મંકીપોક્સ વાયરસમાં અલ્ટ્રાસોનિક એપ્લિકેશન્સ

અલ્ટ્રાસોનિકેશન એ વિશ્લેષણાત્મક નમૂનાઓમાંથી મંકીપોક્સ વાયરસ (MPXV) ને અલગ કરવા માટે, વાયરસ ડીએનએ ફ્રેગમેન્ટેશન તેમજ મંકીપોક્સ રસીના ઉત્પાદનમાં એક મહત્વપૂર્ણ પ્રક્રિયા પદ્ધતિ છે. ડાયગ્નોસ્ટિક્સ અને પૃથ્થકરણ પહેલા નમૂનાની તૈયારી માટે (PCR, ELISA વગેરે) અલ્ટ્રાસોનિકેશનનો ઉપયોગ કોશિકાઓના આંતરિક ભાગમાંથી મંકીપોક્સ વાયરસને મુક્ત કરવા અને/અથવા ડીએનએના ટુકડા કરવા માટે કોષોને લીઝ કરવા માટે થાય છે. રસીના ઉત્પાદનમાં, વાયરસના કણ/ડીએનએ તૈયારી, ડ્રગ કેરિયર્સમાં એન્કેપ્સ્યુલેશન અને ઇનોક્યુલાની રચનાથી એપ્લિકેશનનો સમાવેશ થાય છે.
નીચે તમે અલ્ટ્રાસોનિક મંકીપોક્સ વાયરસના નમૂનાની તૈયારી તેમજ અલ્ટ્રાસોનિકલી આસિસ્ટેડ MPXV રસીના ઉત્પાદન વિશે વિગતવાર માહિતી મેળવી શકો છો.

તમને આ પૃષ્ઠ પર શું મળશે:

• મંકીપોક્સ વાયરસ નિષ્કર્ષણ માટે અલ્ટ્રાસોનિક લિસિસ
• મંકીપોક્સ વાયરસ ડીએનએનું અલ્ટ્રાસોનિક ફ્રેગમેન્ટેશન
• MPXV રસી ઉત્પાદનમાં અલ્ટ્રાસોનિક એપ્લિકેશન્સ

પોલિમરેઝ ચેઇન રિએક્શન (PCR) પહેલા અલ્ટ્રાસોનિક લિસિસ અને ડીએનએ ફ્રેગમેન્ટેશન

વાઈરલ ડીએનએના અનન્ય ક્રમની શોધ માટે, રીઅલ-ટાઇમ અથવા પરંપરાગત પોલિમરેઝ ચેઇન રિએક્શન (PCR) નો ઉપયોગ કરીને ન્યુક્લીક એસિડ એમ્પ્લીફિકેશન ટેસ્ટિંગ (NAAT) દ્વારા મંકીપોક્સ વાયરસનો ચેપ શોધી કાઢવામાં આવે છે. નમૂના (દા.ત. નેસોફેરિંજલ સ્વેપ અથવા ત્વચા બાયોપ્સીમાંથી) કોષોમાં વાયરસ ધરાવે છે.
પૃથ્થકરણ માટે, વાયરસ કોષોમાંથી મુક્ત થવો જોઈએ અને પીસીઆર માટે વાયરલ ડીએનએ ખંડિત હોવા જોઈએ.

અલ્ટ્રાસોનિક લિસિસ:

અલ્ટ્રાસોનિક કોષ વિક્ષેપ/લિસિસ એ કોષના નમૂનાઓમાંથી વાયરસને અલગ કરવા માટે વિશ્વસનીય અને કાર્યક્ષમ પદ્ધતિ છે અને તે રીતે રાસાયણિક એજન્ટો, જેમ કે લાઇસોઝાઇમ, પ્રોટીનેઝ કે અને વિવિધ ડિટર્જન્ટ્સ પર પ્રાધાન્યક્ષમ ટેકનિક છે જેનો વૈકલ્પિક રીતે સેલ લિસિસ અને ડીએનએને મુક્ત કરવા માટે ઉપયોગ થાય છે.
જો કે આવા રાસાયણિક રીએજન્ટના ઉપયોગ માટે પીસીઆર પ્રતિક્રિયાના નિષેધને રોકવા માટે પીસીઆર પૃથ્થકરણ પહેલા કેટલાક પગલાઓમાં સમય માંગી લે તેવા નમૂનાની તૈયારી જરૂરી છે. કારણ કે પીસીઆર અવરોધકો એમ્પ્લીફિકેશનની કાર્યક્ષમતાને અસર કરે છે, અવરોધકોના જથ્થાના નાના ફેરફારો કે જે દૂર કરવામાં આવ્યાં નથી તે પીસીઆર ઉત્પાદન એમ્પ્લીફિકેશનમાં મોટા ફેરફારો તરફ દોરી શકે છે (ડાયકો, 1995).
લિસિસ માટે અલ્ટ્રાસોનિકેશનનો ફાયદો એ છે કે સેલ્યુલર સ્ટ્રક્ચર્સનું સંપૂર્ણ વિક્ષેપ અને લાઇસિંગ રીએજન્ટ્સની જરૂરિયાત વિના ડીએનએનું પ્રકાશન અને સમય લેતી નમૂનાની તૈયારી ઇચ્છનીય છે. (cf. Fykse et al., 2003)

