Υπερήχων Βλαστικών Κυττάρων Απομόνωση
- Υπερήχων σπηλαίωσης είναι ένα εξαιρετικά αποτελεσματικό μηχανική μέθοδος για την απομόνωση βλαστικών κυττάρων από ανθρώπινα λιπώδη ιστό.
- Υπερηχητικά απομονωμένο κλάσμα του στρώματος αγγειακή (SVF) δείχνουν μια υψηλή αναγεννητική δυναμικό για ιατρικές εφαρμογές.
- Hielscher Ultrasonics προσφέρει διάφορες επιλογές των άμεσων και έμμεσων κατεργασία με υπερήχους για τη συλλογή βλαστοκυττάρων.
Υπερήχων Απομόνωση Stem Cells
Από το ανθρώπινο σώμα εκχυλίστηκε λιπώδη ιστό (μέσω λιποαναρρόφηση) κατεργάζεται με υπερήχους για την απομάκρυνση του ιστού από τα βλαστικά κύτταρα και άλλα κύτταρα ανάπτυξης. Αυτό διαχωρίζεται μέρος των κυττάρων είναι γνωστή ως στρωματικά αγγειακά κύτταρα κλάσμα (SVF).
Η υπερηχητική τεχνική απομόνωση των βλαστικών κυττάρων από τον λιπώδη ιστό βασίζεται αποκλειστικά στην αρχή λειτουργίας των υπερήχων που προέρχεται από σπηλαίωση, η οποία είναι μηχανική διάτμηση. Οι cavitational δυνάμεις διάτμησης διαταράσσουν την λιπώδη ιστό, έτσι ώστε τα βλαστικά κύτταρα απελευθερώνονται από τη δομή του λιπώδους ιστού. Η απομόνωση υπερήχων βλαστικών κυττάρων είναι ένα διαδικασία ελεύθερη από ένζυμο, αποφεύγοντας την χρήση κολλαγενάσης, θρυψίνης, ή δισπάση.
Για να διαχωριστούν τα εκχυλίζεται βλαστικά κύτταρα, μεσεγχυματικά βλαστικά κύτταρα, ενδοθηλιακά πρόδρομων και άλλων κυτταρικών τύπων ανάπτυξης, η κατεργασία με υπερήχους λιπώδης ιστός φυγοκεντρείται.
Τα διαχωρισμένα βλαστικά κύτταρα συλλέγονται και αναλύονται για την ποιότητά τους συμπεριλαμβανομένου του αριθμού των κυττάρων, βιωσιμότητα, ενδοτοξίνη, και gram χρώση πριν χρησιμοποιηθεί αμέσως για την αυτόλογη μεταμόσχευση ή διατηρημένα σε κρυο-αποθήκευση.
Γιατί να αποφύγετε τα ένζυμα;
Δεδομένου ότι η ενζυματική πέψη για απομόνωση βλαστικών κυττάρων συνοδεύεται με υψηλό κόστος και τους πιθανούς κινδύνους για την ασφάλεια, καθώς και έλλειψη αποτελεσματικότητας [Oberbauer et αϊ. 2015], οι μη-ενζυματικές μεθόδους απομόνωσης όπως η υπερηχητική σπηλαίωση προτιμώνται. Η υπερηχητική στάδιο απομόνωσης αντικαθιστά την ενζυματική πέψη με διαχωρισμό των κυττάρων και κυτταρικών συσσωματωμάτων μηχανικά από το λιπώδη ιστό.
GDmini2 σε UP200St-TD αισθητηρίου (200 Watt)
- ταχύς
- αποτελεσματικός
- αναπαραγώγιμος
- Ασφαλής
- Χωρίς ένζυμο
- αποδοτική
- Στείρα Επιλογές
Λιπώδη βλαστικά κύτταρα προερχόμενα από
Stem Απόδοση Κυττάρων
Δημοσιευμένο μέθοδος SVF απομόνωση χρησιμοποιώντας υπερήχων απόδοση σπηλαίωσης σε 1,67 - 2,24 × 107 κύτταρα με βιωσιμότητα της 97.1 – 98.9% [Victor, S., 2014]. Οι αποδόσεις των κυττάρων περίπου 2 – 4 εκατομμύρια κύτταρα/γραμμάριο λιπώδη ιστό ελήφθησαν από την υπερήχων λύση των ώριμων λιποκυττάρων σε διαχωρισμένα λιπώδη ιστό [Bright et al., 2014].
