Fragmentacja alfa-synukleiny przy użyciu sonikatora VialTweeter

Włókna i wstążki α-synukleiny są fragmentowane w badaniach naukowych w celu wygenerowania mniejszych fragmentów włókien lub nawet pojedynczych cząsteczek białka, które można łatwiej analizować za pomocą różnych technik eksperymentalnych. Sonicator VialTweeter jest jednym z najczęściej używanych ultradźwięków do wydajnej i niezawodnej fragmentacji alfa-synukleiny.

α-synukleina w badaniach naukowych

VialTweeter do jednoczesnego pobierania wielu próbek do fragmentacji włókien alfa-synukleiny w dokładnie takich samych warunkach.Fibryle alfa-synukleiny to agregaty białkowe, które są silnie związane z zaburzeniami neurodegeneracyjnymi, takimi jak choroba Parkinsona i niektóre formy demencji, w tym demencja z ciałami Lewy'ego. Badania koncentrujące się na fibrylach alfa-synukleiny mają na celu zrozumienie ich roli w postępie choroby i opracowanie potencjalnych interwencji terapeutycznych. Rozbijając fibryle alfa-synukleiny na mniejsze fragmenty, naukowcy mogą badać ich specyficzne cechy strukturalne. Na przykład, fragmentacja włókien alfa-synukleiny umożliwia naukowcom badanie ich interakcji z innymi cząsteczkami, takimi jak białka, lipidy lub małe cząsteczki. Wytwarzając mniejsze fragmenty, można skuteczniej badać miejsca wiązania i powinowactwo do tych partnerów interakcji. Mniejsze fragmenty i wstążki α-Syn mogą również wykazywać zmienioną toksyczność i efekty biochemiczne. Dlatego niezawodna i wydajna technika fragmentacji, która daje powtarzalne wyniki w szybkiej i prostej obróbce próbki, ma kluczowe znaczenie.
Ultradźwiękowa fragmentacja Alpha-Syn: Sonikator VialTweeter to uznany ultradźwiękowy system przygotowywania próbek, który sonizuje do 10 fiolek jednocześnie w dokładnie takich samych warunkach. Programowalne ustawienia pozwalają na proste i szybkie ponowne przeprowadzenie tych samych eksperymentów, co daje wysoce wiarygodne i powtarzalne wyniki fragmentacji fibryli alfa-synukleiny.

Zapytanie o informacje




Zwróć uwagę na nasze Polityka prywatności.


Sonicator VialTweeter jest jednym z najczęściej używanych ultradźwięków do wydajnej i niezawodnej fragmentacji alfa-synukleiny.

Sonikator VialTweeter do jednoczesnej fragmentacji ultradźwiękowej wielu próbek alfa-synukleiny.

 

VialTweeter jest unikalnym systemem ultradźwiękowym umożliwiającym jednoczesne udźwiękowienie do 10 fiolek w dokładnie tych samych warunkach bez skażenia krzyżowego.

UP200St z VialTweeter do nagłaśniania fiolki zamkniętej

Miniatura wideo

Przygotowanie próbki α-synukleiny za pomocą sonikatora

Jednym z podejść do badania fibryli alfa-synukleiny jest ich ekstrakcja i fragmentacja przy użyciu technik takich jak sonikacja. Sonikacja to proces wykorzystujący fale ultradźwiękowe o wysokiej intensywności i niskiej częstotliwości do rozbijania agregatów białkowych, co prowadzi do uwolnienia mniejszych fibryli lub pojedynczych cząsteczek białka. Sonikator VialTweeter jest powszechnie stosowanym w tym celu urządzeniem w badaniach związanych z α-synukleiną.

Liczne badania naukowe opisują precyzyjne protokoły przygotowania próbek do sonikacji fibryli alfa-synukleiny, które wykorzystują Hielscher VialTweeter do wydajnej i niezawodnej fragmentacji fibryli α-synukleiny. Fragmentując fibryle ultradźwiękowo, naukowcy mogą analizować powstałe produkty i badać ich strukturę, toksyczność i interakcje z innymi cząsteczkami. Badania te zapewniają ważny wgląd w mechanizmy leżące u podstaw neurodegeneracji i potencjalnie identyfikują nowe cele terapeutyczne. Dobrze ugruntowane protokoły sonikacji α-synukleiny przy użyciu sonikatora VialTweeter pozwalają na uzyskanie wiarygodnych i powtarzalnych wyników.

