Υπερήχων προετοιμασία του πλούσιου σε αιμοπετάλια ορού
- Το πλούσιο σε αιμοπετάλια πλάσμα (PRP) είναι πλάσμα αίματος που έχει εμπλουτιστεί με αιμοπετάλια, το οποίο χρησιμοποιείται για ιατρικές και αισθητικές θεραπείες.
- Η λύση και η προετοιμασία με υπερήχους είναι μια πολύ αποτελεσματική μέθοδος για την παρασκευή πλάσματος πλούσιου σε αιμοπετάλια.
- Hielscher Υπέρηχοι προσφέρει διάφορα συστήματα υπερήχων που ταιριάζουν με τις απαιτήσεις της θεραπείας του αίματος (π.χ. για εσωτερική και εξωτερική προετοιμασία ενός καθαρού δωματίου).
Ορός πλούσιος σε αιμοπετάλια
Κατεργασία με υπερήχους είναι μια αξιόπιστη και εύκολη μέθοδος για τη λύση των αιμοπεταλίων στον αυτόλογο ορό αίματος, προκειμένου να απελευθερωθούν οι αυξητικοί παράγοντες. Τα κλάσματα που προέρχονται από αιμοπετάλια – γνωστό και ως αυτόλογος εξαρτημένος ορός (ACS) – χρησιμοποιούνται για την επισκευή ιστών ή αισθητικές θεραπείες. Για να επιτευχθούν τα βέλτιστα αποτελέσματα, το PRP εμπλουτίζεται πριν από την ένεση.
Προκειμένου να παρασκευαστεί εμπλουτισμένο πλάσμα με αυξητικούς παράγοντες κυττάρων, κατεργασία με υπερήχους είναι μια πολύ αποτελεσματική και αποδοτική μέθοδος για τη λύση των κυτταρικών μεμβρανών και την απελευθέρωση σχεδόν των πλήρων παραγόντων κυτταρικής ανάπτυξης από τα αιμοπετάλια. Με υπερηχητική λύση και προετοιμασία, μπορεί να χρησιμοποιηθεί ακόμη και αντιπηκτικό αίμα.
Η προετοιμασία του PRP μέσω υπερήχων είναι ένας βολικός και οικονομικά αποδοτικός τρόπος απόδοσης σε συγκεντρωμένους αυξητικούς παράγοντες.
Υπερήχων λύση πλάσματος πλούσιου σε αιμοπετάλια (PRP)
Υπερήχων Lysis Επιδράσεις
Υπερήχων θεραπεία του ορού του αίματος οδηγεί σε ομοιογενή λύση των αιμοπεταλίων προκειμένου να απελευθερωθούν οι παγιδευμένοι αυξητικοί παράγοντες (αυξητικός παράγοντας AB (PDGF-AB), αυξητικός παράγοντας AA (PDGF-AA), αυξητικός παράγοντας BB (PDGF-BB), αγγειακός ενδοθηλιακός αυξητικός παράγοντας (VEGF), μετασχηματίζοντας αυξητικός παράγοντας β (TGF-β), επιδερμικός αυξητικός παράγοντας (EGF), ινσουλινοειδής αυξητικός παράγοντας (IGF), αυξητικός παράγοντας επιθηλιακών κυττάρων ECGF και ινοβλαστικός αυξητικός παράγοντας (FGF)). Τα αιμοπετάλια και τα άλφα-κοκκία τους διαταράσσονται από υπερήχους, χρησιμοποιώντας το φαινόμενο της ακουστική σπηλαίωση. Χρησιμοποιώντας υπερήχων σπηλαίωση για λύση αιμοπεταλίων μειώνει την πιθανή αρνητική επίδραση στη δραστηριότητα του αυξητικού παράγοντα της επαναλαμβανόμενης μεθόδου ψύξης-απόψυξης.
