Уклањање биофилма помоћу соницатора високог протока УИП400МТП
Соникатори високог протока дизајнирани за плоче са више бунара и плоче са 96 јажица су суштински алати у истраживању биофилма, посебно за уклањање и уклањање биофилма из бунара, епрувета, иглица и Петријевих посуда. Ови соникатори олакшавају обраду бројних узорака истовремено, побољшавајући ефикасност и конзистентност. Хиелсцхер соникатор високог протока УИП400МТП је идеалан за соникацију плоча са више јажица, плоча са 96 јажица, неколико епрувета или Петријевих посуда. Уједначене ултразвучне вибрације и кавитација поуздано уклањају биофилм са дна плоче. Ово чини соникатор плоча са више бунара УИП400МТП идеалним алатом за припрему узорака за уклањање биофилма, анализе биофилма и истраживање бактерија и микроба.
Мултивелл-Плате Соницатор УИП400МТП за уклањање и уклањање биофилма у припреми узорака високог протока:
- Бактеријски биофилми
- Еукариотски биофилми
- Биофилмови гљивица
- Арцхаеал биофилмс
- Полимикробни биофилми / Биофилмови мешовитих врста
- Зубни биофилм (плак)
- Морски биофилмови
- Биофилмови животне средине
- Биофилмови медицинских уређаја
- Суспензије култивисаних ћелија
УИП400МТП соникатор високог протока за уклањање биофилма са плоча са више јажица, плоча са 96 бунарчића, епрувета и Петријевих посуда.
Уклањање и уклањање биофилма помоћу ултразвука
Хиелсцхер соникатор високог протока УИП400МТП је скројен за поуздану и уједначену соникацију плоча са више и 96 јажица. Неопходан у истраживању биофилма, соникатор плоча са више бунара УИП400МТП нуди поуздану технологију за уклањање и уклањање биофилма са плоча, епрувета и Петријевих посуда са више бунара. Омогућујући припрему узорака високог протока, УИП400МТП побољшава ефикасност и конзистентност тестова биофилма и других сродних студија, што овај соникатор чини незаменљивим у академским и индустријским микробиолошким истраживањима.
Уклањање биофилма помоћу соникације: За одстрањивање биофилма, биофилмовима се дозвољава да се формирају у бунарчићима плоче са више бунара под контролисаним условима. Плоча се затим поставља у соникатор, где се параметри као што су време, амплитуда и фреквенција постављају у складу са специфичним захтевима типа биофилма и експерименталним циљевима. Ултразвучни таласи стварају кавитацију унутар сваког бунара, ефикасно ометајући матрикс биофилма и померајући ћелије.
Ултразвучна припрема узорака за биофилмове: У тестовима биофилма, соникатори високе пропусности имају неколико примена. После ултразвука, измештене ћелије биофилма могу се сакупити и квантификовати коришћењем различитих тестова као што су кристално љубичасто бојење, бројање живих ћелија или мерење биомасе. Поред тога, биофилмови се могу третирати антимикробним агенсима након чега следи ултразвук да би се проценила ефикасност ових агенаса у нарушавању биофилма. Избачене ћелије биофилма су такође корисне за геномске и протеомске студије, јер се могу користити за екстракцију ДНК, РНК и протеина за даљу молекуларну анализу.
Соникатори високог протока нуде бројне предности. Они омогућавају истовремену обраду више узорака, штедећи време и рад, и обезбеђују уједначен третман свих бунара, смањујући варијабилност и побољшавајући поновљивост резултата. Ови уређаји су такође погодни за студије великих размера, омогућавајући високо пропусни скрининг формирања биофилма, поремећаја и лечења.
(А) Плоча која садржи ТСБ са 2% глукозе која се користи за формирање биофилма, опоравак ћелија и одређивање МИЦ и МБЦБ; (Б) Поклопац са иглама за формирање стафилококних биофилма.
Ћелије биофилма формиране на иглицама су померене коришћењем Хиелсцхер соницатор УИП250МТП током 5 минута у плоче са 96 бунарчића које садрже свеж медијум за културу за опоравак ћелија.
(Слика и студија: ©де Оливеира ет ал., 2016)
Соникатор плоча са 96 јажица УИП400МТП за соникацију микротитарских и плоча са више јажица
Важност ултразвучног уклањања биофилма у истраживању биофилма
Ултразвучно уклањање биофилма је кључно у истраживању биофилма због његове ефикасности, доследности, ефикасности и свестраности. Осигурава темељно и уједначено разбијање биофилма, омогућавајући прецизну и поновљиву анализу у различитим тестовима биофилма. Ови тестови, укључујући кристално љубичасто бојење, бројање одрживих ћелија, биолуминисценцију АТП, редукцију КСТТ, микроскопску анализу и екстракцију нуклеинске киселине/протеина, пружају свеобухватан увид у формирање биофилма, одрживост, структуру и одговор на третмане.
