96-Well Plate Sonicator UIP400MTP for High-Throughput Sample Prep

Za masovno uzgajanje uzoraka i obradu bioloških uzoraka koriste se ploče sa 96 bunara, mikroplate, višestruke ploče ili ELISA ploče. Sa ultrazvučnim pločama UIP400MTP, Hielscher nudi jedinstveno ultrazvučno rešenje ujednačene i pouzdane uzorke preparata od 12-, 24,-, 48-, 96-, 384-ili 1536 bunarskih ploča. Uobičajene primene mikrotiterskog ultrazvučnog UIP400MTP uključuju ćelijsku lizu, vađenje proteina, homogenizaciju ćelija i solubilizaciju, kao i fragmentaciju DNK.

Prednosti UIP400MTP MassSample ultrazvučnog
 

  • Ujednačena sonikacija 1 – 1536 uzoraka
  • Ultrazvučna snaga od 400 vati – Precizno kontrolisano
  • За ћелијске културе, ФФПЕ и замрзнуто ткиво
  • Kompatibilan sa bilo kojom standardnom pločom sa više bunara
  • Једнократна инвестиција по веома разумној цени
  • Користите своје тањире! Нису потребне власничке плоче са више јажица или потрошни материјал.
  • Ради и са епруветама и петријевим посудама
  • Priprema uzorka istovremene mase
  • Precizno kontrolišući parametri sonication (amplitude, trajanje, ciklus, temperatura)
  • Reproduktivni, ponavljajući rezultati
  • Pogodan i bezbedan rad
  • Pogodno za automatizaciju

 

Видео приказује ултразвучни систем за припрему више узорака УИП400МТП, који омогућава поуздану припрему узорка било које стандардне плоче са 96 бунарчића користећи ултразвук високог интензитета. Типичне примене УИП400МТП укључују лизу ћелија, ДНК, РНК и смицање хроматина, као и екстракцију протеина.

Ултрасоникатор УИП400МТП за ултразвучну обраду плоче са 96 јажица

Video sličica

 

Priprema uzorka visoke protoka sa ultrazvučnim UIP400MTP za 96-dobro pločastu i višestruku sonikaciju ploča.

UIP400MTP je ultrazvučni sistem visoke protoka koji obrađuje višestruko dobro i 96 ploča tokom pripreme uzoraka

Захтев за информације




Obratite pažnju na naše Правила о приватности.


 

Priprema masovnog uzorka pomoću ultrazvučnog UIP400MTP

Ploče i mikroplate od 96 bunara su alat za istovremeno rukovanje i obradu velikog broja uzoraka. Kao što već pokazuje njeno ime "96-dobro ploča", mikroplata od 96 bunara ima 96 bunara i može da drži 96 pojedinačnih uzoraka. Priprema uzorka pre analize, npr. pre napada na bazi ćelija (kao što su ELISA ili PCR) zahteva ćelijsku lizu, poremećaj ćelija kao i vađenje proteina i oslobađanje drugih ciljanih intracellularnih molekula. Ultrazvučna ćelijska liza i vađenje je odavno i dobro utvrđen metod visokokvalitetne pripreme uzoraka. Ultrazvučna ćelijska liza i vađenje proteina obavljaju se u skladu sa protokolima i time daju ponovljene i pouzdane rezultate. Masovni ultrazvučni UIP400MTP je moćni ultrazvučni sistem od 400 vati koji parove ultrazvučnih talasa indirektno kroz zidove više bunarskih ploča pretvara u uzorak medijuma. Svaki od 96 uzoraka bunara je soničan sa potpuno istim ultrazvučnim intenzitetom koji rezultira superiornom ćelijskom lizom i prinosima ekstrakcije.

Примене УИП400МТП ултрасоникатора високог протока

Ултрасоникатор УИП400МТП испуњава бројне апликације засноване на типу узорка. Следећи преглед вас упознаје са могућностима соникатора Хиелсцхер УИП400МТП за припрему узорака у биологији, науци о животу, геномици, протеомици и дијагностици биомаркера.