Πρωτόκολλο για την προετοιμασία PRP υπερήχων
Περίπου 16mL φρέσκου δείγματος αυτόλογου αίματος αναστρέφεται απαλά 8-10 φορές σε ένα σωληνάριο έτσι ώστε το αίμα και τα αντιπηκτικά να αναμειγνύονται καλά. Στη συνέχεια, το δείγμα φυγοκεντρείται στα 1800 g επί 20 λεπτά σε θερμοκρασία δωματίου. Μετά τη φυγοκέντρηση, τα αιμοπετάλια και τα μονοπύρηνα κύτταρα δημιουργούν ένα υπόλευκο στρώμα στο κάτω μέρος του στρώματος πλάσματος, το οποίο είναι γνωστό ως πλάσμα πλούσιο σε αιμοπετάλια (PRP). Το ανώτερο στρώμα είναι γνωστό ως πλάσμα φτωχό σε αιμοπετάλια (PPP). Τα μονοπύρηνα κύτταρα μπορούν να αφαιρεθούν ή να παραμείνουν στο δείγμα. Συχνά, τα μονοπύρηνα κύτταρα παραμένουν στο δείγμα PRP για να αποφευχθούν πρόσθετα βήματα, τα οποία ενέχουν τον κίνδυνο μόλυνσης.
Σημείωση: Η υπερηχητική θεραπεία του αυτόλογου PRP πρέπει να διεξάγεται υπό στείρες συνθήκες.
Το PRP και το PPP διαχωρίζονται και συλλέγονται. Στο PPP, προστίθεται 1,5mL διάλυμα χλωριούχου ασβεστίου 10%, ενώ στο PRP 0,5mL προστίθεται αιθανόλη 5%. Και τα δύο εναιωρήματα αναδεύονται απαλά και αφήνονται να σταθούν για 5 λεπτά σε θερμοκρασία δωματίου. Τέλος, 1mL PPP προστίθεται στο εναιώρημα PRP και αφήνεται να σταθεί μέχρι να σχηματιστεί θρόμβος ινώδους.
Θεραπεία με υπερήχους: Καθώς η σχηματισμένη γέλη αιμοπεταλίων δρα ως δεξαμενή για τους απελευθερωμένους αυξητικούς παράγοντες, η γέλη ινώδους πρέπει να διαταραχθεί προκειμένου να απελευθερωθούν οι διαθέσιμοι αυξητικοί παράγοντες. Οι παράμετροι για την απελευθέρωση λύσης υπερήχων και αυξητικού παράγοντα είναι οι εξής: Υπερήχηση με ένα UP200Ht ή UP200St (200W, 26kHz) με sonotrode S26d2 το δείγμα στο σωλήνα. Για να αποφευχθεί η υπερθέρμανση του δείγματος αίματος, υπερήχηση μπορεί να πραγματοποιηθεί σε παλλόμενους κύκλους (π.χ. 10 δευτερόλεπτα επάνω, 30 δευτερόλεπτα μακριά). Το δείγμα πρέπει να τοποθετείται σε πάγο για ψύξη, έτσι ώστε η θερμοκρασία να διατηρείται βέλτιστα μεταξύ 2 – 5°C. Μετά από υπερήχους, το δείγμα φυγοκεντρείται στα 16000 g για 5 λεπτά σε θερμοκρασία δωματίου. Το υπερκείμενο υγρό συλλέγεται και μπορεί να αποθηκευτεί στους -70°C.
Η συγκέντρωση αιμοπεταλίων στο κλάσμα PRP εμπλουτίστηκε 1,7 – 4.5 φορές στη μέθοδο υπερήχων σε σύγκριση με τη βιβλιογραφία μέσο αριθμό αιμοπεταλίων στο ολικό αίμα.
Το PRP έχει συνδυαστεί με θεραπεία με βλαστοκύτταρα που προέρχονται από λιπώδη ιστό (Υπερηχητικά απελευθερωμένα αυτόλογα βλαστοκύτταρα από λιπώδη ιστό, αναμιγνύεται με PRP και εγχέεται πίσω στον ιστό του ασθενούς για επισκευή).
