Dislocazione del biofilm con il sonicatore ad alta produttività UIP400MTP
I sonicatori ad alta produttività progettati per piastre a pozzetti multipli e a 96 pozzetti sono strumenti essenziali nella ricerca sui biofilm, in particolare per staccare e rimuovere i biofilm da pozzetti, provette, pin e piastre Petri. Questi sonicatori facilitano il trattamento di numerosi campioni contemporaneamente, migliorando l'efficienza e la coerenza. Il sonicatore ad alta produttività Hielscher UIP400MTP è ideale per sonicare piastre a più pozzetti, piastre a 96 pozzetti, diverse provette o piastre di Petri. La vibrazione e la cavitazione ultrasonica uniforme rimuovono in modo affidabile i biofilm dal fondo della piastra. Questo rende il sonicatore per piastre a più pozzetti UIP400MTP lo strumento ideale per la preparazione dei campioni per la rimozione dei biofilm, i saggi sui biofilm e la ricerca su batteri e microbi.
Sonicatore a piastra multipla UIP400MTP per il distacco e la rimozione del biofilm nella preparazione di campioni ad alta produttività:
- Biofilm batterici
- Biofilm eucariotici
- Biofilm fungini
- Biofilm arcaici
- Biofilm polimicrobici / Biofilm di specie miste
- Biofilm dentali (placca)
- Biofilm marini
- Biofilm ambientali
- Biofilm di dispositivi medici
- Sospensioni cellulari coltivate
Sonicatore ad alta produttività UIP400MTP per la rimozione del biofilm da piastre a pozzetti multipli, piastre a 96 pozzetti, provette e piastre di Petri.
Dislocazione e rimozione del biofilm mediante sonicazione
Il sonicatore ad alta produttività Hielscher UIP400MTP è stato progettato per la sonicazione affidabile e uniforme di piastre a più pozzetti e a 96 pozzetti. Essenziale nella ricerca sui biofilm, il sonicatore per piastre a più pozzetti UIP400MTP offre una tecnologia affidabile per rimuovere i biofilm da piastre a più pozzetti, provette e piastre Petri. Consentendo una preparazione dei campioni ad alta produttività, l'UIP400MTP migliora l'efficienza e la coerenza dei saggi sui biofilm e di altri studi correlati, rendendo questo sonicatore indispensabile nella ricerca microbiologica sia accademica che industriale.
Rimozione del biofilm mediante sonicazione: Per il dislocamento del biofilm, si lascia che i biofilm si formino nei pozzetti della piastra multipozzetto in condizioni controllate. La piastra viene quindi posta nel sonicatore, dove i parametri quali tempo, ampiezza e frequenza vengono impostati in base ai requisiti specifici del tipo di biofilm e agli obiettivi sperimentali. Le onde ultrasoniche generano cavitazione all'interno di ciascun pozzetto, disgregando efficacemente la matrice del biofilm e staccando le cellule.
Preparazione del campione a ultrasuoni per i biofilm: Nei saggi sul biofilm, i sonicatori ad alta produttività hanno diverse applicazioni. Dopo la sonicazione, le cellule del biofilm staccate possono essere raccolte e quantificate con vari test, come la colorazione con cristal violetto, il conteggio delle cellule vitali o la misurazione della biomassa. Inoltre, i biofilm possono essere trattati con agenti antimicrobici seguiti dalla sonicazione per valutare l'efficacia di questi agenti nel disgregare i biofilm. Le cellule di biofilm staccate sono utili anche per studi genomici e proteomici, in quanto possono essere utilizzate per l'estrazione di DNA, RNA e proteine per ulteriori analisi molecolari.
I sonicatori ad alta produttività offrono numerosi vantaggi. Consentono l'elaborazione simultanea di più campioni, risparmiando tempo e manodopera, e assicurano un trattamento uniforme di tutti i pozzetti, riducendo la variabilità e migliorando la riproducibilità dei risultati. Questi dispositivi sono adatti anche per studi su larga scala, consentendo uno screening high-throughput della formazione, dell'interruzione e del trattamento del biofilm.
