100W ultrazvukovým zařízením při amplitudě = 1 a pracovním cyklu = 100% ve 12 jednominutových (12 x 1 min) pulzech.
Doporučené zařízení:
UP100H; po dobu 12 min na ledu,
Reference/ výzkumná práce:
Zhang et al. (2007): Basonuclin reguluje podmnožinu genů ribozomální RNA v buňkách HaCaT.
Heparin: depolymerizace heparinu
Ultrazvuková aplikace:
Ultrazvuková metoda umožňuje vyrábět nízkomolekulární heparin (LMWH). Heparin přitom podléhá radikálové depolymeraci katalyzované peroxidem vodíku. Reakce je velmi rychlá a trvá méně než 1 hodinu, přičemž fyzikálně-chemický depolymerační proces je založen na mírných reakčních podmínkách, nevyžaduje žádná agresivní ani toxická činidla a poskytuje produkt bez chemických artefaktů. Ultrazvukový proces je tak velmi vhodný pro velkovýrobu LMWH, ale také analogů vyráběných z přírodních sulfatovaných polysacharidů.
Ultrazvukový postup:
Pro fyzikálně-chemickou depolymeraci nefrakcionovaného heparinu ultrazvukem asistovanou radikálovou depolymerací byl heparin rozpuštěn ve vodě na výslednou koncentraci 25 mg/mL (5 mL). Reakční směs byla sonikována pomocí ultrazvukového přístroje se sondou UP50H. Ultrazvukový přístroj byl vybaven sondou (mikrohrot MS3) o průměru 3mm, která poskytovala amplitudu 180μm. Procesor generoval mechanické podélné vibrace o frekvenci 30 kHz, které vznikaly elektrickou excitací. Reakční směs byla udržována při 60°C v reaktoru Radleys® a ultrazvukové vlny byly aplikovány jako pulz 0,5 s, aby se zabránilo zahřívání směsi. Před zahájením reakce současným přidáním peroxidu vodíku a aplikací ultrazvukových vln byl z roztoku odebrán alikvot v čase nula (250μl). Peroxid vodíku byl přidán tak, aby se dosáhlo výsledného poměru peroxid vodíku/heparin (w/w) 0,15 (3,75 mg/mL).
Doporučené zařízení:
UP50H se sonotrodou MS3
Reference/ výzkumná práce:
Achour, Oussama; Bridiau, Nicolas; Godhbani, Azza; Le Joubioux, Florian; Bordenave Juchereau, Stephanie; Sannier, Fredéric; Piot, Jean-Marie; Fruitier Arnaudin, Ingrid; Maugard, Thierry (2013): Ultrazvukem asistovaná příprava nízkomolekulárního heparinu (LMWH) s antikoagulační aktivitou. Carbohydrate Polymers 97; 2013. 684–689.
Ultrazvuková metoda umožňuje vyrábět nízkomolekulární heparin (LMWH). Heparin přitom podléhá radikálové depolymeraci katalyzované peroxidem vodíku. Reakce je velmi rychlá a trvá méně než 1 hodinu, přičemž fyzikálně-chemický depolymerační proces je založen na mírných reakčních podmínkách, nevyžaduje žádná agresivní ani toxická činidla a poskytuje produkt bez chemických artefaktů. Ultrazvukový proces je tak velmi vhodný pro velkovýrobu LMWH, ale také analogů vyráběných z přírodních sulfatovaných polysacharidů.
Ultrazvukový postup:
Pro fyzikálně-chemickou depolymeraci nefrakcionovaného heparinu ultrazvukem asistovanou radikálovou depolymerací byl heparin rozpuštěn ve vodě na výslednou koncentraci 25 mg/mL (5 mL). Reakční směs byla sonikována pomocí ultrazvukového přístroje se sondou UP50H. Ultrazvukový přístroj byl vybaven sondou (mikrohrot MS3) o průměru 3mm, která poskytovala amplitudu 180μm. Procesor generoval mechanické podélné vibrace o frekvenci 30 kHz, které vznikaly elektrickou excitací. Reakční směs byla udržována při 60°C v reaktoru Radleys® a ultrazvukové vlny byly aplikovány jako pulz 0,5 s, aby se zabránilo zahřívání směsi. Před zahájením reakce současným přidáním peroxidu vodíku a aplikací ultrazvukových vln byl z roztoku odebrán alikvot v čase nula (250μl). Peroxid vodíku byl přidán tak, aby se dosáhlo výsledného poměru peroxid vodíku/heparin (w/w) 0,15 (3,75 mg/mL).
Doporučené zařízení:
UP50H se sonotrodou MS3
Reference/ výzkumná práce:
Achour, Oussama; Bridiau, Nicolas; Godhbani, Azza; Le Joubioux, Florian; Bordenave Juchereau, Stephanie; Sannier, Fredéric; Piot, Jean-Marie; Fruitier Arnaudin, Ingrid; Maugard, Thierry (2013): Ultrazvukem asistovaná příprava nízkomolekulárního heparinu (LMWH) s antikoagulační aktivitou. Carbohydrate Polymers 97; 2013. 684–689.
Chmel
Ultrazvuková aplikace:
Extrakce účinných látek / bylinných extraktů ve vodě a ethanolu.
Doporučené zařízení:
UP400S
Extrakce účinných látek / bylinných extraktů ve vodě a ethanolu.
Doporučené zařízení:
UP400S
Lactobacillus (lýza / izolace DNA různých kmenů rodu Lactobacillus)
Ultrazvuková aplikace:
Kmeny Lactobacillus: L. pontis, L. sanfranciscensis, L. farciminis, L. panis, L. oris, L. vaginalis a L. reuteri, L. sp.
Postup: Pro izolaci DNA z jednotlivých kolonií byl vyvinut protokol ultrazvukové lyze. Jedna kolonie (o průměru 2 až 3 mm) byla suspendována ve 100μl lyzačního pufru (20 mM EDTA, 10 mM Tris [pH 7,9], 1% Triton X-100, 500 mM guanidin-HCl, 250 mM NaCl). Buňky byly lyzovány ultrasonikací po dobu 1 min pomocí ultrazvukového přístroje se sondou UP50H. Po přidání 150μl studeného ethanolu (-20°C) byla směs centrifugována přes centrifugační kolonku soupravy QIAamp tissue kit a nakonec eluována 60μl pufru (10 mM Tris [pH 7,5]).