  • Ćelijska Ljecenost
    Лиза ћелија сисара
    Лиза биљних ћелија
    Лиза бактеријских ћелија
    Лиза ћелија квасца
  • Лиза и екстракција ткива
    Лиза свеже смрзнутог ткива
    Екстракција ткива са фиксираним формалином, парафином (ФФПЕ)
  • Екстракција ДНК, РНК и укупне нуклеинске киселине (тНА).
    Vađenje DNK
    Vađenje RNK
    Екстракција укупне нуклеинске киселине (тНА).
  • Vađenje proteina
  • šering od hromatina
    DNK šering
    РНА смицање
  • Екстракција ДНК без ћелија (цфДНК) из плазме
  • Екстракција из ћелијских култура
    Екстракција из ћелијских култура сисара
    Екстракција из биљних ћелијских култура
    Екстракција из култура бактеријских ћелија
    Екстракција из ћелијских култура квасца

Prednosti Lysate preparata pomoću Mikroplate Sonicator UIP400MTP

 

Advantages of the multi-well plate sonicator for high-throughput sample preparation in biomarker diagnostics.

The multi-well plate sonicator UIP400MTP offers numerous benefits.

 
UIP400MTP ultrazvuk za 96-dobro pripremu uzorka ploče pomoću ultrazvukaLisnati preparat u 96-dobro pločama, mikroplatama i multivel pločama (96-, 384- ,1536-well ploče) može predstavljati nekoliko izazova. Tokom preparata za lisnate preparate u 96-dobro pločama i drugim mikro pločama, može da nastane nekoliko izazova. Ti izazovi uključuju nedosledan poremećaj uzorka, ograničenu skalabilnost, unakrsnu kontaminaciju i procese intenzivne radne snage. Sa 96-dobro pločastim sonicatorom UIP400MTP, Hielscher je osmislio pouzdan i udoban sistem za pripremu lisata. Razvijen specijalno za multiwell-pločasti lisatni preparat, mikroplatni sonicator UIP400MTP nudi jedinstvene prednosti u odnosu na tradicionalne tehnike kao što su šejkeri za ploče i lisnatost od mesa. Samim tim, 96-dobro pločasti sonicator UIP400MTP prevazilazi ove izazove u pripremi uzoraka sa više ploča i pomaže vam da postignete visokoproglednu lizu sa odličnom jednoličnošću, reproduktivnošću i korisničkom udobnošću.
 
 
У наставку се бавимо сваким проблемом и како УИП400МТП микроплоча-соникатор помаже у превазилажењу ових изазова:
 

  • Problem nedoslednog prekida uzorka: Postizanje doslednog i efikasnog poremećaja uzorka u svakom bunaru multiwell ploče može biti teško. Tradicionalne metode za preparate za lisate kao što su šejkeri za tanjire ili mlaćenje konaka / mlevenje bead često ne postižu jednoobrazne poremećaje u svim bunarima. Ova nedoslednost može rezultirati varijacijama u lisnatom kvalitetu i uticaju nizvodnih aplikacija.
  • The Microplate Sonicator Solution: Hielscher mikroplatni sonicator UIP400MTP koristi ultrazvučne talase visokog intenziteta za generisanje kavitacije, ravnomerno ometajući uzorke u svakom bunaru. S obzirom na to da su ploče od 96 bunara i multivel-ploče ravnomerno uznemirene mikroplatnim sonicatorom UIP400MTP, osigurana je dosledna i pouzdana lisnata priprema preko cele ploče.
  •  

  • Problem skalabilnosti: Obrada uzoraka u 96-bunarskim pločama ili drugim višestrukim pločama često zahteva skalabilnost za veću protok. Šejkeri za tanjire i mlinovi za glavu mogu biti ograničeni u svojoj skalabilnosti zbog veličine i broja tanjira koje mogu da smeste.
  • Sonicator rešenje od 96 bunara: Mikroplatni sonicator UIP400MTP vam omogućava da koristite bilo koju standardnu ploču sa 12-, 24,-, 48-, 96-, 384-ili 1536 bunara. Ovo omogućava brzu i laku razmeru do pripreme uzoraka velike protoka. S obzirom na to da je Hielscher ultrazvučni UIP400MTP dizajniran za multiwell-ploču sonication kompaktan i zahteva samo ograničen prostor, još veće protok se može lako pokriti dodavanjem dodatnih sonicatora ploča. Više sonicatora se može lako instalirati kao klasteri jedan pored drugog. Ovo nudi skalabilnost omogućavanjem istovremenog sonisanja više ploča, što omogućava rukovanje visokim uzorcima brojeva i efikasnu obradu većih skupova uzoraka, uštedu vremena i povećanje produktivnosti.
  •  

