Ultralydsprøveforberedelse til THC-analyse
- Ultralydsekstraktion er en gennemprøvet metode til produktion af THC, men den kan også bruges til analytiske formål.
- Ultralydbehandling er en almindelig prøveforberedelsesmetode, der anvendes til analyse af det samlede indhold af THC i cannabisprodukter.
- Ultralydsekstraktion påføres prøverne før TLC-, GC- og HPLC-analyse.
Ultralyd THC-ekstraktion
THC eller tetrahydrocannabinol (delta-9-tetrahydrocannabinol) er det kemikalie, der forårsager de fleste af marihuanas psykologiske virkninger. For cannabisarten kan der være mere end 400 forskellige stammer kendt. Afhængigt af den specifikke cannabisstamme kan cannabis have så lidt som 0,3 vægt% THC. I andre stammer kan THC-indholdet nå op til 20 vægtprocent.
De forskellige cannabisprodukter varierer også betydeligt: Så varierer den gennemsnitlige THC-koncentration i marihuana mellem 1 og 5%; i hash er THC-indholdet mellem 5 og 15 %, og i hasholie er det i gennemsnit 20 %. THC i rekreative doser af marihuana er meget variabelt, og jo lavere THC-indholdet i marihuanaen er, jo mere skal brugeren indtage for at opleve de ønskede effekter.
Ultralydsprøveforberedelse bruges til at analysere THC-indholdet
- til kvalitetskontrol af rekreative THC-produkter
- til kvalitetsbestemmelse af farmaceutiske THC-produkter
- for sondringen mellem narkotika-hamp og fiber-hamp.
Til THC-analyse anvendes følgende kromatografiske metoder almindeligvis: Tyndlagskromatografi (TLC), gaskromatografi (GC) og højtydende væskekromatografi (HPLC)
Ultralydsprøveforberedelsesprotokol til TLC-analyse
Prøveforberedelse: Til forberedelse af prøverne skal det tørrede plantemateriale udblødes og formales til et homogent pulver. Til ultralydsekstraktion blandes 500 mg af cannabisplantepulveret og 5 ml methanol-chloroform-blandingen (forhold 9: 1) i et hætteglas. Sonikering kan anvendes ved hjælp af en ultralydsapparat med mikrospids, VialTweeter eller ultralyd Cuphorn. Sonikeringstiden tager ca. 5 min. Lad derefter prøven hvile i mindst 5 min. Den klare supernatant fortyndes med ekstraktionsblandingen (v/v: 1 : 10). Gratis THC: 1μL på TLC-pladen
Decarboxylering: 100 μL af ekstraktet fordampes til tørhed. Resten opvarmes ved 180°C i 4 min. Tilsæt 500 μL methanol-chloroform (v/v 9: 1). Soniker i 5 min. Den klare supernatant fortyndes med ekstraktionsblandingen (v/v: 1 : 10).
Kalibrering: 20ng, 60ng, 100ng, 140ng
HPTLC:
TLC silicagel F-254, Merck 5729
TLC-scanner II, software CATS3, Camag Muttenz Eluens:
Ethylacetat : Toluol : Chloroform = 3 : 17 : 0,25 (v/v/v)
Postkromatografisk derivatisering: Hurtigt blåt salt 0,1 % i 0,1 M NaOH
Densitometri ved 550 nm
Tetrahydrocannabinol (Δ9-THC) til analyse og ekstraktion
Ultralydsprøveforberedelsesprotokol til GC-analyse
Prøveforberedelse: Det tørrede plantemateriale macereres og formales til et homogent pulver. Til ekstraktionen blandes 500 mg af cannabisplantepulveret og 10 ml methanol-hexan-blandingen (forhold på 9: 1) i et hætteglas. Sonikering kan anvendes ved hjælp af en sonde-type ultralydsenhed med mikrospids, VialTweeter eller ultralyd Cuphorn. Soniker prøven i 15-20 min. Ryst prøven og lad den hvile i mindst 5 min. Den klare supernatant fortyndes med ekstraktionsblandingen (v/v 1: 20).
Decarboxyliering: i indsatsen
Injektor temperatur 250 °C
Kalibrering: 5 ng/μL til 250 ng/μL
GC: HP 6890 med 5973 MSD og 7683 autosampler-injektion: 1 μL, splitfri tid: 2 min.
Søjle: HP-5 MS, 30m, diameter 250 μm, filmtykkelse 0,25 μm
Bæregas: He, 35 psi, konstant flow: 4 ml/min.