Εξοπλισμός υπερήχων
Hielscher Υπέρηχοι είναι ειδικός για εξελιγμένη και αξιόπιστη τεχνολογία υπερήχων. Οι συσκευές υπερήχων μας χρησιμοποιούνται παγκοσμίως για λύση, εκχύλιση και προετοιμασία δειγμάτων – με άμεση και έμμεση. Αυτόκλειστο καθώς και Μιας χρήσης Τα εξαρτήματα εξασφαλίζουν ένα χωρίς μόλυνση θεραπεία αυτόλογων δειγμάτων αίματος. Τα περισσότερα από τα συστήματά μας μπορούν να χρησιμοποιηθούν για υπερηχητική λύση βλαστοκύτταρα και PRP, γεγονός που καθιστά τις συσκευές υπερήχων μας οικονομικά ακόμη πιο αποτελεσματικές.
Αυτός ο παρακάτω πίνακας παραθέτει τις συσκευές υπερήχων μας, οι οποίες είναι κατάλληλες για την παρασκευή πλάσματος πλούσιου σε αιμοπετάλια, και τον συνιστώμενο όγκο δείγματος, αντίστοιχα. Μεγαλύτεροι υπερήχων και προσαρμοσμένα συστήματα είναι επίσης διαθέσιμα.
| Συσκευή | Ισχύς [W] | Freq. [kHz] | Δακτυλογραφώ | Όγκος [mL] | ||
|---|---|---|---|---|---|---|
| VialTweeter | 200 | 26 | αυτόνομο | 0.5 | – | 1.5 |
| UP50Η | 50 | 30 | Φορητός ή όρθιος | 0.01 | – | 250 |
| UP100Η | 100 | 30 | Φορητός ή όρθιος | 0.01 | – | 500 |
| UP200Ht | 200 | 26 | Φορητός ή όρθιος | 0.1 | – | 1000 |
| UP200St | 200 | 26 | Standmounted | 0.1 | – | 1000 |
| UP400St | 400 | 24 | Standmounted | 5.0 | – | 2000 |
| UP200St-SonoStep | 200 | 26 | αυτόνομο | 30 | – | 500 |
| GDmini2 | 200 | 26 | κύτταρο ροής χωρίς μόλυνση | |||
Επικοινωνήστε μαζί μας σήμερα! Θα χαρούμε να σας βοηθήσουμε να βρείτε τη βέλτιστη συσκευή υπερήχων!
Επικοινωνήστε μαζί μας! / Ρωτήστε μας!
GDmini2 σε μετατροπέα UP200St-TD (200 watt)
Βιβλιογραφία/Αναφορές
- Fortunato, Τ. Μ.; Beltrami, Χ.; Emanueli, Γ.; De Bank, Ρ.Α:; Pula, G. (2016): Η γέλη λύσης αιμοπεταλίων και οι ενδοθηλιακοί πρόγονοι διεγείρουν το σχηματισμό μικροαγγειακού δικτύου in vitro: επιπτώσεις μηχανικής ιστών. Sci. Rep. 6, 2016.
- Hamid, MSA; Yusof, Ashril? Ali, Mohamed Razif Mohamed (2014): Πλάσμα πλούσιο σε αιμοπετάλια (PRP) για οξύ μυϊκό τραυματισμό: Μια συστηματική ανασκόπηση. PLOS ONE Τόμος 9, Τεύχος 2, 2014.
Γεγονότα που αξίζει να γνωρίζετε
Πλάσμα πλούσιο σε αιμοπετάλια
Το πλούσιο σε αιμοπετάλια πλάσμα περιέχει αυξητικό παράγοντα AB (PDGF-AB), αυξητικό παράγοντα AA ΠΟΥ ΠΡΟΈΡΧΕΤΑΙ ΑΠΌ ΑΙΜΟΠΕΤΆΛΙΑ (PDGF-AA), αυξητικό παράγοντα που προέρχεται από αιμοπετάλια BB (PDGF-BB), αγγειακό ενδοθηλιακό αυξητικό παράγοντα (VEGF), μετασχηματιστικό αυξητικό παράγοντα β (TGF-β), επιδερμικό αυξητικό παράγοντα (EGF), ινσουλινοειδή αυξητικό παράγοντα (IGF), αυξητικό παράγοντα επιθηλιακών κυττάρων ECGF και ινοβλαστικό αυξητικό παράγοντα (FGF), τα οποία είναι σημαντικά διεγερτικά για την κυτταρική ανάπτυξη και ανανέωση.