Соникација нежно уклања и уклања биофилм са чврстих подлога као што су дна плоча, игле, клинови или покровни стакалци.
- Ефикасно ометање биофилма:
Кавитација: Ултразвучни таласи стварају мехуриће кавитације који стварају снажне силе смицања након колапса, ефикасно нарушавајући сложену структуру биофилма.
Темељно померање: Осигурава да се ћелије биофилма темељно уклоне са површина, што је кључно за тачну квантификацију и анализу. - Конзистентност и поновљивост:
Јединствени третман: Соникатори високог протока обезбеђују уједначену дистрибуцију ултразвучне енергије у свим узорцима, смањујући варијабилност и побољшавајући поновљивост.
Стандардизација: Омогућава стандардизацију протокола за нарушавање биофилма, што доводи до поузданијих и упоредивих резултата. - Ефикасност:
Могућност високе пропусности: Омогућава истовремену обраду више узорака, штедећи време и повећавајући пропусност у студијама биофилма.
Аутоматизација: Може се лако интегрисати у аутоматизоване радне токове, додатно повећавајући ефикасност и смањујући ручни рад. - Очување одрживости и интегритета:
Контролисани услови: Параметри као што су време и интензитет могу се фино подесити да поремете биофилмове без угрожавања виталности или интегритета ћелија, што је важно за наредне анализе. - Свестраност:
Широка применљивост: Погодно за различите врсте биофилма (бактеријских, гљивичних, мешовитих врста) и компатибилно са различитим површинама и материјалима који се користе у истраживању биофилма.
Соникатор плоча са више бунара УИП400МТП нуди бројне предности, које их чине незаменљивим алатом у припреми узорака високог протока.
Хиелсцхер Ултрасоницс нуди различите моделе соникатора, укључујући соникаторе типа сонде, соникаторе без контакта и соникаторе високе пропусности. Контактирајте нас сада! Наши технички стручњаци ће радо разговарати о вашим захтевима обраде са вама и препоручити вам најпогоднији соникатор за вашу примену биофилма.
Соникатор микротитарске плоче УИП400МТП користи се за уклањање биофилма за истраживање
Литература / Референце
- FactSheet UIP400MTP Multi-well Plate Sonicator – Non-Contact Sonicator – Hielscher Ultrasonics
- UIP400MTP-Multi-well-Plate-Sonicator-Infographic
- De Oliveira A, Cataneli Pereira V, Pinheiro L, Moraes Riboli DF, Benini Martins K, Ribeiro de Souza da Cunha MDL (2016): Antimicrobial Resistance Profile of Planktonic and Biofilm Cells of Staphylococcus aureus and Coagulase-Negative Staphylococci. International Journal of Molecular Sciences 17(9):1423; 2016.
- Martins KB, Ferreira AM, Pereira VC, Pinheiro L, Oliveira A, Cunha MLRS (2019): In vitro Effects of Antimicrobial Agents on Planktonic and Biofilm Forms of Staphylococcus saprophyticus Isolated From Patients With Urinary Tract Infections. Frontiers in Microbiology 2019.
Често постављана питања о истраживању биофилма
Која је најчешћа скела за биофилмове?
Најчешћа скела за биофилмове у лабораторијским истраживањима је микротитарска плоча. Микротитарске плоче, посебно формат са 96 јажица, имају широку примену због своје свестраности, лакоће употребе и компатибилности са различитим аналитичким техникама.
Која је најбоља плоча са 96 јажица за биофилмове?
Најбоља плоча са 96 јажица за студије биофилма зависи од неколико фактора укључујући тип биофилма који се проучава, експерименталну поставку и специфичне захтеве истраживања. Међутим, неке уобичајено препоручене плоче са 96 јажица за студије биофилма су:
- Цорнинг® Цостар® 3596 Провидна плоча са равним дном са 96 јажица: Ова плоча се често користи због своје високе оптичке јасноће, што је корисно за снимање и спектрофотометријске тестове.
- Нунц™ МицроВелл™ плоче са 96 јажица: Ове плоче су познате по својим уједначеним димензијама бунара и високој оптичкој јасноћи. Доступни су у различитим површинским третманима за подршку различитим типовима ћелијске културе.
- Греинер Био-Оне ЦЕЛЛСТАР® 96-бунарска микроплоча: Ова плоча се често користи за студије биофилма због свог доследног квалитета од бунара до бунара и доступности у различитим површинским премазима, као што су површине третиране културом ткива или површине које се слабо везују.
