การเตรียมอัลตราโซนิกของเซรั่มที่อุดมด้วยเกล็ดเลือด
- พลาสมาที่อุดมด้วยเกล็ดเลือด (PRP) เป็นพลาสมาในเลือดที่อุดมไปด้วยเกล็ดเลือด ซึ่งใช้สําหรับการรักษาทางการแพทย์และยาสนธิ
- การสลายอัลตราโซนิกและการปรับสภาพเป็นวิธีที่มีประสิทธิภาพมากในการเตรียมพลาสมาที่อุดมด้วยเกล็ดเลือด
- Hielscher Ultrasonics นําเสนอระบบอัลตราโซนิกต่างๆที่ตรงกับความต้องการของการรักษาเลือด (เช่นสําหรับการเตรียมห้องปลอดเชื้อภายในและภายนอก)
เซรั่มอุดมด้วยเกล็ดเลือด
Sonication เป็นวิธีที่เชื่อถือได้และง่ายในการสลายเกล็ดเลือดในซีรั่มเลือดอัตโนมัติเพื่อปล่อยปัจจัยการเจริญเติบโต เศษส่วนที่ได้จากเกล็ดเลือด – หรือที่เรียกว่าเซรั่มปรับสภาพอัตโนมัติ (ACS) – ใช้สําหรับการซ่อมแซมเนื้อเยื่อหรือการรักษาความงาม เพื่อให้ได้ผลลัพธ์ที่ดีที่สุด PRP จะได้รับการเสริมสร้างก่อนฉีด
ในการเตรียมพลาสมาที่อุดมด้วยปัจจัยการเจริญเติบโตของเซลล์ sonication เป็นวิธีที่มีประสิทธิภาพและประสิทธิผลมากในการสลายเยื่อหุ้มเซลล์และปล่อยปัจจัยการเจริญเติบโตของเซลล์เกือบทั้งหมดออกจากเกล็ดเลือด โดยการสลายอัลตราโซนิกและการปรับสภาพสามารถใช้ได้แม้กระทั่งเลือดป้องกันการแข็งตัวของเลือด
การปรับสภาพ PRP ผ่านการ sonication เป็นวิธีที่สะดวกและคุ้มค่าในการให้ผลผลิตในปัจจัยการเจริญเติบโตที่เข้มข้น
เอฟเฟกต์อัลตราโซนิก Lysis
การรักษาด้วยอัลตราโซนิกของซีรั่มเลือดส่งผลให้เกิดการสลายเกล็ดเลือดที่เป็นเนื้อเดียวกันเพื่อปลดปล่อยปัจจัยการเจริญเติบโตที่ติดอยู่ (ปัจจัยการเจริญเติบโต AB (PDGF-AB), ปัจจัยการเจริญเติบโต AA (PDGF-AA), ปัจจัยการเจริญเติบโต BB (PDGF-BB), ปัจจัยการเจริญเติบโตของหลอดเลือด (VEGF), ปัจจัยการเจริญเติบโตของหลอดเลือด (β (TGF-β), ปัจจัยการเจริญเติบโตของผิวหนัง (EGF), ปัจจัยการเจริญเติบโตคล้ายอินซูลิน (IGF), ปัจจัยการเจริญเติบโตของเซลล์เยื่อบุผิว ECGF และปัจจัยการเจริญเติบโตของไฟโบรบลาสติก (FGF)) เกล็ดเลือดและอัลฟาแกรนูลถูกขัดขวางโดยการ sonication โดยใช้ปรากฏการณ์ของ โพรงอากาศอะคูสติก. การใช้โพรงอากาศอัลตราโซนิกสําหรับการสลายเกล็ดเลือดช่วยลดผลกระทบด้านลบที่อาจเกิดขึ้นต่อกิจกรรมของปัจจัยการเจริญเติบโตของวิธีการแช่แข็ง-ละลายซ้ํา
โปรโตคอลสําหรับการเตรียมอัลตราโซนิก PRP