Aby byl k dispozici nástroj pro rychlou a spolehlivou identifikaci jednotlivých čistých kultur, byl test PCR zkombinován s rychlým postupem izolace DNA. Časově náročné enzymatické lyzační postupy a proměnlivá citlivost bakterií vůči lysozymu byly překonány ultrazvukovým ošetřením buněk s následnou purifikací a zakoncentrováním vazbou DNA na matrici z oxidu křemičitého. Buněčný materiál jedné kolonie se ukázal jako dostatečný pro PCR.
Doporučené zařízení:
UP50H
Reference/ výzkumná práce:
Müller, M. R. A. (2000): Charakterizace mikrobiálního ekosystému fermentace obilovin pomocí molekulárně biologických metod. Disertační práce, Univerzita v Kolíně nad Rýnem, 2000.
Kmeny Lactobacillus: L. pontis, L. sanfranciscensis, L. farciminis, L. panis, L. oris, L. vaginalis a L. reuteri, L. sp.
Postup: Pro izolaci DNA z jednotlivých kolonií byl vyvinut protokol ultrazvukové lyze. Jedna kolonie (o průměru 2 až 3 mm) byla suspendována ve 100μl lyzačního pufru (20 mM EDTA, 10 mM Tris [pH 7,9], 1% Triton X-100, 500 mM guanidin-HCl, 250 mM NaCl). Buňky byly lyzovány ultrasonikací po dobu 1 min pomocí ultrazvukového přístroje se sondou UP50H. Po přidání 150μl studeného ethanolu (-20°C) byla směs centrifugována přes centrifugační kolonku soupravy QIAamp tissue kit a nakonec eluována 60μl pufru (10 mM Tris [pH 7,5]).
Aby byl k dispozici nástroj pro rychlou a spolehlivou identifikaci jednotlivých čistých kultur, byl test PCR zkombinován s rychlým postupem izolace DNA. Časově náročné enzymatické lyzační postupy a proměnlivá citlivost bakterií vůči lysozymu byly překonány ultrazvukovým ošetřením buněk s následnou purifikací a zakoncentrováním vazbou DNA na matrici z oxidu křemičitého. Buněčný materiál jedné kolonie se ukázal jako dostatečný pro PCR.
Doporučené zařízení:
UP50H
Reference/ výzkumná práce:
Müller, M. R. A. (2000): Charakterizace mikrobiálního ekosystému fermentace obilovin pomocí molekulárně biologických metod. Disertační práce, Univerzita v Kolíně nad Rýnem, 2000.
Lactobacillus acidophilus Gr+
Ultrazvuková aplikace:
Ultrazvuková inaktivace Lactobacillus acidophilus Gr+ v mléce a džusech.
Doporučené zařízení:
UIP500hd
Reference/ výzkumná práce:
Zenker, M.; Heinz, V.; Knorr, D. (2003): Aplikace ultrazvukem asistovaného tepelného zpracování pro konzervaci a zachování kvality tekutých potravin. J Food Prot 66/2003. s. 1642–1649.
Ultrazvuková inaktivace Lactobacillus acidophilus Gr+ v mléce a džusech.
Doporučené zařízení:
UIP500hd
Reference/ výzkumná práce:
Zenker, M.; Heinz, V.; Knorr, D. (2003): Aplikace ultrazvukem asistovaného tepelného zpracování pro konzervaci a zachování kvality tekutých potravin. J Food Prot 66/2003. s. 1642–1649.
Legionella pneumophila Gr+ ve zředěném médiu
Ultrazvuková aplikace:
Ultrazvuková inaktivace Legionella pneumophila Gr+ ve zředěném médiu.
Doporučené zařízení:
UIP500hd
Reference/ výzkumná práce:
Dadjour, M. F.; Ogino, C.; Matsumura, S.; Nakamura, S.; Shimizu N. (2006): Dezinfekce Legionella pneumophila ultrazvukovým ošetřením s TiO2. Water Res 40/2006. pp.1137–1142.
Ultrazvuková inaktivace Legionella pneumophila Gr+ ve zředěném médiu.
Doporučené zařízení:
UIP500hd
Reference/ výzkumná práce:
Dadjour, M. F.; Ogino, C.; Matsumura, S.; Nakamura, S.; Shimizu N. (2006): Dezinfekce Legionella pneumophila ultrazvukovým ošetřením s TiO2. Water Res 40/2006. pp.1137–1142.
Leuconostoc mesenteroides
Ultrazvuková aplikace:
Aktivita leukocytárního lysozymu u myelocytární leukémie: buněčná suspenze byla sonikována 15 min a ve vzorcích byla stanovena aktivita lysozymu. Byla stanovena koncentrace lysozymu v leukocytech ug./10 buněk.
Doporučené zařízení:
UP50H
Aktivita leukocytárního lysozymu u myelocytární leukémie: buněčná suspenze byla sonikována 15 min a ve vzorcích byla stanovena aktivita lysozymu. Byla stanovena koncentrace lysozymu v leukocytech ug./10 buněk.
Doporučené zařízení:
UP50H
Aktivita leukocytárních izoenzymů u myelocytární leukémie
Ultrazvuková aplikace:
Příprava vzorku: buněčná suspenze byla ošetřena ultrazvukem a ve vzorcích byla stanovena aktivita lysozymu. Byla stanovena koncentrace lysozymu v leukocytech ug/106.
Doporučené zařízení:
UP200St
Příprava vzorku: buněčná suspenze byla ošetřena ultrazvukem a ve vzorcích byla stanovena aktivita lysozymu. Byla stanovena koncentrace lysozymu v leukocytech ug/106.
Doporučené zařízení:
UP200St
Lipozomy
Ultrazvuková aplikace:
Tvorba SUV
Klikněte sem a přečtěte si více o ultrazvukové přípravě liposomů!
Doporučené zařízení:
UP50H; 3 cykly po 5 min; v ledové lázni.
Tvorba SUV
Klikněte sem a přečtěte si více o ultrazvukové přípravě liposomů!
Doporučené zařízení:
UP50H; 3 cykly po 5 min; v ledové lázni.
Malachitová zeleň
Ultrazvuková aplikace:
Sonofotokatalytická degradace malachitové zeleně (silný baktericid): Samotná fotokatalytická degradace je výrazně rychlejší než sonolytická degradace, účinnost lze zlepšit spojením obou procesů. Malachitová zeleň, silný baktericid, je velmi ekotoxická pro mořské bakterie, je však přeměňována na organické látky, které jsou méně toxické nebo netoxické.
