Απομόνωση βλαστοκυττάρων με υπερήχους

Η κατεργασία με υπερήχους είναι μια εξαιρετικά αποτελεσματική μηχανική μέθοδος για την απομόνωση βλαστοκυττάρων από ανθρώπινο λιπώδη ιστό. Το στρωματικό αγγειακό κλάσμα (SVF) που απομονώνεται με υπερήχους παρουσιάζει σημαντικό αναγεννητικό δυναμικό για ιατρικές εφαρμογές. Η Hielscher Ultrasonics παρέχει μια σειρά επιλογών άμεσης και έμμεσης κατεργασίας με υπερήχους για τη συλλογή βλαστοκυττάρων. Βρείτε την ιδανική συσκευή υπερήχων για τη διαδικασία απομόνωσης βλαστοκυττάρων που εφαρμόζετε!

Απομόνωση βλαστοκυττάρων με υπερήχους

Ο λιπώδης ιστός που εξάγεται από το ανθρώπινο σώμα (μέσω λιποαναρρόφησης) υποβάλλεται σε κατεργασία με υπερήχους για να απομακρυνθεί ο ιστός από τα βλαστοκύτταρα και άλλα κύτταρα που συμμετέχουν στην ανάπτυξη. Αυτό το διαχωρισμένο σύνολο κυττάρων είναι γνωστό ως κύτταρα του στρωματικού αγγειακού κλάσματος (SVF).
Η τεχνική απομόνωσης βλαστοκυττάρων από λιπώδη ιστό με υπερήχους βασίζεται αποκλειστικά στην αρχή λειτουργίας της σπηλαίωσης που προκαλείται από υπερήχους, η οποία συνίσταται σε αμιγώς μηχανική διάτμηση. Αυτές οι δυνάμεις διάτμησης λόγω σπηλαίωσης διαρρηγνύουν τον λιπώδη ιστό, ώστε τα βλαστοκύτταρα να απελευθερωθούν από τη δομή του λιπώδους ιστού. Η απομόνωση βλαστοκυττάρων με υπερήχους είναι μια διαδικασία χωρίς ένζυμα, που αποφεύγει τη χρήση κολλαγενάσης, θρυψίνης ή δισπάσης.
Για τον διαχωρισμό των εξαγόμενων βλαστοκυττάρων, των μεσεγχυματικών βλαστοκυττάρων, των πρόδρομων ενδοθηλιακών κυττάρων και άλλων τύπων κυττάρων που συμμετέχουν στην ανάπτυξη, ο λιπώδης ιστός που έχει υποβληθεί σε κατεργασία με υπερήχους φυγοκεντρείται.
Τα διαχωρισμένα βλαστοκύτταρα συλλέγονται και αναλύονται ως προς την ποιότητά τους, συμπεριλαμβανομένων του αριθμού κυττάρων, της βιωσιμότητας, της ενδοτοξίνης και της χρώσης Gram, προτού χρησιμοποιηθούν αμέσως για αυτόλογη μεταμόσχευση ή διατηρηθούν σε κρυοσυντήρηση.

Γιατί να αποφεύγονται τα ένζυμα;

Επειδή η ενζυμική πέψη για την απομόνωση βλαστοκυττάρων συνοδεύεται από υψηλό κόστος και πιθανούς κινδύνους για την ασφάλεια, καθώς και από ανεπαρκή αποτελεσματικότητα [Oberbauer et al. 2015], προτιμώνται μη ενζυμικές μέθοδοι απομόνωσης, όπως η σπηλαίωση με υπερήχους. Το στάδιο απομόνωσης με υπερήχους αντικαθιστά την ενζυμική πέψη, διαχωρίζοντας μηχανικά τα κύτταρα και τα κυτταρικά συσσωματώματα από τον λιπώδη ιστό.

Βλαστοκύτταρα προερχόμενα από λιπώδη ιστό

Απόδοση σε βλαστοκύτταρα που επιτυγχάνεται με κατεργασία με υπερήχους

Δημοσιευμένη μέθοδος απομόνωσης του στρωματικού αγγειακού κλάσματος με χρήση σπηλαίωσης με υπερήχους απέδωσε 1,67–2,24 × 10⁷ κύτταρα με βιωσιμότητα 97,1–98,9% [Victor, S., 2014]. Αποδόσεις περίπου 2–4 εκατομμυρίων κυττάρων/γραμμάριο λιπώδους ιστού επιτεύχθηκαν με τη λύση ώριμων λιποκυττάρων με υπερήχους σε διαχωρισμένο λιπώδη ιστό [Bright et al., 2014].
Τα κύτταρα που παρασκευάζονται με υπερήχους διαθέτουν εξίσου υψηλό δυναμικό λιπογενούς και οστεογενούς διαφοροποίησης σε σύγκριση με μια τυπική ενζυμική μέθοδο απομόνωσης [Oberbauer et al. 2015].