Υπερηχητικά παρασκευαστούν κύτταρα κατέχουν εξίσου υψηλό αδιπογονική και οστεογόνο δυναμικό διαφοροποίησης, σε σύγκριση με μία τυποποιημένη μέθοδο ενζυματική απομόνωση [Oberbauer et αϊ. 2015].
Υπερήχων Συστήματα για βλαστικών κυττάρων Απομόνωση
Για να εξασφαλιστεί η υψηλότερη ασφάλεια και την καλύτερη ποιότητα, αξιόπιστο εξοπλισμό υπερήχων, το οποίο επιτρέπει την ακριβή έλεγχο της θεραπείας βλαστικών κυττάρων, είναι ένας βασικός παράγοντας για την επιτυχή θεραπεία των ασθενών. Hielscher Ultrasonics προσφέρει διάφορες επιλογές για μια αυτόλογη διαδικασία διαχωρισμού υπερήχων σπηλαίωση για την απομόνωση και βλαστικών συγκομιδής και ενδοθηλιακά πρόδρομα κύτταρα.
Άμεση επεξεργασία με υπερήχους
Για τη διαδικασία απομόνωσης βλαστικών κυττάρων μέσω άμεσης κατεργασία με υπερήχους, το υπερηχητικό κέρας (sonotrode, υπερηχητικό άκρο / καθετήρα) βυθίζεται μέσα στο λιπώδη ιστό λίπους. Μέσω του sonotrode, οι κύματα υπερήχων συζευχθεί απευθείας στον αυτόλογο λίπος έτσι ώστε το υπερηχητικό σπηλαίωσης απελευθερώνει τα βλαστικά κύτταρα και τα στρωματικά κύτταρα από το απομένον ιστό. Hielscher υπερήχων επεξεργαστές Uf200 ः t και UP200St με sonotrode S26d14 χρησιμοποιούνται συνήθως συστήματα για την αυτόλογη θεραπεία με βλαστοκύτταρα. Η SVF απομόνωση με άμεση κατεργασία υπερήχων είναι ως επί το πλείστον κατάλληλο για χρήση σε εγκαταστάσεις cleanroom.
έμμεση κατεργασία με υπερήχους
Δεδομένου ότι τα βλαστικά κύτταρα που χρησιμοποιούνται για αυτόλογη εφαρμογές, στειρότητα της διαδικασίας είναι πολύ σημαντική. Ως εκ τούτου, Hielscher έχει αναπτύξει διάφορες επιλογές των έμμεσων κατεργασία με υπερήχους, όπως GDmini2, VialTweeter και άλλα προσαρμοσμένα συστήματα. Με έμμεση κατεργασία υπερήχων, τα κύματα υπερήχων συζευγμένο διαμέσου του περιέκτη τοιχώματος μέσα στον λιπώδη ιστό. Το κλάσμα στρωματικό αγγειακό (SVF) διαχωρίζεται από το λιπώδη ιστό με υπερηχητική σπηλαίωσης τόσο ίδιο όπως κατά τη διάρκεια της άμεσης κατεργασίας με υπερήχους.
Η έμμεση μέθοδος επεξεργασίας με υπερήχους προσφέρει το πλεονέκτημα να επεξεργάζεται τα κύτταρα σε ένα κλειστό δοχείο υπό συνθήκες μόλυνσης χωρίς δεδομένου ότι ο κίνδυνος διασταυρούμενης μόλυνσης με εισαγωγή του κέρατος υπερήχων (sonotrode) αποβάλλεται. Η απομόνωση των κυττάρων διεξάγεται σε ένα κλειστό σύστημα που εξασφαλίζει στείρες συνθήκες διεργασίας.
ψηφιακές συσκευές υπερήχων Hielscher μπορεί να ελεγχθεί με ακρίβεια μέσω της οθόνης αφής ή ελέγχου του προγράμματος περιήγησης. διαδικασίες υπερήχων μπορεί να προ-ρυθμιστεί μέσω του μενού διαισθητικό. Οι συσκευές υπερήχων είναι εξοπλισμένα με την καταγραφή μιας αυτόματης (όλα τα δεδομένα proces κατεργασίας με υπερήχους είναι αποθηκευμένα σε μια ολοκληρωμένη SD-Card). Η υπερηχητική ισχύς εισόδου μπορεί να ρυθμιστεί ακριβώς με το πρωτόκολλο απομόνωσης κυττάρων.