- Црне плоче са 96 јажица са чистим дном: За студије које захтевају мерења флуоресценције или луминесценције, црне плоче са чистим дном (нпр. Цорнинг® 3603) су идеалне јер минимизирају унакрсно преслушавање између бунара и побољшавају детекцију сигнала.
- Хидрофобне или хидрофилне обложене плоче: У зависности од природе биофилма и микроорганизма, плоче са специфичним премазима који подстичу или инхибирају адхезију могу бити од користи. На пример, хидрофобне плоче могу бити погодне за биофилмове формиране од одређених бактерија.
- Плоче специфичне за биофилм: Неки произвођачи нуде плоче посебно дизајниране за истраживање биофилма. Ове плоче често имају побољшана својства површине која промовишу формирање биофилма и оптимизоване су за анализе биофилма.
Када бирате плочу са 96 јажица за студије биофилма, узмите у обзир следеће критеријуме:
- Материјал и површинска обрада: Одаберите материјал плоче и површинску обраду који подржавају адхезију и раст микроорганизама који формирају биофилм које проучавате.
Оптичка јасноћа: За тестове који укључују оптичка мерења, обезбедите да плоча има високу оптичку јасноћу. - Дизајн бунара: Узмите у обзир облик и дубину бунара, који могу утицати на раст биофилма и ефикасност накнадних третмана или мерења.
- Компатибилност са опремом: Уверите се да је плоча компатибилна са вашим соникатором, инкубатором и било којом другом опремом која се користи у вашој студији. Хиелсцхер соникатор плоча са више јажица је компатибилан са свим стандардним микротитарским и плочама са више јажица.
На крају крајева, најбољи избор ће зависити од специфичних захтева вашег истраживања биофилма и карактеристика укључених микроорганизама.
Шта се типични тестови биофилма користе у истраживању?
У истраживању и дијагностици, различите врсте тестова се користе за истраживање и класификацију биофилма. Соникација је уобичајени корак припреме узорка за уклањање биофилма са његове чврсте подлоге, што чини биофилм доступним за анализе и анализе.
- Кристално љубичасто бојење:
Сврха: Квантификује укупну биомасу биофилма.
Метода: Биофилмови се боје кристално љубичастом бојом, а боја се затим раствори и мери спектрофотометријски.
Примена: Користи се за процену формирања биофилма и ефеката антимикробних агенаса. - Бројање одрживих ћелија (ЦФУ тест):
Сврха: Одређује број живих ћелија биофилма.
Метода: Избачене ћелије биофилма се серијски разблажују и стављају на агар да би се избројиле јединице које формирају колоније (ЦФУ).
Примена: Процењује виталност ћелија биофилма и антимикробну ефикасност. - АТП биолуминисценција:
Намена: Мери метаболичку активност ћелија биофилма.
Метод: Нивои АТП-а се квантификују коришћењем биолуминисцентног теста.
Примена: Указује на одрживост биофилма и метаболичко стање. - КСТТ тест редукције:
Намена: Процењује метаболичку активност ћелије.
Метода: КСТТ реагенс редукује метаболички активним ћелијама да би се формирао обојени продукт формазана, који је квантификован спектрофотометријски.
Примена: Користи се за процену одрживости ћелија биофилма и ефеката третмана. - Микроскопска анализа:
Сврха: Визуелизира структуру и састав биофилма.
Метода: Технике укључују светлосну микроскопију, конфокалну ласерску скенирајућу микроскопију (ЦЛСМ) и скенирајућу електронску микроскопију (СЕМ).
Примена: Пружа детаљан увид у архитектуру биофилма, дистрибуцију и ефекте третмана. - Екстракција ДНК, РНК и протеина:
Намена: Анализира генетске и протеомске профиле ћелија биофилма.
Метод: Ћелије биофилма се лизирају да би се екстраховале нуклеинске киселине и протеини за низводну анализу (нпр. ПЦР, кПЦР, секвенцирање, протеомика).
Примена: Проучава експресију гена, генетску разноликост и експресију протеина у биофилмима. - Тест инхибиције и ерадикације биофилма:
Сврха: Проверава једињења због њихове способности да спрече стварање биофилма или искорењују успостављене биофилме.
Метода: Биофилмови се третирају потенцијалним анти-биофилм агенсима, а поремећај се процењује коришћењем претходно наведених тестова.
Примена: Откривање лекова и развој анти-биофилм терапија.
Хиелсцхер Ултрасоницс производи ултразвучне хомогенизаторе високих перформанси од лаб до индустријска величина.
