Ứng dụng siêu âm trong MonkeyPox Virus

Ultrasonication là một phương pháp xử lý quan trọng cho sự cô lập của virus đậu mùa khỉ (MPXV) từ các mẫu phân tích, cho sự phân mảnh DNA virus cũng như trong sản xuất vắc-xin bệnh đậu mùa khỉ. Để chuẩn bị mẫu trước khi chẩn đoán và phân tích (PCR, ELISA vv) ultrasonication được sử dụng để lyse tế bào để giải phóng virus đậu mùa khỉ từ bên trong tế bào và / hoặc để phân mảnh DNA. Trong sản xuất vắc-xin, các ứng dụng bao gồm từ điều chế hạt / DNA của vi-rút, đóng gói trong các chất mang thuốc và xây dựng inocula.
Dưới đây bạn có thể tìm thấy thông tin chi tiết về chuẩn bị mẫu virus monkeypox siêu âm cũng như ultrasonically hỗ trợ sản xuất vắc xin MPXV.

 

Những gì bạn sẽ tìm thấy trên trang này:

Yêu cầu thông tin




Lưu ý của chúng tôi Chính sách bảo mật.


Ultrasonicators hiệu suất cao là một công cụ xử lý quan trọng trong sản xuất nhiều loại vắc-xin.

Hệ thống này của 2x 1kW ultrasonicators cho hoạt động dòng chảy liên tục được cài đặt trong một cơ sở sản xuất vắc-xin.

Siêu âm Lysis và phân mảnh DNA trước phản ứng chuỗi polymerase (PCR)

Nhiễm vi-rút đậu mùa khỉ được phát hiện bằng xét nghiệm khuếch đại axit nucleic (NAAT), sử dụng phản ứng chuỗi polymerase (PCR) thời gian thực hoặc thông thường, để phát hiện các chuỗi DNA duy nhất của virus. Mẫu (ví dụ: từ hoán đổi mũi họng hoặc sinh thiết da) chứa vi-rút trong tế bào.
Để phân tích, virus phải được giải phóng khỏi các tế bào và DNA của virus phải được phân mảnh để PCR.

Ly giải siêu âm:

Máy siêu âm UP200Ht với microtip S26d2 để phân tích siêu âm các mẫu sinh họcSiêu âm tế bào gián đoạn / ly giải là một phương pháp đáng tin cậy và hiệu quả để phân lập virus từ các mẫu tế bào và do đó một kỹ thuật thích hợp hơn so với các tác nhân hóa học, chẳng hạn như lysozyme, proteinase K và các chất tẩy rửa khác nhau được sử dụng thay thế để đạt được ly giải tế bào và giải phóng DNA.
Tuy nhiên, việc sử dụng các thuốc thử hóa học như vậy đòi hỏi phải chuẩn bị mẫu tốn thời gian trong một số bước trước khi phân tích PCR để ngăn chặn sự ức chế phản ứng PCR. Vì các chất ức chế PCR ảnh hưởng đến hiệu quả khuếch đại, các biến thể nhỏ của lượng chất ức chế không được loại bỏ có thể dẫn đến các biến thể lớn trong khuếch đại sản phẩm PCR (Diaco, 1995).
Ưu điểm của ultrasonication cho lysis là sự gián đoạn hoàn toàn của cấu trúc tế bào và giải phóng DNA mà không cần phải nói dối thuốc thử và chuẩn bị mẫu tốn thời gian là mong muốn. (xem Fykse và cộng sự, 2003)

Phân mảnh DNA siêu âm:

Siêu âm DNA phân mảnh là đơn giản và đáng tin cậy như là sản xuất các đoạn DNA có thể điều chỉnh theo chiều dài (basepairs, bp). Sử dụng siêu âm, DNA có thể được phân mảnh hiệu quả đến chiều dài DNA được nhắm mục tiêu. Kiểm soát chính xác các thông số siêu âm và các tùy chọn làm mát tinh vi ngăn chặn sự thoái hóa DNA.
Đọc thêm về phân mảnh DNA siêu âm!

