อัลตราโซนิกโฮโมจีไนเนื้อเยื่อ
- อัลตราโซนิกมีความปลอดภัย & วิธีการที่มีประสิทธิภาพของการทําให้เป็นเนื้อเดียวกันเนื้อเยื่อ
- การใช้งานอัลตราโซนิกรวมถึงเนื้อเยื่อเตรียมและสารแขวนลอยการสกัดโปรตีน DNA / RNA และสารออกฤทธิ์รวมถึงการกระตุ้น / ยับยั้งการทํางานของเอนไซม์และยีสต์
- ความสามารถในการควบคุมที่แม่นยําของ homogenizers อัลตราโซนิกชนิดโพรบช่วยให้สามารถเตรียมตัวอย่างเนื้อเยื่อได้อย่างน่าเชื่อถือ
การทําให้เป็นเนื้อเดียวกันของเนื้อเยื่อโดยใช้โพรบอัลตราโซนิก
การทําให้เป็นเนื้อเดียวกันของเนื้อเยื่อเป็นกระบวนการเตรียมตัวอย่างที่เซลล์สัตว์และพืชหรือจุลินทรีย์ถูกเตรียมไว้ก่อนการสกัดสสารภายในเซลล์เช่นโปรตีนดีเอ็นเอหรืออาร์เอ็นเอ เซลล์เมมบรานจะต้องแตกเพื่อปล่อยเนื้อหาของเซลล์ หลังจากทําลายผนังเซลล์โมเลกุลขนาดใหญ่ภายในเซลล์จะลอยอยู่ในสารละลายบัฟเฟอร์เพื่อให้ออร์แกเนลล์โปรตีนและ DNA / RNA พร้อมใช้งาน homogenizers เนื้อเยื่ออัลตราโซนิกและ disruptors เซลล์เป็นเครื่องมือที่มีประสิทธิภาพมากสําหรับการหยุดชะงักของเซลล์การสลายตัวและการสกัด
เครื่องอัลตราโซนิกชนิดโพรบ (เช่น, 200 วัตต์ UP200St ที่มีประสิทธิภาพ) เป็น homogenizers เนื้อเยื่อที่เชื่อถือได้และใช้กันอย่างแพร่หลายสําหรับการเตรียมตัวอย่าง
เนื้อเยื่ออัลตราโซนิก Homogenizers vs เทคนิคการ Lysis ทางเลือก
คุณอาจถามตัวเองว่าเทคนิคการหยุดชะงักของเซลล์และอุปกรณ์การทําให้เป็นเนื้อเดียวกันของเนื้อเยื่อใดเป็นตัวเลือกที่ดีที่สุดสําหรับห้องปฏิบัติการของคุณ ด้านล่างนี้คุณจะพบข้อโต้แย้งสองสามข้อที่พูดถึงการสลายตัวด้วยอัลตราโซนิกและการทําให้เป็นเนื้อเดียวกันของเนื้อเยื่อเนื่องจาก ultrasonication มีข้อดีหลายประการเหนือวิธีการทําให้เป็นเนื้อเดียวกันทางเลือก:
- ประสิทธิภาพ: การทําให้เป็นเนื้อเดียวกันด้วยอัลตราโซนิกเป็นวิธีที่รวดเร็วและมีประสิทธิภาพในการรบกวนเนื้อเยื่อและเซลล์ homogenizers เนื้อเยื่ออัลตราโซนิกใช้หลักการทํางานของโพรงอากาศอะคูสติก วิธีนี้มีประสิทธิภาพสูงและสามารถทําลายเซลล์ได้ในเวลาไม่กี่วินาที เนื่องจากระดับความเข้มสามารถปรับได้ตั้งแต่เล็กน้อยถึงรุนแรง sonication จึงมีประสิทธิภาพโดยเฉพาะอย่างยิ่งสําหรับเนื้อเยื่อแข็งหรือเส้นใยที่ยากต่อการทําให้เป็นเนื้อเดียวกันโดยใช้วิธีการอื่น