Συστήματα υπερήχων για την απομόνωση βλαστοκυττάρων

Για τη διασφάλιση της μέγιστης ασφάλειας και της βέλτιστης ποιότητας, ο αξιόπιστος εξοπλισμός υπερήχων, ο οποίος επιτρέπει τον ακριβή έλεγχο της επεξεργασίας των βλαστοκυττάρων, αποτελεί βασικό παράγοντα για την επιτυχή θεραπεία των ασθενών. Η Hielscher Ultrasonics προσφέρει διάφορες επιλογές για μια διαδικασία διαχωρισμού με σπηλαίωση με υπερήχους για αυτόλογη χρήση, με σκοπό την απομόνωση και τη συλλογή βλαστοκυττάρων και πρόδρομων ενδοθηλιακών κυττάρων.

Άμεση κατεργασία με υπερήχους για την απομόνωση βλαστοκυττάρων

Για τη διαδικασία απομόνωσης βλαστοκυττάρων μέσω άμεσης κατεργασίας με υπερήχους, το κέρας υπερήχων (ηχοτρόδιο, ακροφύσιο / ανιχνευτής υπερήχων) βυθίζεται στον λιπώδη ιστό. Μέσω του ηχοτροδίου, τα κύματα υπερήχων συζεύγνυνται απευθείας με το αυτόλογο λίπος, ώστε η σπηλαίωση με υπερήχους να απελευθερώσει τα βλαστοκύτταρα και τα στρωματικά κύτταρα από τον υπολειπόμενο ιστό. Οι συσκευές υπερήχων της Hielscher UP200Ht και UP200St με ηχοτρόδιο S26d14 είναι συστήματα που χρησιμοποιούνται συνήθως για την επεξεργασία αυτόλογων βλαστοκυττάρων. Η απομόνωση του στρωματικού αγγειακού κλάσματος με άμεση κατεργασία με υπερήχους ενδείκνυται κυρίως για χρήση σε εγκαταστάσεις καθαρών χώρων.

Έμμεση κατεργασία με υπερήχους για την απομόνωση βλαστοκυττάρων

Επειδή τα βλαστοκύτταρα χρησιμοποιούνται για αυτόλογες εφαρμογές, η στειρότητα της διαδικασίας είναι πολύ σημαντική. Γι’ αυτό, η Hielscher έχει αναπτύξει διάφορες επιλογές έμμεσης κατεργασίας με υπερήχους, όπως GDmini2, VialTweeter και άλλα εξατομικευμένα συστήματα. Κατά την έμμεση κατεργασία με υπερήχους, τα υπερηχητικά κύματα συζεύγνυνται με τον λιπώδη ιστό μέσω του τοιχώματος του δοχείου. Το στρωματικό αγγειακό κλάσμα (SVF) διαχωρίζεται από τον λιπώδη ιστό μέσω σπηλαίωσης που προκαλείται από υπερήχους, όπως και κατά την άμεση κατεργασία με υπερήχους.
Μια διαδικασία έμμεσης κατεργασίας με υπερήχους προσφέρει το πλεονέκτημα της επεξεργασίας των κυττάρων σε κλειστό δοχείο υπό συνθήκες χωρίς επιμόλυνση καθώς εξαλείφεται ο κίνδυνος διασταυρούμενης επιμόλυνσης από την εισαγωγή της υπερηχητικής χοάνης (ηχοτροδίου). Η απομόνωση των κυττάρων πραγματοποιείται σε κλειστό σύστημα, διασφαλίζοντας στείρες συνθήκες διεργασίας.
Διαβάστε περισσότερα για τις συσκευές υπερήχων της Hielscher για στείρα κατεργασία!

Οι ψηφιακές συσκευές υπερήχων της Hielscher μπορούν να ελέγχονται με ακρίβεια μέσω οθόνης αφής ή μέσω προγράμματος περιήγησης. Οι διαδικασίες κατεργασίας με υπερήχους μπορούν να προκαθορίζονται μέσω του εύχρηστου μενού. Οι συσκευές υπερήχων διαθέτουν αυτόματη καταγραφή δεδομένων (όλα τα δεδομένα της διαδικασίας κατεργασίας με υπερήχους αποθηκεύονται σε ενσωματωμένη κάρτα SD). Η παρεχόμενη ισχύς υπερήχων μπορεί να προσαρμόζεται με ακρίβεια στο πρωτόκολλο απομόνωσης κυττάρων.