 

Video cho thấy hệ thống chuẩn bị mẫu siêu âm UIP400MTP, cho phép chuẩn bị mẫu đáng tin cậy của bất kỳ tấm đa giếng tiêu chuẩn nào bằng cách sử dụng siêu âm cường độ cao. Các ứng dụng điển hình của UIP400MTP bao gồm lysis tế bào, DNA, RNA và cắt sắc thể cũng như chiết xuất protein.

Ultrasonicator UIP400MTP cho sonication tấm đa giếng

Yêu cầu thông tin




Lưu ý của chúng tôi Chính sách bảo mật.


Ứng dụng siêu âm trong Monkeypox Virus Vắc-xin

Ultrasonication được sử dụng để sản xuất vắc-xin như vắc-xin đậu mùa khỉ. Vắc-xin được sử dụng để chống lại vi-rút đậu mùa khỉ hiện là vắc-xin vi-rút sống. Các loại vắc-xin mới được phát triển có thể sử dụng các nền tảng khác như dựa trên DNA Hiện đang chứa một loại viurs Vaccinia Ankara đã được sửa đổi, một loại orthopoxvirus suy yếu, không sao chép. Nó cũng chứa Tris (tris-aminomethane) và natri clorua. Vắc-xin cũng có thể chứa một lượng nhỏ DNA và protein từ các tế bào nguyên bào sợi phôi gà, được sử dụng để phát triển virus vắc-xin, benzonase và các hợp chất kháng sinh như gentamicin và ciprofloxacin.

Siêu âm đồng nhất được sử dụng trong sản xuất vắc-xin virus sống suy yếu, vắc-xin DNA, cocktail DNA đa hóa trị, vắc-xin mRNA, vắc-xin protein tái tổ hợp, vắc-xin hạt giống vi-rút, v.v.

Các ứng dụng của ultrasonics trong sản xuất vắc xin phạm vi từ

  • phân tán các hạt và tác nhân virus
  • nhũ tương
  • bất hoạt virus
  • công thức mang thuốc (NLC, SLN)
  • Đóng gói
  • giải thể các đại lý
  • chuẩn bị các tá dược
  • Degassing/de-aeration

 

Bạn có thể tìm thấy thông tin chuyên sâu hơn về các ứng dụng siêu âm để cải thiện sản xuất vắc xin!

Giao thức cho siêu âm cách ly của Virus Monkeypox

Nhóm nghiên cứu của Stittelaar (2005) đã sử dụng ly giải siêu âm để giải phóng virus đậu mùa khỉ từ nuôi cấy tế bào chủ tăng trưởng cũng như từ các tế bào thu được thông qua hoán đổi cổ họng từ các loài linh trưởng bị nhiễm bệnh.

Chuẩn bị vắc-xin đậu mùa khỉ:

Virus đậu mùa khỉ được phát triển trên các tế bào nguyên bào sợi phôi gà không có mầm bệnh cụ thể. Sau khi ủ trong 1 đến 2 ngày, huyền phù tế bào virus được thu hoạch bằng một đợt đóng băng tan băng và sau đó tập trung bằng cách ly tâm. Viên nén đã được tái sử dụng và chịu một số vòng đồng nhất siêu âm.

Phân lập vi rút bệnh đậu mùa khỉ từ khỉ macaques đã được tiêm chủng:

Các mẫu đã được đóng băng-tan băng ba lần và sonicated trong một CupHorn siêu âm. Hai chất pha loãng (1:10 và 1:100) trong môi trường vận chuyển được bổ sung 1% huyết thanh bò của thai nhi đã được sử dụng để tiêm các lớp đơn tế bào Vero trong các tấm sáu giếng. Sau 1 giờ ủ bệnh ở 37°C, inocula được loại bỏ và thay thế bằng môi trường nuôi cấy được bổ sung 1% huyết thanh bò của thai nhi. Các lớp đơn được nuôi cấy trong 5 ngày ở nhiệt độ 37 ° C và được nhuộm bằng dung dịch pha lê màu tím.
(xem Stittelaar và cộng sự, 2005)

