Metabolomica facilitata dalla sonicazione ad alto rendimento

La metabolomica è il campo di ricerca che impiega tecniche high-throughput per caratterizzare e quantificare piccole molecole in vari biofluidi, come urina, siero, plasma, feci e saliva, svelando firme metaboliche uniche. Il sonicatore ad alta velocità UIP400MTP, progettato per piastre a pozzetti multipli, è uno strumento potente per lisare le cellule in questi campioni, facilitando il rilascio di metaboliti per l'analisi a valle. Questo approccio preciso e affidabile è essenziale per la metabolomica, in cui sono fondamentali una progettazione accurata dello studio, una preparazione meticolosa dei campioni, una configurazione ottimizzata della piattaforma, un'analisi completa dei dati e un'interpretazione biologica significativa. La metabolomica impiega sia approcci mirati, che si concentrano su classi specifiche di molecole come carboidrati, lipidi e amminoacidi, sia tecniche non mirate, che forniscono un'ampia panoramica dei profili metabolici all'interno di un campione, rivelando l'intricata complessità della segnalazione metabolica.

Preparazione dei campioni ad alta produttività con il sonicatore per piastre da 96 pozzetti UIP400MTP

L'uso del sonicatore senza contatto UIP400MTP in combinazione con piastre da 96 pozzetti è un metodo efficiente per l'omogeneizzazione e l'estrazione di metaboliti ad alta produttività. Questa configurazione evita il contatto diretto con il campione, riducendo il rischio di contaminazione incrociata durante l'elaborazione di più campioni contemporaneamente.

Protocollo passo-passo per l'omogeneizzazione con il Sonicator a 96 pozzetti UIP400MTP

1. Preparazione dei campioni metabolomici
   Esempio di posizionamento: Dispensare ciascun campione (ad esempio, feci, tessuto intestinale o contenuto luminale) in pozzetti individuali di una piastra o micropiastra da 96 pozzetti.
   Solvente: I solventi organici, come metanolo, etanolo, acetonitrile, cloroformio e le loro miscele (acquose), sono essenziali per l'estrazione dei metaboliti, favorendo il rilascio dei metaboliti intracellulari dalla matrice cellulare. Utilizzare 100-300 µL di solvente per pozzetto, assicurando un volume sufficiente per immergere completamente il campione.
   Standard interni: In alternativa, aggiungere standard interni a ciascun pozzetto per la normalizzazione durante l'analisi metabolomica a valle.
2. Configurazione del mezzo di accoppiamento
   Livello dell'acqua: Posizionare la piastra da 96 pozzetti sulla piattaforma di sonicazione riempita con acqua (il mezzo di accoppiamento) come descritto nel manuale.
3. Configurazione dei parametri della UIP400MTP
   Impostazioni di alimentazione: Regolare l'ampiezza degli ultrasuoni al 50-80% della potenza massima per un'omogeneizzazione efficace.
   Modalità a impulsi: Impostare il ciclo di sonicazione a impulsi alternati (ad esempio, 30 secondi ON, 30 secondi OFF) per consentire il raffreddamento ed evitare il surriscaldamento del campione.
   Tempo totale: 4-10 minuti, a seconda della complessità e della durezza del campione.
   Controllo della temperatura: Utilizzare un refrigeratore da laboratorio per mantenere l'acqua a 4-8°C durante la sonicazione per proteggere i metaboliti sensibili al calore.
4. Processo di sonicazione
   Avviare l'UIP400MTP per i cicli di sonicazione.
   Monitorare il processo tramite l'interfaccia UIP400MTP.
   L'effetto di cavitazione omogeneizza i campioni e lima le cellule all'interno dei pozzetti, rilasciando i metaboliti intracellulari nel solvente.
5. Post-Sonorizzazione
   Centrifugazione: Dopo la sonicazione, trasferire il contenuto della piastra in provette di raccolta, se necessario. Centrifugare a 4.000-6.000 × g per 10 minuti per pellettizzare i detriti insolubili e il materiale cellulare.
   Raccolta del surnatante: Trasferire con cura il surnatante di ciascun pozzetto in nuove provette o piastre per l'analisi.
   Asciugatura opzionale: Asciugare i surnatanti con un concentratore di vuoto (ad es., SpeedVac) se è necessaria la concentrazione, quindi ricostituirli in un piccolo volume del solvente appropriato.

Sfruttate la capacità di elaborazione ad alta produttività del sonicatore per piastre multipozzetto UIP400MTP e facilitate la vostra ricerca e analisi metabolomica!

Principio della sonicazione senza contatto con UIP400MTP

L'UIP400MTP applica onde ultrasoniche ai pozzetti di una piastra da 96 pozzetti indirettamente, attraverso un mezzo di accoppiamento (ad esempio, acqua). Queste onde creano una cavitazione che distrugge le cellule e rilascia i metaboliti senza che vi sia un contatto fisico tra la sonda del sonicatore e il campione.

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