Górne obrazy: niefragmentowane fibryle alfa-synukleiny
Dolne obrazy: Ultradźwiękowo pofragmentowane fibryle alfa-synukleiny za pomocą sonikatora VialTweeter
(badanie i zdjęcia: ©Dieriks et al., 2022)

Ultradźwiękowa fragmentacja włókien α-synukleiny – protokoły

Ponieważ wielu badaczy używa sonikatora VialTweeter jako preferowanej techniki fragmentacji do produkcji jednolitych fragmentów fibryli α-synukleiny, ustalone protokoły są łatwo dostępne. Poniżej znajduje się kilka przykładowych protokołów fragmentacji.
 

 
Przygotowanie nasion ClearTau: Fibryle ClearTau rozcieńczono do 10 μM w dH2O i poddano sonikacji przy 70% amplitudzie przez 50 s z cyklem 1 s ON 1 s OFF w probówce przy użyciu sonikatora UP200St z VialTweeter. Nasiona scharakteryzowano za pomocą mikroskopii elektronowej.
Pomiar fluorescencji ThS: Fibryle ClearTau rozcieńczono do 2,5 μM w dH2O i poddano sonikacji przy 70% amplitudzie przez 50 s z cyklem 1 s ON 1 s OFF w probówce przy użyciu UP200St z VialTweeter. Jako kontrolę zastosowano 2,5 μM monomeru Tau 4R2N o pełnej długości. Do reakcji 100 μl dodano 100 μl ThS (10 μM), uzyskując końcowe stężenie białka 1,25 μM. Fluorescencję ThS mierzono w pojedynczym punkcie czasowym przy użyciu 96-dołkowych płytek z przezroczystym dnem ustawionych w czytniku mikropłytek FLUOstar Omega ze wzbudzeniem przy 445 nm i emisją przy 485 nm.
(por. Limorenko i in., 2023)
 
Jednolita długość α-synukleiny przy użyciu sonikacji: Niejednorodność długości fibryli α-syn i wstążek została zmniejszona przez sonikację przez 20 minut na lodzie w 2-ml probówkach Eppendorfa w urządzeniu VialTweeter ustawionym na 75% amplitudy, 0,5 s impulsów.
(por. Bousset et al., 2013)
 
Przeprowadzono kontrolę jakości ludzkiego rekombinowanego monomerycznego WT lub S129A a-Syn i generowanych przez nie polimorfów fibrylarnych, a także a-Syn 1-110. Następnie polimorfy fibrylarne rozdrobniono przez sonikację przez 20 minut w 2-mililitrowych probówkach Eppendorfa w ultrasonografie VialTweeter w celu wytworzenia cząstek fibrylarnych o średniej wielkości 42-52 nm, które są odpowiednie do endocytozy.
(por. Shrivastava i in., 2020)
 

Fragmentacja ultradźwiękowa jest wysoce niezawodną i skuteczną metodą równomiernej fragmentacji włókien i wstęg alfa-synukleiny. VialTweeter jest jednym z najczęściej używanych sonikatorów do fragmentacji α-syn.

Charakterystyka pięciu polimorfów fibrylarnych α-Syn. (A) Pokazano transmisyjne mikrografy elektronowe negatywnie zabarwionych fibrylarnych polimorfów α-Syn, wstążek, fibryli-91, fibryli-65 i fibryli-110 przed (górny pas) i po fragmentacji za pomocą VialTweeter (dolny pas). (B) Pokazano rozkład długości pofragmentowanych polimorfów fibrylarnych. Wskazano liczbę (n) zespołów fibrylarnych, z których uzyskano histogramy.
(badanie i zdjęcia: Shrivastava et al., 2020)

