การแยกเซลล์ต้นกําเนิดอัลตราโซนิก

Sonication เป็นวิธีทางกลที่มีประสิทธิภาพสูงในการแยกเซลล์ต้นกําเนิดออกจากเนื้อเยื่อไขมันของมนุษย์ เศษส่วนหลอดเลือดสโตรมอลที่แยกด้วยอัลตราโซนิก (SVF) แสดงให้เห็นถึงศักยภาพในการสร้างใหม่อย่างมีนัยสําคัญสําหรับการใช้งานทางการแพทย์ Hielscher Ultrasonics มีตัวเลือก sonication ทั้งทางตรงและทางอ้อมสําหรับการเก็บเกี่ยวสเต็มเซลล์ ค้นหาเครื่องสะท้อนเสียงในอุดมคติสําหรับกระบวนการแยกสเต็มเซลล์ของคุณ!

การแยกอัลตราโซนิกของสเต็มเซลล์

เนื้อเยื่อไขมันที่สกัดจากร่างกายมนุษย์ (ผ่านการดูดไขมัน) จะได้รับการรักษาโดยอัลตราโซนิกเพื่อเอาเนื้อเยื่อออกจากสเต็มเซลล์และเซลล์การเจริญเติบโตอื่น ๆ ส่วนที่แยกจากกันของเซลล์นี้เรียกว่าเซลล์เศษส่วนหลอดเลือดสโตรมอล (SVF)
เทคนิคการแยกอัลตราโซนิกของเซลล์ต้นกําเนิดจากเนื้อเยื่อไขมันขึ้นอยู่กับหลักการทํางานของโพรงอากาศที่ได้มาจากอัลตราโซนิกซึ่งเป็นแรงเฉือนเชิงกลล้วนๆ แรงเฉือนโพรงอากาศเหล่านี้ขัดขวางเนื้อเยื่อไขมันเพื่อให้สเต็มเซลล์ถูกปล่อยออกจากโครงสร้างของเนื้อเยื่อไขมัน การแยกสเต็มเซลล์อัลตราโซนิกเป็นขั้นตอนที่ปราศจากเอนไซม์หลีกเลี่ยงการใช้คอลลาเจนเนสทริปซินหรือการแพร่กระจาย
ในการแยกสเต็มเซลล์ที่สกัดออกมาเซลล์ต้นกําเนิด mesenchymal สารตั้งต้นของเยื่อบุผนังหลอดเลือดและเซลล์การเจริญเติบโตประเภทอื่น ๆ เนื้อเยื่อไขมันที่โซนิคจะถูกหมุนประสาท
สเต็มเซลล์ที่แยกออกจากกันจะถูกรวบรวมและวิเคราะห์คุณภาพ รวมถึงจํานวนเซลล์ ความมีชีวิต เอนโดท็อกซิน และคราบแกรมก่อนที่จะใช้ทันทีสําหรับการปลูกถ่ายอัตโนมัติหรือเก็บรักษาไว้ในที่เก็บด้วยความเย็น

ทําไมต้องหลีกเลี่ยงเอนไซม์?

เนื่องจากการย่อยด้วยเอนไซม์สําหรับการแยกสเต็มเซลล์นั้นมาพร้อมกับต้นทุนสูงและความเสี่ยงด้านความปลอดภัยที่อาจเกิดขึ้น ตลอดจนขาดประสิทธิภาพ [Oberbauer et al. 2015] จึงแนะนําให้ใช้วิธีการแยกที่ไม่ใช่เอนไซม์ เช่น โพรงอากาศอัลตราโซนิก ขั้นตอนการแยกอัลตราโซนิกแทนที่การย่อยของเอนไซม์โดยการแยกเซลล์และการรวมตัวของเซลล์ออกจากเนื้อเยื่อไขมัน

สเต็มเซลล์ที่ได้จากไขมัน

ผลผลิตสเต็มเซลล์ที่ได้จาก Soniaction

เผยแพร่วิธีการแยกเศษส่วนของหลอดเลือดสโตรมอลโดยใช้ผลผลิตโพรงอากาศอัลตราโซนิกใน 1.67–2.24 × 10⁷ เซลล์ที่มีความมีชีวิต 97.1–98.9% [Victor, S., 2014] ผลผลิตของเซลล์ประมาณ 2-4 ล้านเซลล์/เนื้อเยื่อไขมันกรัมได้มาจากการสลายอัลตราโซนิกของเซลล์ไขมันที่โตเต็มที่ในเนื้อเยื่อไขมันที่แยกตัว [Bright et al., 2014]
เซลล์ที่เตรียมด้วยอัลตราโซนิกมีศักยภาพในการแยกความแตกต่างของไขมันและกระดูกที่สูงเท่ากันเมื่อเทียบกับวิธีการแยกเอนไซม์มาตรฐาน [Oberbauer et al. 2015]

