Υπερήχων ομογενοποιητές ιστών
- Υπερήχους είναι ένα ασφαλές & αποτελεσματική μέθοδος ομογενοποίησης ιστών.
- Οι εφαρμογές υπερήχων περιλαμβάνουν τον ιστό προετοιμασίας και τα εναιωρήματα, την εκχύλιση πρωτεϊνών, DNA / RNA και δραστικών ενώσεων, καθώς και την ενεργοποίηση / αδρανοποίηση ενζύμων και ζυμών.
- Η ακριβής δυνατότητα ελέγχου των ομογενοποιητών υπερήχων τύπου καθετήρα επιτρέπει την αξιόπιστη προετοιμασία δειγμάτων ιστών.
Ομογενοποίηση ιστών με χρήση ανιχνευτών υπερήχων
Η ομογενοποίηση ιστών είναι μια διαδικασία προετοιμασίας δείγματος όπου παρασκευάζονται ζωικά και φυτικά κύτταρα ή μικροοργανισμοί πριν από την εκχύλιση ενδοκυτταρικής ύλης όπως πρωτεΐνες, DNA ή RNA. Το κυτταρικό μεμβράνιο πρέπει να υποστεί ρήξη για να απελευθερωθεί το περιεχόμενο του κυττάρου. Μετά το σπάσιμο του κυτταρικού τοιχώματος, τα ενδοκυτταρικά μακρομόρια επιπλέουν στο ρυθμιστικό διάλυμα έτσι ώστε οργανίδια, πρωτεΐνες και DNA / RNA να είναι διαθέσιμα. Οι ομογενοποιητές ιστών υπερήχων και οι διαταράκτες κυττάρων είναι πολύ αποτελεσματικά εργαλεία για κυτταρική διαταραχή, λύση και εκχύλιση.
Υπερήχων τύπου καθετήρα (π.χ., το ισχυρό UP200St 200 watt) είναι αξιόπιστοι ομογενοποιητές ιστών και χρησιμοποιούνται ευρέως για την προετοιμασία δειγμάτων.
Υπερήχων ομογενοποιητές ιστών vs εναλλακτικές τεχνικές λύσης
Μπορείτε να αναρωτηθείτε ποια τεχνική κυτταρικής διαταραχής και ποιος εξοπλισμός ομογενοποίησης ιστών είναι η καλύτερη επιλογή για το εργαστήριό σας. Παρακάτω, μπορείτε να βρείτε μερικά επιχειρήματα που μιλούν για υπερηχητική λύση και ομογενοποίηση ιστών, δεδομένου ότι υπερήχους έχει πολλά πλεονεκτήματα έναντι των εναλλακτικών μεθόδων ομογενοποίησης:
- Αποδοτικότητα: Υπερήχων ομογενοποίηση είναι μια γρήγορη και αποτελεσματική μέθοδος για τη διατάραξη των ιστών και των κυττάρων. Οι ομογενοποιητές ιστών υπερήχων χρησιμοποιούν την αρχή λειτουργίας της ακουστικής σπηλαίωσης. Αυτή η μέθοδος είναι εξαιρετικά αποτελεσματική και μπορεί να διαταράξει τα κύτταρα μέσα σε λίγα δευτερόλεπτα. Δεδομένου ότι το επίπεδο έντασης μπορεί να ρυθμιστεί από ήπια σε έντονη, υπερήχηση είναι ιδιαίτερα αποτελεσματική για σκληρούς ή ινώδεις ιστούς που είναι δύσκολο να ομογενοποιηθούν χρησιμοποιώντας άλλες μεθόδους.
- Αποφύγετε τη διασταυρούμενη μόλυνση: Hielscher προσφέρει ισχυρούς ομογενοποιητές ιστών υπερήχων που προετοιμάζουν το δείγμα σε μια έμμεση θεραπεία υπερήχων. Με το UIP400MTP (ιδανικό για μικροτιτλοδότηση και πλάκες πολλαπλών φρεατίων), καθώς και το VialTweeter και το CupHorn (Ιδανικό για φιαλίδια, σωλήνες και ποτήρια) Hielscher προσφέρει υπερήχων εξοπλισμό διαταραχής κυττάρων για ομογενοποίηση χωρίς επαφή, η οποία μειώνει τον κίνδυνο διασταυρούμενης μόλυνσης μεταξύ δειγμάτων. Ελαχιστοποιεί επίσης τον κίνδυνο εισαγωγής ρύπων από επιφάνειες λείανσης ή άλλο εξοπλισμό ομογενοποίησης.