અલ્ટ્રાસોનિક ડીએનએ ફ્રેગમેન્ટેશન:

અલ્ટ્રાસોનિક ડીએનએ ફ્રેગમેન્ટેશન સરળ અને વિશ્વસનીય છે કારણ કે તે લંબાઈમાં ટ્યુનેબલ ડીએનએ ટુકડાઓ ઉત્પન્ન કરે છે (બેઝપેયર, બીપી). અલ્ટ્રાસાઉન્ડનો ઉપયોગ કરીને, DNA ને લક્ષિત DNA લંબાઈમાં અસરકારક રીતે વિભાજિત કરી શકાય છે. અલ્ટ્રાસોનિક પરિમાણો અને અત્યાધુનિક ઠંડક વિકલ્પો પર ચોક્કસ નિયંત્રણ ડીએનએના અધોગતિને અટકાવે છે.
અલ્ટ્રાસોનિક ડીએનએ ફ્રેગમેન્ટેશન વિશે વધુ વાંચો!

મંકીપોક્સ વાયરસ રસીમાં અલ્ટ્રાસોનિક એપ્લિકેશન્સ

મંકીપોક્સ વાયરસ સામે વપરાતી રસીઓ હાલમાં જીવંત વાયરસ રસીઓ છે. નવી વિકસિત રસીઓ અન્ય પ્લેટફોર્મનો ઉપયોગ કરી શકે છે જેમ કે ડીએનએ-આધારિત ધી હાલમાં સંશોધિત વેક્સિનિયા અંકારા વાઈરસ ધરાવે છે, જે એટેન્યુએટેડ, બિન-પ્રતિકૃતિ ઓર્થોપોક્સ વાયરસ છે. તેમાં ટ્રિસ (ટ્રિસ-એમિનોમેથેન) અને સોડિયમ ક્લોરાઇડ પણ હોય છે. રસીમાં ચિકન એમ્બ્રીયો ફાઈબ્રોબ્લાસ્ટ કોષોમાંથી ડીએનએ અને પ્રોટીનની થોડી માત્રા પણ હોઈ શકે છે, જેનો ઉપયોગ રસીના વાયરસ, બેન્ઝોનેઝ અને એન્ટિબાયોટિક સંયોજનો જેમ કે જેન્ટામિસિન અને સિપ્રોફ્લોક્સાસીનને વિકસાવવા માટે થાય છે.

અલ્ટ્રાસોનિક હોમોજેનાઇઝેશનનો ઉપયોગ લાઇવ-એટેન્યુએટેડ વાયરસ રસીઓ, ડીએનએ રસીઓ, મલ્ટી-વેલેન્ટ ડીએનએ કોકટેલ્સ, એમઆરએનએ રસીઓ, રિકોમ્બિનન્ટ પ્રોટીન રસીઓ, વાયરસ જેવી કણોની રસીઓ વગેરેના ઉત્પાદનમાં થાય છે.

તમે સુધારેલ રસીના ઉત્પાદન માટે અલ્ટ્રાસોનિક એપ્લિકેશન્સ વિશે વધુ ઊંડાણપૂર્વકની માહિતી મેળવી શકો છો!

મંકીપોક્સ વાયરસના અલ્ટ્રાસોનિક આઇસોલેશન માટે પ્રોટોકોલ

સ્ટિટેલાર (2005) ની સંશોધન ટીમે વૃદ્ધિ હોસ્ટ સેલ કલ્ચરમાંથી તેમજ ચેપગ્રસ્ત પ્રાઈમેટ્સના ગળાના સ્વેપ દ્વારા મેળવેલા કોષોમાંથી મંકીપોક્સ વાયરસને મુક્ત કરવા અલ્ટ્રાસોનિક લિસિસનો ઉપયોગ કર્યો હતો.

મંકીપોક્સ રસીની તૈયારી:

મંકીપોક્સ વાયરસ ચોક્કસ-પેથોજેન-મુક્ત ચિકન એમ્બ્રીયો ફાઈબ્રોબ્લાસ્ટ કોષો પર ઉગાડવામાં આવ્યા હતા. 1 થી 2 દિવસ સુધી ઇન્ક્યુબેશન પછી, વાયરસ-સેલ સસ્પેન્શનને ફ્રીઝ-પીગળવાના એક રાઉન્ડ દ્વારા લણવામાં આવ્યું હતું અને પછી સેન્ટ્રીફ્યુગેશન દ્વારા કેન્દ્રિત કરવામાં આવ્યું હતું. પેલેટ ફરીથી સસ્પેન્ડ કરવામાં આવી હતી અને અલ્ટ્રાસોનિક હોમોજનાઇઝેશનના ઘણા રાઉન્ડને આધિન હતી.