(A) Piastra contenente TSB con glucosio al 2% utilizzata per la formazione di biofilm, il recupero delle cellule e la determinazione di MIC e MBCB; (B) Coperchio con spilli per la formazione di biofilm stafilococcici.
Le cellule del biofilm formatesi sui perni sono state rimosse con il sonicatore Hielscher UIP250MTP per 5 minuti in piastre da 96 pozzetti contenenti terreno di coltura fresco per il recupero delle cellule.
(Immagine e studio: ©de Oliveira et al., 2016)
Sonicatore per piastre da 96 pozzetti UIP400MTP per la sonicazione di piastre per microtitolazione e multipozzetto
Importanza della rimozione del biofilm con gli ultrasuoni nella ricerca sul biofilm
La rimozione del biofilm mediante ultrasuoni è fondamentale nella ricerca sul biofilm grazie alla sua efficacia, consistenza, efficienza e versatilità. Garantisce una disgregazione completa e uniforme dei biofilm, facilitando un'analisi accurata e riproducibile in vari test sui biofilm. Questi saggi, tra cui la colorazione con cristal violetto, il conteggio delle cellule vitali, la bioluminescenza dell'ATP, la riduzione dell'XTT, l'analisi microscopica e l'estrazione di acidi nucleici e proteine, forniscono informazioni complete sulla formazione, la vitalità, la struttura e la risposta ai trattamenti dei biofilm.
La sonicazione disloca e rimuove delicatamente il biofilm da substrati solidi come fondi di piastre, perni, pioli o coprioggetti.
- Interruzione efficace dei biofilm:
Cavitazione: Le onde ultrasoniche creano bolle di cavitazione che, collassando, generano forti forze di taglio, disgregando efficacemente la complessa struttura dei biofilm.
Dislocazione accurata: Assicura che le cellule del biofilm siano completamente rimosse dalle superfici, il che è fondamentale per una quantificazione e un'analisi accurate. - Coerenza e riproducibilità:
Trattamento uniforme: I sonicatori ad alta produttività forniscono una distribuzione uniforme dell'energia ultrasonica su tutti i campioni, riducendo la variabilità e migliorando la riproducibilità.
Standardizzazione: Consente di standardizzare i protocolli di distruzione del biofilm, ottenendo risultati più affidabili e comparabili. - Efficienza:
Capacità di alta produttività: Consente l'elaborazione simultanea di più campioni, risparmiando tempo e aumentando la produttività negli studi sul biofilm.
Automazione: Può essere facilmente integrato in flussi di lavoro automatizzati, migliorando ulteriormente l'efficienza e riducendo il lavoro manuale. - Preservazione della vitalità e dell'integrità:
Condizioni controllate: Parametri come il tempo e l'intensità possono essere regolati con precisione per disgregare i biofilm senza compromettere la vitalità o l'integrità delle cellule, il che è importante per i test successivi. - Versatilità:
Ampia applicabilità: Adatto a vari tipi di biofilm (batterici, fungini, di specie miste) e compatibile con diverse superfici e materiali utilizzati nella ricerca sui biofilm.
Il sonicatore per piastre a pozzetti multipli UIP400MTP offre numerosi vantaggi che lo rendono uno strumento indispensabile per la preparazione di campioni ad alta produttività.
Hielscher Ultrasonics offre diversi modelli di sonicatori, tra cui sonicatori a sonda, sonicatori senza contatto e sonicatori ad alta produttività. Mettetevi subito in contatto con noi! I nostri esperti tecnici saranno lieti di discutere con voi le vostre esigenze di trattamento e di consigliarvi il sonicatore più adatto per la vostra applicazione di biofilm.
