Sonication for Lysis: การหยุดชะงักและการสกัดของเซลล์

การสลายตัวของเซลล์หรือการสลายตัวเป็นส่วนหนึ่งของการเตรียมตัวอย่างทุกวันในห้องปฏิบัติการเทคโนโลยีชีวภาพ เป้าหมายของการสลายตัวคือการทําลายส่วนต่าง ๆ ของผนังเซลล์หรือเซลล์ที่สมบูรณ์เพื่อปล่อยโมเลกุลทางชีวภาพ homogenizers อัลตราโซนิกใช้กันอย่างแพร่หลายสําหรับการสลายเซลล์ที่ประสบความสําเร็จ ข้อได้เปรียบที่สําคัญของเครื่องอัลตราโซนิกที่ซับซ้อนคือการควบคุมพารามิเตอร์กระบวนการอย่างแม่นยําเช่นความเข้มและอุณหภูมิซึ่งช่วยให้การหยุดชะงักและการสกัดเซลล์ที่อ่อนโยน แต่มีประสิทธิภาพสูง

Cell Lysis โดยใช้ Ultrasound

เครื่องอัลตราโซนิกชนิดโพรบเช่น UP200St เป็นโฮโมจีไนเซอร์เนื้อเยื่อที่เชื่อถือได้และใช้กันอย่างแพร่หลายสําหรับการเตรียมตัวอย่างในพันธุศาสตร์เช่นสําหรับ Sonication-Assisted Agrobacterium-Mediated Transformation (SAAT)การสลายตัวและการสกัดเซลล์อัลตราโซนิกเป็นวิธีการที่ใช้ในการทําลายเซลล์เปิดและแยกเนื้อหาโดยใช้คลื่นเสียงความถี่สูงเช่นอัลตราซาวนด์ Sonication เป็นเทคนิคการสลายซึ่งใช้กันอย่างแพร่หลายเป็นวิธีการที่เป็นที่ยอมรับและเชื่อถือได้ของการหยุดชะงักของเซลล์และการสกัดวัสดุภายในเซลล์ อัลตราโซนิกไลซิสเป็นเทคนิคที่เชื่อถือได้ในการเตรียมไลเสตที่มีเช่นพลาสมิด, การทดสอบตัวรับ, โปรตีน, ดีเอ็นเอ, อาร์เอ็นเอ เป็นต้น เนื่องจากความเข้มของอัลตราโซนิกสามารถปรับระดับได้โดยการปรับพารามิเตอร์กระบวนการความเข้มของ sonication ที่เหมาะสมจากอ่อนมากถึงรุนแรงสามารถตั้งค่าเป็นรายบุคคลสําหรับแต่ละสารและสื่อเพื่อตอบสนองความต้องการใช้งานเฉพาะ ขั้นตอนต่อไปของการสลายตัวคือการแยกส่วนการแยกออร์แกเนลล์หรือ / และการสกัดโปรตีนและการทําให้บริสุทธิ์ วัสดุที่สกัด (= ไลเสต) จะต้องถูกแยกออกและอยู่ภายใต้การตรวจสอบหรือการใช้งานเพิ่มเติมเช่นสําหรับการวิจัยโปรตีโอมิก

เครื่องทําลายห้องปฏิบัติการอัลตราโซนิก UP100H และ UP400St สําหรับการเตรียมตัวอย่าง (การทําให้เป็นเนื้อเดียวกัน, การสลายตัว, การสกัด)

อัลตราโซนิก homogenizers UP100H (100 วัตต์) และ UP400St (400 วัตต์) ·สําหรับการเตรียมตัวอย่างเช่นการสลายและการสกัด

ขอข้อมูล





เมื่อเทียบกับการสลายตัวของเซลล์และวิธีการสกัดอื่น ๆ การสลายเซลล์อัลตราโซนิกมีข้อดีหลายประการ:

  1. ความเร็ว: การสลายตัวและการสกัดเซลล์อัลตราโซนิกเป็นวิธีที่รวดเร็วซึ่งสามารถทําลายเซลล์เปิดได้ในเวลาไม่กี่วินาที สิ่งนี้เร็วกว่าวิธีการอื่น ๆ เช่นการทําให้เป็นเนื้อเดียวกันการละลายน้ําแข็งหรือการกัดลูกปัด
  2. ประสิทธิภาพ: การสลายตัวและการสกัดเซลล์อัลตราโซนิกสามารถใช้ในการรักษาตัวอย่างขนาดเล็กขนาดใหญ่หรือหลายตัวอย่างพร้อมกันทําให้มีประสิทธิภาพมากกว่าวิธีการอื่น ๆ ที่ต้องใช้การประมวลผลตัวอย่างขนาดเล็กเป็นรายบุคคล
  3. ปราศจากสารเคมี: การสลายตัวและการสกัดเซลล์อัลตราโซนิกเป็นวิธีที่ไม่รุกรานซึ่งไม่จําเป็นต้องใช้สารเคมีหรือเอนไซม์ที่รุนแรง สิ่งนี้ทําให้เหมาะสําหรับการใช้งานที่ต้องรักษาความสมบูรณ์ของเนื้อหาของเซลล์ สามารถหลีกเลี่ยงการปนเปื้อนที่ไม่พึงประสงค์ของตัวอย่างได้
  4. ผลตอบแทนสูง: การสลายตัวและการสกัดของเซลล์อัลตราโซนิกสามารถสกัดปริมาณเซลล์ที่ให้ผลผลิตสูงรวมถึง DNA, RNA และโปรตีน นี่เป็นเพราะคลื่นเสียงความถี่สูงแตกเปิดผนังเซลล์และปล่อยเนื้อหาลงในสารละลายโดยรอบ
  5. การควบคุมอุณหภูมิ: เครื่องอัลตราโซนอลเซอร์ที่ซับซ้อนช่วยให้สามารถควบคุมอุณหภูมิของตัวอย่างได้อย่างแม่นยํา sonicators ดิจิตอล Hielscher ติดตั้งเซ็นเซอร์อุณหภูมิแบบเสียบได้และซอฟต์แวร์ตรวจสอบอุณหภูมิ
  6. จำลอง: โปรโตคอลสําหรับการสลายเซลล์อัลตราโซนิกสามารถทําซ้ําได้อย่างง่ายดายและจับคู่กับปริมาตรตัวอย่างที่ใหญ่ขึ้นหรือเล็กลงที่แตกต่างกันโดยการเพิ่มขนาดเชิงเส้นอย่างง่าย
  7. อเนกประสงค์: การสลายตัวและการสกัดเซลล์อัลตราโซนิกสามารถใช้ในการสกัดเซลล์ได้หลากหลายประเภทรวมถึงแบคทีเรียยีสต์เชื้อราเซลล์พืชและสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม นอกจากนี้ยังสามารถใช้ในการสกัดโมเลกุลประเภทต่างๆ รวมถึงโปรตีน DNA RNA และไขมัน
  8. การเตรียมตัวอย่างจํานวนมากพร้อมกัน: Hielscher Ultrasonics นําเสนอโซลูชั่นที่หลากหลายเพื่อประมวลผลตัวอย่างจํานวนมากได้อย่างสะดวกสบายภายใต้เงื่อนไขกระบวนการเดียวกัน ทําให้ขั้นตอนการเตรียมตัวอย่างของการสลายและการสกัดมีประสิทธิภาพสูงและประหยัดเวลา
  9. ง่ายต่อการใช้: อุปกรณ์การสลายเซลล์อัลตราโซนิกและการสกัดใช้งานง่ายและต้องการการฝึกอบรมน้อยที่สุด อุปกรณ์นี้ยังประหยัดเนื่องจากเป็นการลงทุนเพียงครั้งเดียวโดยไม่มีข้อกําหนดสําหรับการซื้อการกําจัดซ้ํา สิ่งนี้ทําให้น่าสนใจสําหรับนักวิจัยและห้องปฏิบัติการที่หลากหลาย

โดยรวมแล้วการสลายตัวและการสกัดเซลล์อัลตราโซนิกเป็นวิธีที่รวดเร็วมีประสิทธิภาพควบคุมได้อย่างแม่นยําและหลากหลายสําหรับการสกัดเนื้อหาของเซลล์ ข้อดีของวิธีการทางเลือกทําให้เป็นตัวเลือกที่น่าสนใจสําหรับการวิจัยและการใช้งานในอุตสาหกรรมที่หลากหลาย

หลักการทํางานของ Lysis เซลล์อัลตราโซนิก

การสลายตัวและการสกัดเซลล์อัลตราโซนิกใช้คลื่นเสียงความถี่สูงเพื่อขัดขวางเซลล์และแยกเนื้อหา คลื่นเสียงสร้างการเปลี่ยนแปลงความดันในของเหลวโดยรอบทําให้ฟองอากาศขนาดเล็กก่อตัวและยุบตัวในกระบวนการที่เรียกว่าโพรงอากาศ ฟองอากาศเหล่านี้สร้างแรงทางกลที่มีความเข้มข้นสูงซึ่งสามารถทําลายเซลล์เปิดและปล่อยเนื้อหาลงในสารละลายโดยรอบ

การสลายตัวของเซลล์โดยใช้เครื่องอัลตราโซนิกมักเกี่ยวข้องกับขั้นตอนต่อไปนี้:

  • ตัวอย่างถูกวางไว้ในหลอดหรือภาชนะที่มีบัฟเฟอร์เหลว
  • หัววัดอัลตราโซนิกถูกแทรกเข้าไปในตัวอย่างและใช้คลื่นเสียงความถี่สูงที่มีประมาณ 20-30 kHz
  • คลื่นอัลตราซาวนด์ทําให้เกิดการสั่นและโพรงอากาศในของเหลวโดยรอบสร้างแรงที่แปลเป็นภาษาท้องถิ่นที่ทําลายเซลล์เปิดและปล่อยเนื้อหา
  • ตัวอย่างจะถูกหมุนเหวี่ยงหรือกรองเพื่อกําจัดเศษเซลล์ใด ๆ และเนื้อหาที่สกัดจะถูกรวบรวมเพื่อการวิเคราะห์ปลายน้ํา
สกัดอัลตราโซนิกทํางานโดยการรบกวนโครงสร้างเซลล์และส่งเสริมการถ่ายโอนมวล

คลื่นอัลตราซาวนด์ที่ทรงพลังขัดขวางเมทริกซ์เซลล์ของโครงสร้างทางชีวภาพและปล่อยสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพ การถ่ายโอนมวลระหว่างวัสดุพืชและตัวทําละลาย (เช่นบัฟเฟอร์) จะทวีความรุนแรงขึ้น (กราฟิก: ©Vilkhu et al., 2006)

คลิปวิดีโอนี้แสดง Hielscher homogenizer อัลตราโซนิก UP100H, ultrasonicator ใช้กันอย่างแพร่หลายสําหรับการเตรียมตัวอย่างในห้องปฏิบัติการ

อัลตราโซนิกโฮโมจีไนเซอร์ UP100H

ภาพขนาดย่อของวิดีโอ

ข้อเสียของวิธีการ Lysis ทั่วไป

ในระหว่างการทํางานในห้องปฏิบัติการคุณอาจเคยประสบกับความยุ่งยากในการสลายเซลล์โดยใช้โปรโตคอลการสลายแบบกลไกหรือทางเคมีแบบดั้งเดิม