મંકીપોક્સ વાઇરસને રસીકરણ કરાયેલ મકાકમાંથી અલગ પાડવું:

નમૂનાઓ ત્રણ વખત ફ્રીઝ-પીગળવામાં આવ્યા હતા અને અલ્ટ્રાસોનિક કપહોર્નમાં સોનિક કરવામાં આવ્યા હતા. 1% ફેટલ બોવાઇન સીરમ સાથે પૂરક પરિવહન માધ્યમમાં બે મંદન (1:10 અને 1:100)નો ઉપયોગ છ-વેલ પ્લેટમાં વેરો સેલ મોનોલેયરને ઇનોક્યુલેટ કરવા માટે કરવામાં આવ્યો હતો. 37 ડિગ્રી સેલ્સિયસ પર 1 કલાકના ઇન્ક્યુબેશન પછી, ઇનોક્યુલાને દૂર કરવામાં આવ્યા હતા અને 1% ગર્ભ બોવાઇન સીરમ સાથે પૂરક કલ્ચર માધ્યમ સાથે બદલવામાં આવ્યા હતા. મોનોલેયર્સ 37 ડિગ્રી સેલ્સિયસ પર 5 દિવસ માટે સંવર્ધિત કરવામાં આવ્યા હતા અને ક્રિસ્ટલ વાયોલેટ સોલ્યુશનથી ડાઘવાળા હતા.
(cf. Stittelar et al., 2005)

વાયરસ વિશ્લેષણ અને રસી ઉત્પાદન માટે અલ્ટ્રાસોનિકેટર્સ

Hielscher Ultrasonics વ્યાપક ઉત્પાદન પોર્ટફોલિયો સંશોધન અને વિશ્લેષણાત્મક પ્રયોગશાળાઓ તેમજ ઔદ્યોગિક રસી ઉત્પાદન માટે આદર્શ અલ્ટ્રાસોનિકેટર ઓફર કરે છે.
Hielscher Ultrasonics સંશોધન અને વિશ્લેષણાત્મક પ્રયોગશાળાઓમાં ઉપયોગ માટે તેમજ ઔદ્યોગિક રસીના ઉત્પાદનમાં અમલીકરણ માટે ઉચ્ચ-પ્રદર્શન અલ્ટ્રાસોનિકેટર્સ અને સોનો-બાયોરેક્ટર્સની ડિઝાઇન, ઉત્પાદન અને વિતરણમાં વિશિષ્ટ છે (દા.ત. રસીઓ, API).
Sonication ખુલ્લા જહાજો, બંધ સતત હલાવવામાં આવતા રિએક્ટર અને સતત ફ્લો થ્રુ રિએક્ટર પર લાગુ કરી શકાય છે. અલ્ટ્રાસોનિક સિસ્ટમ્સના તમામ ભાગો, જે પ્રવાહી માધ્યમ સાથે સંપર્કમાં આવે છે, તે સ્ટેનલેસ સ્ટીલ, ટાઇટેનિયમ અથવા કાચમાંથી બનાવવામાં આવે છે. ઑટોક્લેવેબલ પાર્ટ્સ અને સેનિટરી ફિટિંગ હેઠળ ઉત્પાદનની ખાતરી કરે છે ફાર્મા-ગ્રેડ શરતો.
સ્વચાલિત ડેટા રેકોર્ડિંગ: ઇન્ટેલિજન્ટ સોફ્ટવેર સોનિકેશન પ્રક્રિયાના પરિમાણોને સંકલિત SD મેમરી કાર્ડ પર આપમેળે રેકોર્ડ કરે છે. પ્રક્રિયાના તમામ પરિમાણોનું ચોક્કસ નિયંત્રણ સુનિશ્ચિત કરે છે પ્રજનનક્ષમતા, ઉત્પાદનનું માનકીકરણ, અને ફાર્માસ્યુટિકલ ઉત્પાદન સલામતી ધોરણોની પરિપૂર્ણતાની સુવિધા આપે છે.
Hielscher Ultrasonics’ અલ્ટ્રાસોનિક પ્રોસેસર્સ અત્યંત વિશ્વસનીય છે અને તેને ચોક્કસ રીતે નિયંત્રિત કરી શકાય છે. બધા ઔદ્યોગિક અલ્ટ્રાસોનિકેટર્સ સંપૂર્ણ શ્રેણીને નીચલાથી ખૂબ ઊંચા કંપનવિસ્તાર સુધી પહોંચાડવા માટે એડજસ્ટ કરી શકે છે. Hielscher ની અલ્ટ્રાસોનિક સિસ્ટમ્સની મજબૂતાઈ ભારે ફરજ હેઠળ અને માંગવાળા વાતાવરણમાં 24/7 કામગીરી માટે પરવાનગી આપે છે.

નીચે આપેલ કોષ્ટક તમને અમારા અલ્ટ્રાસોનિકેટર્સની અંદાજિત પ્રોસેસિંગ ક્ષમતાનો સંકેત આપે છે: