Biofilm-dislosering ved hjælp af High-Throughput Sonicator UIP400MTP
Ultralydapparater med høj kapacitet designet til plader med flere brønde og 96-brønds plader er vigtige værktøjer i biofilmforskning, især til at løsne og fjerne biofilm fra brønde, rør, stifter og petriskåle. Disse sonikere letter behandlingen af adskillige prøver samtidigt, hvilket forbedrer effektiviteten og konsistensen. Hielscher højkapacitets-soniker UIP400MTP er den ideelle til sonikering af multi-brøndplader, 96-brønds plader, flere rør eller petriskåle. Den ensartede ultralydsvibration og kavitation fjerner pålideligt biofilm fra bunden af pladen. Dette gør multi-brønds plade sonikeren UIP400MTP det ideelle prøveforberedelsesværktøj til fjernelse af biofilm, biofilmanalyser og forskning i bakterier og mikrober.
Multiwell-Plate Sonicator UIP400MTP til fjernelse og fjernelse af biofilm ved prøveforberedelse med høj kapacitet:
- Bakterielle biofilm
- Eukaryote biofilm
- Biofilm af svampe
- Arkæiske biofilm
- Polymikrobielle biofilm / Biofilm af blandede arter
- Dentale biofilm (plak)
- Marine biofilm
- Miljømæssige biofilm
- Biofilm om medicinsk udstyr
- Dyrkede cellesuspensioner
UIP400MTP ultralydator med høj kapacitet til fjernelse af biofilm fra plader med flere brønde, plader med 96 brønde, rør og petriskåle.
Biofilm Dislosning og fjernelse ved hjælp af sonikering
Hielscher højkapacitets-soniker UIP400MTP er skræddersyet til pålidelig og ensartet sonikering af multi-brønd og 96-brønds plader. Essentiel i biofilmforskning, multi-brønds plade soniker UIP400MTP tilbyder en pålidelig teknologi til at løsne og fjerne biofilm fra multi-brøndplader, rør og petriskåle. Giver mulighed for prøveforberedelse med høj kapacitet, forbedrer UIP400MTP effektiviteten og konsistensen af biofilmanalyser og andre relaterede undersøgelser, hvilket gør denne soniker uundværlig i både akademisk og industriel mikrobiologisk forskning.
Fjernelse af biofilm ved hjælp af sonikering: Til biofilmsforskydning får biofilm lov til at dannes i brøndene på multibrøndpladen under kontrollerede forhold. Pladen placeres derefter i sonikeren, hvor parametre som tid, amplitude og frekvens indstilles i henhold til de specifikke krav til biofilmtypen og eksperimentelle mål. Ultralydsbølgerne genererer kavitation i hver brønd, hvilket effektivt forstyrrer biofilmmatrixen og løsner cellerne.
Ultralydsprøveforberedelse til biofilm: I biofilmanalyser har sonikere med høj kapacitet flere anvendelser. Efter sonikering kan løsnede biofilmceller opsamles og kvantificeres ved hjælp af forskellige assays såsom krystalviolet farvning, levedygtig celletælling eller biomassemåling. Derudover kan biofilm behandles med antimikrobielle midler efterfulgt af sonikering for at vurdere effektiviteten af disse midler til at forstyrre biofilm. Aflejrede biofilmceller er også nyttige til genomiske og proteomiske undersøgelser, da de kan bruges til DNA-, RNA- og proteinekstraktion til yderligere molekylær analyse.
Ultralydapparater med høj kapacitet giver mange fordele. De tillader samtidig behandling af flere prøver, hvilket sparer tid og arbejdskraft, og sikrer ensartet behandling af alle brønde, reducerer variabiliteten og forbedrer reproducerbarheden af resultaterne. Disse enheder er også velegnede til store undersøgelser, hvilket muliggør screening med høj kapacitet af biofilmdannelse, forstyrrelse og behandling.
(A) Plade indeholdende TSB med 2 % glukose brugt til biofilmdannelse, cellegenvinding og bestemmelse af MIC og MBCB; B) Låg med stifter til dannelse af stafylokokbiofilm.
Biofilmcellerne dannet på stifterne blev løsnet ved hjælp af Hielscher-sonikeren UIP250MTP i 5 minutter i 96-brønds plader indeholdende frisk dyrkningsmedium til genvinding af cellerne.
(Billede og studie: ©de Oliveira et al., 2016)
96-brønds plade soniker UIP400MTP til sonikering af mikrotiter- og multiwell-plader
Vigtigheden af ultralydsfjernelse af biofilm i biofilmforskning
Fjernelse af ultralydsbiofilm er afgørende i biofilmforskning på grund af dens effektivitet, konsistens, effektivitet og alsidighed. Det sikrer grundig og ensartet afbrydelse af biofilm, hvilket letter nøjagtig og reproducerbar analyse i forskellige biofilmanalyser. Disse analyser, herunder krystalviolet farvning, levedygtig celletælling, ATP-bioluminescens, XTT-reduktion, mikroskopisk analyse og nukleinsyre/proteinekstraktion, giver omfattende indsigt i biofilmdannelse, levedygtighed, struktur og respons på behandlinger.
