Προετοιμασία πλασμιδίου χρησιμοποιώντας υπερήχους
Υπερήχους είναι μια αξιόπιστη τεχνική για να κατακερματίσει πλασμιδικό DNA. Ακριβώς ελεγχόμενο πλάτος, λειτουργία παλμών και έλεγχος θερμοκρασίας είναι τα πιο σημαντικά χαρακτηριστικά ενός υπερηχητικού για μη επιβλαβή κατακερματισμό πλασμιδίων. Επιπλέον, η χρήση ορισμένων παραγόντων βοηθά στην προστασία από την αποικοδόμηση πλασμιδίων. Hielscher Υπέρηχοι προσφέρει διάφορες λύσεις για ελεγχόμενο κατακερματισμό πλασμιδίων από μεμονωμένα φιαλίδια, ταυτόχρονη υπερήχηση πολλών δειγμάτων, καθώς και πλάκες πολλαπλών φρεατίων. Μάθετε περισσότερα σχετικά με τον επιτυχή υπερηχητικό κατακερματισμό πλασμιδίου!

Το UIP400MTP επιτρέπει την ακριβή ελεγχόμενη υπερήχους των πλακών πολλαπλών φρεατίων. Μία από τις εφαρμογές του UIP400MTP είναι ο κατακερματισμός του πλασμιδικού DNA προκειμένου να ληφθούν θραύσματα ειδικά στοχευμένου μήκους.
Διάτμηση πλασμιδίων χρησιμοποιώντας υπερήχους
Όταν τα δείγματα DNA υποβάλλονται σε υπερηχητικά κύματα, οι δονήσεις που παράγονται με υπερήχους δημιουργούν ακουστική σπηλαίωση στο υγρό που ψαλιδίζει ή σπάει μόρια DNA υψηλού μοριακού βάρους μέσω μηχανικών δυνάμεων. Κατεργασία με υπερήχους είναι η πιο ευρέως χρησιμοποιούμενη μέθοδος για μαζικά πειράματα διάτμησης DNA, συμπεριλαμβανομένων εφαρμογών, όπως η ανοσοκατακρήμνιση χρωματίνης (ChIP), για την οποία τα μικρά μεγέθη θραυσμάτων είναι απολύτως ζωτικής σημασίας για την επίτευξη υψηλής ανάλυσης. (πρβλ. Tseng et al., 2012)
Το πλασμιδικό DNA (pDNA) είναι ειδική μορφή DNA, που χαρακτηρίζεται από το σχήμα του δακτυλίου του και βρίσκεται σε βακτήρια και μερικούς ευκαρυώτες.
Το υπερτυλιγμένο pDNA είναι η επιθυμητή μορφή πλασμιδικού DNA, καθώς δείχνει καλύτερα αποτελέσματα σε κατάντη διαδικασίες όπως η αυτοματοποιημένη αλληλούχιση και η μόλυνση. Υπερήχους είναι κατάλληλο να κατακερματίσει pDNA, συμπεριλαμβανομένων supercoiled pDNA, με επιτυχία.
Οι Thompson et al. (2008) έδειξαν ότι η υπερήχηση πλασμιδίου, η οποία είναι γνωστό ότι κατακερματίζει το υπερτυλιγμένο DNA, είναι ένας αποτελεσματικός τρόπος βελτίωσης των μηκών ανάγνωσης της αλληλουχίας phred20 στο σημείο που δεν διαφέρουν σημαντικά από το πρότυπο ελέγχου του Beckman Coulter ή τα ενζυματικά γραμμικά πλασμίδια.
