Ултразвукови приложения в MonkeyPox вирус

Ultrasonication е важен метод за обработка за изолиране на вируса на маймуната (MPXV) от аналитични проби, за разпокъсаността на вируса ДНК, както и при производството на ваксина срещу маймунска шарка. За подготовка на пробите преди диагностика и анализ (PCR, ELISA и т.н.) ultrasonication се използва за lyse клетки с цел освобождаване на вируса на маймуната от клетъчния интериор и / или за фрагментиране на ДНК. При производството на ваксини приложенията варират от вирусна частична / ДНК подготовка, капсулираност в носителите на лекарства и формулиране на инокулата.
По-долу можете да намерите подробна информация за ултразвукова маймунска маймунска вирусна проба подготовка, както и ултразвуково подпомагана MPXV ваксина производство.

 

Какво ще намерите на тази страница:

Искане на информация




Забележете нашите Правила за поверителност,


Високопроизводителните ултразвукови апарати са критичен инструмент за обработка при производството на много ваксини.

Тази система от 2x 1kW ultrasonicators за работа с непрекъснат поток е инсталирана в съоръжение за производство на ваксини.

Ултразвуков лизис и фрагментация на ДНК преди полимераза верижна реакция (PCR)

Инфекция с вируса на маймунската шарка се открива чрез тестване за усилване на нуклеинова киселина (NAAT), като се използва верижна реакция в реално време или конвенционална полимераза (PCR), за откриване на уникални поредици от вирусна ДНК. Пробата (напр. от назофарингеален суап или кожни биопсии) съдържа вируса в клетките.
За анализ вирусът трябва да бъде освободен от клетките, ане вирусната ДНК трябва да бъде фрагментирана за PCR.

Ултразвуков лизис:

Ultrasonicator UP200Ht с микротип S26d2 за ултразвуково лизиране на биологични пробиУлтразвуково прекъсване на клетките / лизис е надежден и ефективен метод за изолиране на вируси от клетъчни проби и по този начин за предпочитане техника над химични агенти, като лизозим, протеиназа К и различни детергенти, които се използват алтернативно за постигане на клетъчен лизис и освобождаване на ДНК.
Използването на такива химически реагенти обаче изисква отнемащо време подготовка на пробата в няколко стъпки преди PCR анализа, за да се предотврати инхибирането на реакцията на PCR. Тъй като PCR инхибиторите влияят на ефективността на усилването, малки вариации на количеството инхибитори, които не са отстранени, могат да доведат до големи вариации в усилването на PCR продукта (Diaco, 1995).
Предимството на ultrasonication за лизис е, че пълното нарушаване на клетъчните структури и освобождаването на ДНК без необходимост от лежещи реагенти и отнемащи време подготовка на пробата са желателни. (срв. Fykse et al., 2003)

Ултразвукова ДНК фрагментация:

Ултразвукова ДНК фрагментация е проста и надеждна, както е произвежда ДНК фрагменти тунинг по дължина (basepairs, bp). Използвайки ултразвук, ДНК може ефективно да бъде фрагментирана до целевата дължина на ДНК. Прецизният контрол върху ултразвуковите параметри и изтънчените възможности за охлаждане предотвратяват разграждането на ДНК.
Прочетете повече за ултразвуковата фрагментация на ДНК!

 

Видеото показва ултразвуковата система за подготовка на проби UIP400MTP, която позволява надеждната подготовка на пробата на всички стандартни много кладенец плочи с помощта на ултразвук с висока интензивност. Типичните приложения на UIP400MTP включват клетъчен лизис, ДНК, РНК, и хроматин срязване, както и екстракция на протеини.

Ултразвуков апарат UIP400MTP за многопластова ултразвукова обработка

Искане на информация




Забележете нашите Правила за поверителност,


Ултразвукови приложения във ваксина срещу вируса на маймуната

Ultrasonication се използва за производство на ваксини като ваксини срещу маймунки. Ваксините, използвани срещу вируса на маймуната са понастоящем живи вирусни ваксини. Новоразработените ваксини може да използват други платформи като ДНК базирани В момента съдържа модифицирана Vaccinia Ankara viurs, атенюиран, нерепликиращ ортопоксвирус. Съдържа също Tris (трис-аминометан) и натриев хлорид. Ваксината може да съдържа и малки количества ДНК и протеин от клетките на Пилешкия ембрион Фибробласт, които се използват за отглеждане на вируса на ваксината, бензоназата и антибиотичните съединения като гентамицин и ципрофлоксацин.