Doporučené zařízení:
UP400S
Sonofotokatalytická degradace malachitové zeleně (silný baktericid): Samotná fotokatalytická degradace je výrazně rychlejší než sonolytická degradace, účinnost lze zlepšit spojením obou procesů. Malachitová zeleň, silný baktericid, je velmi ekotoxická pro mořské bakterie, je však přeměňována na organické látky, které jsou méně toxické nebo netoxické.
Doporučené zařízení:
UP400S
Acylace mangiferinu
Ultrazvuková aplikace:
Mangiferin (1,3,6,7-Tetrahydroxy-2-[3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]xanthen-9-one; vzorec: C19H18O11) je polyfenol se strukturou C-glykosylxantonu, který se vyskytuje v mnoha rostlinných druzích. Mangiferin vykazuje různé farmakologické účinky. Regioselektivní acylace mangiferinu může být za ultrasonikace velmi účinně katalyzována lipázou. Ve srovnání s konvenčními metodami vyniká ultrazvukem asistovaná katalýza výhodami kratší reakční doby a vyšších výtěžků. Optimální podmínky pro ultrazvukovou acylaci mangiferinu byly zjištěny následovně:
lipáza: PCL, donor acylu: vinylacetát; reakční rozpouštědlo: DMSO, reakční teplota: 45 degC, ultrazvukový výkon: 200W; poměr substrátů: donor acylu/mangiferin 6/1, množství enzymu: 6 mg/ml
Výtěžek regioselektivní acylace činil až 84%.
Doporučené zařízení:
UP200St nebo UP200Ht
Reference/ výzkumná práce:
srov.: Wang, Z.; Wang, R.; Tian, J.; Zhao, B; Wei, X.F.; Su, Y.L.; Li, C.Y.; Cao, S.G.; Wang, L. (2010): Vliv ultrazvuku na lipázou katalyzovanou regioselektivní acylaci mangiferinu v nevodných rozpouštědlech. J. Asian Nat Prod. Res. 12/1, 2010. 56-63.
Mangiferin (1,3,6,7-Tetrahydroxy-2-[3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]xanthen-9-one; vzorec: C19H18O11) je polyfenol se strukturou C-glykosylxantonu, který se vyskytuje v mnoha rostlinných druzích. Mangiferin vykazuje různé farmakologické účinky. Regioselektivní acylace mangiferinu může být za ultrasonikace velmi účinně katalyzována lipázou. Ve srovnání s konvenčními metodami vyniká ultrazvukem asistovaná katalýza výhodami kratší reakční doby a vyšších výtěžků. Optimální podmínky pro ultrazvukovou acylaci mangiferinu byly zjištěny následovně:
lipáza: PCL, donor acylu: vinylacetát; reakční rozpouštědlo: DMSO, reakční teplota: 45 degC, ultrazvukový výkon: 200W; poměr substrátů: donor acylu/mangiferin 6/1, množství enzymu: 6 mg/ml
Výtěžek regioselektivní acylace činil až 84%.
Doporučené zařízení:
UP200St nebo UP200Ht
Reference/ výzkumná práce:
srov.: Wang, Z.; Wang, R.; Tian, J.; Zhao, B; Wei, X.F.; Su, Y.L.; Li, C.Y.; Cao, S.G.; Wang, L. (2010): Vliv ultrazvuku na lipázou katalyzovanou regioselektivní acylaci mangiferinu v nevodných rozpouštědlech. J. Asian Nat Prod. Res. 12/1, 2010. 56-63.
Extrakce molekul
Ultrazvuková aplikace:
Extrakční protokol pro extrakci ze sádrovce, rheolite, čediče, popela edfell a obsidiánového skla:
Vzorek regolitu nebo drcené horniny o hmotnosti 1g se podrobí kapalinové extrakci za ultrazvukového ozařování, aby se extrahovaly a solubilizovaly cílové molekuly. Za tímto účelem byly k 1g vzorku analogu ve skleněné zkumavce přidány 3ml MeOH P80 a směs byla sonikována 20 minut ultrazvukovým zařízením se sondou UP50H nastaveným na 40% amplitudu. Směs se nechala stát 10 minut a zakalený supernatant, který se vytvořil nad sedimentovaným vzorkem analogu, byl dekantován do 1,5 ml centrifugačních zkumavek. Aby se minimalizovaly ztráty extrahovaných složek adsorpcí na povrchy hydrofobních polymerních centrifugačních zkumavek, byly zkumavky nejprve blokovány 0,5% (w/v) BSA ve 100 mM HEPES pH 7,4. Supernatanty byly vyčiřeny centrifugací při 17 000 G po dobu 10 minut a až do testování v imunoanalýze uchovávány při 2 – 8°C ve skleněných lahvičkách.
Doporučené zařízení:
UP50H
Reference/ výzkumná práce:
Rix, C. (2012): Detekce života na Marsu a čip Life Marker: Testy protilátek pro detekci organických molekul v kapalných extraktech vzorků Marsu. Disertační práce, Cranfield University, 2012.
Extrakční protokol pro extrakci ze sádrovce, rheolite, čediče, popela edfell a obsidiánového skla:
Vzorek regolitu nebo drcené horniny o hmotnosti 1g se podrobí kapalinové extrakci za ultrazvukového ozařování, aby se extrahovaly a solubilizovaly cílové molekuly. Za tímto účelem byly k 1g vzorku analogu ve skleněné zkumavce přidány 3ml MeOH P80 a směs byla sonikována 20 minut ultrazvukovým zařízením se sondou UP50H nastaveným na 40% amplitudu. Směs se nechala stát 10 minut a zakalený supernatant, který se vytvořil nad sedimentovaným vzorkem analogu, byl dekantován do 1,5 ml centrifugačních zkumavek. Aby se minimalizovaly ztráty extrahovaných složek adsorpcí na povrchy hydrofobních polymerních centrifugačních zkumavek, byly zkumavky nejprve blokovány 0,5% (w/v) BSA ve 100 mM HEPES pH 7,4. Supernatanty byly vyčiřeny centrifugací při 17 000 G po dobu 10 minut a až do testování v imunoanalýze uchovávány při 2 – 8°C ve skleněných lahvičkách.
Doporučené zařízení:
UP50H
Reference/ výzkumná práce:
Rix, C. (2012): Detekce života na Marsu a čip Life Marker: Testy protilátek pro detekci organických molekul v kapalných extraktech vzorků Marsu. Disertační práce, Cranfield University, 2012.