- หลีกเลี่ยงการปนเปื้อนข้าม: Hielscher นําเสนอ homogenizers เนื้อเยื่ออัลตราโซนิกที่มีประสิทธิภาพซึ่งเตรียมตัวอย่างในการรักษา sonication ทางอ้อม ด้วย UIP400MTP (เหมาะสําหรับไมโครไทเตอร์และแผ่นมัลติเวลล์) รวมถึง VialTweeter และ CupHorn (เหมาะสําหรับขวดหลอดและบีกเกอร์) Hielscher เสนออุปกรณ์รบกวนเซลล์อัลตราโซนิกสําหรับการทําให้เป็นเนื้อเดียวกันแบบไม่สัมผัสซึ่งช่วยลดความเสี่ยงของการปนเปื้อนข้ามระหว่างตัวอย่าง นอกจากนี้ยังลดความเสี่ยงในการนําสารปนเปื้อนจากพื้นผิวบดหรืออุปกรณ์การทําให้เป็นเนื้อเดียวกันอื่น ๆ
- ความยืดหยุ่น: การทําให้เป็นเนื้อเดียวกันด้วยอัลตราโซนิกสามารถใช้กับขนาดและปริมาตรตัวอย่างที่หลากหลายตั้งแต่ปริมาณขนาดเล็กไปจนถึงตัวอย่างเนื้อเยื่อขนาดใหญ่ นอกจากนี้การทําให้เป็นเนื้อเดียวกันด้วยอัลตราโซนิกยังเหมาะสําหรับตัวอย่างหลากหลายประเภทรวมถึงเนื้อเยื่อพืชเนื้อเยื่อสัตว์และการเพาะเลี้ยงจุลินทรีย์ ความเข้มและระยะเวลาของ ultrasonication สามารถปรับเพื่อเพิ่มประสิทธิภาพระดับการหยุดชะงักสําหรับเนื้อเยื่อประเภทต่างๆ
- ความสามารถในการทําซ้ํา: การทําให้เป็นเนื้อเดียวกันด้วยอัลตราโซนิกให้ผลลัพธ์ที่สม่ําเสมอและช่วยให้สามารถควบคุมพารามิเตอร์การทําให้เป็นเนื้อเดียวกันได้อย่างแม่นยําเช่นกําลังขับและเวลา sonication สิ่งนี้ช่วยให้มั่นใจได้ถึงความสามารถในการทําซ้ําและความถูกต้องของข้อมูลการทดลอง
- การเก็บรักษาชีวโมเลกุล: ultrasonication ชนิดโพรบเป็นการรักษาที่ไม่ใช่ความร้อน ซึ่งหมายความว่าผลกระทบของมันไม่ได้ขึ้นอยู่กับความร้อน อย่างไรก็ตามการรักษาเชิงกลทุกครั้งจะสร้างความร้อนตามกฎข้อที่สองของอุณหพลศาสตร์ ซึ่งหมายความว่าตัวอย่างจะอุ่นขึ้นเมื่อเวลาผ่านไปนานขึ้น เครื่องอัลตราโซนิกที่ล้ําสมัยของ Hielscher ติดตั้งเซ็นเซอร์อุณหภูมิและซอฟต์แวร์ตรวจสอบอุณหภูมิอัจฉริยะ ตัวเลือกการระบายความร้อนที่ซับซ้อนช่วยป้องกันการเสื่อมสภาพของความร้อนและช่วยรักษากิจกรรมของชีวโมเลกุลที่ไวต่อความร้อนเช่นเอนไซม์และโปรตีน
- ประหยัดเวลา: ประสิทธิภาพสูงของ ultrasonication ชนิดโพรบช่วยให้การทําให้เป็นเนื้อเดียวกันของเนื้อเยื่ออย่างรวดเร็วซึ่งช่วยประหยัดเวลาเมื่อเทียบกับวิธีการอื่น ๆ ที่ต้องการการจัดการทางกายภาพที่กว้างขวางมากขึ้นของเนื้อเยื่อ
โดยสรุปการทําให้เป็นเนื้อเดียวกันของเนื้อเยื่ออัลตราโซนิกมีข้อดีหลายประการมากกว่าวิธีการทําให้เป็นเนื้อเดียวกันทางเลือก นั่นคือเหตุผลที่ homogenizers เนื้อเยื่ออัลตราโซนิกเป็นเทคนิคการหยุดชะงักของเซลล์ที่ต้องการในการวิจัยต่างๆและการใช้งานในอุตสาหกรรม
ตัวอย่างสําหรับ Tissue Homogenization Protocol โดยใช้โพรบอัลตราโซนิก:
Ultrasonicators อํานวยความสะดวกในการทําให้เนื้อเยื่อเป็นเนื้อเดียวกันโดยใช้งานง่ายและขั้นตอนการทําให้เป็นเนื้อเดียวกันอย่างรวดเร็ว ในเวลาเดียวกันพารามิเตอร์กระบวนการอัลตราโซนิกสามารถควบคุมและตรวจสอบได้อย่างแม่นยําเพื่อให้ผลลัพธ์มีความน่าเชื่อถือและทําซ้ําได้
วัสดุ:
- ตัวอย่างเนื้อเยื่อ (เช่น ตับ สมอง กล้ามเนื้อ)
- บัฟเฟอร์ (เช่น PBS, Tris-HCl)
- ค็อกเทลยับยั้งโปรตีเอส
- อัลตราโซนิก homogenizer (ชนิดโพรบ)
- น้ำแข็ง
- หลอดไมโครเซนทริฟูจ
- ปิ เปต
โปรโตคอลสําหรับ Homogenization เนื้อเยื่ออัลตราโซนิก:
หมายเหตุ: ระยะเวลาและความเข้มของ sonication อาจต้องได้รับการปรับให้เหมาะสมขึ้นอยู่กับชนิดของเนื้อเยื่ออายุและสถานะสุขภาพรวมถึงการใช้งานปลายน้ําที่เฉพาะเจาะจง สิ่งสําคัญคือต้องเลือกบัฟเฟอร์สารยับยั้งโปรตีเอสและสารเติมแต่งอื่น ๆ อย่างระมัดระวังเพื่อเพิ่มประสิทธิภาพผลผลิตและคุณภาพของ homogenate
โฮโมจีไนเซอร์เนื้อเยื่ออัลตราโซนิก UP200Ht ด้วยฮอร์น / โพรบขนาด 2 มม. สําหรับการหยุดชะงักของเซลล์การสลายตัวการทําให้เป็นเนื้อเดียวกันของเซลล์และการละลายรวมถึงการสกัดโปรตีน
ข้อดีที่สําคัญของ Hielscher อัลตราโซนิกเนื้อเยื่อ Homogenizers
- บดอย่างรวดเร็วและมีประสิทธิภาพทำให้เป็นเนื้อเดียวกันสลาย & การหยุดชะงักมือถือหรือการสกัดโดย cavitation ล้ำเสียงที่มีประสิทธิภาพ
- การใช้งานง่ายและใช้งานง่ายและการดำเนินงาน (เลือกรุ่นอนาล็อกหรือดิจิตอล)
- ทำความสะอาดได้ง่ายของพื้นผิวผลิตภัณฑ์ติดต่อโดยการล้าง sonotrode ภายใต้ sonication (CIP สะอาดในสถานที่ / SIP ฆ่าเชื้อในสถานที่)
- กล่องป้องกันเสียง (เสียงกล่องป้องกันสำหรับอุปกรณ์ห้องปฏิบัติการที่ทำมาจากแก้วคริลิคสำหรับการแสดงผลแบบเต็มรูปแบบจากมุมใด)
- การควบคุมเต็มรูปแบบผ่านพารามิเตอร์กระบวนการผ่านการสัมผัสจอแสดงผลดิจิตอลที่อุปกรณ์ (ultrasonicators ดิจิตอล) หรือ PowerMeter (สำหรับอุปกรณ์อะนาล็อก)
- การควบคุมอุณหภูมิแบบบูรณาการ (สำคัญสำหรับตัวอย่างเนื้อเยื่อ labile ไวต่อความร้อน)
- การหยุดในการทำงานเป็นเนื้อเดียวกันสามารถกำหนดเป็นรายบุคคลและที่ตั้งไว้ล่วงหน้าในเมนูดิจิตอล
- อุปกรณ์ดิจิตอลที่มีการติดตั้งข้อมูลโดยอัตโนมัติบันทึก (ใน SD / บูรณาการ USB-ComboCard) เซ็นเซอร์อุณหภูมิ plugable และการควบคุมระยะไกลเบราว์เซอร์
- การรักษาแบบ multi-sample กับ VialTweeter, เต้าฮอร์น หรือโดยการใช้ sonotrodes 4- หรือ 8 นิ้ว (เช่นเพื่อบูรณาการในกระบวนการทางห้องปฏิบัติการหุ่นยนต์)
- สำหรับขนาดเล็กและการใช้งานขนาดใหญ่
การเตรียมตัวอย่างด้วย โพรบอัลตราโซนิก UP100H.