- Με ακρίβεια ελεγχόμενο
- Αναπαραγώγιμα αποτελέσματα
- Ρυθμιζόμενο για να στοχεύει μήκη θραυσμάτων DNA
- Έλεγχος θερμοκρασίας
- Δυνατότητα κλιμάκωσης σε οποιοδήποτε μέγεθος δείγματος
Χρήση πλασμιδικών φορέων
Τα πλασμίδια χρησιμοποιούνται συχνά ως εργαλεία για την κλωνοποίηση, τη μεταφορά και το χειρισμό γονιδίων. Όταν τα πλασμίδια χρησιμοποιούνται πειραματικά για αυτούς τους σκοπούς, ονομάζονται φορείς. Θραύσματα DNA ή γονίδια μπορούν να εισαχθούν σε έναν πλασμιδικό φορέα, δημιουργώντας ένα λεγόμενο ανασυνδυασμένο πλασμίδιο. Οι πλασμιδιακοί φορείς χρησιμοποιούνται ως οχήματα για την οδήγηση του ανασυνδυασμένου DNA σε ένα κύτταρο ξενιστή και αποτελούν βασικό συστατικό της μοριακής κλωνοποίησης.
“Οι μη ιικοί φορείς μελετώνται εκτενώς για την πιθανή χρήση τους στη γονιδιακή θεραπεία για τη θεραπεία διαφόρων περίπλοκων ασθενειών. Οι μη ιικοί φορείς προστατεύουν το πλασμιδικό DNA από τη φυσική, χημική και ενζυματική αποικοδόμηση και παραδίδουν το μόριο DNA στη θέση στόχου. Για παράδειγμα, τα κατιονικά λιποσώματα, η χιτοζάνη και άλλα θετικά φορτισμένα νανοσωματίδια σχηματίζουν σύμπλοκα με πλασμιδικό DNA μέσω ηλεκτροστατικών αλληλεπιδράσεων. Ωστόσο, τα εύκολα σχηματισμένα κατιονικά λιποσώματα / σύμπλοκα πλασμιδικού DNA είναι σχετικά μεγάλα (δηλ. 300-400 nm) και ετερογενή στη φύση, καθιστώντας δύσκολη τη χρήση τους σε φαρμακευτικές εφαρμογές. Τα μεγάλα και ετερογενή πλασμιδικά DNA / λιποσώματα, πλασμιδικό DNA / αερολύματα, και σύμπλοκα πλασμιδικού DNA / πεπτιδίων μπορούν να μειωθούν σε μικρότερα και ομοιογενή σωματίδια χρησιμοποιώντας υπερήχους.” (Sarker κ.ά., 2019)
Ένα εξέχον παράδειγμα για τη χρήση πλασμιδικών φορέων είναι το CRISPR–Cas9. Το σύστημα CRISPR-Cas9 συνήθως παραδίδεται στα κύτταρα ως ένα ενιαίο μεγάλο πλασμίδιο ή πολλαπλά μικρότερα πλασμίδια που κωδικοποιούν μια αλληλουχία στόχου, έναν οδηγό CRISPR και Cas9.
Υπερήχων προετοιμασία νανοσωματιδίων PLGA φορτωμένου με DNA με νανοκατακρήμνιση
Οι Jo et al. (2020) χρησιμοποίησαν πολυ(γαλακτικό-συν-γλυκολικό οξύ) (PLGA) για να σχηματίσουν έναν φορέα νανοσωματιδίων για την παράδοση ενός μοντέλου πλασμιδίου CRISPR-Cas9 σε πρωτογενή μακροφάγα που προέρχονται από μυελό των οστών. Για τη νανοκατακρήμνιση νανοσωματιδίων PLGA, χρησιμοποιήθηκαν PLGA με δύο διαφορετικές τελικές ομάδες (ομάδες εστέρων και αμινών) με στόχο τα θετικά φορτισμένα τελικά καπάκια αμίνης να αυξήσουν την αποτελεσματικότητα της ενθυλάκωσης