- Ευκαμψία: Η ομογενοποίηση υπερήχων μπορεί να χρησιμοποιηθεί με μια ποικιλία μεγεθών και όγκων δειγμάτων, από μικρούς όγκους έως μεγάλα δείγματα ιστών. Επιπλέον, η ομογενοποίηση με υπερήχους είναι επίσης κατάλληλη για ένα ευρύ φάσμα τύπων δειγμάτων, συμπεριλαμβανομένων φυτικών ιστών, ζωικών ιστών και μικροβιακών καλλιεργειών. Η ένταση και η διάρκεια της υπερήχων μπορεί να ρυθμιστεί για να βελτιστοποιηθεί το επίπεδο διαταραχής για διαφορετικούς τύπους ιστών.
- Αναπαραγωγιμότητα: Υπερήχων ομογενοποίηση παρέχει συνεπή αποτελέσματα και επιτρέπει τον ακριβή έλεγχο των παραμέτρων ομογενοποίησης, όπως η ισχύς εξόδου και ο χρόνος υπερήχων. Αυτό βοηθά στη διασφάλιση της αναπαραγωγιμότητας και της ακρίβειας των πειραματικών δεδομένων.
- Διατήρηση βιομορίων: Καθετήρας-τύπου υπερήχους είναι μια μη θερμική θεραπεία. Αυτό σημαίνει ότι ο αντίκτυπός του δεν βασίζεται στη θερμότητα. Ωστόσο, κάθε μηχανική επεξεργασία παράγει θερμότητα σύμφωνα με τον δεύτερο νόμο της θερμοδυναμικής. Αυτό σημαίνει ότι το δείγμα γίνεται θερμότερο σε μεγαλύτερους χρόνους υπερήχων. Hielscher state-of-the-art υπερήχων είναι εξοπλισμένα με αισθητήρες θερμοκρασίας και έξυπνο λογισμικό παρακολούθησης θερμοκρασίας. Οι εξελιγμένες επιλογές ψύξης επιτρέπουν την πρόληψη της υποβάθμισης της θερμότητας και βοηθούν στη διατήρηση της δραστηριότητας των ευαίσθητων στη θερμότητα βιομορίων, όπως τα ένζυμα και οι πρωτεΐνες.
- Εξοικονόμηση χρόνου: Η υψηλή αποτελεσματικότητα της υπερήχων τύπου καθετήρα επιτρέπει την ταχεία ομογενοποίηση των ιστών, η οποία εξοικονομεί χρόνο σε σύγκριση με άλλες μεθόδους που απαιτούν πιο εκτεταμένο φυσικό χειρισμό του ιστού.
Η ομογενοποίηση των ιστών υπερήχων προσφέρει πολλά πλεονεκτήματα έναντι των εναλλακτικών μεθόδων ομογενοποίησης. Αυτός είναι ο λόγος για τον οποίο οι ομογενοποιητές ιστών υπερήχων είναι η προτιμώμενη τεχνική διαταραχής κυττάρων σε διάφορες ερευνητικές και βιομηχανικές εφαρμογές.
Παράδειγμα για ένα πρωτόκολλο ομογενοποίησης ιστών χρησιμοποιώντας έναν υπερηχητικό ανιχνευτή:
Οι υπερήχων διευκολύνουν την ομογενοποίηση των ιστών με απλή λειτουργία και μια γρήγορη διαδικασία ομογενοποίησης. Ταυτόχρονα, οι παράμετροι της διαδικασίας υπερήχων μπορούν να ελέγχονται αμοιβαία και να παρακολουθούνται έτσι ώστε τα αποτελέσματα να είναι αξιόπιστα και αναπαραγώγιμα.