  • Problem unakrsne kontaminacije: Unakrsna kontaminacija je česta briga kada radite sa višestrukim pločama. Tradicionalne metode kao što su šejkeri za ploče mogu dovesti do prskanja uzoraka ili prenosa između bunara, kompromitujući integritet podataka.
  • Sonicator rešenje od 96 bunara: Sonikator UIP400MTP za 96-bunarske ploče i druge ploče sa više bunara dizajniran je tako da indirektno sonicira bunarske ploče, što znači da se ne dodaje nikakav materijal kao što su beads ili hemikalije. Mikroplate se mogu pokriti folijom ili poklopcem stvarajući zatvoreni sistem koji eliminiše rizik od bilo kakve unakrsne kontaminacije. Ovo omogućava preciznu i pouzdanu obradu uzoraka bez kompromitovanja eksperimentalnih rezultata.
  •  

  • Проблем скупих власничких производа за једнократну употребу: Већина соникатора високе пропусности ограничена је на скупе власничке плоче са више јажица, тако да сте приморани на то због прескупих плоча са више јажица. Ограничење на власничке плоче поставља вишеструке изазове, укључујући финансијска ограничења, ограничен избор и флексибилност, зависност од добављача и питања одрживости животне средине.
  • Sonicator rešenje od 96 bunara: Соникатор УИП400МТП је дизајниран да ради са било којим стандардним плочама са 96 јажица, микроплочама и више-бунарићима. Изаберите жељени тип микротитарске плоче и добављача! Хиелсцхер Ултрасоницс не продаје скупе материјале за једнократну употребу као што су плоче са 96 јажица, али вам даје слободу да изаберете најприкладнији и економичнији тип плоче са више бунара за ваше истраживачке експерименте. Ово вам омогућава да дизајнирате свој рад тачно према захтевима истраживања и помаже вам да уштедите новац куповином јефтиних плоча.
  •  

  • Problem radno-intenzivnih procesa: Lizativna priprema u viševelovelnim pločama može biti radno intenzivna, što zahteva ponavljajuće ručne korake i produženo vreme obrade. Šejkeri za ploče često zahtevaju duga vremena inkubacije i povremene cikluse tresanja. Mlinovi za bead zahtevaju dodavanje beadsa, a uzorke cevi je potrebno obraditi u grupama. Naknadno uklanjanje beads-a je veoma radan proces i uvek dolazi sa rizikom od neželjenog gubitka uzoraka i kontaminacije uzoraka.
  • Sonicator rešenje od 96 bunara: Hielscher multi-well pločasti sonikator UIP400MTP za 96-dobro ploču i mikroplate sonication pojednostavljuje proces, smanjujući radnu snagu i vreme. Proces sonikacije je brz, sa istovremenim tretmanom svih bunara, eliminišući potrebu za višestrukim koracima inkubacije ili ručnim probnim prenosima. Određeni protokoli sonication-a se mogu sačuvati u meniju koji omogućava brzo i jednostavno ponovno pokretanje procesa sonication (npr. u unapred podešenoj amplitude, vremenu, pulsnom/burst modu i temperaturnom prozoru). Olakšava proizvodnju reproduktivnog i ponavljajućeg vađenja proteina lize i enormno rezultira fragmentacijom DNK.
  •  

  • Problem uzorka oporavka: Tradicionalne metode kao što su mlinovi za bead mogu rezultirati lošim oporavkom uzorka usled gubitka uzorka tokom prenosa bead-a ili poteškoća u odvajanju uzoraka od beadsa.
  • Sonicator rešenje od 96 bunara: Hielscher mikrotiter ploča Sonicator UIP400MTP dizajniran je za 96-dobro ploče i sinikaciju višeslojnih ploča i nudi superiorno rukovanje uzorkom i oporavak jer ne zahtevaju dodavanje bead-a ili uključuju složene korake razdvajanja uzoraka. Ploče se mogu lako preneti na naredne procesne korake nakon sonicije ili se uzorci mogu povratiti iz pojedinačnih bunara bez ikakvog gubitka ili kontaminacije.
  •  