  • การสลายทางกล: วิธีการสลายตัวทางกลเช่นการบดด้วยปูนและสากหรือการทําให้เป็นเนื้อเดียวกันโดยใช้เครื่องกดแบบฝรั่งเศสโรงสีลูกปัดหรือระบบโรเตอร์สเตเตอร์มักขาดตัวเลือกการควบคุมและการปรับล่วงหน้า ซึ่งหมายความว่าการใช้การกัดและการเจียรสามารถสร้างความร้อนและแรงเฉือนได้อย่างรวดเร็วซึ่งสามารถทําลายตัวอย่างและโปรตีนที่ทําให้เสียสภาพได้ นอกจากนี้ยังอาจใช้เวลานานและต้องใช้วัสดุเริ่มต้นจํานวนมาก
  • การสลายตัวทางเคมี: วิธีการสลายทางเคมีเช่นการสลายด้วยผงซักฟอกสามารถทําลายตัวอย่างได้โดยขัดขวางไขมัน bilayer และโปรตีนที่ทําให้เสียสมดุล นอกจากนี้ยังอาจต้องใช้หลายขั้นตอนและอาจทิ้งสารปนเปื้อนที่เหลืออยู่ซึ่งรบกวนการใช้งานปลายน้ํา การค้นหาปริมาณที่เหมาะสมของผงซักฟอกเป็นความท้าทายเพิ่มเติม
  • รอบการแช่แข็งละลาย: วัฏจักรการละลายน้ําแข็งอาจทําให้เยื่อหุ้มเซลล์แตก แต่รอบซ้ํา ๆ อาจทําให้เกิดการเสื่อมสภาพและการเสื่อมสภาพของโปรตีน วิธีนี้อาจต้องใช้หลายรอบซึ่งอาจใช้เวลานานและมักส่งผลให้ผลผลิตลดลง
  • เอนไซม์ lysis: วิธีการไลซิสของเอนไซม์สามารถเฉพาะเจาะจงกับเซลล์บางประเภทและต้องใช้หลายขั้นตอนทําให้ใช้เวลานาน พวกเขายังสร้างของเสียและต้องการการเพิ่มประสิทธิภาพอย่างระมัดระวังเพื่อหลีกเลี่ยงการเสื่อมสภาพของตัวอย่าง ชุดไลซิสเอนไซม์มักมีราคาแพง หากขั้นตอนการสลายเอนไซม์ในปัจจุบันของคุณให้ผลลัพธ์ไม่เพียงพอ sonication เป็นวิธีเสริมฤทธิ์กันสามารถใช้เพื่อเพิ่มการหยุดชะงักของเซลล์

ในทางตรงกันข้ามกับวิธีการสลายเซลล์ทางกลและเคมีทั่วไป sonication เป็นเครื่องมือที่มีประสิทธิภาพและเชื่อถือได้มากสําหรับการสลายตัวของเซลล์ที่ช่วยให้สามารถควบคุมพารามิเตอร์ sonication ได้อย่างสมบูรณ์ สิ่งนี้ทําให้มั่นใจได้ถึงการเลือกสรรสูงในการปล่อยวัสดุและความบริสุทธิ์ของผลิตภัณฑ์ [cf. Balasundaram และคณะ, 2009]
เหมาะสําหรับเซลล์ทุกประเภทและสามารถใช้งานได้ง่ายในขนาดเล็กและขนาดใหญ่ – ภายใต้สภาวะที่ควบคุมได้เสมอ Ultrasonicators ทําความสะอาดง่าย โฮโมจีไนเซอร์อัลตราโซนิกมีฟังก์ชั่น clean-in-place (CIP) และ sterilize-in-place (SIP) เสมอ sonotrode ประกอบด้วยแตรไทเทเนียมขนาดใหญ่ซึ่งสามารถเช็ดหรือล้างในน้ําหรือตัวทําละลาย (ขึ้นอยู่กับสื่อการทํางาน) การบํารุงรักษาเครื่องอัลตราโซนิกเป็นเพราะความทนทานของพวกเขาเกือบจะละเลย

 

บทช่วยสอนนี้อธิบายว่า sonicator ประเภทใดดีที่สุดสําหรับงานเตรียมตัวอย่างของคุณเช่น lysis, การหยุดชะงักของเซลล์, การแยกโปรตีน, การกระจายตัวของ DNA และ RNA ในห้องปฏิบัติการการวิเคราะห์และการวิจัย เลือกประเภท sonicator ที่เหมาะสําหรับการใช้งานปริมาณตัวอย่างหมายเลขตัวอย่างและปริมาณงานของคุณ Hielscher Ultrasonics มี homogenizer อัลตราโซนิกที่เหมาะสําหรับคุณ!