Pelety z myších jater
Ultrazvuková aplikace:
Pelety byly promyty a sonikovány 5 min s dalšími 0,5 mL LB2 a centrifugovány při 12 000 g po dobu dalších 20 min a výsledné dvě frakce supernatantu byly odebrány. Nakonec byly pelety rozpuštěny v 0,5 mL pufru obsahujícího 40 mM báze Tris, 5 M močovinu, 2 M thiomočovinu, 4% CHAPS, 100 mM DTT, 0,5% (v/v) biolyte 3-10 (LB3) a byly sonikovány a centrifugovány při 12 000 g po dobu 20 min.
Doporučené zařízení:
UP200S; po dobu 5min.
Reference/ výzkumná práce:
Gazzana et al. (2009): An update on mouse liver proteome.
Pelety byly promyty a sonikovány 5 min s dalšími 0,5 mL LB2 a centrifugovány při 12 000 g po dobu dalších 20 min a výsledné dvě frakce supernatantu byly odebrány. Nakonec byly pelety rozpuštěny v 0,5 mL pufru obsahujícího 40 mM báze Tris, 5 M močovinu, 2 M thiomočovinu, 4% CHAPS, 100 mM DTT, 0,5% (v/v) biolyte 3-10 (LB3) a byly sonikovány a centrifugovány při 12 000 g po dobu 20 min.
Doporučené zařízení:
UP200S; po dobu 5min.
Reference/ výzkumná práce:
Gazzana et al. (2009): An update on mouse liver proteome.
Suspenze myších jater
Ultrazvuková aplikace:
Homogenizace vzorku za účelem získání buněčného lyzátu.
Doporučené zařízení:
UP200S; po dobu 3 x 20 s.
Reference/ výzkumná práce:
Gazzana et al. (2009): An update on mouse liver proteome.
Homogenizace vzorku za účelem získání buněčného lyzátu.
Doporučené zařízení:
UP200S; po dobu 3 x 20 s.
Reference/ výzkumná práce:
Gazzana et al. (2009): An update on mouse liver proteome.
Penicillium digitatum
Ultrazvuková aplikace:
Ultrazvuková inaktivace Penicillium digitatum (rostlinný patogen) v Sabouraudově růstovém médiu.
Doporučené zařízení:
UP200St
Reference/ výzkumná práce:
López-Malo, A.; Palou, E.; Jiménez-Fernández, M.; Alzamora, S. M.; Guerrero, S. (2005): Multifaktoriální inaktivace plísní kombinující termosonikaci a antimikrobiální látky. J. Potraviny Eng. 67/ 2005. str. 87–93.
Ultrazvuková inaktivace Penicillium digitatum (rostlinný patogen) v Sabouraudově růstovém médiu.
Doporučené zařízení:
UP200St
Reference/ výzkumná práce:
López-Malo, A.; Palou, E.; Jiménez-Fernández, M.; Alzamora, S. M.; Guerrero, S. (2005): Multifaktoriální inaktivace plísní kombinující termosonikaci a antimikrobiální látky. J. Potraviny Eng. 67/ 2005. str. 87–93.
Fykocyanin ze Spirulina platensis (Arthrospira platensis)
Ultrazvuková aplikace:
Extrakce fykocyaninu z buněk Spirulina platensis (Arthrospira platensis).
Doporučené zařízení:
UP400S
Extrakce fykocyaninu z buněk Spirulina platensis (Arthrospira platensis).
Doporučené zařízení:
UP400S
Rostlinné buňky a pletiva
Ultrazvuková aplikace:
30% zahuštěných rostlinných buněk (W/V) a destilovaná voda se dezintegrují sonikací po dobu 1–15 min; dezintegrace rostlinné tkáně: 1 g sušené tkáně suspendované v alkoholu se dezintegruje během sonikace trvající přibližně 5 min.
Doporučené zařízení:
UP100H
30% zahuštěných rostlinných buněk (W/V) a destilovaná voda se dezintegrují sonikací po dobu 1–15 min; dezintegrace rostlinné tkáně: 1 g sušené tkáně suspendované v alkoholu se dezintegruje během sonikace trvající přibližně 5 min.
Doporučené zařízení:
UP100H
Krevní destičky
Ultrazvuková aplikace:
Příprava lyzátu krevních destiček: dezintegrace za 1–5 min.
Doporučené zařízení:
UP200Ht
Příprava lyzátu krevních destiček: dezintegrace za 1–5 min.
Doporučené zařízení:
UP200Ht
Pleurotus tuberregium
Ultrazvuková aplikace:
Extrakce polysacharidů z jedlé houby Pleurotus tuberregium
Doporučené zařízení:
UP400S
Extrakce polysacharidů z jedlé houby Pleurotus tuberregium
Doporučené zařízení:
UP400S
Kopolymer kyseliny mléčné a glykolové (PLGA)
Ultrazvuková aplikace:
Příprava kopolymeru kyseliny mléčné a glykolové (PLGA) naplněného hovězím sérovým albuminem (BSA) sonikací za 40 s.
Doporučené zařízení:
Dmini; po dobu 40 s.
Reference/ výzkumná práce:
Freitas et al. (2005): Průtoková ultrazvuková emulgace kombinovaná se statickým mikromícháním pro aseptickou výrobu mikrokuliček extrakcí rozpouštědlem.
Příprava kopolymeru kyseliny mléčné a glykolové (PLGA) naplněného hovězím sérovým albuminem (BSA) sonikací za 40 s.
Doporučené zařízení:
Dmini; po dobu 40 s.
Reference/ výzkumná práce:
Freitas et al. (2005): Průtoková ultrazvuková emulgace kombinovaná se statickým mikromícháním pro aseptickou výrobu mikrokuliček extrakcí rozpouštědlem.
Polyfenoly z jablek
Ultrazvuková aplikace:
Ultrazvuková extrakce polyfenolů z jablek. Rozpouštědlo: vodné. Zvýšení výtěžku o 6%; intenzita sonikace: 20–75Ws/ml; teplota procesu: zahřáto na 80 degC.
Doporučené zařízení:
UIP2000hd
Reference/ výzkumná práce:
Vilkhu, K.; Manasseh, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Ultrazvuková obnova a úprava složek potravin. In: Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011): Ultrazvukové technologie pro potraviny a biologické zpracování. Praha: Springer, 2011. str. 345-368.
Ultrazvuková extrakce polyfenolů z jablek. Rozpouštědlo: vodné. Zvýšení výtěžku o 6%; intenzita sonikace: 20–75Ws/ml; teplota procesu: zahřáto na 80 degC.
Doporučené zařízení:
UIP2000hd
Reference/ výzkumná práce:
Vilkhu, K.; Manasseh, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Ultrazvuková obnova a úprava složek potravin. In: Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011): Ultrazvukové technologie pro potraviny a biologické zpracování. Praha: Springer, 2011. str. 345-368.