Sonikering løsner og fjerner biofilm forsigtigt fra faste underlag såsom pladebunde, stifter, pinde eller dækglas.
- Effektiv afbrydelse af biofilm:
Kavitation: Ultralydsbølger skaber kavitationsbobler, der genererer stærke forskydningskræfter ved kollaps, hvilket effektivt forstyrrer den komplekse struktur af biofilm.
Grundig forskydning: Sikrer, at biofilmceller løsnes grundigt fra overflader, hvilket er afgørende for nøjagtig kvantificering og analyse. - Konsistens og reproducerbarhed:
Ensartet behandling: Ultralydapparater med høj kapacitet giver ensartet ultralydsenergifordeling på tværs af alle prøver, hvilket reducerer variabiliteten og forbedrer reproducerbarheden.
Standardisering: Muliggør standardisering af biofilmafbrydelsesprotokoller, hvilket fører til mere pålidelige og sammenlignelige resultater. - Effektivitet:
Høj kapacitet: Tillader samtidig behandling af flere prøver, hvilket sparer tid og øger gennemstrømningen i biofilmundersøgelser.
Automatisering: Kan nemt integreres i automatiserede arbejdsgange, hvilket yderligere forbedrer effektiviteten og reducerer manuelt arbejde. - Bevarelse af levedygtighed og integritet:
Kontrollerede forhold: Parametre som tid og intensitet kan finjusteres for at forstyrre biofilm uden at gå på kompromis med cellens levedygtighed eller integritet, hvilket er vigtigt for efterfølgende analyser. - Alsidighed:
Bred anvendelighed: Velegnet til forskellige typer biofilm (bakterie-, svampe-, blandings-arter) og kompatibel med forskellige overflader og materialer, der anvendes i biofilmforskning.
Multi-well plade sonicator tilbyder UIP400MTP adskillige fordele, som gør dem til et uundværligt værktøj til prøveforberedelse med høj kapacitet.
Hielscher Ultrasonics tilbyder forskellige sonikermodeller, herunder sonde-type sonikere, berøringsfri sonikere og ultralydapparater med høj gennemstrømning. Kontakt os nu! Vores tekniske eksperter vil med glæde diskutere dine behandlingskrav med dig og anbefale dig den bedst egnede soniker til din biofilmapplikation.
Microtiter plade soniker UIP400MTP bruges til at fjerne biofilm til forskning
Litteratur / Referencer
- FactSheet UIP400MTP Multi-well Plate Sonicator – Non-Contact Sonicator – Hielscher Ultrasonics
- UIP400MTP-Multi-well-Plate-Sonicator-Infographic
- De Oliveira A, Cataneli Pereira V, Pinheiro L, Moraes Riboli DF, Benini Martins K, Ribeiro de Souza da Cunha MDL (2016): Antimicrobial Resistance Profile of Planktonic and Biofilm Cells of Staphylococcus aureus and Coagulase-Negative Staphylococci. International Journal of Molecular Sciences 17(9):1423; 2016.
- Martins KB, Ferreira AM, Pereira VC, Pinheiro L, Oliveira A, Cunha MLRS (2019): In vitro Effects of Antimicrobial Agents on Planktonic and Biofilm Forms of Staphylococcus saprophyticus Isolated From Patients With Urinary Tract Infections. Frontiers in Microbiology 2019.
Ofte stillede spørgsmål om biofilmforskning
Hvad er det mest almindelige stillads til biofilm?
Det mest almindelige stillads til biofilm i laboratorieforskning er mikrotiterpladen. Mikrotiterplader, især 96-brøndsformatet, er meget udbredt på grund af deres alsidighed, brugervenlighed og kompatibilitet med forskellige analytiske teknikker.
Hvad er den bedste 96-brønds plade til biofilm?
Den bedste 96-brønds plade til biofilmundersøgelser afhænger af flere faktorer, herunder typen af biofilm, der undersøges, den eksperimentelle opsætning og de specifikke krav til forskningen. Nogle almindeligt anbefalede 96-brønds plader til biofilmundersøgelser er dog:
- Corning® Costar® 3596 96-brønds klar flad bundplade: Denne plade bruges ofte på grund af dens høje optiske klarhed, hvilket er gavnligt til billeddannelse og spektrofotometriske analyser.
- Nunc™ MicroWell™ 96-brønds plader: Disse plader er kendt for deres ensartede brønddimensioner og høje optiske klarhed. De fås i forskellige overfladebehandlinger for at understøtte forskellige typer cellekulturer.