 
Fibryle α-Syn rozdrobniono przez sonikację przez 20 minut w 2 ml probówkach Eppendorfa w urządzeniu VialTweeter w celu wytworzenia cząstek fibrylarnych o średniej wielkości 42-52 nm, jak oceniono w analizie TEM.
(por. Negrini i in., 2022)
 
Rozpuszczone fibryle91 (w PBS) rozdrobniono przed dodaniem do hodowli komórkowych przez sonikację przez 20 minut w probówkach Eppendorf o pojemności 2 ml przy użyciu sonikatora Vial Tweeter, podzielono na porcje, zamrożono w ciekłym azocie i przechowywano do momentu użycia w temperaturze -80 ̊C.
(por. Vajhøj i in., 2021)
 

Sonicator UIP400MTP do fragmentacji włókien alfa-synukleiny w płytkach wielodołkowych.

Sonicator UIP400MTP do fragmentacji włókien alfa-synukleiny w płytkach wielodołkowych.

Sonicator UIP400MTP do fragmentacji włókien alfa-synukleiny w płytkach wielodołkowych.

VialTweeter i sonikatory laboratoryjne do fragmentacji α-Syn

VialTweeter z probówkami Eppendorf 2,0 ml do niezawodnej fragmentacji fibryli alfa-synukleinyFirma Hielscher Ultrasonics jest uznawana na całym świecie za wiodącego producenta najnowocześniejszych ultrasonografów. Zaufane i ugruntowane w głównych laboratoriach badawczych na całym świecie, nasze ultradźwięki oferują niezrównaną jakość i wydajność dla krytycznych eksperymentów.
Dzięki Hielscher VialTweeter i każdemu innemu sonikatorowi Hielscher doświadczysz niezrównanego komfortu użytkowania, ponieważ są one starannie zaprojektowane pod kątem powtarzalnych wyników, łatwości użytkowania i bezproblemowej obsługi. Dzięki funkcjom automatycznego rejestrowania danych możesz skupić się na swoich badaniach, podczas gdy nasze ultradźwięki skrupulatnie rejestrują kluczowe dane w celu zapewnienia powtarzalności i precyzji.
Osiągaj spójne i powtarzalne wyniki z pewnością siebie!
Nasze ultrasonografy są projektowane i produkowane w Niemczech. Niemiecka precyzja i najwyższa jakość inżynieryjna zapewniają niezawodne i dokładne przygotowanie próbki, takie jak fragmentacja włókien alfa-synukleiny za każdym razem. Koniec z obawami o niespójne wyniki - nasza technologia ultradźwiękowa zapewnia, że Twoje badania pozostają w czołówce postępu naukowego.
Ale to nie wszystko! Nasze zaangażowanie w doskonałość wykracza poza nasze produkty. Jesteśmy dumni z naszej wyjątkowej obsługi klienta, zapewniając fachowe wsparcie w celu rozwiązania wszelkich pytań lub wątpliwości. Nasz oddany zespół jest tutaj, aby pomóc Ci na każdym etapie podróży badawczej, zapewniając maksymalne wykorzystanie naszych ultradźwiękowców.
Wybierz innowacyjność, niezawodność i wyjątkowe doświadczenie użytkownika - wybierz nasze sonikatory laboratoryjne, takie jak VialTweeter do fragmentacji włókien alfa-synukleiny. Skorzystaj z już ustalonych protokołów i dołącz do grona wiodących naukowców, którzy ufają naszej technologii w swoich krytycznych badaniach. Podnieś poziom swoich badań i odkryj nowe granice w badaniach nad demencją i chorobami neurodegeneracyjnymi dzięki naszym najnowocześniejszym ultrasonografom.

Dlaczego Hielscher Ultrasonics?