Polyfenoly z černého čaje
Ultrazvuková aplikace:
Ultrazvuková extrakce polyfenolů z černého čaje. Rozpouštědlo: vodné. Zvýšení výtěžku o 6–18%; intenzita sonikace: 8–10Ws/ml; okolní tlak, teplota procesu: zahřáto na 90 degC.
Doporučené zařízení:
UIP2000hd
Reference/ výzkumná práce:
Vilkhu, K.; Manasseh, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Ultrazvuková obnova a úprava složek potravin. In: Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011): Ultrazvukové technologie pro potraviny a biologické zpracování. Praha: Springer, 2011. str. 345-368.
Ultrazvuková extrakce polyfenolů z černého čaje. Rozpouštědlo: vodné. Zvýšení výtěžku o 6–18%; intenzita sonikace: 8–10Ws/ml; okolní tlak, teplota procesu: zahřáto na 90 degC.
Doporučené zařízení:
UIP2000hd
Reference/ výzkumná práce:
Vilkhu, K.; Manasseh, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Ultrazvuková obnova a úprava složek potravin. In: Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011): Ultrazvukové technologie pro potraviny a biologické zpracování. Praha: Springer, 2011. str. 345-368.
Polyfenoly z výlisků červených hroznů
Ultrazvuková aplikace:
Ultrazvuková extrakce polyfenolů z matolin červených hroznů. Rozpouštědlo: vodné. Zvýšení výtěžku o 11–35%; intenzita sonikace: 20–75Ws/ml; okolní tlak.
Doporučené zařízení:
UIP2000hd
Reference/ výzkumná práce:
Vilkhu, K.; Manasseh, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Ultrazvuková obnova a úprava složek potravin. In: Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011): Ultrazvukové technologie pro potraviny a biologické zpracování. Praha: Springer, 2011. str. 345-368.
Ultrazvuková extrakce polyfenolů z matolin červených hroznů. Rozpouštědlo: vodné. Zvýšení výtěžku o 11–35%; intenzita sonikace: 20–75Ws/ml; okolní tlak.
Doporučené zařízení:
UIP2000hd
Reference/ výzkumná práce:
Vilkhu, K.; Manasseh, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Ultrazvuková obnova a úprava složek potravin. In: Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011): Ultrazvukové technologie pro potraviny a biologické zpracování. Praha: Springer, 2011. str. 345-368.
Polyfenoly, aminokyselina a kofein ze zeleného čaje
Vepřové maso: nakládání vepřové pečeně do solného láku
Ultrazvuková aplikace:
Při ultrazvukem asistovaném nakládání do láku byly vepřové hřbety (Longissimus dorsi) ponořeny do láku chloridu sodného (40 g L−1) a ošetřeny při 5°C nízkofrekvenčním ultrazvukem (20 kHz) o nízké intenzitě (2–4 W/cm−2). Byl zkoumán vliv ultrazvukem asistovaného nakládání na mikrostrukturu vepřové tkáně, denaturaci proteinů, vaznost vody (WBC), schopnost zadržovat vodu (WHC), difuzní koeficient chloridu sodného (D) a texturní profil masa (TPA). Výsledky ukázaly, že ultrazvukové ošetření způsobilo příznivé mikrostrukturní změny v masné tkáni. Schopnost zadržovat vodu a texturní vlastnosti byly ultrazvukovým ošetřením zlepšeny ve srovnání se vzorky nakládanými jak tumblováním, tak staticky. Tyto pozitivní účinky však byly vysoce závislé na intenzitě ultrazvuku. Vyšší intenzity a/nebo delší doby ošetření způsobovaly denaturaci proteinů. Model konstantního difuzního koeficientu dokázal přesně popsat kinetiku difuze NaCl během nakládání. Ultrazvukové ošetření významně zvýšilo difuzi soli ve srovnání se vzorky nakládanými za statických podmínek a difuzní koeficient exponenciálně rostl se zvyšující se intenzitou ultrazvuku.
Doporučené zařízení:
UP200Ht se sonotrodou S26d40
Reference/ výzkumná práce:
Siro, I.; Ven, Cs.; Balla, Cs.; Jonas, G.; Zeke, I.; Friedrich, L. (2009): Aplikace ultrazvukem asistované konzervační techniky pro zlepšení difúze chloridu sodného v prasečím mase. Časopis potravinářského inženýrství 91/2, 2009. 353–362.
Při ultrazvukem asistovaném nakládání do láku byly vepřové hřbety (Longissimus dorsi) ponořeny do láku chloridu sodného (40 g L−1) a ošetřeny při 5°C nízkofrekvenčním ultrazvukem (20 kHz) o nízké intenzitě (2–4 W/cm−2). Byl zkoumán vliv ultrazvukem asistovaného nakládání na mikrostrukturu vepřové tkáně, denaturaci proteinů, vaznost vody (WBC), schopnost zadržovat vodu (WHC), difuzní koeficient chloridu sodného (D) a texturní profil masa (TPA). Výsledky ukázaly, že ultrazvukové ošetření způsobilo příznivé mikrostrukturní změny v masné tkáni. Schopnost zadržovat vodu a texturní vlastnosti byly ultrazvukovým ošetřením zlepšeny ve srovnání se vzorky nakládanými jak tumblováním, tak staticky. Tyto pozitivní účinky však byly vysoce závislé na intenzitě ultrazvuku. Vyšší intenzity a/nebo delší doby ošetření způsobovaly denaturaci proteinů. Model konstantního difuzního koeficientu dokázal přesně popsat kinetiku difuze NaCl během nakládání. Ultrazvukové ošetření významně zvýšilo difuzi soli ve srovnání se vzorky nakládanými za statických podmínek a difuzní koeficient exponenciálně rostl se zvyšující se intenzitou ultrazvuku.
Doporučené zařízení:
UP200Ht se sonotrodou S26d40
Reference/ výzkumná práce:
Siro, I.; Ven, Cs.; Balla, Cs.; Jonas, G.; Zeke, I.; Friedrich, L. (2009): Aplikace ultrazvukem asistované konzervační techniky pro zlepšení difúze chloridu sodného v prasečím mase. Časopis potravinářského inženýrství 91/2, 2009. 353–362.
Porphyra yezoensis
Ultrazvuková aplikace:
Ultrazvuková degradace polysacharidů z Porphyra yezoensis: 50mL roztoku polysacharidů porphyra yezoensis o koncentraci 1,0 g/100mL (sušina) bylo sonikováno 4 h přístrojem UP400S.
