homogenizers เนื้อเยื่ออัลตราโซนิก
- Ultrasonication ปลอดภัย & วิธีการที่มีประสิทธิภาพในการทําให้เนื้อเยื่อเป็นเนื้อเดียวกัน
- การใช้งานอัลตราโซนิกรวมถึงการเตรียมเนื้อเยื่อและสารแขวนลอยการสกัดโปรตีน DNA / RNA และสารประกอบที่ใช้งานอยู่ตลอดจนการกระตุ้น / การยับยั้งการทํางานของเอนไซม์และยีสต์
- ความสามารถในการควบคุมที่แม่นยําของโฮโมจีไนเซอร์อัลตราโซนิกชนิดโพรบช่วยให้สามารถเตรียมตัวอย่างเนื้อเยื่อได้อย่างน่าเชื่อถือ
การทําให้เป็นเนื้อเดียวกันของเนื้อเยื่อโดยใช้โพรบอัลตราโซนิก
การทําให้เป็นเนื้อเดียวกันของเนื้อเยื่อเป็นกระบวนการเตรียมตัวอย่างที่เตรียมเซลล์หรือจุลินทรีย์ของสัตว์และพืชก่อนการสกัดสสารภายในเซลล์ เช่น โปรตีน ดีเอ็นเอ หรือ อาร์เอ็นเอ เยื่อหุ้มเซลล์จะต้องแตกเพื่อปล่อยเนื้อหาของเซลล์ หลังจากทําลายผนังเซลล์โมเลกุลขนาดใหญ่ภายในเซลล์จะลอยอยู่ในสารละลายบัฟเฟอร์เพื่อให้ออร์แกเนลล์โปรตีนและ DNA / RNA พร้อมใช้งาน Homogenizers เนื้อเยื่ออัลตราโซนิกและตัวก่อกวนเซลล์เป็นเครื่องมือที่มีประสิทธิภาพมากสําหรับการหยุดชะงักของเซลล์การสลายและการสกัด
เครื่องอัลตราโซนิกชนิดโพรบ (เช่น UP200St ทรงพลัง 200 วัตต์) เป็นโฮโมจีไนเซอร์เนื้อเยื่อที่เชื่อถือได้และใช้กันอย่างแพร่หลายสําหรับการเตรียมตัวอย่าง
Ultrasonic Tissue Homogenizers เทียบกับเทคนิคการสลายทางเลือก
คุณอาจถามตัวเองว่าเทคนิคการหยุดชะงักของเซลล์และอุปกรณ์การทําให้เป็นเนื้อเดียวกันของเนื้อเยื่อใดเป็นตัวเลือกที่ดีที่สุดสําหรับห้องปฏิบัติการของคุณ ด้านล่างนี้คุณจะพบข้อโต้แย้งบางประการที่พูดถึงการสลายอัลตราโซนิกและการทําให้เป็นเนื้อเดียวกันของเนื้อเยื่อเนื่องจากอัลตราโซนิกมีข้อดีหลายประการเหนือวิธีการทําให้เป็นเนื้อเดียวกันทางเลือก:
- ประสิทธิภาพ: การทําให้เป็นเนื้อเดียวกันด้วยอัลตราโซนิกเป็นวิธีที่รวดเร็วและมีประสิทธิภาพในการขัดขวางเนื้อเยื่อและเซลล์ Homogenizers เนื้อเยื่ออัลตราโซนิกใช้หลักการทํางานของโพรงอากาศอะคูสติก วิธีนี้มีประสิทธิภาพสูงและสามารถทําลายเซลล์ได้ในเวลาไม่กี่วินาที เนื่องจากระดับความเข้มสามารถปรับได้จากเล็กน้อยเป็นรุนแรง sonication จึงมีประสิทธิภาพโดยเฉพาะอย่างยิ่งสําหรับเนื้อเยื่อแข็งหรือเส้นใยที่ยากต่อการทําให้เป็นเนื้อเดียวกันโดยใช้วิธีอื่น