  • Problem nesvestrane upotrebe: Konvencionalni metodi pripreme uzoraka mikroplate imaju samo ograničenu fleksibilnost upotrebe i aplikacija. Promene uzorka volumena, tipova ploča ili primene različitih intenziteta tretmana često nisu izvodljive.
  • Sonicator rešenje od 96 bunara: Hielscher mikroplatni sonicator UIP400MTP pruža maksimalnu svestranost u obradi uzoraka. UIP400MTP može da primi različite formate ploča, uključujući pojedinačne cevi, 96-bunar, 384-bunar ili čak ploče veće gustine, kao i prilagođene ploče. Pored toga, mikro-dobro pločasti sononičar nudi veliku fleksibilnost u parametrima sonikacije, kao što su amplitude, trajanje, pulsacija i temperatura, omogućavajući optimizaciju za različite tipove uzoraka i aplikacija. Pored toga, UIP400MTP možete koristiti za soniciju malih bočica kao što su krio-bočice ili Eppendorf cevi, kao i petrijeva jela. Naravno, UIP400MTP ne samo da može da lizuje i remeti ćelije, fragmentira DNK i RNK ili da homogenizuje uzorke tkiva, već se može koristiti i za emulzifikaciju i homogenizaciju uzoraka, dega mikroplate uzorke, čišćenje površine malih čvrstina ili upotrebu kao alternativu za lepršavi homogenizer (za homogenizaciju uzoraka u zapečaćenim kesama).
  •  

  • Problem kompatibilnosti sa automatizacijom: Mircoplate perla-mlevenje ili enzimska / hemijska liza zahteva post-procesni korak, gde se perle uklanjaju i ispiraju uzorci. Ovaj dodatni korak procesa remeti nesmetanu tranziciju u automatizovanoj pripremi uzorka.
  • Sonicator rešenje od 96 bunara: Hielscher mikroplatni sonicator UIP400MTP se može lako integrisati u linije za automatsko uzorkovanje. Pouzdan i ponavljan proces sonication idealan je za standardizovanu pripremu uzoraka sa reproduktivnim rezultatima.

 

Sve u svemu, Hielscher UIP400MTP je najsofisticiraniji mikroplatni sonicator sa mogućnostima lečenja bilo koje standardne višestruko dobrostojeće ploče. Nudeći značajne prednosti u odnosu na tradicionalne tehnike pripreme mikrotiterskih ploča kao što su šejkeri za ploče i mlinovi za bead, Hielscher mikroplatni sonicator UIP400MTP obezbeđuje konzistentan poremećaj uzorka, skalabilnost, smanjenu unakrsnu kontaminaciju, smanjen intenzitet rada, poboljšan oporavak uzorka i svestranost u obradi uzoraka. Ove funkcije čine Hielscher UIP400MTP najefikasnijim i najpouzdanijim ultrazvučnim homogenizerom za preparat za lisnatost u multiwell pločama, pospešujući eksperimentalnu reprodukciju i efikasnost.

Test erozije aluminijumske folije pokazuje ujednačenu eroziju kavitacione folije u predelu 96-bunarskih ploča koje treba sonicizovati. Drugi test pokazuje emulizaciju biste nafte i vode u svim bunarima 96-dobro.

UIP400MTP za 96-dobro ploču i višestepenu sonikaciju - Jednoličnost ultrazvučnog intenziteta

Video sličica

UIP400MTP je moćan ultrazvučni uređaj za probnu pripremu više bunarskih ploča.

UIP400MTP za mikrotiter ploču / višestruko dobro smena ploča

Uniform Sonication of All Wells with the UIP400MTP

Testovi kao što su test aluminijumske folije i test emulzije dokazuju ujednačen ultrazvučni intenzitet preko kompletne površine UIP4000MTP. Ujednačeni intenzitet rezultira homogenim uzorkom sonikacije u svim bunarima više bunarskih ploča.
Test aluminijumske folije sa UIP400MTP
Test aluminijumske folije izveden sa ultrazvučnim ultrazvučnim pločama UIP400MTP demonstrira ujednačenu generaciju akustične kavitacije preko kompletne površine.
Kompletna površina aluminijumske folije pokazuje ravnomerno raspoređene rupe izazvane kavitacijom.

Test aluminijumske folije pokazuje ujednačenu pojavu akustične kavitacije preko kompletne površine UIP400MTP.