Υλικά:
- Δείγμα ιστού (π.χ. ήπαρ, εγκέφαλος, μυς)
- Ρυθμιστικό διάλυμα (π.χ. PBS, Tris-HCl)
- κοκτέιλ αναστολέα πρωτεάσης
- Υπερηχητικός ομογενοποιητής (τύπος καθετήρα)
- Πάγος
- Σωλήνες μικροφυγοκέντρησης
- Σιφώνια
Πρωτόκολλο για ομογενοποίηση ιστών υπερήχων:
Σημείωση: Η διάρκεια και η ένταση της υπερήχων μπορεί να χρειαστεί να βελτιστοποιηθεί ανάλογα με τον τύπο ιστού, την ηλικία και την κατάσταση υγείας, καθώς και τις συγκεκριμένες κατάντη εφαρμογές. Είναι επίσης σημαντικό να επιλέξετε προσεκτικά το ρυθμιστικό διάλυμα, τους αναστολείς πρωτεάσης και άλλα πρόσθετα για να βελτιστοποιήσετε την απόδοση και την ποιότητα του ομογενοποιημένου.
Υπερήχων ομογενοποιητής ιστών UP200Ht με κέρατο / ανιχνευτή 2mm για κυτταρική διαταραχή, λύση, ομογενοποίηση και διαλυτοποίηση κυττάρων καθώς και εκχύλιση πρωτεϊνών.
Σημαντικά πλεονεκτήματα των ομογενοποιητών ιστών υπερήχων Hielscher
- ταχεία και αποτελεσματική λείανση, ομογενοποίηση, λύση & κυτταρική διαταραχή ή εκχύλιση με ισχυρή υπερηχητική σπηλαίωση
- εύκολη και διαισθητική χρήση και λειτουργία (επιλέξτε την αναλογική ή ψηφιακή έκδοση)
- εύκολος καθαρισμός των επιφανειών επαφής με το προϊόν με έκπλυση του sonotrode υπό υπερήχους (CIP clean-in-place / SIP sterilize-in-place)
- κουτί προστασίας ήχου (το κουτί προστασίας ήχου για τις εργαστηριακές συσκευές είναι εξ ολοκλήρου κατασκευασμένο από ακρυλικό γυαλί για πλήρη ορατότητα από οποιαδήποτε γωνία)
- Πλήρης έλεγχος των παραμέτρων της διαδικασίας μέσω ψηφιακής οθόνης αφής στη συσκευή (ψηφιακοί υπερήχων) ή powermeter (για αναλογικές συσκευές)
- Ενσωματωμένος έλεγχος θερμοκρασίας (σημαντικός για θερμοευαίσθητα, ασταθή δείγματα ιστών)
- Οι παύσεις στην εκτέλεση ομογενοποίησης μπορούν να οριστούν μεμονωμένα και να προρυθμιστούν στο ψηφιακό μενού
- όλες οι ψηφιακές συσκευές είναι εξοπλισμένες με αυτόματη καταγραφή δεδομένων (σε ενσωματωμένη κάρτα SD/USB-ComboCard), αισθητήρα θερμοκρασίας με δυνατότητα σύνδεσης και τηλεχειριστήριο προγράμματος περιήγησης.
- επεξεργασία πολλαπλών δειγμάτων με το VialTweeter, Cuphorn είτε με τη χρήση sonotrodes 4 ή 8 δακτύλων (π.χ. για ενσωμάτωση σε εργαστηριακές διαδικασίες ρομπότ)
- για εφαρμογές μικρής και μεγάλης κλίμακας
Προετοιμασία δείγματος με το υπερηχητικός καθετήρας UP100H.
Ο παρακάτω πίνακας σας δίνει μια ένδειξη της κατά προσέγγιση ικανότητας επεξεργασίας των ομογενοποιητών ιστών υπερήχων μας για κυτταρική αποσύνθεση, λύση και εκχύλιση:
| Όγκος παρτίδας | Ροή | Προτεινόμενες συσκευές |
|---|---|---|
| πλάκες πολλαπλών φρεατίων | Δ / υ | UIP400MTP |
| φιαλίδια, μικρό ποτήρι ζέσεως | Δ / υ | Υπερήχων CupHorn |
| έως 10 φιαλίδια | Δ / υ | VialTweeter |
| 1 έως 500mL | 10 έως 200mL/min | UP100Η |
| 10 έως 2000mL | 20 έως 400mL / λεπτό | UP200Ht, UP400St |
| 0.1 έως 20L | 0.2 έως 4L/min | UIP2000hdT |
Επικοινωνήστε μαζί μας! / Ρωτήστε μας!
Υπερήχων CupHorn για την έντονη υπερήχηση κλειστών σωλήνων και φιαλιδίων για στείρα ομογενοποίηση δειγμάτων.