Ултразвуковата хомогенизация се използва при производството на живи атенюирани вирусни ваксини, ДНК ваксини, многовалентни ДНК коктейли, рРНК ваксини, рекомбинантни протеинови ваксини, вирусоподобни ваксини за частици и др.

Приложенията на ултразвука при производството на ваксини варират от

  • дисперсия на вирусни частици и агенти
  • емулгиране
  • инактивиране на вируси
  • лекарствен носител (NLC, SLN)
  • капсулиране
  • разтваряне на агенти
  • приготвяне на адювант
  • Дегазация / обезателно

 

Можете да намерите по-задълбочена информация за ултразвукови приложения за подобрено производство на ваксини!

Протокол за ултразвукова изолация на вируса на маймуната

Изследователският екип на Stittelaar (2005) използва ултразвуков лизис за освобождаване на вируса на маймуната от растежа хост клетъчна култура, както и от клетки, получени чрез гърлото суапове от заразени примати.

Подготовка на ваксина срещу маймунки:

Monkeypox вируси са отглеждани на специфични без патогени пиле ембрион фибробластни клетки. След инкубация в продължение на 1 до 2 дни, суспензията вирус-клетка е добита от един кръг на замразяване-размразяване и след това се концентрира чрез центрофугиране. Пелетът беше ресуспендиран и подложен на няколко кръга на ултразвукова хомогенизация.

Monkeypox вирус изолация от ваксинирани макаци:

Пробите бяха размразени три пъти и с ултразвук в ултразвукова CupHorn. Две разреждания (1:10 и 1:100) в транспортната среда, допълнени с 1% серум от фетален едър рогат добитък, са използвани за инокулиране на монослойните клетки vero в шест-кладенец плочи. След 1 з на инкубация при 37°C, инокулата са отстранени и заменени с култура средно допълнени с 1% плода говежди серум. Монослойните са били култивирани в продължение на 5 дни при 37°C и оцветени с кристален виолетов разтвор.
(срв. "Стителаар и др.", 2005 г.)

В това видео ви показваме 2 киловат ултразвукова система за инлайн работа в очистим шкаф. Hielscher доставя ултразвуково оборудване на почти всички индустрии, като химическата промишленост, фармацевтичната, козметиката, нефтохимичните процеси, както и за процесите на екстракция на основата на разтворители. Този очистим шкаф от неръждаема стомана е предназначен за работа в опасни зони. За тази цел запечатаният шкаф може да бъде очистен от клиента с азот или чист въздух, за да се предотврати влизането на запалими газове или пари в шкафа.

2x 1000 Вата Ultrasonicators в очистващ кабинет за монтаж в опасни зони

Ултразвукови средства за анализ на вируси и производство на ваксини

Hielscher Ultrasonics широко продуктово портфолио предлага идеалния ultrasonicator за научни изследвания и аналитични лаборатории, както и за промишлено производство на ваксини.
Hielscher Ultrasonics е специализиран в проектирането, производството и разпространението на високопроизводителни ултразвукови и соно-биореактори за използването в изследователски и аналитични лаборатории, както и за внедряване в промишленото производство на ваксини (напр. ваксини, Апис).
Прецизен контрол върху ултразвуковите параметри на процеса от Hielscher Ultrasonics' интелигентен софтуерУлтразвукът може да се прилага върху отворени съдове, затворени непрекъснато разбърквани реактори и реактори с непрекъснат поток. Всички части на ултразвуковите системи, които се свързват с течната среда, са направени от неръждаема стомана, титан, или стъкло. Автоклавируемите части и санитарните фитинги осигуряват производството под фармако-клас условия.
Автоматично записване на данни: Интелигентен софтуер записва параметрите на процеса на обработка с ултразвук автоматично на интегрираната SD карта с памет. Прецизният контрол на всички параметри на процеса гарантира Възпроизводимост, стандартизацията на производството, и улеснява изпълнението на стандартите за безопасност на фармацевтичните продукти.
Hielscher Ultrasonics’ ултразвукови процесори са високо надеждни и могат да бъдат прецизно контролирани. Всички индустриални ултразвукови уреди могат да се регулират, за да доставят пълния диапазон от по-ниски до много високи амплитуди. Здравината на ултразвуковите системи на Hielscher позволява 24/7 работа при тежкотоварни и в взискателни среди.