  • wysoka wydajność
  • Najnowocześniejsza technologia
  • niezawodność & krzepkość
  • powtarzalność
  • regulowana, precyzyjna kontrola procesu
  • dla każdej objętości
  • inteligentne oprogramowanie
  • inteligentne funkcje (np. programowalne, protokołowanie danych, zdalne sterowanie)
  • Łatwa i bezpieczna eksploatacja
  • Niskie koszty utrzymania
  • CIP (clean-in-place)

 

Ten samouczek wyjaśnia, jaki typ sonikatora jest najlepszy do zadań związanych z przygotowywaniem próbek, takich jak liza, rozbijanie komórek, izolacja białek, fragmentacja DNA i RNA w laboratoriach, analiza i badania. Wybierz idealny typ sonikatora do swojego zastosowania, objętości próbki, liczby próbek i przepustowości. Hielscher Ultrasonics ma idealny homogenizator ultradźwiękowy dla Ciebie!

Jak znaleźć idealny sonikator do rozbijania komórek i ekstrakcji białek w nauce i analizie?

Miniatura wideo

 

Projektowanie, produkcja i doradztwo – Jakość Made in Germany

Ultradźwięki firmy Hielscher są znane z najwyższej jakości i standardów konstrukcyjnych. Solidność i łatwa obsługa pozwalają na płynną integrację naszych ultradźwięków z obiektami przemysłowymi. Surowe warunki i wymagające środowiska są łatwo obsługiwane przez ultradźwięki Hielscher.

Hielscher Ultrasonics jest firmą posiadającą certyfikat ISO i kładzie szczególny nacisk na wysokowydajne ultradźwięki charakteryzujące się najnowocześniejszą technologią i łatwością obsługi. Oczywiście sonikatory Hielscher są zgodne z CE i spełniają wymagania UL, CSA i RoHs.
 
Poniższa tabela przedstawia przybliżoną wydajność przetwarzania naszych ultrasonografów laboratoryjnych:
 

Polecane urządzenia Wielkość partii natężenie przepływu
UIP400MTP płytki wielokrotnego użytku / mikrotitery b.d.
ultradźwiękowy cuphorn CupHorn do fiolek lub zlewek b.d.
GDmini2 ultradźwiękowy reaktor mikroprzepływowy b.d.
VialTweeter 0.5-1,5 mL b.d.
UP100H 1 do 500mL 10-200mL/min
UP200Ht, UP400St 10 do 2000mL 20-400mL/min

Skontaktuj się z nami! / Zapytaj nas!

Poproś o więcej informacji

Skorzystaj z poniższego formularza, aby uzyskać dodatkowe informacje na temat VialTweeter i innych sonikatorów, fragmentacji alfa-synukleiny, protokołów i cen. Z przyjemnością omówimy z Tobą Twój proces i zaoferujemy Ci sonikator spełniający Twoje wymagania dotyczące przygotowania próbki!









Proszę zwrócić uwagę na nasze Polityka prywatności.


 

Film przedstawia ultradźwiękowy system przygotowania próbek UIP400MTP, który pozwala na niezawodne przygotowanie próbek z dowolnych standardowych płytek wielodołkowych przy użyciu ultradźwięków o wysokiej intensywności. Typowe zastosowania UIP400MTP obejmują lizę komórek, ścinanie DNA, RNA i chromatyny, a także ekstrakcję białek.

Ultrasonikator UIP400MTP do sonikacji płytek wieloigłowych

Miniatura wideo

Zapytanie o informacje




Zwróć uwagę na nasze Polityka prywatności.


MultiSampleSonicator VialTweeter może pomieścić do 10 mniejszych fiolek i do 5 większych probówek.

The VialTweeter jest powszechnie stosowany do fragmentacji fibryli alfa-synukleiny jako etap przedanalitycznego przygotowania próbki.



Literatura / materiały źródłowe


Ultradźwięki o wysokiej wydajności! Oferta firmy Hielscher obejmuje pełne spektrum produktów - od kompaktowych ultradźwięków laboratoryjnych, poprzez urządzenia stołowe, aż po w pełni przemysłowe systemy ultradźwiękowe.

Firma Hielscher Ultrasonics produkuje wysokowydajne homogenizatory ultradźwiękowe od laboratorium do wielkość przemysłowa.


Chętnie porozmawiamy o Państwa procesie.

Skontaktujmy się.