Sonicatore per piastre per microtitolazione UIP400MTP viene utilizzato per rimuovere i biofilm per la ricerca
Letteratura / Riferimenti
- FactSheet UIP400MTP Multi-well Plate Sonicator – Non-Contact Sonicator – Hielscher Ultrasonics
- UIP400MTP-Multi-well-Plate-Sonicator-Infographic
- De Oliveira A, Cataneli Pereira V, Pinheiro L, Moraes Riboli DF, Benini Martins K, Ribeiro de Souza da Cunha MDL (2016): Antimicrobial Resistance Profile of Planktonic and Biofilm Cells of Staphylococcus aureus and Coagulase-Negative Staphylococci. International Journal of Molecular Sciences 17(9):1423; 2016.
- Martins KB, Ferreira AM, Pereira VC, Pinheiro L, Oliveira A, Cunha MLRS (2019): In vitro Effects of Antimicrobial Agents on Planktonic and Biofilm Forms of Staphylococcus saprophyticus Isolated From Patients With Urinary Tract Infections. Frontiers in Microbiology 2019.
Domande frequenti sulla ricerca sul biofilm
Qual è l'impalcatura più comune per i biofilm?
L'impalcatura più comune per i biofilm nella ricerca di laboratorio è la piastra per microtitolazione. Le piastre per microtitolazione, in particolare il formato a 96 pozzetti, sono ampiamente utilizzate per la loro versatilità, facilità d'uso e compatibilità con varie tecniche analitiche.
Qual è la migliore piastra a 96 pozzetti per biofilm?
La migliore piastra a 96 pozzetti per gli studi sul biofilm dipende da diversi fattori, tra cui il tipo di biofilm da studiare, l'impostazione sperimentale e i requisiti specifici della ricerca. Tuttavia, alcune piastre a 96 pozzetti comunemente consigliate per gli studi sul biofilm sono:
- Piastra trasparente a fondo piatto Corning® Costar® 3596 a 96 pozzetti: Questa piastra è spesso utilizzata per la sua elevata chiarezza ottica, che è vantaggiosa per l'imaging e le analisi spettrofotometriche.
- Piastre a 96 pozzetti Nunc™ MicroWell™: Queste piastre sono note per le dimensioni uniformi dei pozzetti e l'elevata chiarezza ottica. Sono disponibili in vari trattamenti superficiali per supportare diversi tipi di coltura cellulare.
- Micropiastra Greiner Bio-One CELLSTAR® a 96 pozzetti: Questa piastra è spesso utilizzata per gli studi sul biofilm grazie alla sua qualità costante da pozzetto a pozzetto e alla disponibilità di diversi rivestimenti superficiali, come le superfici trattate con colture tissutali o a basso legame.
- Piastre a 96 pozzetti con fondo nero/chiaro: Per gli studi che richiedono misure di fluorescenza o luminescenza, le piastre nere con fondo trasparente (ad esempio, Corning® 3603) sono ideali perché riducono al minimo il cross-talk tra i pozzetti e migliorano la rilevazione del segnale.
- Piastre con rivestimento idrofobico o idrofilo: A seconda della natura del biofilm e del microrganismo, possono essere utili piastre con rivestimenti specifici che promuovono o inibiscono l'adesione. Ad esempio, le piastre idrofobiche possono essere adatte ai biofilm formati da alcuni batteri.
- Piastre specifiche per il biofilm: Alcuni produttori offrono piastre specifiche per la ricerca sul biofilm. Queste piastre hanno spesso proprietà superficiali migliorate che favoriscono la formazione del biofilm e sono ottimizzate per i saggi sul biofilm.
Quando si sceglie una piastra a 96 pozzetti per gli studi sul biofilm, si devono considerare i seguenti criteri:
- Materiale e trattamento superficiale: Scegliere un materiale per le piastre e un trattamento della superficie che favorisca l'adesione e la crescita dei microrganismi che formano il biofilm da studiare.