Βρείτε τον βέλτιστο ομογενοποιητή ιστών υπερήχων για την εφαρμογή σας
Hielscher ομογενοποιητές ιστών υπερήχων είναι διαθέσιμα με ένα εύρος εξόδου υπερήχων μεταξύ 50W έως 16,000W (16kW).
Οι εργαζόμενοι στο εργαστήριο είναι ευχαριστημένοι από την απλή και διαισθητική λειτουργία των ομογενοποιητών εργαστηρίου υπερήχων Hielscher. Ανάλογα με τις συγκεκριμένες απαιτήσεις, οι συσκευές Hielscher διαθέτουν ψηφιακό ή αναλογικό έλεγχο.
- Το VialTweeter είναι ένας ισχυρός ομογενοποιητής υπερήχων που επιτρέπει την ταυτόχρονη υπερήχηση έως και 10 φιαλίδια ή δοκιμαστικούς σωλήνες στην ίδια ένταση. Λόγω της έμμεσης υπερήχων, αποφεύγεται εντελώς η διασταυρούμενη μόλυνση και η απώλεια δείγματος. Ο καθαρισμός και η απολύμανση μειώνονται στο ελάχιστο λόγω της χρήσης φιαλιδίων μιας χρήσης. Το μπλοκ sonotrode είναι αυτόκλειστο.
- Το UIP400MTP Plate-Sonicator Είναι ιδανικό όταν εργάζεστε με πλάκες μικροτιτλοδότησης και πολλαπλών φρεατίων, όπως πλάκες 96 φρεατίων. Απλά τοποθετήστε το πιάτο πολλαπλών φρεατίων ή το τρυβλίο Petri στο UIP400MTP και όλα τα δείγματα υποβάλλονται ομοιόμορφα σε υπερήχους. Με το UIP400MTP Plate-Sonicator, η επεξεργασία δειγμάτων υψηλής απόδοσης γίνεται απλή και αποτελεσματική!
- Στην περιοχή των υπερήχων εργαστηρίου τύπου καθετήρα, οι ομογενοποιητές μπορούν να επιλεγούν με 50 watt, 100 watt, 200 watt και 400 watt.
UP50H (50W)
UP100H (100W)
UP200Ht / UP200St (200W)
UP400St (400W)
Εφαρμογή και χρήση ομογενοποιητών ιστών υπερήχων
Οι ομογενοποιητές υπερήχων χρησιμοποιούνται συνήθως για λείανση ιστών, διαταραχή κυττάρων & Λύση και ομογενοποίηση βιολογικών δειγμάτων πριν από την εκχύλιση ενδοκυτταρικής ύλης στο μοριακό εύρος. Με την ελεγχόμενη υπερήχηση των δειγμάτων, όλα τα στάδια από τη λύση έως την εκχύλιση και την ομογενοποίηση μπορούν να πραγματοποιηθούν χρησιμοποιώντας τον ίδιο υπερηχητικό κυτταρικό διαταράκτη.
Το μεγάλο πλεονέκτημα των ομογενοποιητών υπερήχων έγκειται στην εύκολα ρυθμιζόμενη είσοδο ισχύος και ένταση υπερήχων. Hielscher υπερήχων διαταράκτες κυττάρων (lysers) επιτρέπουν τον έλεγχο της έντασης υπερήχων ρυθμίζοντας το πλάτος από 20% έως 100%.
Εναλλακτικά στη συνεχή λειτουργία, ο ομογενοποιητής υπερήχων μπορεί να ρυθμιστεί σε λειτουργία κύκλου, π.χ. για την υπερήχηση του ευαίσθητου στη θερμότητα ιστού. Υπερήχηση σε λειτουργία παλμού σημαίνει ότι ο υπερήχων παράγει υψηλά έντονα υπερηχητικά κύματα σε περιοδικούς κύκλους. Η διάρκεια της περιόδου υπερήχων και ο χρόνος ανάπαυσης μπορούν να οριστούν ξεχωριστά από τον χρήστη.