Αυτόλογος Εξαρτημένος Ορός (ACS)
Το αυτόλογο πλάσμα (ACP) είναι ένα πλάσμα πλούσιο σε αιμοπετάλια που εξάγεται από αυτόλογο αίμα το οποίο χρησιμοποιείται για την υποστήριξη της αναγέννησης σε ποικίλες ορθοπεδικές καταστάσεις και χειρουργικές επεμβάσεις. Ο εξαρτημένος ορός παρασκευάζεται διαχωρίζοντας το πλάσμα από τα άλλα συστατικά του αίματος (όπως τα ερυθροκύτταρα) και συμπυκνώνοντάς το. Το ACP είναι πλάσμα πλούσιο σε αιμοπετάλια (PRP). Το PRP είναι ένας γενικός όρος για έναν τύπο πλάσματος που περιέχει σημαντικά υψηλότερη συγκέντρωση θρομβοκυττάρων σε σύγκριση με το ολικό αίμα. Εξάγεται από ολικό αίμα. Τα κύρια συστατικά του ACP περιλαμβάνουν θρομβοκύτταρα (αιμοπετάλια) και διάφορους αυξητικούς παράγοντες που παίζουν σημαντικό ρόλο στη διαδικασία επούλωσης. Σε αντίθεση με άλλα πλούσια σε αιμοπετάλια σκευάσματα πλάσματος, το ACP διακρίνεται από χαμηλή συγκέντρωση λευκών αιμοσφαιρίων όπως τα ουδετερόφιλα κοκκιοκύτταρα που μπορεί να είναι επιζήμια για τη διαδικασία επούλωσης όταν υπάρχουν σε υψηλές συγκεντρώσεις.
Ενέσεις πλάσματος πλούσιες σε αιμοπετάλια
Το πλούσιο σε αιμοπετάλια πλάσμα χρησιμοποιείται ως ένεση στην αναγεννητική ιατρική καθώς και σε καλλυντικές διαδικασίες. Η εφαρμογή του PRP υπόσχεται σημαντική επιτάχυνση της επούλωσης των μυών και της αποκατάστασης των μυών. Επιπλέον, χρησιμοποιείται με επιτυχία για τη θεραπεία φλεγμονών, αρθρίτιδας, πόνου, τραυμάτων, αργής επούλωσης ανοιχτών πληγών και σοβαρών εγκαυμάτων του δέρματος. Το PRP περιέχει υψηλό επίπεδο αυξητικών παραγόντων, οι οποίοι διεγείρουν και προστατεύουν τα επουλωτικά κύτταρα και ότι ο κατεστραμμένος ιστός επισκευάζεται.
Για καλλυντικά treaments, PRP έχει αποδειχθεί αποτελεσματική για την τόνωση της ανάπτυξης των μαλλιών, ανανέωση του δέρματος (επίσης γνωστή ως θεραπεία βαμπίρ).
Αυξητικοί παράγοντες που προέρχονται από αιμοπετάλια (PDGF)
Ο όρος αυξητικός παράγοντας που προέρχεται από αιμοπετάλια (PDGF) αναφέρεται στους παράγοντες PDGF-A, PDGF-B, PDGF-C και PDGF-D. Είναι ένα δίκτυο σηματοδότησης τεσσάρων συνδετήρων (PDGF-A, PDGF-B, PDGF-C και PDGF-D) και δύο υποδοχέων, PDGFR-άλφα και PDGFR-βήτα.
Αυξητικοί παράγοντες, ή πρωτεΐνες, ρυθμίζουν την κυτταρική ανάπτυξη και διαίρεση. Ως το κύριο μιτογόνο που βρίσκεται στον ορό των θηλαστικών, το οποίο απελευθερώνεται από τα αιμοπετάλια κατά τη διάρκεια του σχηματισμού θρόμβων, παίζει σημαντικό ρόλο στο σχηματισμό αιμοφόρων αγγείων (αγγειογένεση), την ανάπτυξη αιμοφόρων αγγείων από ήδη υπάρχοντα ιστό αιμοφόρων αγγείων.