Таблицата по-долу дава индикация за приблизителната капацитет за преработка на нашите ultrasonicators:

Партида том Дебит Препоръчителни Devices
много кладенец / микротитър плочи n/a 1000000000000000000000
1 до 500mL 10 до 200 ml / мин UP100H
10 до 2000mL 20 до 400 ml / мин Uf200 ः т, UP400St
00,1 до 20L 00,2 до 4 л / мин UIP2000hdT
10 до 100L 2 до 10 л / мин UIP4000hdT
n/a 10 до 100 L / мин UIP16000
n/a по-голям струпване на UIP16000

Свържете се с нас! / Попитай ни!

Поискайте повече информация

Моля, използвайте формата по-долу, за да поискате допълнителна информация за ултразвукови процесори, приложения и цена. Ще се радваме да обсъдим процеса с вас и да ви предложим ултразвукова система, която отговаря на вашите изисквания!









Моля, обърнете внимание, че нашите Правила за поверителност,


Ултразвуковите хомогенизатори са надеждни за ДНК срязване

Ултразвуково ДНК срязване
Адаптиран от Jkwchui под CC-BY-SA.03



Литература / Препратки

  • Stittelaar, Koert; Amerongen, Geert; Kondova, Ivanela; Kuiken, Thijs; Lavieren, Rob; Pistoor, Frank; Niesters, Hubert; Doornum, Gerard; Van der Zeijst, Bernard; Mateo, Luis; Chaplin, Paul; Osterhaus, Albert (2005): Modified Vaccinia Virus Ankara Protects Macaques against Respiratory Challenge with Monkeypox Virus. Journal of Virology 79, 2005. 7845-51.
  • Shah Purvin, Parameswara Rao Vuddanda, Sanjay Kumar Singh, Achint Jain, and Sanjay Singh (2014): Pharmacokinetic and Tissue Distribution Study of Solid Lipid Nanoparticles of Zidovudine in Rats. Journal of Nanotechnology, Volume 2014.
  • J. Robin Harris, Andrei Soliakova, Richard J. Lewis, Frank Depoix, Allan Watkinson, Jeremy H. Lakeya (2012): Alhydrogel® adjuvant, ultrasonic dispersion and protein binding: a TEM and analytical study. Micron Volume 43, Issues 2–3, February 2012, 192-200.
  • Doron Melamed, Gabriel Leitner, E. Dan Heller (1991): A Vaccine against Avian Colibacillosis Based on Ultrasonic Inactivation of Escherichia coli. Avian Diseases Vol. 35, No. 1 (Jan. – Mar., 1991), 17-22.
  • Huang C-F, Wu T-C, Wu C-C, Lee C-C, Lo W-T, Hwang K-S, Hsu M-L, Peng H-J. (2011): Sublingual vaccination with sonicated Salmonella proteins and mucosal adjuvant induces mucosal and systemic immunity and protects mice from lethal enteritis. APMIS 119, 2011. 468–78.

Факти заслужава да се знае

Вирус на маймунопокс

Маймунската шарка (MPV, MPXV, или hMPXV) е вид двустранен ДНК вирус, който причинява вирусно зоонотично заболяване. Това заболяване е известно като маймунска шарка инфекция и може да се появи при хора и животни. Той принадлежи към рода Ортопоксвирус в семейството Poxviridae. Вирусът на маймунопокса е един от човешкия ортопоксвирус заедно с вариола (VARV), cowpox (CPX), и вирусите на ваксиния (VACV). Ортопоксвирусите се характеризират с големи тухлени вирусни частици, съдържащи двустранен ДНК геном от приблизително 200 000 bp.

ЕЛАЙЗА Асай

ELISA означава Ензимно свързан immunoSorbent Assay и е етикетиран имуноанализ, който се счита за златен стандарт на имуноанализите. ELISA е имунологичен тест, ценен за високата си диагностична чувствителност, се използва за откриване и количествено определяне на молекули, включително антитела, антигени, протеини, гликопротеини, и хормони. Принципът на ELISA се основава на антиген-антитяло взаимодействие. Чрез това антигенно-антитялото взаимодействие, специфичните антитела се свързват с целевия му антиген. Само когато взаимодействието се осъществява, субстратът може да се свърже с ензима и може да се наблюдава последващо преобразуване на субстрата, което означава, че се получава положителен резултат.


Ултразвук с висока производителност! Продуктовата гама на Hielscher обхваща пълния спектър от компактния ултразвуков апарат на лабораторията над пейка-топ единици до пълноиндустриални ултразвукови системи.

Hielscher Ultrasonics произвежда високопроизводителни ултразвукови хомогенизатори от лаборатория да се промишлени размери.