σε παλμική υπερήχηση, κατά τη διάρκεια της περιόδου ανάπαυσης, το υλικό με υπερήχους μπορεί να επιστρέψει στην κατάσταση ηρεμίας του και το δείγμα μπορεί να κρυώσει (χρησιμοποιώντας τον χρόνο ανάπαυσης για απαγωγή θερμότητας). Με αυτόν τον τρόπο, η ένταση επεξεργασίας μπορεί να ρυθμιστεί με ακρίβεια σύμφωνα με τον ιστό και μειώνεται η ανεπιθύμητη θέρμανση του δείγματος.
Οι ομογενοποιητές ιστών υπερήχων είναι ισχυροί και φιλικοί προς το χρήστη, ενώ παράγουν αξιόπιστα αποτελέσματα εξασφαλίζοντας αναπαραγωγιμότητα λόγω του πλήρους ελέγχου όλων των σημαντικών παραμέτρων της διαδικασίας.
Κοινά πεδία εφαρμογών της υπερηχητικής λείανσης ιστών, κυτταρική διαταραχή, λύση, εκχύλιση και ομογενοποίηση βρίσκονται σε βιολογικά και φαρμακευτικά εργαστήρια, μικροβιολογία, πρωτεομική και γονιδιωματική έρευνα (π.χ. απελευθέρωση πρωτεϊνών πριν από τη δυτική κηλίδωση και ενζυμική ανοσοπροσροφητική δοκιμασία ELISA), αλλά και στην παραγωγή βοτανικών εκχυλισμάτων και βιοδραστικών ενώσεων για τις βιομηχανίες τροφίμων, φαρμάκων και καλλυντικών.
- Κάντε κλικ εδώ για συγκεκριμένες συστάσεις σχετικά με την προετοιμασία του δείγματος, την ομογενοποίηση των ιστών, τη λύση και την εκχύλιση (π.χ. κύτταρα, βακτήρια, σπόρια, δραστικές ενώσεις)!
- Διαβάστε εδώ γιατί οι υπερήχων είναι ένα απαραίτητο εργαλείο για πρωτεομική έρευνα!
- Μάθετε πώς υπερήχηση διευκολύνει γονιδιωματική ερευνητική εργασία!
Βιβλιογραφία / Αναφορές
- Nico Böhmer, Andreas Dautel, Thomas Eisele, Lutz Fischer (2012): Recombinant expression, purification and characterisation of the native glutamate racemase from Lactobacillus plantarum NC8. Protein Expr Purif. 2013 Mar;88(1):54-60.
- Brandy Verhalen, Stefan Ernst, Michael Börsch, Stephan Wilkens (2012): Dynamic Ligand-induced Conformational Rearrangements in P-glycoprotein as Probed by Fluorescence Resonance Energy Transfer Spectroscopy. J Biol Chem. 2012 Jan 6;287(2): 1112-27.
- Claudia Lindemann, Nataliya Lupilova, Alexandra Müller, Bettina Warscheid, Helmut E. Meyer, Katja Kuhlmann, Martin Eisenacher, Lars I. Leichert (2013): Redox Proteomics Uncovers Peroxynitrite-Sensitive Proteins that Help Escherichia coli to Overcome Nitrosative Stress. J Biol Chem. 2013 Jul 5; 288(27): 19698–19714.
- Elahe Motevaseli, Mahdieh Shirzad, Seyed Mohammad Akrami, Azam-Sadat Mousavi, Akbar Mirsalehian, Mohammad Hossein Modarressi (2013): Normal and tumour cervical cells respond differently to vaginal lactobacilli, independent of pH and lactate. ed Microbiol. 2013 Jul; 62(Pt 7):1065-1072.
Γεγονότα που αξίζει να γνωρίζετε
Οι ομογενοποιητές ιστών υπερήχων αναφέρονται συχνά ως υπερήχων ανιχνευτής, ηχητικός λύτης, διαταράκτης υπερήχων, υπερηχητικός μύλος, sono-ruptor, sonifier, ηχητικός dismembrator, κυτταρικός διαταράκτης, υπερηχητικός διασκορπιστής ή διαλύτης. Οι διαφορετικοί όροι προκύπτουν από τις διάφορες εφαρμογές που μπορούν να εκπληρωθούν με υπερήχους.
Hielscher Υπέρηχοι κατασκευάζει υψηλής απόδοσης υπερήχων ομογενοποιητές για την ανάμειξη εφαρμογών, διασπορά, γαλακτωματοποίηση και εκχύλιση σε εργαστήριο, πιλοτική και βιομηχανική κλίμακα.