και τη φόρτιση λόγω των αλληλεπιδράσεων φορτίου μεταξύ αυτής και της αρνητικά φορτισμένης ραχοκοκαλιάς του DNA. Σε ένα κωνικό σωλήνα φυγοκέντρησης πολυπροπυλενίου 50 mL, 100 mg Pluronic F127 διαλύθηκε σε 20 mL αυτόκλειστου νερού DI με ανάμιξη στροβίλου ακολουθούμενη από 30 λεπτά απαλής υπερήχησης χρησιμοποιώντας λουτρό υπερήχων (βλέπε CupHorn). Προστέθηκε μια μαγνητική ράβδος ανάδευσης σε αυτόκλειστο και το διάλυμα αναμίχθηκε στις 600 σ.α.λ. για 30 λεπτά, ενώ έγιναν τα άλλα διαλύματα. Πλαστικά εργαστηριακά σκεύη χρησιμοποιήθηκαν αντί για γυάλινα σκεύη παντού για να ελαχιστοποιηθεί η μη ειδική προσρόφηση του DNA. Διαλύματα PLGA διαλυμένα σε DMF (44,48 mg/ml) και πεντακένιο TIPS διαλυμένα σε THF (0,667 mg/ml) παρασκευάστηκαν ξεχωριστά. Το PLGA αφέθηκε ήρεμο να βρέξει σε DMF για 30 λεπτά πριν υποβληθεί σε υπερήχους για 30 λεπτά. (για πλήρες πρωτόκολλο βλ. Jo et al., 2020)
- Εξαγωγή DNA
- Ενθυλάκωση DNA
- Διασπορά DNA επικαλυμμένου με νανοσωματίδια
- Παράδοση πλασμιδικού DNA στα κύτταρα
Προστασία πλασμιδικού DNA κατά τη διάρκεια υπερήχων
Το DNA, συμπεριλαμβανομένων των πλασμιδίων και των υπερτυλιγμένων πλασμιδίων, είναι εξαιρετικά ευαίσθητη αποδόμηση. Όλες οι διαθέσιμες μέθοδοι κατακερματισμού είναι γνωστές για ορισμένα μειονεκτήματα. Υπερήχων κατακερματισμός DNA είναι μία από τις προτιμώμενες μεθόδους, δεδομένου ότι η ελεγχόμενη υπερήχηση σε συνδυασμό με προστατευτικά μέτρα επιτρέπει τη μείωση της διάτμησης και της θερμότητας που προκαλείται από βλάβη των κλώνων DNA.
Εκτός από τις ρυθμίσεις χαμηλού πλάτους, τον τρόπο παλμών και τον έλεγχο θερμοκρασίας κατά τη διάρκεια της διάτμησης DNA με υπερήχους, η χρήση ορισμένων παραγόντων έδειξε σημαντική προστατευτική επίδραση έναντι της υποβάθμισης του DNA. Για παράδειγμα, διάφορα πολυμερή, πεπτίδια, και λιπίδια προστατεύουν το πλασμιδικό DNA κατά τη διάρκεια υπερήχων.

Η σταθερότητα του πλασμιδικού DNA και των νανοσυμπλεγμάτων πλασμιδικού DNA / IL έναντι του υπερηχητικού στρες διάτμησης διερευνήθηκε χρησιμοποιώντας δοκιμασία ηλεκτροφόρησης πηκτής αγαρόζης. Τόσο το πλασμιδικό DNA όσο και τα νανοσύμπλοκα πλασμιδικού DNA / IL υποβλήθηκαν σε υπερηχητική τάση διάτμησης για διαφορετικά χρονικά σημεία. Το πλασμιδικό DNA εκτέθηκε σε υπερηχητικό στρες διάτμησης για 0, 10, 20, 30 και 40 λεπτά. Ωστόσο, τα νανοσύμπλοκα πλασμιδίου DNA / IL εκτέθηκαν σε υπερηχητικό στρες διάτμησης για 0, 10, 20, 30, 40, 60, 90 και 120 λεπτά.