- Greiner Bio-One CELLSTAR® 96-brønds mikroplade: Denne plade bruges ofte til biofilmundersøgelser på grund af dens ensartede brønd-til-brønd-kvalitet og tilgængelighed i forskellige overfladebelægninger, såsom vævskulturbehandlede eller lavbindende overflader.
- Sorte/klare bundplader med 96 brønde: Til undersøgelser, der kræver fluorescens- eller luminescensmålinger, er sorte plader med klar bund (f.eks. Corning® 3603) ideelle, da de minimerer krydstale mellem brønde og forbedrer signaldetektion.
- Hydrofobe eller hydrofile belagte plader: Afhængigt af biofilmens og mikroorganismens art kan plader med specifikke belægninger, der fremmer eller hæmmer vedhæftning, være gavnlige. For eksempel kan hydrofobe plader være velegnede til biofilm dannet af visse bakterier.
- Biofilmspecifikke plader: Nogle producenter tilbyder plader, der er specielt designet til biofilmforskning. Disse plader har ofte forbedrede overfladeegenskaber, der fremmer biofilmdannelse og er optimeret til biofilmanalyser.
Når du vælger en 96-brønds plade til biofilmundersøgelser, skal du overveje følgende kriterier:
- Materiale og overfladebehandling: Vælg et plademateriale og en overfladebehandling, der understøtter vedhæftning og vækst af de biofilmdannende mikroorganismer, du studerer.
Optisk klarhed: For analyser, der involverer optiske målinger, skal du sikre dig, at pladen har høj optisk klarhed. - Godt design: Overvej formen og dybden af brøndene, som kan påvirke biofilmvæksten og effektiviteten af efterfølgende behandlinger eller målinger.
- Kompatibilitet med udstyr: Sørg for, at pladen er kompatibel med din soniker, inkubator og andet udstyr, der bruges i din undersøgelse. Hielscher multi-brønd plade soniker er kompatibel med alle standard mikrotiter og multi-brønd plader.
I sidste ende vil det bedste valg afhænge af de specifikke krav til din biofilmforskning og egenskaberne ved de involverede mikroorganismer.
Hvad er typiske biofilmanalyser, der bruges i forskning?
I forskning og diagnostik bruges forskellige typer assays til at undersøge og klassificere biofilm. Sonikering er et almindeligt prøveforberedelsestrin for at fjerne biofilmen fra dets faste substrat, hvilket gør biofilmen tilgængelig for analyser og analyser.
- Krystalviolet farvning:
Formål: Kvantificerer den samlede biofilmbiomasse.
Metode: Biofilm farves med krystalviolet farvestof, og farvestoffet opløses og måles spektrofotometrisk.
Anvendelse: Bruges til at vurdere biofilmdannelse og virkningerne af antimikrobielle midler. - Levedygtig celletælling (CFU-analyse):
Formål: Bestemmer antallet af levedygtige biofilmceller.
Metode: Løsnede biofilmceller fortyndes serielt og belægges på agar for at tælle kolonidannende enheder (CFU'er).
Anvendelse: Evaluerer biofilmcellelevedygtighed og antimikrobiel effekt. - ATP Bioluminescens:
Formål: Måler metabolisk aktivitet af biofilmceller.
Metode: ATP-niveauer kvantificeres ved hjælp af et bioluminescerende assay.
Anvendelse: Angiver biofilms levedygtighed og metaboliske tilstand. - XTT-reduktionsanalyse:
Formål: Vurderer cellulær metabolisk aktivitet.
Metode: XTT-reagens reduceres af metabolisk aktive celler til dannelse af et farvet formazanprodukt, som kvantificeres spektrofotometrisk.
Anvendelse: Bruges til at evaluere biofilmcellelevedygtighed og effekten af behandlinger. - Mikroskopisk analyse:
Formål: Visualiserer biofilmens struktur og sammensætning.
Metode: Teknikkerne omfatter lysmikroskopi, konfokal laserscanningsmikroskopi (CLSM) og scanningselektronmikroskopi (SEM).
Anvendelse: Giver detaljeret indsigt i biofilmarkitektur, distribution og virkningerne af behandlinger. - DNA-, RNA- og proteinekstraktion:
Formål: Analyserer genetiske og proteomiske profiler af biofilmceller.
Metode: Biofilmceller lyseres for at ekstrahere nukleinsyrer og proteiner til downstream-analyse (f.eks. PCR, qPCR, sekventering, proteomics).
Anvendelse: Studerer genekspression, genetisk mangfoldighed og proteinekspression i biofilm. - Biofilmhæmning og udryddelsesassays:
Formål: Screener forbindelser for deres evne til at forhindre biofilmdannelse eller udrydde etablerede biofilm.
Metode: Biofilm behandles med potentielle anti-biofilmmidler, og disruption vurderes ved hjælp af de førnævnte assays.
Anvendelse: Lægemiddelopdagelse og udvikling af anti-biofilmterapier.
Hielscher Ultrasonics fremstiller højtydende ultralydshomogenisatorer fra Lab til industriel størrelse.