วิธีค้นหา sonicator ที่สมบูรณ์แบบสําหรับการหยุดชะงักของเซลล์และการสกัดโปรตีนในวิทยาศาสตร์และการวิเคราะห์

ภาพขนาดย่อของวิดีโอ

 

อัลตราโซนิกไลซิสและการหยุดชะงักของเซลล์

โดยทั่วไปการสลายตัวอย่างในห้องปฏิบัติการจะใช้เวลาระหว่าง15วินาทีและ2นาที ในฐานะที่เป็นความรุนแรงของ sonication เป็นเรื่องง่ายมากที่จะปรับโดยการตั้งค่าความกว้างเวลา sonication เช่นเดียวกับการเลือกอุปกรณ์ที่เหมาะสมก็เป็นไปได้ที่จะทำลายเยื่อหุ้มเซลล์อย่างอ่อนโยนหรือกะทันหันขึ้นอยู่กับโครงสร้างของเซลล์และวัตถุประสงค์ของการสลาย ( เช่นการสกัดดีเอ็นเอต้อง sonication นุ่มการสกัดโปรตีนที่สมบูรณ์ของแบคทีเรียต้องมีการรักษาอัลตราซาวนด์ที่รุนแรงมากขึ้น) อุณหภูมิในระหว่างกระบวนการสามารถตรวจสอบได้โดยเซ็นเซอร์อุณหภูมิแบบบูรณาการและสามารถควบคุมได้อย่างง่ายดายโดยการระบายความร้อน (น้ำแข็งหรือเซลล์ไหลด้วยแจ็คเก็ตระบายความร้อน) หรือ sonication ในโหมดการทำงาน ในระหว่าง sonication โหมดชีพจร sonication สั้นระเบิดรอบของระยะเวลา1-15 วินาทีช่วยให้การกระจายความร้อนและเย็นในช่วงระยะเวลานาน
ทุกกระบวนการอัลตราซาวนด์ที่ขับเคลื่อนด้วยจะสมบูรณ์ทำซ้ำและปรับขนาดได้เป็นเส้นตรง

ขอข้อมูล





VialTweeter เป็นอัลตร้าโอนิคาเตอร์ MultiSample ที่ช่วยให้ตัวอย่างเป็นเนื้อเดียวกันที่เชื่อถือได้ภายใต้สภาวะปลอดเชื้อ

ขวดทวีตเตอร์ เป็น homogeniser อัลตราโซนิกสําหรับการเตรียมพร้อมกันสม่ําเสมอและรวดเร็วปลอดเชื้อของตัวอย่างจํานวนมาก

อัลตราโซนิก Homogenizers สําหรับ Lysis เซลล์และการสกัด

อุปกรณ์อัลตราโซนิกประเภทต่างๆช่วยให้สามารถจับคู่เป้าหมายการเตรียมตัวอย่างและเพื่อให้มั่นใจถึงความเป็นมิตรต่อผู้ใช้และความสะดวกสบายในการใช้งาน ultrasonicators ชนิดโพรบเป็นอุปกรณ์ที่พบมากที่สุดในห้องปฏิบัติการ เหมาะสมที่สุดสําหรับการเตรียมตัวอย่างขนาดเล็กและขนาดกลางที่มีปริมาตร 0.1 มล. ถึง 1,000 มล. ขนาดพลังงานที่แตกต่างกันและ sonotrodes ช่วยให้สามารถปรับ ultrasonicator ให้เข้ากับปริมาตรตัวอย่างและภาชนะเพื่อผลลัพธ์ sonicating ที่มีประสิทธิภาพและประสิทธิผลสูงสุด อุปกรณ์โพรบอัลตราโซนิกเป็นตัวเลือกที่ดีที่สุดเมื่อต้องเตรียมตัวอย่างเดียว