Chiarezza ottica: Per i test che prevedono misurazioni ottiche, assicurarsi che la piastra abbia un'elevata trasparenza ottica. - Progettazione del pozzo: Considerare la forma e la profondità dei pozzetti, che possono influenzare la crescita del biofilm e l'efficacia dei trattamenti o delle misurazioni successive.
- Compatibilità con le apparecchiature: Assicurarsi che la piastra sia compatibile con il sonicatore, l'incubatore e qualsiasi altra apparecchiatura utilizzata nello studio. Il sonicatore per piastre multipozzetto Hielscher è compatibile con tutte le piastre standard per microtitolazione e multipozzetto.
In definitiva, la scelta migliore dipenderà dai requisiti specifici della ricerca sul biofilm e dalle caratteristiche dei microrganismi coinvolti.
Quali sono i tipici test sul biofilm utilizzati nella ricerca?
Nella ricerca e nella diagnostica, vengono utilizzati vari tipi di test per studiare e classificare i biofilm. La sonicazione è una fase comune di preparazione del campione per rimuovere il biofilm dal suo substrato solido, rendendolo disponibile per i saggi e le analisi.
- Colorazione con cristalvioletto:
Scopo: Quantifica la biomassa totale del biofilm.
Metodo: I biofilm vengono colorati con il colorante crystal violet, che viene poi solubilizzato e misurato spettrofotometricamente.
Applicazione: Utilizzato per valutare la formazione di biofilm e gli effetti degli agenti antimicrobici. - Conteggio delle cellule vitali (test CFU):
Scopo: determina il numero di cellule vitali del biofilm.
Metodo: Le cellule del biofilm staccate vengono diluite in serie e piastrate su agar per contare le unità formanti colonie (CFU).
Applicazione: Valuta la vitalità delle cellule del biofilm e l'efficacia antimicrobica. - Bioluminescenza dell'ATP:
Scopo: misura l'attività metabolica delle cellule del biofilm.
Metodo: I livelli di ATP sono quantificati con un test bioluminescente.
Applicazione: Indica la vitalità del biofilm e lo stato metabolico. - Saggio di riduzione XTT:
Scopo: valutare l'attività metabolica cellulare.
Metodo: Il reagente XTT viene ridotto dalle cellule metabolicamente attive per formare un prodotto formazan colorato, che viene quantificato spettrofotometricamente.
Applicazione: Utilizzato per valutare la vitalità delle cellule del biofilm e l'effetto dei trattamenti. - Analisi microscopica:
Scopo: visualizzare la struttura e la composizione del biofilm.
Metodo: Le tecniche comprendono la microscopia ottica, la microscopia confocale a scansione laser (CLSM) e la microscopia elettronica a scansione (SEM).
Applicazione: Fornisce informazioni dettagliate sull'architettura del biofilm, sulla distribuzione e sugli effetti dei trattamenti. - Estrazione di DNA, RNA e proteine:
Scopo: analizzare i profili genetici e proteomici delle cellule del biofilm.
Metodo: Le cellule del biofilm vengono lisate per estrarre acidi nucleici e proteine da analizzare a valle (ad esempio, PCR, qPCR, sequenziamento, proteomica).
Applicazione: Studia l'espressione genica, la diversità genetica e l'espressione proteica nei biofilm. - Saggi di inibizione ed eradicazione del biofilm:
Scopo: vagliare i composti per la loro capacità di prevenire la formazione di biofilm o di eradicare i biofilm già esistenti.
Metodo: I biofilm vengono trattati con potenziali agenti anti-biofilm e la loro disgregazione viene valutata utilizzando i saggi sopra menzionati.
Applicazione: Scoperta di farmaci e sviluppo di terapie anti-biofilm.
Hielscher Ultrasonics produce omogeneizzatori a ultrasuoni ad alte prestazioni da laboratorio a dimensioni industriali.