- หลีกเลี่ยงการปนเปื้อนข้าม: Hielscher นําเสนอ homogenizers เนื้อเยื่ออัลตราโซนิกที่มีประสิทธิภาพซึ่งเตรียมตัวอย่างในการรักษาแบบ sonication ทางอ้อม ด้วย UIP400MTP (เหมาะสําหรับไมโครไทเตอร์และเพลตมัลติเวลล์) เช่นเดียวกับ VialTweeter และ CupHorn (เหมาะสําหรับขวดหลอดและบีกเกอร์) Hielscher นําเสนออุปกรณ์หยุดชะงักเซลล์อัลตราโซนิกสําหรับการทําให้เป็นเนื้อเดียวกันแบบไม่สัมผัสซึ่งช่วยลดความเสี่ยงของการปนเปื้อนข้ามระหว่างตัวอย่าง นอกจากนี้ยังช่วยลดความเสี่ยงในการนําสารปนเปื้อนจากพื้นผิวการเจียรหรืออุปกรณ์การทําให้เป็นเนื้อเดียวกันอื่นๆ
- ความยืดหยุ่น: การทําให้เป็นเนื้อเดียวกันด้วยอัลตราโซนิกสามารถใช้ได้กับขนาดและปริมาตรของตัวอย่างที่หลากหลายตั้งแต่ปริมาณน้อยไปจนถึงตัวอย่างเนื้อเยื่อขนาดใหญ่ นอกจากนี้การทําให้เป็นเนื้อเดียวกันด้วยอัลตราโซนิกยังเหมาะสําหรับตัวอย่างหลากหลายประเภทรวมถึงเนื้อเยื่อพืชเนื้อเยื่อสัตว์และการเพาะเลี้ยงจุลินทรีย์ ความเข้มและระยะเวลาของอัลตราโซนิกสามารถปรับได้เพื่อปรับระดับการหยุดชะงักสําหรับเนื้อเยื่อประเภทต่างๆ
- ความสามารถในการทําซ้ํา: การทําให้เป็นเนื้อเดียวกันด้วยอัลตราโซนิกให้ผลลัพธ์ที่สม่ําเสมอและช่วยให้สามารถควบคุมพารามิเตอร์การทําให้เป็นเนื้อเดียวกันได้อย่างแม่นยําเช่นกําลังขับและเวลาโซนิเคชั่น สิ่งนี้ช่วยให้มั่นใจได้ถึงความสามารถในการทําซ้ําและความถูกต้องของข้อมูลการทดลอง
- การเก็บรักษาโมเลกุลชีวภาพ: อัลตราโซนิกแบบโพรบเป็นการรักษาแบบไม่ใช้ความร้อน ซึ่งหมายความว่าผลกระทบไม่ได้ขึ้นอยู่กับความร้อน อย่างไรก็ตามการบําบัดทางกลทุกครั้งจะสร้างความร้อนตามกฎข้อที่สองของอุณหพลศาสตร์ ซึ่งหมายความว่าตัวอย่างจะอุ่นขึ้นเมื่อเวลาผ่านไป sonication นานขึ้น เครื่องอัลตราโซนิกล้ําสมัยของ Hielscher ติดตั้งเซ็นเซอร์อุณหภูมิและซอฟต์แวร์ตรวจสอบอุณหภูมิอัจฉริยะ ตัวเลือกการทําความเย็นที่ซับซ้อนช่วยป้องกันการเสื่อมสภาพของความร้อนและช่วยรักษาการทํางานของโมเลกุลชีวภาพที่ไวต่อความร้อน เช่น เอนไซม์และโปรตีน
- ประหยัดเวลา: ประสิทธิภาพสูงของอัลตราโซนิกแบบโพรบช่วยให้สามารถทําให้เนื้อเยื่อเป็นเนื้อเดียวกันได้อย่างรวดเร็วซึ่งช่วยประหยัดเวลาเมื่อเทียบกับวิธีการอื่น ๆ ที่ต้องใช้การจัดการทางกายภาพของเนื้อเยื่อที่กว้างขวางมากขึ้น
การทําให้เป็นเนื้อเดียวกันของเนื้อเยื่ออัลตราโซนิกมีข้อดีหลายประการเหนือวิธีการทําให้เป็นเนื้อเดียวกันทางเลือก นั่นคือเหตุผลที่โฮโมจีไนเซอร์เนื้อเยื่ออัลตราโซนิกเป็นเทคนิคการหยุดชะงักของเซลล์ที่ต้องการในการวิจัยและการใช้งานในอุตสาหกรรมต่างๆ