ประมาณ 16 มล. ของตัวอย่างเลือดสดที่เก็บรวบรวมได้ด้วยตนเอง ถูกคว่ําเบา ๆ 8-10 ครั้งในหลอดเพื่อให้เลือดและยาต้านการแข็งตัวของเลือดผสมกันดี หลังจากนั้น ตัวอย่างจะถูกหมุนเหวี่ยงที่ 1800 กรัมเป็นเวลา 20 นาทีที่อุณหภูมิห้อง หลังจากการหมุนเหวี่ยงเกล็ดเลือดและเซลล์โมโนนิวเคลียร์จะสร้างชั้นสีขาวที่ด้านล่างของชั้นพลาสมา ซึ่งเรียกว่าพลาสมาที่อุดมด้วยเกล็ดเลือด (PRP) ชั้นบนเรียกว่าพลาสมาเกล็ดเลือดต่ํา (PPP) เซลล์โมโนนิวเคลียร์สามารถถอดออกหรืออยู่ในตัวอย่างได้ บ่อยครั้งที่เซลล์โมโนนิวเคลียร์ยังคงอยู่ในตัวอย่าง PRP เพื่อหลีกเลี่ยงขั้นตอนเพิ่มเติม ซึ่งเสี่ยงต่อการปนเปื้อน
หมายเหตุ: การรักษาด้วยอัลตราโซนิกของ PRP อัตโนมัติต้องดําเนินการภายใต้สภาวะปลอดเชื้อ
PRP และ PPP ถูกแยกและรวบรวม ใน PPP จะเติมสารละลายแคลเซียมคลอไรด์ 1.5% 10 มล. ในขณะที่เติมเอทานอล 0.5 มิลลิลิตร 5% ลงใน PRP ระบบแขวนลอยทั้งสองถูกกวนเบา ๆ และปล่อยให้ยืนเป็นเวลา 5 นาทีที่อุณหภูมิห้อง ในที่สุด PPP 1 มล. จะถูกเติมลงในสารแขวนลอย PRP และปล่อยให้ยืนจนกว่าก้อนไฟบรินจะก่อตัวขึ้น
การรักษาด้วยอัลตราโซนิก: เนื่องจากเจลเกล็ดเลือดที่เกิดขึ้นทําหน้าที่เป็นแหล่งกักเก็บสําหรับปัจจัยการเจริญเติบโตที่ปล่อยออกมาเจลไฟบรินจะต้องหยุดชะงักเพื่อปลดปล่อยปัจจัยการเจริญเติบโตที่มีอยู่ พารามิเตอร์สําหรับการสลายอัลตราโซนิกและการปล่อยปัจจัยการเจริญเติบโตมีดังต่อไปนี้: Sonicate ด้วย UP200 ฮิต หรือ UP200 เซนต์ (200W, 26kHz) พร้อม sonotrode S26d2 ตัวอย่างในหลอด เพื่อหลีกเลี่ยงความร้อนสูงเกินไปของเลือด amp เลอ sonication สามารถทําได้ในรอบการเต้นเป็นจังหวะ (เช่น เปิด 10 วินาที ปิด 30 วินาที) ควรวางตัวอย่างบนน้ําแข็งเพื่อทําความเย็นเพื่อให้อุณหภูมิถูกรักษาไว้อย่างเหมาะสมระหว่าง 2 – 5 องศาเซลเซียส หลังจากการ sonication ตัวอย่างจะถูกหมุนเหวี่ยงที่ 16000 กรัมเป็นเวลา 5 นาที ที่อุณหภูมิห้อง ส่วนเหนือน้ําจะถูกรวบรวมและสามารถเก็บไว้ที่อุณหภูมิ -70°C
ความเข้มข้นของเกล็ดเลือดในเศษส่วน PRP อุดมไปด้วย 1.7 – 4.5 เท่าในวิธีการ sonicated เมื่อเทียบกับวรรณกรรมจํานวนเกล็ดเลือดเฉลี่ยในเลือดครบส่วน
PRP ถูกรวมกับการบําบัดด้วยสเต็มเซลล์ที่ได้จากไขมัน (เซลล์ต้นกําเนิดอัตโนมัติที่ปล่อยอัลตราโซนิกจากเนื้อเยื่อไขมันผสมกับ PRP แล้วฉีดกลับเข้าไปในเนื้อเยื่อของผู้ป่วยเพื่อซ่อมแซม)
อุปกรณ์อัลตราโซนิก