ตารางด้านล่างแสดงความสามารถในการประมวลผลโดยประมาณของ homogenizers เนื้อเยื่ออัลตราโซนิกของเราสําหรับการสลายตัวของเซลล์การสลายตัวและการสกัด:
| ปริมาณชุด | อัตราการไหล | อุปกรณ์ที่แนะนำ |
|---|---|---|
| แผ่นหลายหลุม | n/a | UIP400MTP |
| ขวด, บีกเกอร์ขนาดเล็ก | n/a | อัลตราโซนิก cuphorn |
| สูงสุด 10 ขวด | n/a | VialTweeter |
| 1 ถึง 500mL | 10 ถึง 200mL / นาที | UP100H |
| 10 ถึง 2000ml | 20 ถึง 400ml / นาที | Uf200 ःที, UP400St |
| 00.1 เพื่อ 20L | 00.2 เพื่อ 4L / นาที | UIP2000hdT |
ติดต่อเรา! / ถามเรา!
อัลตราโซนิก cuphorn สําหรับ sonication ที่รุนแรงของหลอดปิดและขวดสําหรับการทําให้เป็นเนื้อเดียวกันปลอดเชื้อของตัวอย่าง
ค้นหา homogenizer เนื้อเยื่ออัลตราโซนิกที่ดีที่สุดสําหรับการใช้งานของคุณ
Hielscher homogenizers เนื้อเยื่ออัลตราโซนิกจะสามารถใช้ได้กับช่วงที่ผลผลิตอัลตราซาวนด์ระหว่าง 50W เพื่อ 16,000W (16kW)
คนงานในห้องปฏิบัติการมีความยินดีกับการทํางานที่เรียบง่ายและใช้งานง่ายของ homogenizers ห้องปฏิบัติการอัลตราโซนิก Hielscher อุปกรณ์ Hielscher มาพร้อมกับการควบคุมแบบดิจิตอลหรืออนาล็อกขึ้นอยู่กับข้อกําหนดเฉพาะ
การ VialTweeter เป็นอุปกรณ์อัลตราโซนิกที่มีประสิทธิภาพที่ช่วยให้ sonication พร้อมกันถึง 10 ขวดหรือหลอดทดสอบที่ระดับความเข้มเดียวกัน เนื่องจาก sonication ทางอ้อม, การปนเปื้อนและการสูญเสียตัวอย่างหลีกเลี่ยงอย่างสมบูรณ์ การทำความสะอาดและฆ่าเชื้อจะลดลงไปต่ำสุดที่เกิดจากการใช้ขวดทิ้ง sonotrode บล็อกเป็นหม้อนึ่งฆ่าเชื้อ
ในช่วงของการสอบสวนชนิด ultrasonicators ห้องปฏิบัติการอุปกรณ์สามารถเลือกได้ด้วย 50W, 100w, 200W, 250W และ 400W.
สำหรับปริมาณกระบวนการขนาดใหญ่ที่ม้านั่งบนสารทำลายอัลตราโซนิกจะสามารถใช้ได้กับ 500W, 1000W, 1500W และ 2000W.
และสำหรับกระแสปริมาณสูง ultrasonicators ของ 4000W, 10, 000W หรือ 16, 000W มี clusterizable และจึงสามารถที่จะ lyse และเป็นเนื้อเดียวกันจริงจำนวนของเรื่องโทรศัพท์มือถือทุก
การประยุกต์ใช้และการใช้ประโยชน์ของ Homogenizers เนื้อเยื่ออัลตราโซนิก
homogenizers อัลตราโซนิกเป็นที่นิยมใช้สำหรับบดเนื้อเยื่อเซลล์หยุดชะงัก & สลายและเป็นเนื้อเดียวกันของตัวอย่างทางชีวภาพก่อนที่จะมีการสกัดของเรื่องเซลล์ในช่วงโมเลกุล โดย sonication ควบคุมของกลุ่มตัวอย่างทุกขั้นตอนจากการสลายการสกัดและการทำให้เป็นเนื้อเดียวกันสามารถดำเนินการได้โดยใช้เซลล์เดียวกัน disruptor อัลตราโซนิก
ข้อได้เปรียบที่ดีของ homogenizers อัลตราโซนิกอยู่ในอินพุตพลังงานที่ปรับได้ง่ายและความเข้มของ sonication Hielscher ultrasonic cell disruptors (lysers) อนุญาตให้ควบคุมความเข้มของ sonication โดยการปรับแอมพลิจูดจาก 20% เป็น 100%
อีกทางเลือกหนึ่งในการดำเนินงานอย่างต่อเนื่อง homogenizer ล้ำสามารถตั้งค่าให้โหมดวงจรเช่น สำหรับ sonication ของเนื้อเยื่อความร้อนที่สำคัญ sonication ในโหมดการเต้นของชีพจรหมายความ ultrasonicator สร้างคลื่นอัลตราโซนิกที่รุนแรงในระดับสูงในรอบระยะ ระยะเวลาของช่วงเวลา sonication และเวลาที่เหลือสามารถตั้งค่าเป็นรายบุคคลโดยผู้ใช้