ตัวอย่างสําหรับโปรโตคอลการทําให้เป็นเนื้อเดียวกันของเนื้อเยื่อโดยใช้โพรบอัลตราโซนิก:
เครื่องอัลตราโซนิกอํานวยความสะดวกในการทําให้เนื้อเยื่อเป็นเนื้อเดียวกันโดยการใช้งานที่เรียบง่ายและขั้นตอนการทําให้เป็นเนื้อเดียวกันอย่างรวดเร็ว ในขณะเดียวกันพารามิเตอร์กระบวนการอัลตราโซนิกสามารถควบคุมและตรวจสอบได้เพื่อให้ผลลัพธ์มีความน่าเชื่อถือและทําซ้ําได้
วัสดุ:
- ตัวอย่างเนื้อเยื่อ (เช่น ตับ สมอง กล้ามเนื้อ)
- บัฟเฟอร์ (เช่น PBS, Tris-HCl)
- ค็อกเทลยับยั้งโปรตีเอส
- โฮโมจีไนเซอร์อัลตราโซนิก (ชนิดโพรบ)
- น้ำแข็ง
- หลอด microcentrifuge
- ปิ เปต
โปรโตคอลสําหรับการทําให้เนื้อเยื่ออัลตราโซนิกเป็นเนื้อเดียวกัน:
หมายเหตุ: ระยะเวลาและความเข้มของโซนิเคชั่นอาจต้องได้รับการปรับให้เหมาะสมขึ้นอยู่กับประเภทของเนื้อเยื่ออายุและสถานะสุขภาพตลอดจนการใช้งานปลายน้ําที่เฉพาะเจาะจง สิ่งสําคัญคือต้องเลือกบัฟเฟอร์ สารยับยั้งโปรตีเอส และสารเติมแต่งอื่นๆ อย่างระมัดระวังเพื่อเพิ่มประสิทธิภาพผลผลิตและคุณภาพของโฮโมจีเนต
เครื่องทําเนื้อเยื่ออัลตราโซนิก UP200Ht ด้วยฮอร์น / โพรบขนาด 2 มม. สําหรับการหยุดชะงักของเซลล์ การสลาย homogeniaztion ของเซลล์และการละลาย ตลอดจนการสกัดโปรตีน
ข้อได้เปรียบที่สําคัญของ Hielscher Ultrasonic Tissue Homogenizers
- การบดที่รวดเร็วและมีประสิทธิภาพการทําให้เป็นเนื้อเดียวกันการสลาย & การหยุดชะงักของเซลล์หรือการสกัดโดยการโพรงอากาศอัลตราโซนิกที่มีประสิทธิภาพ
- การใช้งานและใช้งานง่ายและใช้งานง่าย (เลือกเวอร์ชันอนาล็อกหรือดิจิตอล)
- ทําความสะอาดพื้นผิวที่สัมผัสกับผลิตภัณฑ์ได้ง่ายโดยการล้าง sonotrode ภายใต้ sonication (CIP clean-in-place / SIP sterilize-in-place)
- กล่องป้องกันเสียง (กล่องป้องกันเสียงสําหรับอุปกรณ์ห้องปฏิบัติการทําจากแก้วอะคริลิกอย่างสมบูรณ์เพื่อการมองเห็นอย่างเต็มที่จากทุกมุม)
- ควบคุมพารามิเตอร์กระบวนการได้อย่างเต็มที่ผ่านหน้าจอสัมผัสแบบดิจิตอลที่อุปกรณ์ (เครื่องอัลตราโซนิกดิจิตอล) หรือ Powermeter (สําหรับอุปกรณ์แอนะล็อก)
- การควบคุมอุณหภูมิแบบบูรณาการ (สําคัญสําหรับตัวอย่างเนื้อเยื่อที่ไวต่อความร้อนและไม่แน่นอน)
- การหยุดชั่วคราวในการเรียกใช้การทําให้เป็นเนื้อเดียวกันสามารถกําหนดและตั้งค่าล่วงหน้าได้เป็นรายบุคคลในเมนูดิจิทัล