Hielscher Ultrasonics เป็นผู้เชี่ยวชาญสําหรับเทคโนโลยีอัลตราโซนิกที่ซับซ้อนและเชื่อถือได้ อุปกรณ์อัลตราโซนิกของเราใช้ทั่วโลกสําหรับการสลายการสกัดและการเตรียมตัวอย่าง – โดยทางตรงและทางอ้อม นึ่งฆ่าเชื้อได้ เช่นเดียวกับ ทิ้ง อุปกรณ์เสริมให้แน่ใจว่า ปราศจากการปนเปื้อน การรักษาตัวอย่างเลือดอัตโนมัติ ระบบส่วนใหญ่ของเราสามารถใช้สําหรับการสลายอัลตราโซนิกของ สเต็มเซลล์ และ PRP ซึ่งทําให้อุปกรณ์อัลตราโซนิกของเรามีประสิทธิภาพมากยิ่งขึ้น
ตารางด้านล่างนี้แสดงรายการอุปกรณ์อัลตราโซนิกของเราซึ่งเหมาะสําหรับการเตรียมพลาสมาที่อุดมด้วยเกล็ดเลือดและปริมาตรตัวอย่างที่แนะนําตามลําดับ มีเครื่องอัลตราโซนิกขนาดใหญ่และระบบที่กําหนดเองเช่นกัน
อุปกรณ์ | กําลังไฟ [W] | ความถี่ [kHz] | ประเภท | ปริมาตร [มล.] | ||
---|---|---|---|---|---|---|
ไวอัลทวีตเตอร์ | 200 | 26 | สแตนด์อโลน | 0.5 | – | 1.5 |
UP50H | 50 | 30 | มือถือหรือแบบตั้งพื้น | 0.01 | – | 250 |
UP100H | 100 | 30 | มือถือหรือแบบตั้งพื้น | 0.01 | – | 500 |
UP200 ฮิต | 200 | 26 | มือถือหรือแบบตั้งพื้น | 0.1 | – | 1000 |
UP200 เซนต์ | 200 | 26 | ยืน | 0.1 | – | 1000 |
UP400ST | 400 | 24 | ยืน | 5.0 | – | 2000 |
UP200St-โซโนสเต็ป | 200 | 26 | สแตนด์อโลน | 30 | – | 500 |
จีดีมินิ 2 | 200 | 26 | โฟลว์เซลล์ที่ปราศจากการปนเปื้อน |
กรุณาติดต่อเราวันนี้! เรายินดีที่จะช่วยคุณค้นหาอุปกรณ์อัลตราโซนิกที่เหมาะสมที่สุด!
ติดต่อเรา! / ถามเรา!
วรรณกรรม/อ้างอิง
- ฟอร์ทูนาโต, TM; เบลทรามี, Ch.; เอ็มมานูเอลี, ซี.; เดอแบงก์, PA:; Pula, G. (2016): เจลเกล็ดเลือดไลเสทและบรรพบุรุษเยื่อบุผนังหลอดเลือดกระตุ้นการสร้างเครือข่ายหลอดเลือดขนาดเล็กในหลอดทดลอง: ความหมายทางวิศวกรรมเนื้อเยื่อ วิทย์ ตัวแทน 6, 2016.
- ฮามิด, MSA; ยูซอฟ, แอชริล; Ali, Mohamed Razif Mohamed (2014): พลาสมาที่อุดมด้วยเกล็ดเลือด (PRP) สําหรับการบาดเจ็บของกล้ามเนื้อเฉียบพลัน: การทบทวนอย่างเป็นระบบ PLOS ONE เล่ม 9 ฉบับที่ 2 2014
ข้อเท็จจริงที่ควรค่าแก่การรู้
พลาสมาที่อุดมไปด้วยเกล็ดเลือด
พลาสมาที่อุดมด้วยเกล็ดเลือดประกอบด้วยปัจจัยการเจริญเติบโต AB (PDGF-AB), ปัจจัยการเจริญเติบโตที่ได้จากเกล็ดเลือด AA (PDGF-AA), ปัจจัยการเจริญเติบโตที่ได้จากเกล็ดเลือด BB (PDGF-BB), ปัจจัยการเจริญเติบโตของหลอดเลือด (VEGF), β ปัจจัยการเจริญเติบโตของการเปลี่ยนแปลง (TGF-β), ปัจจัยการเจริญเติบโตของผิวหนัง (EGF), ปัจจัยการเจริญเติบโตคล้ายอินซูลิน (IGF), ปัจจัยการเจริญเติบโตของเซลล์เยื่อบุผิว ECGF และปัจจัยการเจริญเติบโตของไฟโบรบลาสติก (FGF) ซึ่งเป็นสารกระตุ้นที่สําคัญสําหรับการเจริญเติบโตและการผลัดเซลล์