หากต้องเตรียมตัวอย่างเพิ่มเติมเช่นสารละลายเซลล์ 8-10 ขวด sonication ทางอ้อมที่รุนแรงด้วยระบบอัลตราโซนิกเช่น VialTweeter หรือ cuphorn อัลตราโซนิกเป็นวิธีการทําให้เป็นเนื้อเดียวกันที่เหมาะสมที่สุดสําหรับการสลายที่มีประสิทธิภาพ ขวดหลายขวดถูก sonicated ในเวลาเดียวกันที่ความเข้มเดียวกัน สิ่งนี้ช่วยประหยัดเวลาไม่เพียง แต่ช่วยให้มั่นใจได้ถึงการรักษาตัวอย่างทั้งหมดเหมือนกันซึ่งทําให้ผลลัพธ์ในกลุ่มตัวอย่างเชื่อถือได้และเทียบเคียงได้ นอกจากนี้ในระหว่างการปนเปื้อนข้าม sonication ทางอ้อมโดยการแช่ sonotrode อัลตราโซนิก (หรือที่เรียกว่าโพรบอัลตราโซนิกแตรปลายหรือนิ้ว) เนื่องจากใช้ขวดที่ตรงกันในแต่ละขนาดตัวอย่างการทําความสะอาดที่ใช้เวลานานและการสูญเสียตัวอย่างเนื่องจากการดีแคนติ้งของภาชนะจะถูกละเว้น สําหรับ sonication สม่ําเสมอของแผ่นมัลติเวลล์หรือไมโครไทเตอร์ Hielscher เสนอ UIP400MTP
สำหรับปริมาณที่เพิ่มขึ้นเช่น สำหรับการผลิตในเชิงพาณิชย์ของสารสกัดจากเซลล์ระบบอัลตราโซนิกอย่างต่อเนื่องกับเครื่องปฏิกรณ์เซลล์ไหลมีความเหมาะสมมากที่สุด อย่างต่อเนื่องและแม้กระทั่งการไหลของวัสดุแปรรูปมั่นใจแม้ sonication พารามิเตอร์ทั้งหมดของกระบวนการสลายตัวอัลตราโซนิกสามารถเพิ่มประสิทธิภาพและปรับปรุงความต้องการของการประยุกต์ใช้และวัสดุเซลล์ที่เฉพาะเจาะจง
 
 
ขั้นตอนที่เป็นแบบอย่างสำหรับ lysing ล้ำของเซลล์แบคทีเรีย

  • การเตรียมเซลล์ระงับ: เม็ดมือถือจะต้องถูกระงับอย่างสมบูรณ์ในสารละลายบัฟเฟอร์โดยการผสมยาง (เลือกสารละลายบัฟเฟอร์ของคุณเข้ากันได้กับการวิเคราะห์ต่อไปนี้วิธีโครมาโตที่เฉพาะเจาะจงเช่น) เพิ่ม lysozymes และ / หรือสารอื่น ๆ ถ้าจำเป็น (พวกเขาจะต้องยังเข้ากันได้กับการแยก / บริสุทธิ์หมายถึง) ผสม / เนื้อเดียวกันวิธีการแก้เบา ๆ ภายใต้ sonication อ่อนจนระงับสมบูรณ์จะประสบความสำเร็จ
  • อัลตราโซนิกสลาย: วางตัวอย่างในอ่างน้ำแข็ง สำหรับการหยุดชะงักของเซลล์ sonicate ระงับที่ 60-90 ระเบิดสอง (ใช้โหมดการเต้นของชีพจร ultrasonicator ของคุณ)
  • แยก: แปะ lysate (. เช่น 10 นาทีที่ 10,000 x กรัมที่ 4degC) เฉพาะกิจใสจากตะกอนเซลล์อย่างระมัดระวัง ใสเป็น lysate มือถือทั้งหมด หลังจากการกรองสารละลายที่คุณได้รับของเหลวชี้แจงของโปรตีนของเซลล์ที่ละลายน้ำได้

 