Doporučené zařízení:
UP400S; pulzní ultrazvuk (cykly: 2 s zapnuto / 2 s vypnuto) při 20°C.
Ultrazvuková degradace polysacharidů z Porphyra yezoensis: 50mL roztoku polysacharidů porphyra yezoensis o koncentraci 1,0 g/100mL (sušina) bylo sonikováno 4 h přístrojem UP400S.
Doporučené zařízení:
UP400S; pulzní ultrazvuk (cykly: 2 s zapnuto / 2 s vypnuto) při 20°C.
Prášky
Ultrazvuková aplikace:
Mletí, deaglomerace a dispergace na malou, relativně jednotnou velikost částic.
Doporučené zařízení:
UP200St
Mletí, deaglomerace a dispergace na malou, relativně jednotnou velikost částic.
Doporučené zařízení:
UP200St
Potkaní kosti
Potkaní játra
Ultrazvuková aplikace:
Dezintegrace a homogenizace tkáně přístrojem UP400S.
Doporučené zařízení:
UP400S; 3krát po 30 s; na ledu.
Reference/ výzkumná práce:
Oh et al. (2003): Acetyl-CoA Carboxylase Gene Is Regulated by Sterol Regulatory Element-binding Protein-1 in Liver. Journal of Biological Chemistry 2003.
Dezintegrace a homogenizace tkáně přístrojem UP400S.
Doporučené zařízení:
UP400S; 3krát po 30 s; na ledu.
Reference/ výzkumná práce:
Oh et al. (2003): Acetyl-CoA Carboxylase Gene Is Regulated by Sterol Regulatory Element-binding Protein-1 in Liver. Journal of Biological Chemistry 2003.
Potkaní kůže
Rauvolfia serpentina
Rebaudiosid A
Ultrazvuková aplikace:
Vzorky 10g sušených a mletých listů stévie byly extrahovány ve 100mL vody za stálého míchání (magnetickým míchadlem). Hodnota pH byla upravována 0,01 M fosforečnanem sodným pH 7. Vzorek byl umístěn do 150 mL skleněné kádinky a sonikován ultrazvukovým přístrojem se sondou (UIP500hd, 20kHz, 500W). Hrot sonotrody byl ponořen přibližně 1,5 cm do suspenze listů stévie. Ultrazvukové zařízení bylo nastaveno na výstupní výkon 350W. Mírné sonikační ošetření při 350 W po dobu 5–10 min při konstantní teplotě procesu 30°C poskytlo výtěžek rebaudiosidu A 30–34g na 100g vzorku. Po sonikaci byl roztok extraktu centrifugován a přefiltrován přes mikroporézní membránu 0,45 μm; filtrát byl použit pro analýzu celkového obsahu rebaudiosidu A. Výtěžek extrakce celkového obsahu rebaudiosidu A byl analyzován pomocí HPLC.
Ultrazvukem asistovanou extrakcí bez rozpouštědel byl získán vysoký výtěžek rebaudiosidu A ve srovnání s tradičními extrakčními metodami, jako je extrakce teplem nebo macerace.
Doporučené zařízení:
UIP500hd
Vzorky 10g sušených a mletých listů stévie byly extrahovány ve 100mL vody za stálého míchání (magnetickým míchadlem). Hodnota pH byla upravována 0,01 M fosforečnanem sodným pH 7. Vzorek byl umístěn do 150 mL skleněné kádinky a sonikován ultrazvukovým přístrojem se sondou (UIP500hd, 20kHz, 500W). Hrot sonotrody byl ponořen přibližně 1,5 cm do suspenze listů stévie. Ultrazvukové zařízení bylo nastaveno na výstupní výkon 350W. Mírné sonikační ošetření při 350 W po dobu 5–10 min při konstantní teplotě procesu 30°C poskytlo výtěžek rebaudiosidu A 30–34g na 100g vzorku. Po sonikaci byl roztok extraktu centrifugován a přefiltrován přes mikroporézní membránu 0,45 μm; filtrát byl použit pro analýzu celkového obsahu rebaudiosidu A. Výtěžek extrakce celkového obsahu rebaudiosidu A byl analyzován pomocí HPLC.
Ultrazvukem asistovanou extrakcí bez rozpouštědel byl získán vysoký výtěžek rebaudiosidu A ve srovnání s tradičními extrakčními metodami, jako je extrakce teplem nebo macerace.
Doporučené zařízení:
UIP500hd
Rýžový škrob
Ultrazvuková aplikace:
Dezintegrace, izolace škrobu a rozrušení nekovalentních vazeb mezi proteinem a škrobem v suspenzi rýžové mouky (33%) za 20–40 min.
Doporučené zařízení:
UP500hd; 20–40 min.
Dezintegrace, izolace škrobu a rozrušení nekovalentních vazeb mezi proteinem a škrobem v suspenzi rýžové mouky (33%) za 20–40 min.
Doporučené zařízení:
UP500hd; 20–40 min.
Vířníci
Ultrazvuková aplikace:
Dezintegrace buněk mezozooplanktonu: sonikací za následujících podmínek čtyř průtoků (200, 400, 520 a 800lh-1) a čtyř amplitud (25, 50, 75 a 100%) bylo dosaženo míry usmrcení mezi 58 a 85%.
Doporučené zařízení:
UP2000 s průtokovou celou
Reference/ výzkumná práce:
Viitaslo et al. (2005): Ozon, ultrafialové záření, ultrazvuk a peroxid vodíku jako metody úpravy balastní vody – experimenty s mezozooplanktonem v brakické vodě s nízkou salinitou. Journal of Marine Environmental Engineering, 8(1), 35-55.
Dezintegrace buněk mezozooplanktonu: sonikací za následujících podmínek čtyř průtoků (200, 400, 520 a 800lh-1) a čtyř amplitud (25, 50, 75 a 100%) bylo dosaženo míry usmrcení mezi 58 a 85%.
Doporučené zařízení:
UP2000 s průtokovou celou
Reference/ výzkumná práce:
Viitaslo et al. (2005): Ozon, ultrafialové záření, ultrazvuk a peroxid vodíku jako metody úpravy balastní vody – experimenty s mezozooplanktonem v brakické vodě s nízkou salinitou. Journal of Marine Environmental Engineering, 8(1), 35-55.
S. fragilis
Saccharomyces cerevisiae
Ultrazvuková aplikace:
Dezintegrace
Doporučené zařízení:
UP400S
Reference/ výzkumná práce:
Guerrero, S,; López-Malo, A.; Alzamora, S. M. (2001): Vliv ultrazvuku na přežití Saccharomyces cerevisiae: vliv teploty, pH a amplitudy. Innov. Food Sci. Emerg Technol. 2/2001. pp. 31–39.
Dezintegrace
Doporučené zařízení:
UP400S
Reference/ výzkumná práce:
Guerrero, S,; López-Malo, A.; Alzamora, S. M. (2001): Vliv ultrazvuku na přežití Saccharomyces cerevisiae: vliv teploty, pH a amplitudy. Innov. Food Sci. Emerg Technol. 2/2001. pp. 31–39.
Saccharomyces cerevisiae
Ultrazvuková aplikace:
Ultrazvuková inaktivace Saccharomyces cerevisiae v Sabouraudově růstovém médiu a ve fyziologickém roztoku.
Doporučené zařízení:
UP400S
Reference/ výzkumná práce:
Yap, A.; Jiránek, V.; Grbin, P.; Barnes, M.; Bates, D. (2007): Studie o aplikaci vysoce výkonného ultrazvuku pro čištění a dezinfekci hlavně a prken. Austr. Novozélandský vinařský průmysl. J. 22(3)/ 2007. str. 96–104.
Ultrazvuková inaktivace Saccharomyces cerevisiae v Sabouraudově růstovém médiu a ve fyziologickém roztoku.
Doporučené zařízení:
UP400S
Reference/ výzkumná práce:
Yap, A.; Jiránek, V.; Grbin, P.; Barnes, M.; Bates, D. (2007): Studie o aplikaci vysoce výkonného ultrazvuku pro čištění a dezinfekci hlavně a prken. Austr. Novozélandský vinařský průmysl. J. 22(3)/ 2007. str. 96–104.
Šafrán, Crocus sativus
Ultrazvuková aplikace:
Extrakce účinných látek (aromatických a barvicích látek).
Klikněte sem a přečtěte si více o extrakci ze šafránu!
Doporučené zařízení:
UP50H
Reference/ výzkumná práce:
Kadkhodaee et al. (2007): Ultrazvuková extrakce aktivních sloučenin ze šafránu. Acta Hortic. 739, 2007. 417-425.
Extrakce účinných látek (aromatických a barvicích látek).
Klikněte sem a přečtěte si více o extrakci ze šafránu!
Doporučené zařízení:
UP50H
Reference/ výzkumná práce:
Kadkhodaee et al. (2007): Ultrazvuková extrakce aktivních sloučenin ze šafránu. Acta Hortic. 739, 2007. 417-425.
Salmonella Senftenberg 775W Gr-
Ultrazvuková aplikace:
Ultrazvuková inaktivace Salmonella Senftenberg 775W Gr- v McIlvainově citrát-fosfátovém pufru nebo živném bujónu.
Doporučené zařízení:
UP100H
Reference/ výzkumná práce:
Álvarez, I.; Manas, P.; Virto, R.; Condón, S. (2006): Inaktivace Salmonella Senftenberg 775W ultrazvukovými vlnami pod tlakem při různých vodních aktivitách. Int. J. Food Microbiol. 108/2006. pp. 218–225.
Ultrazvuková inaktivace Salmonella Senftenberg 775W Gr- v McIlvainově citrát-fosfátovém pufru nebo živném bujónu.
Doporučené zařízení:
UP100H
Reference/ výzkumná práce:
Álvarez, I.; Manas, P.; Virto, R.; Condón, S. (2006): Inaktivace Salmonella Senftenberg 775W ultrazvukovými vlnami pod tlakem při různých vodních aktivitách. Int. J. Food Microbiol. 108/2006. pp. 218–225.
Salvia miltiorrhiza Bunge
Ultrazvuková aplikace:
Extrakce biologicky aktivních látek: Danshensu sodného a čtyř tanshinonů (dihydrotanshione I, tanshinone I, cryptotanshinone a tanshinone IIA).
Doporučené zařízení:
UP100H
Extrakce biologicky aktivních látek: Danshensu sodného a čtyř tanshinonů (dihydrotanshione I, tanshinone I, cryptotanshinone a tanshinone IIA).
Doporučené zařízení:
UP100H
Salvia officinalis
Ultrazvuková aplikace:
Extrakce účinných látek ze Salvia Officinalis (šalvěj) za méně než 2 h.
Doporučené zařízení:
UP50H
Extrakce účinných látek ze Salvia Officinalis (šalvěj) za méně než 2 h.
Doporučené zařízení:
UP50H
Sérum
Ovčí játra s cystami, plíce a pozitivní krev (antigeny Echinococcus granulosus)
Ultrazvuková aplikace:
Cystická játra, plíce a pozitivní krev ovcí (antigeny Echinococcus granulosus u jehňat): Vzorek byl poté sonikován 2 × 15 s na ledu, dokud nebyly viditelné žádné intaktní protoskolexy.
Doporučené zařízení:
UP200S; 2 x 15 s.
Reference/ výzkumná práce:
Tabar et al. (2009): Protilátková odpověď proti hydatidové tekutině, protoscolexu a celotělovým antigenům Echinococcus granulosus u jehňat. Journal of Veterinary Research, svazek 10, číslo 3; 2009. 283-288.
Cystická játra, plíce a pozitivní krev ovcí (antigeny Echinococcus granulosus u jehňat): Vzorek byl poté sonikován 2 × 15 s na ledu, dokud nebyly viditelné žádné intaktní protoskolexy.
Doporučené zařízení:
UP200S; 2 x 15 s.
Reference/ výzkumná práce:
Tabar et al. (2009): Protilátková odpověď proti hydatidové tekutině, protoscolexu a celotělovým antigenům Echinococcus granulosus u jehňat. Journal of Veterinary Research, svazek 10, číslo 3; 2009. 283-288.
Sorbitan-trioleát, ethanol (jako rozpouštědlo) a prášek Bi-2212
Ultrazvuková aplikace:
Deaglomerace suspenze obsahující dispergační činidlo Sorbitant Trioleate, ethanol (jako rozpouštědlo) a prášek Bi-2212.
Doporučené zařízení:
UP200S; po dobu 3 min.
Reference/ výzkumná práce:
Mora et al. (2009): Výroba supravodivých povlaků na strukturálních keramických dlaždicích.
Deaglomerace suspenze obsahující dispergační činidlo Sorbitant Trioleate, ethanol (jako rozpouštědlo) a prášek Bi-2212.
Doporučené zařízení:
UP200S; po dobu 3 min.
