• Ultrazvuku je bezpečné & účinnou metodu homogenizace tkání.
• Ultrazvukové aplikace zahrnují přípravu tkáně a suspenze, extrakci proteinů, DNA / RNA a aktivních sloučenin, stejně jako aktivaci / inaktivaci enzymů a kvasinek.
• Přesná řiditelnost ultrazvukových homogenizérů sondového typu umožňuje spolehlivou přípravu vzorků tkáně.

Homogenizace tkání pomocí ultrazvukových sond

Homogenizace tkání je proces přípravy vzorků, při kterém se připravují živočišné a rostlinné buňky nebo mikroorganismy před extrakcí intracelulární hmoty, jako jsou proteiny, DNA nebo RNA. Buněčná membrána musí být prasklá, aby se uvolnil obsah buňky. Po prolomení buněčné stěny se intracelulární makromolekuly vznášejí v pufrovém roztoku, takže jsou k dispozici organely, proteiny a DNA / RNA. Ultrazvukové tkáňové homogenizátory a buněčné disruptory jsou velmi účinnými nástroji pro narušení buněk, lýzu a extrakci.

Ultrazvukové homogenizátory tkání vs alternativní techniky lýzy

Možná se ptáte sami sebe, jaká technika narušení buněk a které zařízení pro homogenizaci tkání je nejlepší volbou pro vaši laboratoř. Níže najdete několik argumentů, které hovoří o ultrazvukové lýze a homogenizaci tkání, protože ultrazvuku má několik výhod oproti alternativním metodám homogenizace:

• Účinnost: Ultrazvuková homogenizace je rychlá a účinná metoda pro narušení tkání a buněk. Ultrazvukové homogenizátory tkání využívají pracovní princip akustické kavitace. Tato metoda je vysoce účinná a může narušit buňky během několika sekund. Vzhledem k tomu, že úroveň intenzity může být upravena od mírné až intenzivní, sonikace je zvláště účinná pro tvrdé nebo vláknité tkáně, které je obtížné homogenizovat pomocí jiných metod.



• Zabraňte křížové kontaminaci: Hielscher nabízí silné ultrazvukové homogenizátory tkání, které připravují vzorek v nepřímé léčbě sonikací. S UIP400MTP (ideální pro mikrotitr a multiwell-desky), stejně jako VialTweeter a CupHorn (ideální pro lahvičky, zkumavky a kádinky) Hielscher nabízí ultrazvukové zařízení pro narušení buněk pro bezkontaktní homogenizaci, což snižuje riziko křížové kontaminace mezi vzorky. Minimalizuje také riziko zanesení nečistot z brusných povrchů nebo jiných homogenizačních zařízení.
• Flexibilita: Ultrazvuková homogenizace může být použita s různými velikostmi a objemy vzorků, od malých objemů až po velké vzorky tkání. Kromě toho je ultrazvuková homogenizace vhodná také pro širokou škálu typů vzorků, včetně rostlinných tkání, živočišných tkání a mikrobiálních kultur. Intenzita a trvání ultrazvuku lze upravit tak, aby optimalizovala úroveň narušení pro různé typy tkání.
• Reprodukovatelnost: Ultrazvuková homogenizace poskytuje konzistentní výsledky a umožňuje přesné řízení parametrů homogenizace, jako je výkon a doba sonikace. To pomáhá zajistit reprodukovatelnost a přesnost experimentálních dat.
• Konzervace biomolekul: Ultrazvuku typu sondy je netepelné ošetření. To znamená, že jeho dopad není založen na teple. Každá mechanická úprava však vytváří teplo v souladu s druhým termodynamickým zákonem. To znamená, že vzorek se zahřívá při delších časech sonikace. Hielscher state-of-the-art ultrasonicators jsou vybaveny teplotními senzory a inteligentní software pro sledování teploty. Sofistikované možnosti chlazení umožňují zabránit degradaci tepla a pomáhají zachovat aktivitu biomolekul citlivých na teplo, jako jsou enzymy a proteiny.
• Časově úsporný: Vysoká účinnost ultrazvuku typu sondy umožňuje rychlou homogenizaci tkání, což šetří čas ve srovnání s jinými metodami, které vyžadují rozsáhlejší fyzickou manipulaci s tkání.

Stručně řečeno, ultrazvuková homogenizace tkáně nabízí několik výhod oproti alternativním metodám homogenizace. To je důvod, proč ultrazvukové homogenizátory tkání jsou preferovanou technikou narušení buněk v různých výzkumných a průmyslových aplikacích.

Příklad protokolu o homogenizaci tkání pomocí ultrazvukové sondy:

Ultrasonicators usnadňují homogenizaci tkání jednoduchou operací a rychlým homogenizačním postupem. Současně mohou být ultrazvukové parametry procesu reciplyzně řízeny a sledovány tak, aby výsledky byly spolehlivé a reprodukovatelné.
 
Materiály:

• Vzorek tkáně (např. játra, mozek, svaly)
• Buffer (např. PBS, Tris-HCl)
• koktejl inhibitoru proteázy
• Ultrazvukový homogenizátor (sondový typ)
• Led
• mikrocentrifugační trubice
• Pipety

 
 
Protokol pro ultrazvukovou homogenizaci tkání:

Poznámka: Trvání a intenzita sonikace může být nutné optimalizovat v závislosti na typu tkáně, věku, a zdravotní stav, stejně jako specifické následné aplikace. Je také důležité pečlivě vybrat pufr, inhibitory proteázy a další přísady, aby se optimalizoval výtěžek a kvalita homogenátu.