ที่ sonication ชีพจรในช่วงระยะเวลาที่เหลือวัสดุ sonicated สามารถกลับไปยังรัฐที่พักผ่อนและตัวอย่างสามารถเย็นลง (โดยใช้เวลาที่เหลือสำหรับการกระจายความร้อน) ดังนั้นการประมวลผลความเข้มที่สามารถตั้งค่าได้อย่างถูกต้องตามเนื้อเยื่อและเครื่องทำความร้อนตัวอย่างที่ไม่พึงประสงค์จะลดลง
อัลตราโซนิก homogenizers เนื้อเยื่อที่มีประสิทธิภาพและใช้งานง่ายในขณะที่การผลิตผลลัพธ์ที่น่าเชื่อถือเชื่อมั่นในการทำซ้ำเนื่องจากการควบคุมเต็มรูปแบบผ่านพารามิเตอร์กระบวนการสำคัญทั้งหมด
การใช้งานทั่วไปของการบดเนื้อเยื่ออัลตราโซนิกการหยุดชะงักของเซลล์การสลายตัวการสกัดและการทําให้เป็นเนื้อเดียวกันพบได้ในห้องปฏิบัติการทางชีวภาพและเภสัชกรรมจุลชีววิทยาโปรตีโอมิกและการวิจัยจีโนม (เช่นการปล่อยโปรตีนก่อนการซับแบบตะวันตกและการทดสอบอิมมูโนซอร์เบนต์ที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ ELISA) แต่ยังอยู่ในการผลิตสารสกัดจากพฤกษศาสตร์และสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพสําหรับอุตสาหกรรมอาหารยาและเครื่องสําอาง
คลิกที่นี่สำหรับคำแนะนำกระบวนการที่เฉพาะเจาะจงเกี่ยวกับการเตรียมตัวเป็นเนื้อเดียวกันเนื้อเยื่อสลายและการสกัด (เช่นเซลล์แบคทีเรียสปอร์, สารประกอบที่ใช้งาน)!
วรรณกรรม / อ้างอิง
- Nico Böhmer, Andreas Dautel, Thomas Eisele, Lutz Fischer (2012): Recombinant expression, purification and characterisation of the native glutamate racemase from Lactobacillus plantarum NC8. Protein Expr Purif. 2013 Mar;88(1):54-60.
- Brandy Verhalen, Stefan Ernst, Michael Börsch, Stephan Wilkens (2012): Dynamic Ligand-induced Conformational Rearrangements in P-glycoprotein as Probed by Fluorescence Resonance Energy Transfer Spectroscopy. J Biol Chem. 2012 Jan 6;287(2): 1112-27.
- Claudia Lindemann, Nataliya Lupilova, Alexandra Müller, Bettina Warscheid, Helmut E. Meyer, Katja Kuhlmann, Martin Eisenacher, Lars I. Leichert (2013): Redox Proteomics Uncovers Peroxynitrite-Sensitive Proteins that Help Escherichia coli to Overcome Nitrosative Stress. J Biol Chem. 2013 Jul 5; 288(27): 19698–19714.
- Elahe Motevaseli, Mahdieh Shirzad, Seyed Mohammad Akrami, Azam-Sadat Mousavi, Akbar Mirsalehian, Mohammad Hossein Modarressi (2013): Normal and tumour cervical cells respond differently to vaginal lactobacilli, independent of pH and lactate. ed Microbiol. 2013 Jul; 62(Pt 7):1065-1072.
ข้อเท็จจริงที่รู้
อัลตราโซนิก homogenizers เนื้อเยื่อมักจะถูกเรียกว่าคลื่นเสียงสอบสวน lyser โซนิค disruptor อัลตราซาวนด์, เครื่องบดล้ำ Sono-เกอร์, sonifier, dismembrator โซนิค disrupter เซลล์กระจายอัลตราโซนิกหรือ Dissolver เงื่อนไขที่แตกต่างกันเป็นผลมาจากการใช้งานต่างๆที่สามารถปฏิบัติตาม sonication
Hielscher Ultrasonics ผลิต homogenizers อัลตราโซนิกประสิทธิภาพสูงสําหรับการใช้งานผสมกระจาย emulsification และสกัดในห้องปฏิบัติการนักบินและอุตสาหกรรมขนาด