(μελέτη και εικόνα: ©Sarker et al., 2019)
Οι Sarker et al. (2019) έδειξαν ότι όταν οι νανοδομές πλασμιδικού DNA / ιοντικού υγρού (pDNA / IL) υποβλήθηκαν σε υπερηχητική τάση διάτμησης για 0, 10, 20, 30, 40, 60, 90 και 120 λεπτά και συμπλοκοποιήθηκαν με τον εμπορικά διαθέσιμο κατιονικό παράγοντα παράδοσης γονιδίων λιποφεκταμίνη, το ποσοστό των φθοριζόντων θετικών κυττάρων ήταν 80%, 98%, 97%, 85%, 78%, 65%, 65% και 50%, αντίστοιχα (βλ. διάγραμμα παρακάτω). Το ποσοστό των φθοριζόντων θετικών κυττάρων αυξήθηκε όταν οι νανοδομές υποβλήθηκαν σε υπερηχητική τάση διάτμησης για 10 και 20 λεπτά και στη συνέχεια μειώθηκε αργά.

Επίδραση ιοντικού υγρού [Bmim][PF6] στην παροχή πλασμιδικού DNA σε κύτταρα COS7. Τα νανοσύμπλοκα Plasmid DNA / IL (ιοντικό υγρό) υποβλήθηκαν σε υπερηχητική τάση διάτμησης για έως και 120 λεπτά και συμπλοκοποιήθηκαν με LA πριν παραδοθούν σε κύτταρα COS7. Τα δεδομένα δείχνουν τον μέσο αριθμό (%) των θετικών στην GFP κυττάρων HeLa που μετρήθηκαν σε 10 διαφορετικά μικροσκοπικά πεδία και το πείραμα πραγματοποιήθηκε πολλές φορές σε τρεις διαφορετικές ημέρες. (Μελέτη και διάγραμμα: ©Sarker et al., 2019)

Το πλασμιδικό DNA μπορεί να προστατευθεί προσθέτοντας έναν παράγοντα πριν από τον υπερηχητικό κατακερματισμό: Υπερήχηση που προκαλείται από αποικοδόμηση γυμνού pDNA (Α) και pDNA διαμορφωμένου με 1,5 mM CaCl2 και 20% (v / v) t-βουτανόλης (Β)
Τα δείγματα υποβλήθηκαν σε υπερήχους με αισθητήρα 20W για έως και 120 δευτερόλεπτα, όπως υποδεικνύεται στην κορυφή κάθε λωρίδας. Η λωρίδα H αντιστοιχεί στον δείκτη Hyperladder I ™️. Υποδεικνύονται οι ζώνες πλασμιδίων OC και SC.
(μελέτη και εικόνες: ©Wu et al., 2009)
Υπερήχων Lysate Προετοιμασία
Πρωτόκολλο λύσης κυττάρων υπερήχων
Ξεκινήστε με ένα εμπλουτισμένο δείγμα κυττάρων που παρασκευάστηκε μέσω μιας μεθόδου διαχωρισμού κυττάρων (π.χ. ανοσομαγνητικός κυτταρικός διαχωρισμός, διαλογή κυττάρων ενεργοποιημένη με φθορισμό (FACS), φυγοκέντρηση βαθμίδωσης πυκνότητας, απομόνωση κυττάρων ανοσοπυκνότητας).
Τα δείγματα κυττάρων πρέπει να δείχνουν έναν όγκο ρυθμιστικού διαλύματος λύσης που είναι κατάλληλος για τον πειραματικό στόχο και τον υπερηχητικό τύπο καθετήρα.
Τα υποτονικά ρυθμιστικά διαλύματα προτιμώνται καθώς ενισχύουν την υπερηχητική κυτταρική λύση. Είναι σημαντικό τα πρόσθετα και η συγκέντρωση αλάτων να χρησιμοποιούνται με κατάλληλο τρόπο.
Επιλέξτε τη συσκευή λύσης υπερήχων: Για έμμεση υπερήχηση φιαλιδίων, συνιστάται το VialTweeter ή το CupHorn. Για πλάκες πολλαπλών πηγαδιών, το UIP400MTP είναι ο ιδανικός υπερηχητικός. Και κλασική κατεργασία με υπερήχους τύπου καθετήρα, ένας υπερηχητικός ομογενοποιητής ως UP100H ή UP200Ht με μικρο-άκρη είναι οι πλέον κατάλληλοι.