Test aluminijumske folije pokazuje ujednačenu pojavu akustične kavitacije preko kompletne površine UIP400MTP.

Emulsioni test sa UIP400MTP
Rezultati testa emulzije vizuelno pokazuju ujednačen ultrazvučni intenzitet UIP400MTP. Gornja slika prikazuje smesu biste vode i ulja u tanjiru od 96 bunara pre sonikacije. Na drugoj slici su ultrazvučne emulzije posle 1 min. tretmana. Svi bunari pokazuju isti gubitak transparentnosti, što ukazuje na ujednačenu emulziju u svim šupljinama.

Emulsioni test ulja i vode u šupljinama ploče od 96 bunara demonstrira ujednačen ultrazvučni intenzitet preko kompletne ploče.

Emulsioni test ulja i vode u šupljinama ploče od 96 bunara demonstrira ujednačen ultrazvučni intenzitet preko kompletne ploče. Posle sonikacije, svi bunari pokazuju isti stepen emulzisacije na koji ukazuje isti gubitak transparentnosti u svim bunarima. (Slika iznad: neodonirano ulje i voda; slika ispod: sonirane O/W emulzije)

Precizna kontrola temperature tokom sonikacije mikrotiter ploče

UIP400MTP je moćni ultrazvučnik od 400 vati, koji prenosi ultrazvučne talase i vibracije indirektno kroz zidove mikrotiter ploče u uzorke i stvara kavitaciju i šiptarske sile u medijumu. Kao sve metode mehaničkog prekida ćelija, sonicija stvara toplotu. Međutim, za razliku od alternativnih metoda prekida ćelija, UIP400MTP omogućava sofisticirano praćenje temperature i pre-postavljanje temperaturnih ograničenja kako bi se sprečila bilo kakva toplotna degradacija bioloških uzoraka.
UIP400MTP je opremljen pametnim softverom. Putem digitalnog ekrana osetljivog na dodir, meniju se može lako pristupiti do unapred podešenih ograničenja temperature i programirati ukupan unos energije za pokretanje uzorka.

Praćenje temperature uzorka: MultiSample ultrazvučni UIP400MTP opremljen je inteligentnim softverom i senzorom za dodatnu temperaturu. Priključite senzor temperature u UIP400MTP i ubacite vrh senzora temperature u jedan od mikrotiterskih bunara. Putem digitalnog obojenog ekrana osetljivog na dodir, u meniju UIP400MTP možete da postavite određeni temperaturni opseg za uzorak sonikacije. Ultrazvučnik će se automatski zaustaviti kada se dostigne maksimalna temperatura i pauzirati dok se temperatura uzorka ne spusti na nižu vrednost postavljene temperaturne ∆. Onda se sonikacija ponovo automatski započinje. Ova pametna funkcija sprečava razgradnju izazvanu toplotom.
Ako je moguće, možete unapred ohladiti ploču od 96 bunara ili mikrotiter ploču i njene uzorke kako biste odložili dostizanje kritične granice temperature.

96-well tanjir sonication with the UIP4000MTP

UIP400MTP za indirektnu, ali intenzivnu sonikuaciju 96-dobro ploča i mikro-bunarskih ploča.

UIP400MTP Mikroplatni sonicator za pripremu uzorka visoke protoka

Kupci širom sveta koriste Hielscher UIP400MTP za pouzdanu, reproduktivnu i pogodnu pripremu masovnih uzoraka u više bunarskim pločama. UIP400MTP olakšava njihov svakodnevni rad u biološkim, biohemijskim, životnim naukama, medicinskim i kliničkim laboratorijama. Uz inteligentni softver i kontrolu temperature Hielscher UIP400MTP, temperatura je pouzdano kontrolisana i izbegnuta je degradacija uzoraka izazvanih toplotom. Ultrazvučni preparat uzorka sa Hielscher Ultrasonics UIP400MTP daje veoma pouzdane i reproduktivne rezultate!
Zatražite da Vaš besplatan informativni paket koji uključuje prijave i cenu za UIP400MTP bude popunjavanje formulara ispod ili nas kontaktirajte putem mejla ili telefona već danas!
 

Захтев за предлог за ове тачке!

Да бисте добили предлог, молимо вас да ставите своје контакт податке у форму испод. Типична конфигурација уређај прелиминарно изабрани. Слободно да се ревидира избор пре него што кликнете на дугме да тражи предлог.