Λογοτεχνία / Αναφορές
- Όμπερμπάουερ, Ελένη. Στέφενχάγκεν, Καρολάιν. Βούρζερ, κρικρις. Γκάμπριελ, Κρίστιαν. Ρέντλ, Χάινς. Wolbank, Σουζάν (2015): ενζυματικά και μη ενζυματικά συστήματα απομόνωσης για κύτταρα που προέρχονται από λιπώδη ιστό: τρέχουσα κατάσταση της τέχνης. Αναγέννηση κυττάρων (2015) 4:7.
Γεγονότα που αξίζει να γνωρίζουμε
βλαστοκύτταρα
Τα βλαστικά κύτταρα είναι αδιαφοροποίητα κύτταρα ενός πολυκύτταρου οργανισμού που έχουν την ικανότητα να παράγουν απεριόριστα περισσότερα κύτταρα του ίδιου τύπου. Χαρακτηρίζονται από την αξιοσημείωτη δυνατότητα ανάπτυξης σε πολλούς διαφορετικούς κυτταρικούς τύπους στο σώμα κατά την πρώιμη κατάσταση ζωής και ανάπτυξης. Το πιο χαρακτηριστικό γνώρισμα των βλαστοκυττάρων είναι η ικανότητά τους να ανανεώνονται με κυτταρική διαίρεση και η ικανότητά τους να μετατραπούν σε κύτταρα ειδικά για ιστούς ή όργανα με ειδικές λειτουργίες. Τα πολυδύναμα βλαστοκύτταρα έχουν τη δυνατότητα να διαφοροποιούνται σε οποιοδήποτε από τα τρία γεννητικά κύτταρα: endoderm (εσωτερική επένδυση στομάχου, γαστρεντερική οδό, πνεύμονες), μεσοδερμία (μύες, οστά, αίμα, ουρογεννητικά) ή εξωδερμία (επιδερμικοί ιστοί και νευρικό σύστημα).
Σε ορισμένα όργανα, όπως το έντερο και μυελό των οστών, τα βλαστικά κύτταρα διαιρούνται τακτικά για να επισκευή και αντικατάσταση φθαρμένων ή κατεστραμμένους ιστούς. Με άλλα όργανα, όπως το πάγκρεας και την καρδιά, τα βλαστικά κύτταρα διαιρούνται μόνο υπό ειδικές συνθήκες.
Τα μεσεγχυματικά στρωματικά / βλαστικά κύτταρα (MSC), τα οποία προσφέρουν ένα υψηλό δυναμικό για πολλαπλή θεραπευτικές εφαρμογές στην αναγεννητική και την αισθητική ιατρική, βρίσκονται κυρίως στο μυελό των οστών, αλλά μπορεί να απομονωθούν από άλλους ιστούς (π.χ. χόνδρο, λίπος, μυϊκά κύτταρα), πολύ. Τα μεσεγχυματικά βλαστικά κύτταρα θεωρούνται ως πρωτότυπος ενήλικα βλαστικά κύτταρα που χαρακτηρίζονται από την ικανότητά τους της αυτο-ανανέωσης.
έρευνα και θεραπείες κυττάρων Stem χρησιμοποιούνται για να καλλιεργήσει ιστών και οργάνων για σκοπούς μεταμόσχευσης (μηχανική ιστών). Άλλες ιατρικές πεδία για την εφαρμογή των βλαστικών κυττάρων μπορεί να βρεθεί στη θεραπεία της νόσου του εγκεφάλου (π.χ. του Πάρκινσον και η νόσος του Alzheimer), η θεραπεία ανεπάρκειας των κυττάρων, ασθένεια του αίματος (π.χ. λευχαιμία), από κοινού και χόνδρου κηλίδας (π.χ. οστεοαρθρίτιδα), καθώς και τα καλλυντικά θεραπείες (π.χ. αντι-γήρανσης θεραπείες). Σε γενικές γραμμές, τα βλαστικά κύτταρα έχουν ένα μέγεθος περίπου. 15-25 micron σε διάμετρο.