Πρωτόκολλο για κατεργασία με υπερήχους τύπου καθετήρα: Τοποθετήστε τον καθετήρα υπερήχων στον όγκο του δείγματος σε ένα σωλήνα μικροφυγοκέντρησης και υπερήχων για περίπου 10 δευτερόλεπτα. Ανάλογα με το δείγμα DNA, η υπερήχηση μπορεί να επαναληφθεί μία ή δύο φορές. Η απαιτούμενη εισροή ενέργειας υπερήχων (Ws / mL) εξαρτάται από το ιξώδες του δείγματος και τον τύπο DNA. Η ψύξη μέσω λουτρού πάγου και ο τρόπος παλμών του υπερήχων βοηθά στην πρόληψη της θερμικής υποβάθμισης του δείγματος.
Μετά από λύση με υπερήχους, το δείγμα φυγοκεντρείται σε διαχωρισμένα υπολείμματα σφαιριδίων (που περιέχουν μη λυμένα κύτταρα, πυρήνες και μη λυμένα οργανίδια)
Εάν το δείγμα δεν υποστεί άμεση περαιτέρω επεξεργασία, μπορεί να αποθηκευτεί σε κατάλληλη θερμοκρασία για να διατηρηθεί η βιωσιμότητά του.
Υπερήχων για κατακερματισμό DNA
Hielscher Υπέρηχοι προσφέρει διάφορες υπερήχων με βάση τις πλατφόρμες για το DNA, RNA, και κατακερματισμό χρωματίνης. Αυτές οι διαφορετικές πλατφόρμες περιλαμβάνουν υπερηχητικούς ανιχνευτές (sonotrodes), έμμεσες λύσεις υπερήχων για την ταυτόχρονη προετοιμασία δείγματος πολλαπλών σωλήνων ή πλακών πολλαπλών φρεατίων (π.χ. πλάκες 96 φρεατίων, πλάκες μικροτιτλοδότησης), sonoreactors, και υπερήχων cuphorns. Όλες οι πλατφόρμες διάτμησης DNA τροφοδοτούνται από επεξεργαστές υπερήχων υψηλής απόδοσης συντονισμένους με συχνότητα, οι οποίοι είναι ακριβώς ελεγχόμενοι και παρέχουν αναπαραγώγιμα αποτελέσματα.
Υπερήχων επεξεργαστές για οποιοδήποτε αριθμό δείγματος και μέγεθος
Με τους υπερήχους πολλαπλών δειγμάτων Hielscher VialTweeter (για έως και 10 δοκιμαστικούς σωλήνες) και UIP400MTP (για μικροπλάκες / πλάκες πολλαπλών φρεατίων) καθίσταται εύκολα δυνατή η μείωση του χρόνου επεξεργασίας δείγματος λόγω έντονης και επακριβώς ελεγχόμενης υπερήχων, ενώ επιτυγχάνεται η επιθυμητή κατανομή μεγέθους θραυσμάτων DNA και απόδοση. Ο υπερηχητικός κατακερματισμός DNA καθιστά τα βήματα προετοιμασίας πλασμιδίων αποτελεσματικά, αξιόπιστα και επεκτάσιμα. Τα πρωτόκολλα μπορούν να κλιμακωθούν γραμμικά από ένα έως πολλά δείγματα εφαρμόζοντας σταθερές παραμέτρους υπερήχων.
Καθετήρας υπερήχων με ένα έως πέντε δάχτυλα είναι ιδανικό για την προετοιμασία μικρότερων αριθμών δειγμάτων. Εργαστήριο υπερήχων Hielscher είναι διαθέσιμα με διαφορετικά επίπεδα ισχύος, ώστε να μπορείτε να επιλέξετε τον ιδανικό υπερηχητικό διαταράκτη για την εφαρμογή που σχετίζεται με το DNA σας.