Reference/ výzkumná práce:
Mora et al. (2009): Výroba supravodivých povlaků na strukturálních keramických dlaždicích.
Sójové isoflavony
Ultrazvuková aplikace:
ultrazvuková extrakce sójových izoflavonů ve vodě a rozpouštědle. Zvýšení výtěžku až o 15% v účinnosti extrakce.
Doporučené zařízení:
UP200St
Reference/ výzkumná práce:
Rostagno et al. (2003), citováno podle Vilkhu, K.; Manasseh, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Ultrazvuková obnova a úprava složek potravin. In: Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011): Ultrazvukové technologie pro potraviny a biologické zpracování. Praha: Springer, 2011. str. 345-368.
ultrazvuková extrakce sójových izoflavonů ve vodě a rozpouštědle. Zvýšení výtěžku až o 15% v účinnosti extrakce.
Doporučené zařízení:
UP200St
Reference/ výzkumná práce:
Rostagno et al. (2003), citováno podle Vilkhu, K.; Manasseh, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Ultrazvuková obnova a úprava složek potravin. In: Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011): Ultrazvukové technologie pro potraviny a biologické zpracování. Praha: Springer, 2011. str. 345-368.
Sójová bílkovina
Ultrazvuková aplikace:
Ultrazvuková extrakce sójového proteinu ve vodě a zásadě (hydroxid sodný). Zvýšení výtěžku o 53%. Inline sonikace byla shledána účinnější než dávková extrakce (inline sonikace poskytla o 23% vyšší výtěžek než dávková sonikace).
Doporučené zařízení:
UIP1000hd pro dávkové zpracování / kádinku a s reaktorem s průtokovou celou pro inline sonikaci.
Reference/ výzkumná práce:
Moulton a Wang (1982), citováno podle Vilkhu, K.; Manasseh, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Ultrazvuková obnova a úprava složek potravin. In: Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011): Ultrazvukové technologie pro potraviny a biologické zpracování. Praha: Springer, 2011. str. 345-368.
Ultrazvuková extrakce sójového proteinu ve vodě a zásadě (hydroxid sodný). Zvýšení výtěžku o 53%. Inline sonikace byla shledána účinnější než dávková extrakce (inline sonikace poskytla o 23% vyšší výtěžek než dávková sonikace).
Doporučené zařízení:
UIP1000hd pro dávkové zpracování / kádinku a s reaktorem s průtokovou celou pro inline sonikaci.
Reference/ výzkumná práce:
Moulton a Wang (1982), citováno podle Vilkhu, K.; Manasseh, R.; Mawson, R.; Ashokkumar, M. (2011): Ultrazvuková obnova a úprava složek potravin. In: Feng/ Barbosa-Cánovas/ Weiss (2011): Ultrazvukové technologie pro potraviny a biologické zpracování. Praha: Springer, 2011. str. 345-368.
Hlavičky lidských spermií
Bičíky lidských spermií
Stevia rebaudiana Bert.
Ultrazvuková aplikace:
Ultrazvuková extrakce steviosidového glykosidu: vzorky 10 g sušených listů Stevia rebaudiana se čtyřmi velikostmi částic (0,315 mm, 2 mm, 6,3 mm a drcené sušené listy) byly smíchány s různými rozpouštědly: destilovanou vodou a směsmi voda/ethanol (55% a 70%) při různých poměrech hmotnosti vzorku k objemu rozpouštědla: 1/10, 1/8, 1/5 (w/v) a poté vystaveny ultrazvuku při pokojové teplotě. Doba sonikace: < 5 min.
Doporučené zařízení:
UP200St
Ultrazvuková extrakce steviosidového glykosidu: vzorky 10 g sušených listů Stevia rebaudiana se čtyřmi velikostmi částic (0,315 mm, 2 mm, 6,3 mm a drcené sušené listy) byly smíchány s různými rozpouštědly: destilovanou vodou a směsmi voda/ethanol (55% a 70%) při různých poměrech hmotnosti vzorku k objemu rozpouštědla: 1/10, 1/8, 1/5 (w/v) a poté vystaveny ultrazvuku při pokojové teplotě. Doba sonikace: < 5 min.
Doporučené zařízení:
UP200St
Kontaktujte nás! / Zeptejte se nás!
Vysoce výkonné ultrazvukové přístroje pro jakoukoli velikost
Buněčné dezintegrátory a homogenizátory tkání Hielscher Ultrasonics jsou k dispozici v jakékoli velikosti pro jakýkoli objem. Ať už potřebujete sonikovat malé vzorky, hromadné vzorky, jako jsou 96jamkové destičky, středně velké objemy nebo objemy celých nákladních vozů za hodinu, naše portfolio nabízí ideální ultrazvukový přístroj pro vaši aplikaci. Kompaktní ruční ultrazvukové homogenizátory jsou optimální pro laboratoř a výzkum, zatímco naše průmyslová řada pokrývá vše od 0,5kW do 16kW na ultrazvukový procesor. Díky možnosti instalace v klastrech můžete s ultrazvukovými přístroji Hielscher zpracovat prakticky jakýkoli objem. Robustnost ultrazvukového zařízení Hielscher umožňuje provoz 24/7 při vysoké zátěži a v náročných prostředích.
Propracovaný a inteligentní software umožňuje nejvyšší kontrolu procesu a pohodlí obsluhy. Všechna data sonikace se automaticky zaznamenávají na vestavěnou SD kartu. Mezi další inteligentní funkce patří přednastavení a ukládání parametrů sonikace, připojení k LAN a vzdálené ovládání přes prohlížeč.
Níže uvedená tabulka udává přibližnou kapacitu zpracování našich laboratorních sonikátorů pro homogenizaci tkání a další úlohy přípravy vzorků:
| Doporučená zařízení | Objem dávky | Průtok |
|---|---|---|
| UIP400MTP sonikátor pro 96jamkové destičky | multijamkové / mikrotitrační destičky | n.a. |
| Ultrazvukový CupHorn | CupHorn pro lahvičky nebo kádinku | n.a. |
| GDmini2 | ultrazvukový mikroprůtokový reaktor | n.a. |
| VialTweeter | 0,5 až 1,5mL | n.a. |
| UP100H | 1 až 500mL | 10 až 200mL/min |
| UP200Ht, UP200St | 10 až 1000mL | 20 až 200mL/min |
| UP400St | 10 až 2000mL | 20 až 400mL/min |
| Ultrazvukový sítový třasák | n.a. | n.a. |
Ultrazvukový přístroj UP200Ht s 2mm mikrohrotem S26d2 pro sonikaci malých vzorků