Ovn: 100 ° C i 1 min.; temperaturstigning på 15 °C /min. til 280 °C; 280°C i 5 min. MSD: SCAN: m/e 35 – 550
Ultralydsprøveforberedelsesprotokol til HPLC-analyse
Prøveforberedelse (analog til GC-præp): Det tørrede plantemateriale macereres og formales til et homogent pulver. Til ekstraktionen blandes 500 mg af cannabisplantepulveret og 10 ml methanol-hexan-blandingen (forhold på 9: 1) i et hætteglas. Sonikering kan anvendes ved hjælp af en sonde-type ultralydsapparat med mikrospids, VialTweeter eller ultralyd Cuphorn. Soniker prøven i 15-20 min. Ryst prøven og lad den hvile i mindst 5 min. Den klare supernatant fortyndes med ekstraktionsblandingen (v/v 1: 20).
VialTweeter Til forberedelse af ultralydsprøver
Forkolonne: LiChrospher 60, RP-Select B, 5μm (Merck 50963)
Kolonne: LiChroCart 125-4, Lichrospher 60, RP-Select B, 5 μm (Merck 50829)
Elueringsmiddel: isokratisk 36% TEAP 25 mmol/L, 64% acetonitrilkvantificering ved 210nm
Kalibrering: 0,001 – 0,10 μg/μl
Kalibrering: 0,01 – 0,50 μg/μl
Fastholdelsestid: for CBD: 6,2 min.; for CBN: 8,0 min.; for THC: 9,4 min.; for THC-A: 11,0 min
LOD: CBD 0,5%, CBN 0,5%, THC 0,15%, THC-A 1%
UP200St med mikrospids til prøvesonikering
Litteratur/Referencer
- Werner Bernhard, Franziska Penitschka, Alain Broillet, Prisma Regenscheit (2006): Forensisch chemische Analysen von THC haltigem Hanfkraut. Von der DC via GC zur HPLC-Methode. Applica 2006.
Fakta, der er værd at vide
hamp består af de tørrede blomster og underliggende blade og stængler fra den kvindelige cannabisplante. Dette er den mest udbredte form, og den indeholder ca. 3% til 20% THC. Specifikke, højt opdrættede former for marihuana når et THC-indhold på mere end 30%. Marihuana er kildematerialet til alle andre sorter af THC-holdige cannabisprodukter. For at omdanne den mest udbredte cannabinoid, tetrahydrocannabinolsyre (THCA), til den psykoaktive THC, skal der iværksættes en dekarboylationsproces. Derfor skal cannabis og dets ekstrakter opvarmes eller dehydreres for at forårsage decarboxylering.
kief Refererer til et pulver, rigt på trichomer, som sigtes fra cannabisblade og blomster. Det indtages enten i pulverform eller komprimeret og bruges i hashkager.
hash eller hash er en koncentreret harpikskage eller kugle, der enten er fremstillet af presset kief eller af harpiksen, der skrabes fra plantens overflade og rulles til kugler. Det forekommer i forskellige farver fra sort til gyldenbrun afhængigt af renhed og kilde. Det kan indtages oralt eller ryges, f.eks. i en pibe, vandpibe, bong, bobler, fordamper, ved hjælp af en varm kniv, røges i joints, blandes med cannabisknopper eller tobak, ryges som flaske eller bruges som ingrediens i mad.
cannabis tinktur Henviser til ekstraktet af cannabinoider i alkohol. Cannabinoiderne udvindes fra cannabisplanten ved hjælp af højbestandig spiritus (for det meste kornalkohol) til at skabe tinkturen.
hash olie er en harpiksholdig matrix af cannabinoider produceret ved opløsningsmiddelekstraktion, dannet til en hærdet eller tyktflydende masse. Hasholie er et af de mest potente cannabisprodukter på grund af dets høje niveau af psykoaktive forbindelser. Brugen af hasholie udvundet i butan og superkritisk kuldioxid har for nylig vundet en stigende popularitet.
Infusioner henviser til forskellige slags cannabisinfusioner, der adskiller sig fra hinanden ved det brede udvalg af ikke-flygtige opløsningsmidler, der kan bruges til at fremstille en cannabisinfusion. For at forberede en sådan infusion blandes cannabisplantemateriale med et opløsningsmiddel og presses og filtreres derefter for at overføre olierne fra planten til opløsningsmidlet. Kakaosmør, mejerismør, madolie, glycerin og hudfugtighedscreme er almindeligt anvendte opløsningsmidler.
medicinsk marihuana henviser til brugen af cannabisplanten som en lægeanbefalet urteterapi samt syntetisk THC og cannabinoider. Denne brug kræver generelt en recept, og distribution sker normalt inden for en ramme, der er defineret af lokale love. Flere forskningsstudier har vist, at brugen af cannabis eller dets derivater virker mod f.eks. kemoterapi-induceret kvalme og opkastning, neuropatiske smerter og multipel sklerose.