วิดีโอแสดงระบบเตรียมตัวอย่างอัลตราโซนิก UIP400MTP ซึ่งช่วยให้การเตรียมตัวอย่างที่เชื่อถือได้ของแผ่นหลายหลุมมาตรฐานใด ๆ โดยใช้อัลตราซาวนด์ความเข้มสูง การใช้งานทั่วไปของ UIP400MTP รวมถึงการสลายเซลล์ดีเอ็นเออาร์เอ็นเอและการตัดโครมาตินเช่นเดียวกับการสกัดโปรตีน

Ultrasonicator UIP400MTP สําหรับ sonication แผ่นหลายดี

ภาพขนาดย่อของวิดีโอ

 
การใช้งานที่พบมากที่สุดสำหรับ ultrasonicators ในทางชีววิทยาและเทคโนโลยีชีวภาพ ได้แก่ :

  • การเตรียมสารสกัดจากเซลล์
  • การหยุดชะงักของยีสต์, แบคทีเรีย, เซลล์พืช, เนื้อเยื่อเซลล์อ่อนหรือแข็ง, วัสดุนิวคลีอิก
  • การสกัดโปรตีน
  • การเตรียมและการแยกของเอนไซม์
  • การผลิตแอนติเจน
  • สกัดดีเอ็นเอและ / หรือการกำหนดเป้าหมายการกระจายตัว
  • เตรียมไลโปโซม
การหยุดชะงักของเซลล์การสลายตัวและการสกัดด้วยอัลตราซาวนด์เป็นวิธีการเตรียมตัวอย่างที่มีประสิทธิภาพในห้องปฏิบัติการ

การหยุดชะงักของเซลล์ด้วยเครื่องอัลตราโซนิกชนิดโพรบเป็นวิธีการเตรียมตัวอย่างที่มีประสิทธิภาพ

ตารางด้านล่างให้ภาพรวมเกี่ยวกับเครื่องอัลตราโซนิกของเราสําหรับการหยุดชะงักและการสกัดของเซลล์ คลิกที่ประเภทอุปกรณ์เพื่อรับข้อมูลเพิ่มเติมเกี่ยวกับโฮโมจีไนเซอร์อัลตราโซนิกแต่ละตัว เจ้าหน้าที่ด้านเทคนิคที่ผ่านการฝึกอบรมมาเป็นอย่างดีและมีประสบการณ์ยาวนานของเรายินดีที่จะช่วยคุณเลือกเครื่องอัลตราโซนิกที่เหมาะสมที่สุดสําหรับตัวอย่างของคุณ!
 

ปริมาณชุด อัตราการไหล อุปกรณ์ที่แนะนำ
มากถึง 10 ขวดหรือหลอด N.A. VialTweeter
แผ่นมัลติเวลล์ / ไมโครไทเตอร์ N.A. UIP400MTP
หลายหลอด / เรือ N.A. เต้าฮอร์น
1 ถึง 500mL 10 ถึง 200mL / นาที UP100H
10 ถึง 1000mL 20 ถึง 200mL / นาที Uf200 ःที, UP200St
10 ถึง 2000ml 20 ถึง 400ml / นาที UP400St

ติดต่อเรา / สอบถามข้อมูลเพิ่มเติม

พูดคุยกับเราเกี่ยวกับการสลายตัวของเซลล์และกระบวนการสกัดของคุณ เราจะแนะนําเครื่องอัลตราโซนิกและพารามิเตอร์การประมวลผลที่เหมาะสมที่สุดสําหรับการหยุดชะงักของเซลล์






 

สําหรับการประเมินผลและการเพิ่มประสิทธิภาพการใช้งานของลูกค้า Hielscher Ultrasonics มีห้องปฏิบัติการกระบวนการอัลตราโซนิกที่มีอุปกรณ์ครบครัน กรุณาติดต่อเราสําหรับข้อมูลเพิ่มเติมที่
วิดีโอนี้แสดง homogenizer อัลตราโซนิก 100 วัตต์ UP100H สําหรับการสกัดพฤกษศาสตร์

อัลตราโซนิกการสกัดของสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพ

ภาพขนาดย่อของวิดีโอ



การใช้งานต่าง ๆ นานาของสาขาอัลตราซาวนด์ออกมาในภาคส่วนของเทคโนโลยีชีวภาพชีววิศวกรรมจุลชีววิทยาอณูชีววิทยาชีวเคมีภูมิคุ้มกันแบคทีเรียไวรัสวิทยาโปรตีนพันธุศาสตร์สรีรวิทยาชีววิทยาเซลล์โลหิตวิทยาและพฤกษศาสตร์

Lysis: ทําลายโครงสร้างเซลล์

เซลล์มีการป้องกันโดยเยื่อหุ้มพลาสม่ากึ่งดูดซึมซึ่งประกอบด้วยใน bilayer phospho-ไขมัน (เช่นโปรตีนไขมัน bilayer; เกิดขึ้นจากไขมันไม่ชอบน้ำและโมเลกุลฟอสฟอรัสกับน้ำด้วยการฝังตัวโมเลกุลของโปรตีน) และสร้างอุปสรรคระหว่างการตกแต่งภายในเซลล์ (พลาสซึม) และ สภาพแวดล้อม extracellular เซลล์พืชและเซลล์โปรคาริโอถูกล้อมรอบด้วยผนังเซลล์ เนื่องจากหลายชั้นผนังเซลล์หนาของเซลลูโลสเซลล์พืชยากที่จะ Lyse กว่าเซลล์สัตว์ การตกแต่งภายในเซลล์เช่น organelles นิวเคลียส, mitochondrion มีเสถียรภาพโดยโครงร่าง
โดย lysing เซลล์ก็จะมุ่งเป้าไปที่การสกัดและแยก organelles โปรตีนดีเอ็นเอ mRNA หรือสารชีวโมเลกุลอื่น ๆ

วิธีการทั่วไปของ Cell Lysis และข้อเสีย

มีหลายวิธีที่จะ lysate เซลล์ซึ่งสามารถแบ่งออกเป็นวิธีทางกลและทางเคมีซึ่งรวมถึงการใช้ผงซักฟอกหรือตัวทำละลาย, การประยุกต์ใช้ความดันสูงหรือการใช้งานของโรงสีลูกปัดหรือกดฝรั่งเศสที่มี ข้อเสียที่มีปัญหามากที่สุดของวิธีการเหล่านี้คือการควบคุมยากและการปรับตัวของพารามิเตอร์กระบวนการและจึงส่งผลกระทบต่อ
ตารางด้านล่างแสดงข้อเสียเปรียบหลักของวิธีการ lysis ทั่วไป:

ตารางแสดงรายการการหยุดชะงักของเซลล์ทั่วไปและวิธีการสลายตัวและแสดงข้อเสียที่สําคัญของแต่ละวิธี

ตาราง: วิธีการทั่วไปของการสลายเซลล์มีข้อเสียที่สำคัญ

 

ขั้นตอนของ Lysis

สลายเป็นกระบวนการที่มีความละเอียดอ่อน ในระหว่างการสลายการป้องกันของเยื่อหุ้มเซลล์ถูกทำลาย แต่การใช้งาน, สูญเสียสภาพธรรมชาติและการย่อยสลายของโปรตีนที่สกัดจากสภาพแวดล้อมที่ร่างกายอย่างผิดปกติ (การเบี่ยงเบนจากค่า pH) จะต้องได้รับการป้องกัน ดังนั้นในการสลายทั่วไปจะดำเนินการในการแก้ปัญหาบัฟเฟอร์ ปัญหาส่วนใหญ่เกิดขึ้นจากการหยุดชะงักของเซลล์ที่ไม่สามารถควบคุมผลในการเปิดตัวที่ไม่ตรงเป้าหมายของวัสดุภายในเซลล์ทั้งหมดและ / หรือสูญเสียสภาพธรรมชาติของผลิตภัณฑ์เป้าหมาย

วรรณคดี / อ้างอิง

เรายินดีที่จะหารือเกี่ยวกับกระบวนการของคุณ

มาติดต่อกันเถอะ