- อุปกรณ์ดิจิทัลทั้งหมดมีการบันทึกข้อมูลอัตโนมัติ (บน SD/USB-ComboCard ในตัว) เซ็นเซอร์อุณหภูมิแบบเสียบได้ และรีโมทคอนโทรลของเบราว์เซอร์
- การรักษาหลายตัวอย่างด้วย ไวอัลทวีตเตอร์, คัพฮอร์น หรือโดยใช้ sonotrodes 4 หรือ 8 นิ้ว (เช่น สําหรับการรวมเข้ากับกระบวนการหุ่นยนต์ในห้องปฏิบัติการ)
- สําหรับการใช้งานขนาดเล็กและขนาดใหญ่
การเตรียมตัวอย่างด้วย โพรบอัลตราโซนิก UP100H.
ตารางด้านล่างให้ข้อบ่งชี้ถึงความสามารถในการประมวลผลโดยประมาณของเครื่องโฮโมจีไนเซอร์เนื้อเยื่ออัลตราโซนิกของเราสําหรับการสลายตัวของเซลล์การสลายและการสกัด:
| ปริมาณแบทช์ | อัตราการไหล | อุปกรณ์ที่แนะนํา |
|---|---|---|
| แผ่นมัลติเวล | ไม่มี | UIP400MTP |
| ขวดบีกเกอร์ขนาดเล็ก | ไม่มี | อัลตราโซนิก CupHorn |
| มากถึง 10 ขวด | ไม่มี | ไวอัลทวีตเตอร์ |
| 1 ถึง 500 มล. | 10 ถึง 200 มล. / นาที | UP100H |
| 10 ถึง 2000 มล. | 20 ถึง 400 มล. / นาที | UP200 ฮิต, UP400ST |
| 0.1 ถึง 20L | 0.2 ถึง 4L / นาที | UIP2000hdt |
ติดต่อเรา! / ถามเรา!
อัลตราโซนิก CupHorn สําหรับการ sonication ที่เข้มข้นของหลอดปิดและขวดสําหรับการทําให้เป็นเนื้อเดียวกันของตัวอย่างที่ปราศจากเชื้อ
ค้นหา Homogenizer เนื้อเยื่ออัลตราโซนิกที่เหมาะสมที่สุดสําหรับการใช้งานของคุณ
โฮโมจีไนเซอร์เนื้อเยื่ออัลตราโซนิก Hielscher มีช่วงเอาต์พุตอัลตราซาวนด์ระหว่าง 50W ถึง 16,000W (16kW)
คนงานในห้องปฏิบัติการพอใจกับการทํางานที่เรียบง่ายและใช้งานง่ายของเครื่องโฮโมจีไนเซอร์ในห้องปฏิบัติการอัลตราโซนิก Hielscher อุปกรณ์ของ Hielscher มาพร้อมกับการควบคุมแบบดิจิตอลหรืออนาล็อก
- ไวลทวีตเตอร์ เป็นโฮโมจีไนเซอร์อัลตราโซนิกที่มีประสิทธิภาพซึ่งช่วยให้สามารถ sonication ได้ถึง 10 ขวดหรือหลอดทดลองพร้อมกันในความเข้มเท่ากัน เนื่องจากการ sonication ทางอ้อมจึงหลีกเลี่ยงการปนเปื้อนข้ามและการสูญเสียตัวอย่างได้อย่างสมบูรณ์ การทําความสะอาดและการฆ่าเชื้อจะลดลงเหลือน้อยที่สุดเนื่องจากการใช้ขวดแบบใช้แล้วทิ้ง บล็อก sonotrode สามารถนึ่งฆ่าเชื้อได้
- เครื่องโซนิคเตอร์แผ่น UIP400MTP เหมาะอย่างยิ่งเมื่อคุณทํางานกับไมโครไทเตอร์และเพลตมัลติเวล เช่น เพลต 96 หลุม เพียงวางจานมัลติเวลล์หรือจานเพาะเชื้อใน UIP400MTP และตัวอย่างทั้งหมดจะได้รับเสียงอย่างสม่ําเสมอ ด้วย UIP400MTP Plate-Sonicator การประมวลผลตัวอย่างที่มีปริมาณงานสูงจะง่ายและมีประสิทธิภาพ!