Navedite informacije koje želite da primite ispod:



  • Ultrazvučna jedinica za pripremu više uzoraka UIP400MTP za sinikaciju više bunarskih ploča. UIP400MTP funkcioniše i kao alternativa lepršanju homogenizera, agitovanja zapečaćenih kesa i kesica ultrasonično u sterilnim uslovima.

    ultrazvučni procesor (20kHz, 400W) za intenzivnu sonikuaciju 96-bunarskih ploča i višeslojnih ploča; idealan za pripremu bioloških uzoraka (npr. ćelijska liza, DNK šiping, solubilizacija), sa pumpom za recirkulaciju; pumpa i utičnica za lako isušivanje, sa ručnim
    LxBxH: approx.30x43x33cm
    Težina: oko 30kg


Molimo vas da zabeležite naše Правила о приватности.


 
Tražite ultrazvučni sistem za obradu većih volumena? Табела испод показује приближни капацитет обраде наших ултразвучних уређаја:
Sledeća tabela vam daje naznaku približnog kapaciteta obrade naših ultrazvučnih sistema od kompaktnih ručnih homogenizatora i High-throughput / MultiSample sonicatora do industrijskih ultrazvučnih procesora za komercijalne aplikacije:
 

батцх tomПротокПрепоручени уређаји
12-, 24,-, 48-, 96-, 384-, ili 1536-bunarske ploče / mikrotiter tanjiri, petrijeve posude, male bočiceН.А.UIP400MTP
10 bočica à 0,5 do 1,5mLН.А.Vialvajer na UP200St
0.01 do 250mL5 do 100mL/minУП50Х
0.01 do 500mL10 до 200мЛ / минУП100Х
10 до 2000мЛ20 до 400мЛ / минУП200Хт, УП400Ст
0.1 до 20Л0.2 до 4Л / минУИП2000хдТ
10 до 100Л2 до 10Л / минUIP4000hdT
Н.А.10 до 100Л / минУИП16000
Н.А.већекластер УИП16000
Соникатор за високо пропусну припрему узорака! УИП400МТП соникатор плоча олакшава лизу, екстракцију протеина, фрагментацију ДНК и солубилизацију ћелија биолошких узорака у плочама са 96 бунарчића.

Соникатор плоча УИП400МТП за све плоче са 96 јажица, микротитарске плоче и плоче са више јажица.

UIP400MTP je pouzdan ultrazvučnik za uzorak pripreme 96-dobro ploča, mikrotiter ploča, višestrukih ploča i mikroplata. Tipične primene uključuju ćelijsku lizu, DNK šering i vađenje proteina.

UIP400MTP je pogodan za soniciju bilo koje vrste 96-dobro ploča, mikroplata, mikrotiter ploča i multiwell ploča.



Literatura/reference

Чињенице вреди знати

Šta su Mikrotiter ploče?

Mikrotiter ploče, poznate i kao 96-bunarske ploče, 96-bunarske mikroplate, višestruko dobro ploče ili ELISA ploče, su pravougaone višestruke ploče, koje se široko koriste u laboratorijama za obradu kulturnih ćelija, ćelijskih uzoraka. Mikrotiter ploče se obično koriste u manifold asays kao što su ELISA i PCR. Većina ploča od 96 bunara dizajnirana je za tokove posla sa visokim tromim i kompatibilna je sa analitičkim instrumentima i robotskim rukovanjem i obradom. Stoga su dostupne više varijanti kao što su potpuno suknje ploče pogodne za robotske platforme, nesuvane, polu-suknje i bar-kodirane ploče prilagođene masovnoj obradi uzoraka.
Uobičajena upotreba mikrotiterskih ploča uključuje primenu kao što su prikupljanje uzoraka, priprema jedinjenja, kombinatorička hemija, skrining visoke protoka, prečišćavanje nukleinska kiselina, rast bakterijske kulture i replikacija ploča.

Ultrazvučni ultrazvučni UIP400MTP čini efikasan uzorak pripreme za ekranizaciju visoke protoka

UIP400MTP je veoma efikasan za brzi uzorak pripreme za proveru visoke protoki.

Biće nam drago da razgovaramo o vašem procesu.

Hajde da stupimo u kontakt.