Η υπερηχητική μονάδα προετοιμασίας πολλαπλών δειγμάτων VialTweeter επιτρέπει την ταυτόχρονη υπερήχηση έως και 10 φιαλιδίων. Με τη συσκευή σύσφιξης VialPress, μπορούν να πιεστούν έως και 4 επιπλέον σωλήνες προς τα εμπρός για έντονη υπερήχηση.
ακριβής έλεγχος της διαδικασίας
Ακριβώς ελεγχόμενες ρυθμίσεις υπερήχων είναι ζωτικής σημασίας, δεδομένου ότι η εξαντλητική ηχοποίηση μπορεί να καταστρέψει το DNA, το RNA και τη χρωματίνη, αλλά η ανεπαρκής διάτμηση υπερήχων οδηγεί σε πολύ μεγάλα θραύσματα DNA και χρωματίνης. Ψηφιακοί υπερήχων Hielscher μπορεί εύκολα να ρυθμιστεί σε ακριβή παράμετρο υπερήχων. Συγκεκριμένες ρυθμίσεις υπερήχων μπορούν επίσης να αποθηκευτούν ως προγραμματισμένη ρύθμιση για γρήγορη επανάληψη της ίδιας διαδικασίας.
Όλες οι υπερήχηση πρωτοκολλούνται αυτόματα και αποθηκεύονται ως αρχείο CSV σε μια ενσωματωμένη κάρτα SD. Αυτό επιτρέπει την ακριβή τεκμηρίωση των εκτελούμενων δοκιμών και καθιστά δυνατή την αναθεώρηση των υπερήχων τρέχει εύκολα.
Μέσω τηλεχειριστηρίου προγράμματος περιήγησης, όλοι οι ψηφιακοί υπερήχων μπορούν να λειτουργήσουν και να παρακολουθούνται μέσω οποιουδήποτε τυπικού προγράμματος περιήγησης. Δεν απαιτείται εγκατάσταση πρόσθετου λογισμικού, καθώς η σύνδεση LAN είναι μια πολύ απλή εγκατάσταση plug-n-play.
Υψηλότερη φιλικότητα προς το χρήστη κατά τη διάρκεια της προετοιμασίας υπερήχων DNA
Όλοι Hielscher υπερήχων έχουν σχεδιαστεί για να παρέχουν υπερήχους υψηλής απόδοσης, ενώ ταυτόχρονα είναι πάντα πολύ φιλικό προς το χρήστη και εύκολο στη χρήση. Όλες οι ρυθμίσεις είναι καλά δομημένες σε ένα σαφές μενού, το οποίο είναι εύκολα προσβάσιμο μέσω έγχρωμης οθόνης αφής ή τηλεχειριστηρίου προγράμματος περιήγησης. Το έξυπνο λογισμικό με προγραμματιζόμενες ρυθμίσεις και αυτόματη καταγραφή δεδομένων εξασφαλίζει βέλτιστες ρυθμίσεις υπερήχων για αξιόπιστα και αναπαραγώγιμα αποτελέσματα. Η καθαρή και εύχρηστη διεπαφή μενού μετατρέπει Hielscher υπερήχων σε φιλικές προς το χρήστη και αποτελεσματικές συσκευές.
Ο παρακάτω πίνακας σας δίνει μια ένδειξη της κατά προσέγγιση ικανότητας επεξεργασίας των υπερήχων εργαστηρίου μας για κυτταρική λύση και κατακερματισμό DNA:
Όγκος παρτίδας | Ροή | Προτεινόμενες συσκευές |
---|---|---|
πλάκες πολλαπλών φρεατίων | Δ / υ | UIP400MTP |
φιαλίδια, μικρό ποτήρι ζέσεως | Δ / υ | Υπερήχων CupHorn |
έως 10 φιαλίδια | Δ / υ | VialTweeter |
1 έως 500mL | 10 έως 200mL/min | UP100Η |
10 έως 2000mL | 20 έως 400mL / λεπτό | UP200Ht, UP400St |
Επικοινωνήστε μαζί μας! / Ρωτήστε μας!