Hlavní výhody Hielscher Ultrazvukové homogenizátory tkání

• rychlá a efektivní mletí, homogenizace, lysis & rozrušení buněk, nebo extrakce silným ultrazvukové kavitace
• snadné a intuitivní ovládání a provoz (vyberte analogový nebo digitální verze)
• snadné čištění product-kontaktních povrchů splachování sonotroda za použití ultrazvuku (CIP clean-in-place / SIP sterilizovat-in-place)
• protihlukové box (ochranná krabice zvuk laboratorních zařízení jsou zcela vyrobeny z akrylového skla pro plnou viditelnost ze všech stran)
• plná kontrola nad parametry procesu přes digitální dotykového displeje na zařízení (digitální ultrasonicators) nebo powermeter (pro analogové zařízení)
• integrované řízení teploty (důležité pro citlivé na teplo, vzorky tkání labilní)
• přestávky v homogenizační horizontu lze individuálně definovány a předem nastavit v digitální nabídce
• Všechny digitální přístroje jsou vybaveny záznam automatizované zpracování dat (o integrované SD / USB-ComboCard), senzor plugable teploty a prohlížeče na dálkovém ovladači.
• léčba více vzorků s VialTweeter, CupHorn nebo použitím 4- nebo 8-prst sonotrody (např. pro integraci do laboratorní robot procesech)
• na malém měřítku a aplikací ve velkém měřítku

Níže uvedená tabulka vám dává údaj o přibližné kapacitě zpracování našich ultrazvukových tkáňových homogenizátorů pro rozpad buněk, lýzu a extrakci:

Najděte optimální ultrazvukový homogenizátor tkání pro vaši aplikaci

Hielscher ultrazvukové tkáně homogenizátory jsou k dispozici ve výkonovém rozsahu ultrazvukového mezi 50 W až 16 kW (16,000W).
Laboratorní pracovníci jsou potěšeni jednoduchým a intuitivním ovládáním ultrazvukových laboratorních homogenizátorů Hielscher. V závislosti na konkrétních požadavcích jsou zařízení Hielscher dodávána s digitálním nebo analogovým ovládáním.
Tá VialTweeter je výkonný ultrazvukové zařízení, které umožňuje současné ultrazvukové vibrace až 10 lahviček nebo zkumavkách při stejné intenzitě. Vzhledem k nepřímé ultrazvuku, křížové kontaminace a ztráty vzorek se zcela vyhnout. Pro čištění a dezinfekci je snížena na minimum v důsledku použití jednorázových injekčních lahviček. Blok sonotroda je sterilizovat v autoklávu.
V oblasti laboratorních ultrasonicators sonda typu, zařízení lze zvolit 50W, 100W, 200w, 250W a 400w,
Při větších objemech proces, bench-top ultrazvukové disruptory jsou k dispozici 500w, 1000W, 1500W a 2000 W,
A pro vysoké proudy objemu, ultrasonicators z 4000W, 10 000 W nebo 16 000 W jsou clusterizable, a tudíž schopný pro lyži a homogenizovat prakticky každý množství buněčné hmoty.

Aplikace a využití ultrazvukových homogenizátorů tkání

Ultrazvukové homogenizátory se běžně používají pro tkáňové broušení, rozrušení buněk & lýza a homogenizace biologických vzorků před extrakci intracelulární hmoty v molekulární rozsahu. Řízenou sonikaci vzorků, všechny kroky z lýzy k extrakci a homogenizaci může být provedena za použití stejné ultrazvukové buněk disruptor.
Velká výhoda ultrazvukových homogenizérů spočívá ve snadno nastavitelné příspěvku a intenzitě sonikace. Hielscher ultrazvukové buněčné disruptory (lyzéry) umožňují kontrolovat intenzitu sonikace úpravou amplitudy od 20% do 100%.
Alternativně k nepřetržitý provoz, ultrazvukový homogenizér může být nastavena na režim cyklu, např za použití ultrazvuku tepelně citlivé tkáně. Sonikace v pulsním režimu se rozumí ultrasonicator generuje vysoké intenzivní ultrazvukové vlny v pravidelných cyklech. Trvání doby sonikace a zbytek času lze individuálně nastavit uživatelem.
NA pulzní Ultrazvuku, Po dobu odpočinku se sonikuje materiál může vrátit do své klidové stavu a vzorek se může ochladit (použití doby odpočinku pro odvod tepla). Tím se intenzita zpracování se dá přesně nastavit v souladu s tkání a nežádoucím zahříváním vzorku se sníží.
Ultrazvukové tkáně homogenizátory jsou robustní a uživatelsky přívětivé a současně produkovat spolehlivé výsledky ujišťovat reprodukovatelnost kvůli plnou kontrolu nad všemi důležitými parametry procesu.
Běžné aplikační oblasti ultrazvukového broušení tkání, narušení buněk, lýzy, extrakce a homogenizace se nacházejí v biologických a farmaceutických laboratořích, mikrobiologii, proteomickém a genomickém výzkumu (např. uvolňování bílkovin před Western blottingem a enzymovým imunosorbentním testem ELISA), ale také při výrobě botanických extraktů a bioaktivních sloučenin pro potravinářský, farmaceutický a kosmetický průmysl.
Klikněte zde specifických procesů doporučení týkající se přípravy vzorku, tkáně homogenizaci, lýzy a extrakce (například buňky, bakterie, spory, aktivní sloučeniny)!

Literatura / Reference