Τα μεσεγχυματικά βλαστικά κύτταρα (MSC) είναι πολυδύναμα στρωματικά κύτταρα, τα οποία έχουν την ικανότητα να διαφοροποιούνται σε μια ποικιλία κυτταρικών τύπων, συμπεριλαμβανομένων των οστεοβλαστών (κύτταρα των οστών), χονδροκύτταρα (χόνδρος κύτταρα), μυοκύτταρα (μυϊκά κύτταρα), και λιποκύτταρα (κύτταρα λίπους).
Στρωματικά Αγγειακές Κλάσμα (SVF)
Στρωματικά Αγγειακές Κλάσμα (SVF) είναι ένα συστατικό του lipoaspirate που μπορεί να εξαχθεί μέσω λιποαναρρόφηση από λιπώδη ιστό στο ανθρώπινο σώμα. Η lipoaspirate συνίσταται σε ένα ετερογενές μίγμα των κυττάρων και έχει υψηλή περιεκτικότητα σε βλαστικά κύτταρα, γνωστή ως λιπώδη προερχόμενα αρχέγονα κύτταρα (ASC ή ADSC), τα οποία δείχνουν ομοιότητες με βλαστικά κύτταρα του μυελού των οστών, όπως η ικανότητά τους να διαφοροποιούνται σε πολλαπλές σειρές κυττάρων.
Η ετερογενής πληθυσμός SVF περιλαμβάνει ενδοθηλιακά κύτταρα, ερυθροκύτταρα, ινοβλάστες, λεμφοκύτταρα, μονοκύτταρα / μακροφάγα, και περικύτταρα μεταξύ άλλων, καθώς και ένα σημαντικό κλάσμα του λιπώδους-βλαστικά κύτταρα.
Λιπώδη-Προερχόμενο στρωματικά / Stem Cells (ASC)
Τα προερχόμενα από λιπώδη στρωματικά / αρχέγονα κύτταρα (ASC / ADSC) απελευθερώνουν υψηλά επίπεδα βιοδραστικών αυξητικών παραγόντων όπως ο αυξητικός παράγοντας επιδερμίδας (EGF), ο αγγειακός ενδοθηλιακός αυξητικός παράγοντας (VEGF), ο βασικός αυξητικός παράγοντας ινοβλαστών (bFGF) , αυξητικός παράγοντας αυξημένος από αιμοπετάλια (PDGF), αυξητικός παράγοντας ηπατοκυττάρων (HGF), αυξητικός παράγοντας μετασχηματισμού-β (ΤΟΡ-β), αυξητικός παράγοντας ινσουλίνης (IGF) και νευροτροφικός παράγοντας προερχόμενος από τον εγκέφαλο (BDNF). Το ACS δεν απελευθερώνει μόνο αυξητικούς παράγοντες, εκκρίνουν επίσης κυτταροκίνες συμπεριλαμβανομένου του σχετιζόμενου με fms συνδέτη κινάσης τυροσίνης 3 (Flt-3), παράγοντα διέγερσης αποικίας κοκκιοκυττάρων (G-CSF), παράγοντα διέγερσης αποικιών μακροφάγων κοκκιοκυττάρων (GM-CSF) (IL-6), IL-7, IL-8, IL-11 και IL-12, ανασταλτικός παράγοντας λευχαιμίας (LIF) και άλγος παράγοντος νέκρωσης όγκου (Μ-CSF) (ΤΝΡ-α).
Εκχύλιση Τύποι Βλαστικών Κυττάρων
Τα αυτόλογα ενήλικα βλαστικά κύτταρα από τον άνθρωπο μπορούν να εξαχθούν από τις ακόλουθες πηγές:
- Ο μυελός των οστών, η οποία απαιτεί την εκχύλιση από τη συγκομιδή, η οποία είναι, γεώτρηση εντός του οστού.
- λιπώδη ιστό (λιπίδιο κύτταρα), η οποία απαιτεί εκχύλιση με λιποαναρρόφηση.
- Αίμα, η οποία απαιτεί την εκχύλιση μέσω αφαίρεσης, όπου το αίμα από το δότη περνά μέσα από ένα “διάλυση” μηχάνημα όπου τα βλαστικά κύτταρα εκχυλίζονται ενώ τα άλλα συστατικά του αίματος επιστρέφονται πίσω στο δότη.