Trong video này, chúng tôi cho bạn thấy một hệ thống siêu âm 2 kilowatt cho hoạt động nội tuyến trong một tủ có thể thanh lọc. Hielscher cung cấp thiết bị siêu âm cho hầu hết các ngành công nghiệp, chẳng hạn như ngành công nghiệp hóa chất, dược phẩm, mỹ phẩm, quy trình hóa dầu cũng như cho các quy trình khai thác dựa trên dung môi. Tủ thép không gỉ có thể thanh lọc này được thiết kế để hoạt động trong các khu vực nguy hiểm. Với mục đích này, tủ kín có thể được khách hàng thanh lọc bằng nitơ hoặc không khí trong lành để ngăn khí hoặc hơi dễ cháy xâm nhập vào tủ.

2x 1000 Watts Ultrasonicators trong tủ thanh lọc để cài đặt trong khu vực nguy hiểm

Ultrasonicators để phân tích virus và sản xuất vắc xin

Hielscher Ultrasonics danh mục sản phẩm rộng cung cấp ultrasonicator lý tưởng cho các phòng thí nghiệm nghiên cứu và phân tích cũng như cho sản xuất vắc xin công nghiệp.
Hielscher Ultrasonics chuyên thiết kế, sản xuất và phân phối ultrasonicators hiệu suất cao và sono-bioreactors để sử dụng trong các phòng thí nghiệm nghiên cứu và phân tích cũng như để thực hiện trong sản xuất vắc-xin công nghiệp (ví dụ: Vaccine, Api).
Kiểm soát chính xác các thông số quá trình siêu âm bằng Ultrasonics Hielscher' phần mềm thông minhSonication có thể được áp dụng cho các tàu mở, đóng cửa liên tục khuấy lò phản ứng và liên tục dòng chảy thông qua lò phản ứng. Tất cả các bộ phận của hệ thống siêu âm, mà có được tiếp xúc với môi trường chất lỏng, được làm từ thép không gỉ, titan, hoặc thủy tinh. Các bộ phận hấp tiệt trùng và phụ kiện vệ sinh đảm bảo sản xuất theo điều kiện cấp dược phẩm.
Ghi dữ liệu tự động: Phần mềm thông minh ghi lại các thông số của quá trình sonication tự động trên thẻ nhớ SD tích hợp. Việc kiểm soát chính xác tất cả các thông số quy trình đảm bảo Reproducibility, tiêu chuẩn hóa của sản xuấtvà tạo điều kiện cho việc thực hiện các tiêu chuẩn an toàn sản phẩm dược phẩm.
Hielscher Ultrasonics’ bộ vi xử lý siêu âm có độ tin cậy cao và có thể được kiểm soát chính xác. Tất cả các ultrasonicators công nghiệp có thể điều chỉnh để cung cấp đầy đủ phạm vi từ biên độ thấp hơn đến rất cao. Sự mạnh mẽ của hệ thống siêu âm của Hielscher cho phép hoạt động 24/7 dưới nhiệm vụ nặng nề và trong môi trường đòi hỏi khắt khe.

Bảng dưới đây cho bạn một dấu hiệu về khả năng xử lý gần đúng của máy siêu âm:

batch Khối lượng Tốc độ dòng Thiết bị khuyến nghị
tấm đa giếng / microtiter N/a UIP400MTP (UIP400MTP)
1 đến 500ml 10 đến 200mL / phút UP100H
10 đến 2000mL 20 đến 400mL / phút UP200Ht, UP400St
0.1 đến 20L 00,2 đến 4L / phút UIP2000hdT
10 đến 100L 2 đến 10L / phút UIP4000hdT
N/a 10 đến 100L / phút UIP16000
N/a lớn hơn Cụm UIP16000

Liên hệ chúng tôi! / Hỏi chúng tôi!

Yêu cầu thêm thông tin

Vui lòng sử dụng mẫu dưới đây để yêu cầu thêm thông tin về bộ vi xử lý siêu âm, ứng dụng và giá cả. Chúng tôi sẽ vui mừng để thảo luận về quá trình của bạn với bạn và để cung cấp cho bạn một hệ thống siêu âm đáp ứng yêu cầu của bạn!