- ในช่วงของเครื่องอัลตราโซนิกในห้องปฏิบัติการแบบโพรบสามารถเลือกโฮโมจีไนเซอร์ได้ขนาด 50 วัตต์ 100 วัตต์ 200 วัตต์และ 400 วัตต์
UP50H (50 วัตต์)
UP100H (100 วัตต์)
UP200 ฮิตต์ / UP200St (200 วัตต์)
UP400St (400 วัตต์)
การประยุกต์ใช้และการใช้ Homogenizers เนื้อเยื่ออัลตราโซนิก
Homogenizers อัลตราโซนิกมักใช้สําหรับการบดเนื้อเยื่อการหยุดชะงักของเซลล์ & การสลายและการทําให้เป็นเนื้อเดียวกันของตัวอย่างทางชีวภาพก่อนการสกัดสสารภายในเซลล์ในช่วงโมเลกุล โดยการ sonication ที่ควบคุมของตัวอย่างขั้นตอนทั้งหมดตั้งแต่การสลายไปจนถึงการสกัดและการทําให้เป็นเนื้อเดียวกันสามารถทําได้โดยใช้เครื่องรบกวนเซลล์อัลตราโซนิกเดียวกัน
ข้อได้เปรียบที่ยอดเยี่ยมของ homogenizers อัลตราโซนิกอยู่ที่อินพุตพลังงานที่ปรับได้ง่ายและความเข้มของ sonication เครื่องรบกวนเซลล์อัลตราโซนิก Hielscher (lysers) ช่วยให้สามารถควบคุมความเข้มของ sonication โดยการปรับแอมพลิจูดจาก 20% ถึง 100%
อีกทางเลือกหนึ่งสําหรับการทํางานต่อเนื่องสามารถตั้งค่าโฮโมจีไนเซอร์อัลตราโซนิกเป็นโหมดวงจรเช่นสําหรับการ sonication ของเนื้อเยื่อที่ไวต่อความร้อน Sonication ในโหมดพัลส์หมายความว่าเครื่องอัลตราโซนิกสร้างคลื่นอัลตราโซนิกที่เข้มข้นสูงในรอบเป็นระยะ ระยะเวลาของระยะเวลา sonication และเวลาพักสามารถกําหนดได้โดยผู้ใช้
ที่ การ sonication แบบพัลซิ่งในช่วงพักวัสดุที่โซนิคสามารถกลับสู่สถานะพักและตัวอย่างสามารถเย็นลงได้ (โดยใช้เวลาพักในการกระจายความร้อน) ด้วยเหตุนี้ จึงสามารถตั้งค่าความเข้มของการประมวลผลได้อย่างแม่นยําตามเนื้อเยื่อ และลดความร้อนของตัวอย่างที่ไม่ต้องการ
โฮโมจีไนเซอร์เนื้อเยื่ออัลตราโซนิกมีความทนทานและเป็นมิตรกับผู้ใช้ในขณะที่ให้ผลลัพธ์ที่เชื่อถือได้ทําให้มั่นใจได้ถึงความสามารถในการทําซ้ําเนื่องจากการควบคุมพารามิเตอร์กระบวนการที่สําคัญทั้งหมดอย่างเต็มที่
สาขาการใช้งานทั่วไปของการบดเนื้อเยื่ออัลตราโซนิกการหยุดชะงักของเซลล์การสลายการสกัดและการทําให้เป็นเนื้อเดียวกันพบได้ในห้องปฏิบัติการทางชีวภาพและเภสัชกรรมจุลชีววิทยาการวิจัยโปรตีโอมิกส์และจีโนม (เช่นการปล่อยโปรตีนก่อนการบัดแบบตะวันตกและการทดสอบอิมมูโนดูดซับที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ ELISA) แต่ยังในการผลิตสารสกัดจากพฤกษศาสตร์และสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพสําหรับอุตสาหกรรมอาหารยาและเครื่องสําอาง