ระบบอัลตราโซนิกสําหรับการแยกสเต็มเซลล์

เพื่อให้มั่นใจในความปลอดภัยสูงสุดและคุณภาพที่ดีที่สุดอุปกรณ์อัลตราโซนิกที่เชื่อถือได้ซึ่งช่วยให้สามารถควบคุมการรักษาด้วยสเต็มเซลล์ได้อย่างแม่นยําเป็นปัจจัยสําคัญสําหรับการรักษาผู้ป่วยที่ประสบความสําเร็จ Hielscher Ultrasonics มีตัวเลือกมากมายสําหรับกระบวนการแยกโพรงอากาศอัลตราโซนิกอัตโนมัติเพื่อแยกและเก็บเกี่ยวเซลล์ต้นกําเนิดและเยื่อบุผนังหลอดเลือด

Sonication โดยตรงสําหรับการแยกสเต็มเซลล์

สําหรับกระบวนการแยกสเต็มเซลล์ผ่านการ sonication โดยตรงแตรอัลตราโซนิก (sonotrode, ปลายอัลตราโซนิก / โพรบ) จะถูกแช่ลงในเนื้อเยื่อไขมันไขมัน คลื่นอัลตราซาวนด์จะเชื่อมต่อโดยตรงกับไขมันอัตโนมัติเพื่อให้โพรงอากาศอัลตราโซนิกปล่อยสเต็มเซลล์และเซลล์สโตรมอลออกจากเนื้อเยื่อที่เหลือ เครื่องสะท้อนเสียง Hielscher UP200 ฮิต และ UP200 เซนต์ ด้วย sonotrode S26d14 เป็นระบบที่ใช้กันทั่วไปสําหรับการรักษาด้วยสเต็มเซลล์อัตโนมัติ การแยกเศษส่วนของหลอดเลือดสโตรมอลโดยการ sonication โดยตรงส่วนใหญ่เหมาะสําหรับใช้ในสิ่งอํานวยความสะดวกในห้องปลอดเชื้อ

Sonication ทางอ้อมสําหรับการแยกสเต็มเซลล์

เนื่องจากสเต็มเซลล์ถูกใช้สําหรับการใช้งานอัตโนมัติความปลอดเชื้อของกระบวนการจึงมีความสําคัญมาก ดังนั้น Hielscher จึงได้พัฒนาทางเลือกหลายอย่างในการ sonication ทางอ้อมเช่น จีดีมินิ 2, ไวอัลทวีตเตอร์ และระบบที่กําหนดเองอื่น ๆ โดยการ sonication ทางอ้อมคลื่นอัลตราซาวนด์จะเชื่อมต่อผ่านภาชนะผนังเข้าไปในเนื้อเยื่อไขมัน เศษส่วนของหลอดเลือดสโตรมอล (SVF) ถูกแยกออกจากเนื้อเยื่อไขมันโดยการโพรงอากาศอัลตราโซนิกเช่นเดียวกับระหว่างการ sonication โดยตรง
กระบวนการ sonication ทางอ้อมให้ข้อได้เปรียบในการประมวลผลเซลล์ในภาชนะปิดภายใต้ สภาวะที่ปราศจากการปนเปื้อน เนื่องจากความเสี่ยงของการปนเปื้อนข้ามโดยการใส่แตรอัลตราซาวนด์ (sonotrode) จะถูกกําจัดออกไป การแยกเซลล์จะดําเนินการในระบบปิดเพื่อให้มั่นใจถึงสภาวะกระบวนการปลอดเชื้อ
อ่านเพิ่มเติมเกี่ยวกับ Hielscher Sterile Sonicators!

เครื่องสะท้อนเสียงดิจิตอลของ Hielscher สามารถควบคุมได้อย่างแม่นยําผ่านหน้าจอสัมผัสหรือการควบคุมเบราว์เซอร์ ขั้นตอนการ sonication สามารถตั้งค่าล่วงหน้าได้ผ่านเมนูที่ใช้งานง่าย อุปกรณ์อัลตราโซนิกมีการบันทึกข้อมูลอัตโนมัติ (ข้อมูลกระบวนการ sonication ทั้งหมดจะถูกเก็บไว้ใน SD-Card ในตัว) อินพุตพลังงานอัลตราโซนิกสามารถปรับได้อย่างแม่นยําตามโปรโตคอลการแยกเซลล์