Máy đồng nhất siêu âm đáng tin cậy để cắt DNA

Siêu âm DNA Cắt
Chuyển thể từ Jkwchui dưới CC-BY-SA.03



Văn học/tài liệu tham khảo

  • Stittelaar, Koert; Amerongen, Geert; Kondova, Ivanela; Kuiken, Thijs; Lavieren, Rob; Pistoor, Frank; Niesters, Hubert; Doornum, Gerard; Van der Zeijst, Bernard; Mateo, Luis; Chaplin, Paul; Osterhaus, Albert (2005): Modified Vaccinia Virus Ankara Protects Macaques against Respiratory Challenge with Monkeypox Virus. Journal of Virology 79, 2005. 7845-51.
  • Shah Purvin, Parameswara Rao Vuddanda, Sanjay Kumar Singh, Achint Jain, and Sanjay Singh (2014): Pharmacokinetic and Tissue Distribution Study of Solid Lipid Nanoparticles of Zidovudine in Rats. Journal of Nanotechnology, Volume 2014.
  • J. Robin Harris, Andrei Soliakova, Richard J. Lewis, Frank Depoix, Allan Watkinson, Jeremy H. Lakeya (2012): Alhydrogel® adjuvant, ultrasonic dispersion and protein binding: a TEM and analytical study. Micron Volume 43, Issues 2–3, February 2012, 192-200.
  • Doron Melamed, Gabriel Leitner, E. Dan Heller (1991): A Vaccine against Avian Colibacillosis Based on Ultrasonic Inactivation of Escherichia coli. Avian Diseases Vol. 35, No. 1 (Jan. – Mar., 1991), 17-22.
  • Huang C-F, Wu T-C, Wu C-C, Lee C-C, Lo W-T, Hwang K-S, Hsu M-L, Peng H-J. (2011): Sublingual vaccination with sonicated Salmonella proteins and mucosal adjuvant induces mucosal and systemic immunity and protects mice from lethal enteritis. APMIS 119, 2011. 468–78.

Sự kiện đáng biết

Virus đậu mùa khỉ

Bệnh đậu mùa khỉ (MPV, MPXV, hoặc hMPXV) là một loài virus DNA sợi kép, gây ra một bệnh lây truyền từ động vật sang người do virus. Bệnh này được gọi là nhiễm bệnh đậu mùa khỉ và có thể xảy ra ở người và động vật. Nó thuộc chi Orthopoxvirus trong họ Poxviridae. Virus đậu mùa khỉ là một trong những loại virus orthopoxvirus ở người cùng với virus variola (VARV), cowpox (CPX) và vaccinia (VACV). Orthopoxvirus được đặc trưng bởi các hạt virus hình viên gạch lớn, chứa bộ gen DNA sợi kép khoảng 200.000 bp.

Xét nghiệm ELISA

ELISA là viết tắt của Xét nghiệm hấp thụ miễn dịch liên kết enzyme và là một xét nghiệm miễn dịch được dán nhãn được coi là tiêu chuẩn vàng của xét nghiệm miễn dịch. ELISA là một xét nghiệm miễn dịch, có giá trị về độ nhạy chẩn đoán cao, được sử dụng để phát hiện và định lượng các phân tử, bao gồm kháng thể, kháng nguyên, protein, glycoprotein và hormone. Nguyên lý của ELISA dựa trên tương tác kháng nguyên-kháng thể. Bằng cách tương tác kháng nguyên-kháng thể này, các kháng thể đặc hiệu liên kết với kháng nguyên đích của nó. Chỉ khi sự tương tác diễn ra, chất nền mới có thể liên kết với enzyme và có thể quan sát thấy sự chuyển đổi chất nền tiếp theo, điều đó có nghĩa là thu được kết quả dương tính.


Siêu âm hiệu suất cao! Phạm vi sản phẩm của Hielscher bao gồm toàn bộ quang phổ từ máy siêu âm phòng thí nghiệm nhỏ gọn trên các đơn vị băng ghế dự bị đến các hệ thống siêu âm công nghiệp đầy đủ.

Hielscher Ultrasonics sản xuất homogenizers siêu âm hiệu suất cao từ Phòng thí nghiệm đến kích thước công nghiệp.