เซรั่มปรับสภาพอัตโนมัติ (ACS)
พลาสมาปรับสภาพอัตโนมัติ (ACP) เป็นพลาสมาที่อุดมด้วยเกล็ดเลือดที่สกัดจากเลือดอัตโนมัติซึ่งใช้เพื่อสนับสนุนการงอกใหม่ในสภาวะกระดูกและขั้นตอนการผ่าตัดที่หลากหลาย เซรั่มปรับสภาพเตรียมโดยการแยกพลาสมาออกจากส่วนประกอบของเลือดอื่นๆ (เช่น เม็ดเลือดแดง) และเข้มข้น ACP เป็นพลาสมาที่อุดมด้วยเกล็ดเลือด (PRP) PRP เป็นคําทั่วไปสําหรับพลาสมาชนิดหนึ่งที่มีความเข้มข้นของเม็ดเลือดอุดตันสูงกว่าอย่างมีนัยสําคัญเมื่อเทียบกับเลือดครบส่วน สกัดจากเลือดครบส่วน ส่วนประกอบหลักของ ACP ได้แก่ เกล็ดเลือดอุดตัน (เกล็ดเลือด) และปัจจัยการเจริญเติบโตหลายอย่างที่มีบทบาทสําคัญในกระบวนการรักษา ซึ่งแตกต่างจากสูตรพลาสมาที่อุดมด้วยเกล็ดเลือดอื่น ๆ ACP มีความโดดเด่นด้วยเซลล์เม็ดเลือดขาวที่มีความเข้มข้นต่ํา เช่น ยูโทรฟิลไซต์ ซึ่งอาจเป็นอันตรายต่อกระบวนการบําบัดเมื่อมีความเข้มข้นสูง
การฉีดพลาสมาที่อุดมด้วยเกล็ดเลือด
พลาสมาที่อุดมด้วยเกล็ดเลือดใช้เป็นยาฉีดในเวชศาสตร์ฟื้นฟูและในขั้นตอนเครื่องสําอาง การประยุกต์ใช้ PRP รับประกันการเร่งการรักษากล้ามเนื้อและการฟื้นฟูกล้ามเนื้ออย่างมีนัยสําคัญ นอกจากนี้ยังประสบความสําเร็จในการรักษาการอักเสบโรคข้ออักเสบความเจ็บปวดบาดแผลรักษาแผลเปิดช้าและแผลไหม้ที่ผิวหนังอย่างรุนแรง PRP มีปัจจัยการเจริญเติบโตในระดับสูง ซึ่งกระตุ้นและปกป้องเซลล์ที่รักษา ao ว่าเนื้อเยื่อที่เสียหายได้รับการซ่อมแซม
สําหรับการรักษาเครื่องสําอาง PRP ได้รับการพิสูจน์แล้วว่ามีประสิทธิภาพในการกระตุ้นการเจริญเติบโตของเส้นผมการต่ออายุผิว (หรือที่เรียกว่าการรักษาแวมไพร์)
ปัจจัยการเจริญเติบโตที่ได้จากเกล็ดเลือด (PDGF)
คําว่าปัจจัยการเจริญเติบโตที่ได้จากเกล็ดเลือด (PDGF) หมายถึงปัจจัย PDGF-A, PDGF-B, PDGF-C และ PDGF-D เป็นเครือข่ายการส่งสัญญาณของลิแกนด์สี่ตัว (PDGF-A, PDGF-B, PDGF-C และ PDGF-D) และตัวรับสองตัว PDGFR-alpha และ PDGFR-beta
ปัจจัยการเจริญเติบโตหรือโปรตีนควบคุมการเจริญเติบโตและการแบ่งตัวของเซลล์ ในฐานะที่เป็นไมโตเจนหลักที่พบในเซรั่มสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมซึ่งถูกปล่อยออกมาจากเกล็ดเลือดในระหว่างการสร้างลิ่มเลือดจึงมีบทบาทสําคัญในการสร้างหลอดเลือด (angiogenesis) ซึ่งเป็นการเจริญเติบโตของหลอดเลือดจากเนื้อเยื่อหลอดเลือดที่มีอยู่แล้ว