Βιβλιογραφία / Αναφορές
- Mark D. Thompson, Kelly G. Aukema, Dana M. O’Bryan, Stephen D. Rader, Brent W. Murray (2008): Plasmid sonication improves sequencing efficiency and quality in the Beckman Coulter CEQ system. BioTechniques 2008, 45:3, 327-329
- Fykse, Else; Olsen, Jaran; Skogan, Gunnar (2003): Application of sonication to release DNA from Bacillus cereus for quantitative detection by real-time PCR. Journal of microbiological methods 55, 2003. 1-10.
- Ming L. Wu; Sindélia S. Freitas; Gabriel A. Monteiro; Duarte M. F. Prazeres; José A. L. Santos (2009). Stabilization of naked and condensed plasmid DNA against degradation induced by ultrasounds and high-shear vortices. Biotechnology Applied Biochemistry 53(4), 2009.
- Sarker, Satya Ranjan; Ball, Andrew S.; Bhargava, Suresh Kumar; Soni., Sarvesh K. (2019): Evaluation of plasmid DNA stability against ultrasonic shear stress and its in vitro delivery efficiency using ionic liquid [Bmim][PF6]. RSC Advances 9, 2019. 29225-29231.
- Miguel Larguinho, Hugo M. Santos, Gonçalo Doria, H. Scholz, Pedro V. Baptista, José L. Capelo (2010): Development of a fast and efficient ultrasonic-based strategy for DNA fragmentation. Talanta, Volume 81, Issue 3, 2010. 881-886.
- Julie Ann Wyber; Julie Andrews; Antony D’Emanuele (1997): The Use of Sonication for the Efficient Delivery of Plasmid DNA into Cells. Pharmaceutical Research 14(6), 1997. 750–756.
Γεγονότα που αξίζει να γνωρίζετε
Τι είναι τα πλασμίδια;
Ένα πλασμίδιο είναι ένα μικρό κυκλικό μόριο DNA που είναι φυσικά ξεχωριστό από το χρωμοσωμικό DNA και αναπαράγεται ανεξάρτητα. Τα πλασμίδια συνδέονται συχνά με γονίδια που συμβάλλουν στην επιβίωση ενός οργανισμού και προσδίδουν συγκεκριμένα πλεονεκτήματα, π.χ. αντοχή στα αντιβιοτικά. Τα πλασμίδια βρίσκονται συνήθως ως μικρά κυκλικά, δίκλωνα μόρια DNA σε βακτήρια. Ωστόσο, τα πλασμίδια είναι μερικές φορές παρόντα σε αρχαίους και ευκαρυωτικούς οργανισμούς. Τα πλασμίδια είναι σημαντικά εργαλεία στη μοριακή βιολογία, τη γενετική, τη βιοχημεία και την επιστήμη της ζωής. Γνωστά ως φορείς στη γενετική μηχανική, τα πλασμίδια χρησιμοποιούνται για την αναπαραγωγή ή την έκφραση ορισμένων γονιδίων. Η στοχευμένη αλλοίωση ενός διανύσματος ονομάζεται διανυσματικός σχεδιασμός.
Ανάλυση GFP στην κυτταρική έρευνα
Η πράσινη φθορίζουσα πρωτεΐνη (GFP) είναι ένας ευέλικτος βιολογικός δείκτης για την παρακολούθηση φυσιολογικών διεργασιών, την απεικόνιση του εντοπισμού πρωτεϊνών και την ανίχνευση διαγονιδιακής έκφρασης in vivo. Η GFP μπορεί να διεγερθεί από τη γραμμή λέιζερ 488 nm και ανιχνεύεται βέλτιστα στα 510 nm.

Hielscher Υπέρηχοι κατασκευάζει υψηλής απόδοσης υπερήχων ομογενοποιητές από εργαστήριο προς βιομηχανικό μέγεθος.