- คลิกที่นี่เพื่อดูคําแนะนํากระบวนการเฉพาะเกี่ยวกับการเตรียมตัวอย่าง การทําให้เป็นเนื้อเดียวกันของเนื้อเยื่อ การสลายตัว และการสกัด (เช่น เซลล์ แบคทีเรีย สปอร์ สารออกฤทธิ์)!
- อ่านที่นี่ว่าเหตุใดเครื่องโซนิโคมิกจึงเป็นเครื่องมือที่ขาดไม่ได้สําหรับการวิจัยโปรตีโอมิกส์!
- เรียนรู้ว่า sonication อํานวยความสะดวกในการทํางานวิจัยจีโนมได้อย่างไร!
วรรณกรรม / อ้างอิง
- Nico Böhmer, Andreas Dautel, Thomas Eisele, Lutz Fischer (2012): Recombinant expression, purification and characterisation of the native glutamate racemase from Lactobacillus plantarum NC8. Protein Expr Purif. 2013 Mar;88(1):54-60.
- Brandy Verhalen, Stefan Ernst, Michael Börsch, Stephan Wilkens (2012): Dynamic Ligand-induced Conformational Rearrangements in P-glycoprotein as Probed by Fluorescence Resonance Energy Transfer Spectroscopy. J Biol Chem. 2012 Jan 6;287(2): 1112-27.
- Claudia Lindemann, Nataliya Lupilova, Alexandra Müller, Bettina Warscheid, Helmut E. Meyer, Katja Kuhlmann, Martin Eisenacher, Lars I. Leichert (2013): Redox Proteomics Uncovers Peroxynitrite-Sensitive Proteins that Help Escherichia coli to Overcome Nitrosative Stress. J Biol Chem. 2013 Jul 5; 288(27): 19698–19714.
- Elahe Motevaseli, Mahdieh Shirzad, Seyed Mohammad Akrami, Azam-Sadat Mousavi, Akbar Mirsalehian, Mohammad Hossein Modarressi (2013): Normal and tumour cervical cells respond differently to vaginal lactobacilli, independent of pH and lactate. ed Microbiol. 2013 Jul; 62(Pt 7):1065-1072.
ข้อเท็จจริงที่ควรค่าแก่การรู้
Homogenizers เนื้อเยื่ออัลตราโซนิกมักเรียกว่าโพรบ sonicator, sonic lyser, ultrasound disruptor, ultrasonic grinder, sono-ruptor, sonifier, sonic dismembrator, cell disrupter, ultrasonic disperser หรือ dissolver เงื่อนไขที่แตกต่างกันเป็นผลมาจากการใช้งานต่างๆที่สามารถเติมเต็มได้โดยการ sonication
Hielscher Ultrasonics ผลิตโฮโมจีไนเซอร์อัลตราโซนิกประสิทธิภาพสูงสําหรับการใช้งานผสมการกระจายอิมัลชันและการสกัดในระดับห้องปฏิบัติการนําร่องและอุตสาหกรรม